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37肖俊临检

R457.12单位代码：

10660

学号：

05005001037

成都医学院

2005级医学检验系本科毕业生论文

微柱凝胶法和凝聚胺法在交叉配血中联合应用的探讨

学生：

肖俊

导师：

张彤

年级：

2005级

专业：

医学检验

2010年3月25日

目录

摘要……………………………………3

前言……………………………………3

材料与方法………………………………3-4

结果……………………………………4

讨论……………………………………5

参考文献…………………………………6

致谢……………………………………6

略缩词表…………………………………6

论文原创性声明…………………………6

英文摘要…………………………………7

附：

综述………………………………7-9

微柱凝胶法和凝聚胺法在交叉配血中联合应用的探讨

医学检验专业学生：

肖俊导师：

张彤

【摘要】目的探讨微柱凝胶法（MGT）和凝聚胺法（MPT）在交叉配血中联合应用的价值，确保输血安全。

方法用MGT法和MPT法对需要输血的732例受血者进行交叉配血，对交叉配血不合者再同时用两种方法作不规则抗体的筛选。

结果微柱凝胶法（MGT）检测出不规则抗体2例，交叉配血不合者10例；凝聚胺法（MPT）法检测出不规则抗体1例，交叉配血不合者7例。

微柱凝胶法，不受非特异性因素及温度等的影响，但高脂血及高纤维蛋白原血清对试验干扰明显，凝聚胺法灵敏度不及微柱凝胶法，但对高纤维蛋白原和高脂血影响小。

结论在临床交叉配血中，提倡推广微柱凝胶法。

将两种配血方法联合起来应用，有利于提高临床输血治疗的安全性。

【关键词】微柱凝胶法；凝聚胺法；交叉配血；不规则抗体

1.前言准确的交叉配血试验（Crossmatchingtest，CMT）是确保临床安全、有效输血的重要手段。

传统的盐水配血法虽然简便快速，但只能检出不相配合的完全抗体（天然抗体IgM）而不能发现不完全抗体（免疫性抗体IgG）。

酶法和抗人球蛋白法虽能检出抗体IgG，但操作步骤烦琐、耗时，易耽误危重患者的抢救治疗工作。

微柱凝胶技术融合了分子筛技术、离心技术和免疫反应技术，具有标本用量少，灵敏度高，特异性强，操作简便，便于观察且结果可长期保存等优点，近年来临床诊疗中已得到了广泛应用。

本文就微柱凝胶法与凝聚胺法对本院住院部需要输血的患者进行交叉配血，如下。

2.材料与方法

2.1材料

2.1.1检测对象

受血者为2009年5月至2009年12月期间本院住院部需要输血的患者732例，其中男351例，女381例，部分有输血史及妊娠史。

2.1.2主要试剂

微柱凝胶卡、筛选细胞、谱细胞，抗人球试剂由长春博讯生物技术有限公司提供。

凝聚胺试剂由珠海生物技术有限公司（BASO公司）生产。

2.1.3主要仪器

微柱凝胶卡专用离心机及孵育器（长春博讯生物技术有限公司提供）

2.2方法所有的需输血患者均用MGT法和MPT法进行交叉配血，对交叉配血不合者再同时用两种方法作不规则抗体的筛选。

两种方法的操作均按说明书要求严格进行.

3.结果

3.1不规则抗体试验732例需要输血的患者中共检出不规则抗阳性者共2例，其中MGT法测出2例，MPT法测出1例，另1例抗体太弱未测出。

结果见表l。

表1不规则抗体分析结果

Table1Analysisofirregularantibodiesresults

微柱凝胶卡法（MGT）

凝聚胺法（MPT）

抗-C

1

1

抗-A1

1

0

合计

2

1

3．2两种方法交叉配血不合比较及解决方法见表2。

表2两种方法交叉配血不合比较及解决方法

Table2aretwowaystocompareandcrossmatchingsub-solution

影响因素

例数（%）

MGT

MPT

解决方法

高纤维蛋白原

3（22）

3

1

抽抗凝血，用促凝管或延长血清析出时间

脂血

5（36）

5

1

洗涤供受者双方红细胞后，重新配血

非特异性凝集

2（14）

0

2

用凝胶法配血，排除非特异性物质的干扰

受血者有不规则抗体

2（14）

2

1

用多袋血交叉配血，选择相合的血液供血者

冷抗体阳性

2（14）

0

2

用凝胶法配血或凝聚胺法在37℃下配血

4.讨论

在732例交叉配血中，微柱凝胶法（MGT）交叉配血不合者10例，凝聚胺法（MPT）法检测交叉配血不合者7例；MGT检测出不规则抗体2例而MPT只检出不规则抗体1例，漏检了1例含量较弱的抗体。

可见MGT试验较MPT试验敏感度高，这与王梁平等[1]对MGT法与MPT法抗体检出分析结果相符。

试验中，受冷凝集和非特异性物质的干扰，凝聚胺法有4例配血出现凝集，而微柱凝胶法不受这些因素的影响。

但在3例高纤维蛋白和5例高脂血中样本中，微柱凝胶法检出8例，MPT法检出2例，可能是因为标本中纤维蛋白原含量高或为脂血时，此时制备红细胞悬液容易出现小凝块［2］，影响了微柱凝胶试验。

但凝聚胺法在实验过程中加入第二液后相对地将血清中的纤维蛋白原、脂蛋白和红细胞悬液进行了稀释，所以受高纤维蛋白血和高脂血干扰较小。

MGT法是近年来兴起的一项免疫学检测新技术，是生物化学凝胶过滤技术、离心技术与免疫化学抗原抗体反应相结合的产物，敏感度高，红细胞浓度、离心时间和离心力等都会影响导致假阳性发生。

MPT法试剂来源和保存容易，操作简便快速为优选[3]，特别是在急诊配血中为首选。

因此，在进行交叉配血时，最好能将MGT法和MPT法结合起来同时应用，分析原因，得出准确的结果，为临床提供可靠的诊断依据，更能确保输血的安全性和准确性。

5.结论

⑴,凝聚胺法受冷凝集和非特异性物质的干扰，而微柱凝胶法不受这些因素影响;

⑵,高纤维蛋白原和高脂血对微柱凝胶法检测干扰较大，而凝聚胺法所受干扰较小;

⑶,微柱凝胶法较凝聚胺法敏感度高，两种方法各有优缺点，应将两种配血方法联合起来应用，有利于提高临床输血治疗的安全性。

参考文献

[1]王梁平，彭道波，赵晖，等，微柱凝胶法与凝聚胺法抗体检出比较分析．临床检验杂志，2001，19（6）：

355．

[2]武建柱．凝胶技术的临床应用及其实验研究现状［J］．中国输血杂志，2003，16（5）：

370.

[3]王培华.输血技术学.北京.人民卫生出版社，1998：

204.

致谢：

在我毕业论文完成过程中，张彤老师和胡昭宇主任对我论文从选题、构思、资料收集到最后定稿的各个环节给予细心指引与教导，使我对论文的书写有了深刻的认识，使我得以最终完成毕业论文，在此表示衷心感谢，再次感谢各位老师在百忙之中抽出时间来对我们论文的指导。

略缩词表：

英文缩写

全称

中文

MGT

microcolumngeltest

微柱凝胶法

MPT

polybrenetest

凝聚胺法

论文原创性声明：

本人郑重声明：

所呈交的论文《微柱凝胶法和凝聚胺法在交叉配血中联合应用的探讨》，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。

除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。

对本文的研究做出重要贡献的个人或集体，均已在文中以明确方式标明。

本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。

作者：

日期：

Studyonlinked-applicationofthecrossmatchingtest

bybothMGTandMPT

xiaoJunDepartmentofLaboratoryMedicalScience,GuiYangMedicalUniversity550004.

ZhangTongDepartmentofLaboratoryMedicalScience,44HospitalofPLA.

【Abstract】Objective:

Thevalueofthethesisistoexplorelinked-applicationofthecrossmatchingtestbyboththemicrocolumngeltest（MGT）andpolybrenetest（MPT）inordertoensuretransfusionsafety.Method:

the732patientsareacceptedtocrossmatchingtestbybothMGTandMPT.iftheresultofwhichismismatched,thesamplesoftheirsaretestedthecrossmatchingtesttoscreenirregularantibodybybothMGTandMPTatthesametimeagain.Result:

2casesareirregularantibodydetectedbyMGT,10casesaremismatchedcrossmatchingtestbyMGT;1casesareirregularantibodydetectedbyMPT,7casesaremismatchedcrossmatchingtestbyMPT.theMGTisnotaffectedbybothnon-specificfactorandtemperature,buttheresultoftestisinterferedbybothlipohemiaandhighfibrinogensignificantly;thesensitivityoftheMPTisinferiortothatoftheMGT,buttheMPTproducesalittleeffectonbothlipohemiaandhighfibrinogen.Conclusion:

theMGTisadvocatedtouseinthecourseoftheclinicalcrossmatchingbloodpopularly,andthecombinedapplicationofbothMGTandMPTisfavorabletoimprovethetransfusionsafety.

【Keywords】MGT,MPT,crossmatchingtest,irregularantibody

附：

综述

微柱凝胶卡法（MGT）与凝聚胺法（MPT）在交叉配血试验中运用综述

学生：

肖俊指导老师：

张彤

交叉配血是临床输血的重要保证，交叉配血试验又称不配合试验，是确保患者安全输血必不可少的试验，也是安全输血的关键步骤。

交叉配血试验的方法较多，现在有不少医院采用微柱凝胶卡法与凝聚胺法进行交叉配血，更进一步的确保了输血的安全。

MGT法是近年来兴起的一项免疫学检测新技术，是生物化学凝胶过滤技术、离心技术与免疫化学抗原抗体反应相结合的产物，敏感度高，但影响因素较多，如红细胞浓度、离心时间和离心力等都会影响结果，导致假阳性发生。

1．红细胞浓度过高时

王梁平等学者认为红细胞悬液浓度过高时，离心力不足或离心时间过短，以及血清中所含纤维蛋白出现细胞的凝块或血液标本被细菌污染等，均可能导致MGT法出现假阳性[1]；

2．脂血、高纤维蛋白质标本纤维蛋白原含量高或为脂血时，对微柱凝胶实验影响较大，可能是此时制备红细胞悬液容易出现小凝块所致[2]，而MPT法在实验过程中加入第二液后相对地将血请中的纤维蛋白原、脂蛋白和红细胞悬液进行了稀释，使实验所受干扰减少。

MPT法是一种经典的操作简便而快速的方法，运用凝聚胺技术进行交叉配血，是利用低离子介质减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞与血清或血浆中抗体结合。

凝聚胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解产生的正电荷能中和红细胞膜表面带有负电荷的唾液酸，使红细胞的Zete电位降低，红细胞之间距离缩短，使红细胞发生非特异性凝集，此凝集是可逆的。

当再加入悬浮液，悬浮液主要是枸橼酸钠，枸橼酸根离子的负电荷能与凝聚胺上的正电荷中和，使非免疫性的可逆聚合现象消失，结果为阴性，而真正的凝集无法散开为阳性结果。

但存在着很多影响因素

1．止血敏影响金燕等学者认为止血敏药物在水溶液中带有负电荷，能使红细胞膜表面的Zete电位上升，增加红细胞之间的排斥力[3]。

实验观察到只有等止血敏的半衰期后方可消除其干扰作用。

实际工作中滴注止血敏2d～3d后重新抽取患者血样本，止血敏的干扰得以完全消除。

2．肝素在水溶液中具有强负电荷，能与一些阳离子结合生成络合物，因此肝素的干扰作用可能是由于肝素与血标本中带正电荷的纤维蛋白原和血浆球蛋白结合，是红细胞膜表面的负电荷不再受纸维蛋白原和血浆球蛋白等大分子作用，从而增加红细胞相互之间的排斥力最后导致液体中红细胞非免疫性的可逆聚合反应受到抑制[4]。

肾病患者在进行血液透析时均要使用肝素，因此在对肾病透析患者进行凝聚胺法交叉配血时，加入凝聚胺试剂后，均不能引出红细胞非免疫性的可逆聚合。

3．红细胞的浓度．红细胞盐水悬液比例达不到3％～5％．低于此浓度凝集反应不明显[5]．浓度过高则影响观察结果血清滴量的影响．血清滴量增加1倍．如试剂组成中的低离子介质加量不变．将影响红细胞IgG的致敏．使红细胞不能很好的靠近并发生非特异性凝集．且抗D抗体的检测灵敏度降低4～8倍。

4．反应时间因素的影响由凝聚胺引起的红细胞非特异性凝集一般在1分钟内完全散开．若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会完全散开．同时弱凝集可能则30分钟内明显减弱或消失[6]。

因此，结果应以立刻观察为准．严格掌握结果判读时间。

5．离心速度因素的影响交叉配血试验．离心时间过长或离心速度偏高可使血细胞比容过紧，不易充分摇匀，易将聚集误认是凝集；离心时间或离心力不足，不利于凝集反应。

笔者认为，微柱凝胶卡法MGT与凝聚胺法MPT在临床配血工作中都有自已的优缺点，因而建议在交叉配血过程中将两种方法进行结合运用，以便提高临床输血的安全性。

参考文献

[1]王梁平，彭道波，赵晖，等．微柱凝胶法与凝聚胺法抗体检出比较分析[J]．临床检验杂志，2001，19（6）：

355．

[2]舒象武.应用微柱凝胶球蛋白技术进行交叉配血[J]．中国现代医学杂志，2003，13（13）：

116—118

[3]金燕，唐吉斌。

凝聚胺法交叉配血的干扰及排除方法.实用医技杂志,2008,15（19）:

2493

[4]吴争胜．MPT在抗体检测和交叉配血中的影响因素探讨[J]．江西医学检验，2007，25（4）：

403-404．

[5]陈学军，徐兴强，金小波．凝聚胺试验在抗体检测和交叉配血中的应用情况．中国输血杂志，2002，15（6）：

432．

[6]胡建华,万向农.影响凝聚胺法交叉配血因素浅析.实验与检验医学;2008,26（6）:

689.