检验科实习记录医学检验.docx
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检验科实习记录医学检验
检验科的实习记录(医学检验专业)
1免疫室
输血前九项Elisa(乙肝两对半+丙肝抗原+丙肝抗体+梅毒抗体+艾滋)
乙肝五项化学发光时间分辨定量检测
肝炎病原学Elisa(甲+乙+丙+戊)
自身抗体全套检测(欧蒙试剂+免疫印迹法)
自身免疫性肝病(欧蒙+免疫印迹法:
自免肝膜条)
抗核抗体
抗中性粒细胞胞浆抗体ANCA(欧蒙+膜条)
CCP检测Elisa
过敏原测定(欧蒙免疫印迹法)食入性+吸入性
肥大氏反应(诊断伤寒O,H副伤寒甲乙丙)
红细胞冷凝集试验
结核抗体检测(金标渗滤法)
呼吸道病原学检查全套
梅毒{Elisa+→TPPA+TRUST}
HBSAG+→金标条复查
具体操作
乙肝两对半Elisa(一步法)(12345,第5项HBCAb需稀释血清50ul+1。
5ml生理盐水0。
9%NaCl)
空白对照
阳性(P)
阴性(N)
样本血清
加样
50ul阳
50ul阴
50ul血清
加酶
50
50
50
混匀,37℃温育25min,洗板5次,最后一次尽量扣干
显色液A
显色液B
50
50
50
50
50
50
50
50
混匀,避光显色15min
加终止液
50
50
50
50
双波长测定
注:
HBeAb加样后,需加入中和抗原50ul
梅毒螺旋体抗体Elisa
空白对照
阳性(P)
阴性(N)
样本血清
加酶
100ul
100ul
100ul
加样
20
20
20
混匀,37℃温育30min,洗板5次,最后一次尽量扣干
显色液A
显色液B
50
50
50
50
50
50
50
50
混匀,避光显色15min
加终止液
50
50
50
50
双波长测定
丙肝抗体(同戊肝抗体)
空白对照
阳性(P)
阴性(N)
样本血清
加稀释液
100ul
100ul
100ul
加样
10
10
10
混匀,37℃温育30min,洗板5次,最后一次尽量扣干
加酶
100
100
100
混匀,37℃温育30min,洗板5次,最后一次尽量扣干
显色液A
显色液B
50
50
50
50
50
50
50
50
混匀,避光显色15min
加终止液
50
50
50
50
双波长测定
丙肝抗原(没有质控品)
空白对照
阳性(P)
阴性(N)
样本血清
加稀释液
100ul
100ul
100ul
加样
100
100
100
混匀,45℃温育40min,洗板6次,最后一次尽量扣干
加酶
200
200
200
混匀,37℃温育30min,洗板6次,最后一次尽量扣干
显色液A
显色液B
100
100
100
100
100
100
100
100
混匀,避光显色10min
加终止液
50
50
50
50
双波长测定
艾滋(北京万泰)
甲肝
空白对照
阳性(P)
阴性(N)
样本血清
加样
50ul阳
50ul阴
50ul血清
37℃40min,洗板5次,最后一次尽量扣干
加酶
100
100
100
37℃20min,洗板5次,最后一次尽量扣干
显色液A
显色液B
50
50
50
50
50
50
50
50
混匀,避光显色15min
加终止液
50
50
50
50
双波长测定
戊肝
TPPA
1号标本
2号标本
3号标本
A
100ul稀释液
(1:
5)
100ul稀释液
100ul稀释液
B
25ul(1:
10)
25ul
25ul
C
25(1:
20)(1:
40)
25
25
D
25(1:
40)(1:
80)
25
25
E
25(1:
80)(1:
160)
25
25
F
25(1:
160)(1:
320)
25
25
G
25(1:
320)(1:
640)
25
25
H
25(1:
640)(1:
1280)
25
25
分别向以上A横排孔加入25ul血清,吸走25ul加入B排,依次作倍比稀释。
C排加入25ul未致敏粒子,ABDEFGH加入致敏粒子
注:
粉红色(最终稀释倍数)
混匀,静置两小时后观察结果.
TRUST
1号
2号
原倍血清
50ul血清+50ul抗原悬液
50ul血清+50ul抗原悬液
1:
2
稀释血清+50ul抗原悬液
稀释血清+50ul抗原悬液
1:
4
…。
.
….。
乙肝五项化学发光时间分辨定量检测IFFA(同个批号,每天只需做两个浓度的校准品,两点定标)
HBsAg,HBsAb,HBeAg
B
D
样本血清
加样
50ulB校准品
50ulD校准品
50ul血清
室温下振荡器上孵育40min,洗板4次,最后一次尽量扣干
加铕标记物(稀释后)
100
100
100
室温下振荡器上孵育40min,洗板6次,最后一次尽量扣干
加增强液
100
100
100
测定
HBeAb,HBcAb加样后,需加入中和抗原50ul
HBcAb血清样品+1ml生理盐水稀释
肥达氏反应
4.875ml生理盐水+125ul待测血清(1:
40稀释)加入第一竖排,此时试管内还剩2.5ml稀释血清,+2.5ml生理盐水补足5ml(1:
80稀释)加入第二竖排,依次稀释下去
1:
40
1:
80
1:
160
1:
320
对照管(NaCl)
甲500ul
500ul
500ul
500ul
500ul
乙500ul
500ul
500ul
500ul
500ul
丙500ul
500ul
500ul
500ul
500ul
O500ul
500ul
500ul
500ul
500ul
H500ul
500ul
500ul
500ul
500ul
向以上各管加入500ul相应的菌液。
最后稀释倍数为;
(1:
80)
(1:
160)
(1:
320)
(1:
640)
红细胞冷凝集试验(两管血:
抗凝全血+血清)
将全血洗涤3次,制成洗涤红细胞,取30ul+2970ul生理盐水制成1%红细胞悬液
倍比稀释血清
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
生理盐水
200
200
200
200
200
200
200
200
200
200
待测血清
200→
1:
2
200→1:
4
200→1:
8
200→1:
16
200→1:
32
200→1:
64
200→1:
128
200→1:
256
200→1:
512
200→1:
1024
向以上各管加入已制成的1%红细胞悬液200ul。
全自动免疫分析仪(瑞士TECAN)
时间分辨仪
洗板机
酶标仪
超声波清洗仪
连续加样枪
2微生物
染色
革兰染色(真菌,一般检查)
龙胆紫1min,水洗,甩干
碘液1min,水洗,甩干
脱色液(丙酮,乙醇)30s,甩干
沙黄溶液复染30s,干燥
抗酸染色(结核杆菌检查)
石碳酸复红20—25min,水洗,甩干
盐酸酒精(1—2次)脱至无色,水洗,甩干
亚甲蓝复染5min,水洗,干燥
墨汁染色
隐孢子球菌黑色荚膜被染成?
KOH用于检出头发,皮屑等中的真菌?
转种
1血平板2麦康凯3沙保氏(制作该平板时,不需要调节PH,偏酸,倒平板前加入氯霉素抑制细菌,用于分离真菌及对氯霉素耐药且耐酸的细菌)
血液培养及鉴定(自动血液培养仪)
[需氧+→血平板,麦康凯。
厌氧+→两个血平板,一个麦康凯,一血平板放入孵箱中,另一血平板放入烛缸(厌氧环境)中培养](都是三区划线法)若需氧厌氧都长菌,则转种两个血平板(O2,O\2),两个麦康凯(O2,O\2)
尿液培养及鉴定(1,2)
尿液本来是无菌标本,但因为生理环境,采集时极易被污染,临床以有菌标本对待。
血平板:
棋盘法划线(用接种环取一环,连续作横、竖接种,期间不用灭菌(用于菌落计数,<10^5/L为污染菌,>10^5/L认为是感染菌)
麦康凯:
分区划线
痰培养及鉴定(1,2,3)分区划线(直接取标本画)
大便培养及鉴定(2,3)分区划线(直接画)
真菌
芽管实验:
200ul健康人血清+第一区取菌种约1\3环
鉴别真菌?
上鉴定卡
全自动血培养仪
放瓶密码1
取瓶positivebottle密码12345,打开机门后,可以连续取瓶——esc——yes——扫条码—-扫完后—-esc—yes-—退出
配制培养基
称量:
XX*1XX*0.X
溶解:
蒸馏水
加热:
搅拌
调节PH:
滴加NaOH,慢慢调节
分装
沙保氏培养基加入氯霉素?
不用调PH原因?
只有耐酸又对氯霉素耐药的细菌才能生长,抑制细菌生长,选择性生长真菌。
绿脓杆菌(铜绿假单胞菌)
特点:
全自动微生物鉴定仪
GPI(革兰阳性菌鉴定卡)
GPS(革兰阳性菌药敏卡)
GNI(革兰阴性菌鉴定卡)
GNS(革兰阴性菌药敏卡)
3体液室
1尿常规(组合)
尿液分析仪H-800
质控:
编号0500—-阳性质控分析
尿沉渣分析仪i
质控(高值和低值)手动分析进样
2尿常规(门诊)
尿液分析仪BW-500
质控
3粪便常规(组合)
涂片镜检:
生理盐水涂片(保护红细胞原有形态)
红细胞:
皱缩红细胞、膨胀的红细胞(微调感受包膜同心圆感)、正常红细胞(圆圆的双凹圆盘形,吹动能翻转),大多可泛灰红色。
白细胞:
圆圆的,是红细胞体积的1—3倍,微调可见泛绿光,颗粒感。
真菌(霉菌):
多见芽生孢子
1)葵瓜子样,多见有一小点,微调亮亮的,泛绿光
2)椭圆形较葵瓜子样大,微调亮亮的,体内多有一小点,常泛绿光(注意与泛黄光的那种鉴别,其内多没有小点)
寄生虫:
最常见钩虫,蛔虫,鞭虫
隐血试验(OB):
原理:
胶体金法检测粪便中的血红蛋白
蒸馏水溶解(破换红细胞,释放血红蛋白?
)
4阴道分泌物常规(白带常规)
Ⅱ的临界条件:
E++,WBC〈=15
例:
E++,WBC〈=15,霉菌少量.则为Ⅲ
5前列腺液检查
乳白稀薄
卵磷脂小体80%—90%(圆圆的,像闪光的星星,注意与变形的白细胞相区别)
查见颗粒细胞(可能是吞噬了卵磷脂小体的吞噬细胞)
查见淀粉样小体(同心圆)
白细胞XX-XX/HP
红细胞XX—XX/HP
精子XX-XX/HP
6精液常规检查
例颜色:
乳白
性状:
稀薄
量:
5ml
镜下所见:
A级精子20%。
。
。
。
。
。
快速直线运动
B级精子35%。
。
。
。
。
。
缓慢运动
C级精子20%。
。
。
。
。
。
缓缓运动或原地打转
D级精子30%。
。
.。
.。
不动死精子
精子活动率=(A+B+C)%
白细胞XX-XX/HP
红细胞XX—XX/HP
精子计数:
XX*10^9
注;精液超过2h不液化,则不用计数。
精子计数(稀释20倍):
20ul液化精液+0。
38ml精子计数用稀释液,冲池后静置5分钟后计数。
例:
20*10*10^6*20
7胃液检查
隐血检查
颜色:
棕红
性状:
粘稠
量:
10ml
镜下所见(见到什么报告什么):
白细胞、红细胞、真菌、细菌、结晶等
8其他穿刺液检查
颜色性状
量
镜下所见.。
。
。
.。
9尿本周氏蛋白定性检查
第一步:
取小试管加入样本尿液1-2ml,滴加磺基水杨酸1—2滴,若出现白色浑浊或沉淀,则继续第二步。
第二步:
取1/3大试管其体积的尿液,加热至沸腾,使蛋白质变性沉淀,过滤取其滤液,冷却后加热滤液,若出现:
沉淀——澄清—-沉淀的连续现象,则为尿本周氏蛋白定性阳性。
10尿乳糜试验检查
4门诊生化室
OlympusAU640
试剂舱R1和R2
电解质分析测定装置(K、Na、Cl)
进样系统
比色系统
JA0001
需要预处理后再上机的标本
1糖化血红蛋白测定
10ul全血(取之前务必混匀)+400ulHbA1cR3试剂,至少静置5分钟,上机检测.
周一和周四做质控(高值和低值),质控时取样10ul需要保证精确。
2血清总铁结合率测定
1)200ul血清+200ul铁测定标准液,混匀后孵育10分钟
2)取一勺约绿豆大小碳酸镁加入,震荡混匀孵育10分钟
3)离心5分钟,取上清液上机测定
5八楼生化室
Backmancoulter高速离心机(越高速要求配平越严格)
1、AU2700(LJ)
内生肌酐清除率(标本要求:
一管血,一杯尿液)
上架;血清+离心后尿液
尿液标本条码号写在相应检验单上,没有单子的,记录下条码号、患者姓名、所做项目在纸上.
24小时尿蛋白定量:
写上24小时尿量
总铁结合率(组合):
血清铁测定(抗凝离心血清)+总铁结合率测定(小杯上写上患者姓名)
1、200ul血清+200ul铁标准液
2、37℃孵育10分钟
3、加入MgCO3,37℃孵育10分钟
4、离心5分钟,吸取上清液上机做总铁结合率
2、特定蛋白测定Ⅴ
内风湿因子+抗“O”+C反应蛋白
若只有C反应蛋白,则上Olympus生化项目
3、微量元素测定(铜锌钙镁铁)火焰原子吸收光谱法
微量元素测定BH—5300S博晖全血血清多元素分析仪
绿色全血管
试剂(子弹壳)处理液+40ul全血,混匀
4、蛋白电泳○
血清蛋白电泳仪器:
SEBIAHYDRASYS
试剂:
sebia
1、琼脂糖凝胶
2、点样架
3、滤纸(用于吸去琼脂糖凝胶表面的水分)
4、固定条(2条):
用于固定琼脂糖凝胶上电泳仪
6二楼血液室
迈瑞BC5380血液分析仪
试剂耗材:
迈瑞原装稀释液、迈瑞溶血剂(四种)
800i血液分析仪(适用于末梢血)
动脉血气分析仪
Backmancoulteraccess2心机标志物分析仪(每日质控+保养)
赛科西德血沉仪
7八楼血液室
迈瑞血液分析仪BC5500
ABX-120血液分析仪(含网织红细胞计数)
赛科西德血粘度仪SA-6000
SysmexCA-7000全自动血凝仪
BC5500(JQ)
质控
编号9001(高值)9002(中值)
开放-全血WBC+DIFF
ABX—120(JI)
1)质控
手动进样仓——当上下指示灯都为黄色时-—进样——响声后才能移开标本
网织红计数原理(荧光染料染色法)
2)WBC无法进行分类时,先在仪器上手工分类
方法:
esc-—memory——移动上下光标找到所需要分类的标本号如JI20(则仪器读取条码号为0001。
。
.r0010)--回车——F8—-再按F8——在WBC分类散点图上——按Tab键使光标移到最上面那根临界线———移动上下键直到分出类为止(可以明显看出散点图分为五个区为最佳分类处)。
——回车——(保存)按字母“Y”——(密码)esc退出—-F10-—选择2sending——回车确认传送数据
3)ABX-120上查找数据,传输数据?
Esc—memory—移动上下光标找到所需要传送的标本号———回车——F10——选择2sending-—回车确认传送数据
4)ABX—120上在原号上复测?
Esc—memory-移动上下光标找到所需要复测的标本号—--手动进样?
自动覆盖?
5)ABX-120上手动进样与自动条码识别进样不需用人工模式转换?
(迈瑞53805500需要转换模式)
编号原则:
急诊干部病房,血液科的血常规(组合)
第一次用
0000JI1——10
0001JI11——20
0002JI21——30
0009JI91——100
第二次用
0000JI101——110
0001JI111——120
0009JI191-—200
第三次用急诊架
0009JI291——300
手动进样急诊编号;JI8001…。
8011…。
.
SysmexCA-7000全自动血凝仪(LK)
质控大样品杯+200ul用M方式做
编号:
QC01(蓝色盖)质控原液+1ml双蒸水
801(紫色盖)质控原液+1ml双蒸水
901(DD质控)质控配制:
用1ml稀释液复溶冻干粉,再稀释10倍
Menu-—worklist——next—-编号(identry)——例:
701——点击项目(profile1
(1)设置为凝血四项)——R(演算fib)或M(微量吸样)方式-—repeat(一架上重复标本数)--enter—-quit——上架(一定要拔去盖子!
!
!
)
PT凝血酶原时间测定
APTT部分活化凝血活酶时间测定
TT凝血酶时间测定
FIB纤维蛋白原测定
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