PMS2Cmet和MSH6在胃癌中的意义.docx

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PMS2Cmet和MSH6在胃癌中的意义

PMS2、C-met和MSH6在胃癌中的意义

杜锦波张文天刘杰朱春景

【摘要】【摘要】目的探讨PMS2、C-met、MSH6与胃癌TNM分期，肿瘤大小，分化类型，脉管癌栓，淋巴结转移，2年生存率及复发率，性别，年龄之间的关系。

方法胃癌标本100例分别应用免疫组化方法检测PMS2、C-met、MSH6的表达,并进行分析。

结果PMS2、MSH6在胃癌标本中的表达与TNM分期（P<0.05），肿瘤大小（P<0.05），分化类型（P<0.05），脉管癌栓（P<0.05）淋巴结转移（P>0.05），2年生存率及复发率（P<0.05），性别（P>0.05），年龄（P<0.05）密切相关。

C-met在胃癌标本中的表达与TNM分期（P<0.05），肿瘤大小（P<0.05），分化类型（P<0.05），脉管癌栓（P<0.05）淋巴结转移（P<0.05），2年生存率及复发率（P<0.05），性别（P>0.05），年龄（P<0.05）密切相关。

PMS2的表达与C-met的表达呈负相关（rs=-0.125）；PMS2的表达与MSH6的表达呈正相关性（rs=0.654），统计学意义（P<0.05）。

结论胃癌的病理特征及预后与PMS2、C-met、MSH6的表达密切相关，联合检测pms2、c-met、MSH6的表达有助于对胃癌进行临床分析及预后评价。

【期刊名称】河北医药

【年（卷）,期】2019（041）009

【总页数】5

【关键词】【关键词】PMS2；C-met；MSH6;免疫组化;联合检测;胃癌

项目来源：

沧州市科学技术研究与发展指导计划项目（编号：

172302047）

目前胃癌发病率逐年上升,已成为威胁居民健康的主要原因。

胃位于上腹部，有丰富的淋巴系统、血液系统，比邻器官（肝脏、胰腺、脾脏、横结肠等）。

这些特点致使胃癌的恶性程度比较高，较容易发生复发和远处转移[1-3]。

胃癌较易发生淋巴转移，血液转移及局部侵犯而且周围脏器多且重要，使得胃癌的手术难度较大。

胃癌的外科治疗成为难点，胃癌的预后一直未得到根本改善。

随着医院胃镜的普及，胃癌的早发现，早治疗变为可能。

临床工作最常用胃癌的TNM分期，分化类型，有无脉管癌栓来预测胃癌的预后。

但是即使这些指标完全一样的胃癌患者，预后却不尽相同。

这一现实迫切需要我们寻找一种更加客观，更加全面的指标来对胃癌的预后进行评估。

研究表明，PMS2、C-met、MSH6是一种原癌基因，为监测及治疗胃恶性肿瘤的潜在靶点[4]。

有研究表明，PMS2、C-met、MSH6的表达与胃癌的临床病理分期有重要的关系[5,6]。

本研究选取胃癌患者100例分别检测PMS2、C-met、MSH6的表达，研究这些指标与胃癌的TNM分期，肿瘤大小，分化类型，脉管癌栓，淋巴结转移，2年生存率及复发率，性别，年龄之间的关系；探索胃癌的更全面，科学的危险度评估，预后评估。

1资料与方法

1.1一般资料收集我院胃肠（微创）外科2009年1月至2012年1月治疗的胃癌患者100例，均具有完整的临床资料信息，且所有入选患者术前均未行新辅助治疗。

每例入选标本均经2名以上病理医师复诊，患者术后均按照胃癌治疗指南行化疗治疗并规律复查。

1.2试剂与仪器兔抗人MSH6、PMS2、C-met抗体购于武汉博士德公司。

SP免疫组化二步法检测试剂盒、抗原修复液，DAB显色液、PBS缓冲液均购自北京迈新生物技术有限公司。

免疫组化主要仪器有显微镜、切片机，组织脱水机、孵育盒等。

1.3方法切片均脱蜡水化;3%H2O2室温孵育10min;蒸馏水2次冲洗，PBS浸泡6min;再行抗原修复;10%的正常山羊血清（PBS稀释）封闭，室温孵育10min。

倾去血清，分别滴加（1∶100）的PMS2、C-met、MSH6的单克隆抗体、4℃过夜;PBS冲洗3次，每次5min;生物素标记二抗工作液37℃孵育30min;PBS冲洗3次，每次5min;滴加2滴辣根酶标记链霉卵白素37℃孵育30min;PBS冲洗3次，DAB显色剂显色;自来水充分冲洗，封片。

每例染2张。

在光学显微镜5个高倍视野下观察，分析。

进行视野内阳性细胞计数，并计算阳性细胞所占比例。

肿瘤细胞无着色为（-）；≤25%细胞着色为（+）；26%～50%细胞着色为（++）；≥51%的细胞着色为（+++）。

1.4统计学分析计数资料采用χ2检验或Fisher确切概率分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1PMS2表达与胃癌临床病理的关系PMS2主要表达于细胞核，且染色呈棕黄色。

PMS2在胃癌标本中的表达与TNM分期（P<0.05），肿瘤大小（P<0.05），分化类型（P<0.05），脉管癌栓（P<0.05）淋巴结转移（P>0.05），2年生存率及复发率（P<0.05），性别（P>0.05），年龄（P<0.05）密切相关。

见图1，表1。

2.2MSH6表达与胃癌临床病理的关系MSH6主要表达于细胞核，且染色呈棕黄色。

MSH6在胃癌标本中的表达与TNM分期（P<0.05），肿瘤大小（P<0.05），分化类型（P<0.05），脉管癌栓（P<0.05）淋巴结转移（P>0.05），2年生存率及复发率（P<0.05），性别（P>0.05），年龄（P<0.05）密切相关。

见图2，表2。

2.3C-met表达与胃癌临床病理的关系C-met的表达以细胞浆为主，呈棕黄色或棕褐色为阳性染色。

C-met在胃癌标本中的表达与TNM分期（P<0.05）,肿瘤大小（P<0.05）,分化类型（P<0.05），脉管癌栓（P<0.05）淋巴结转移（P<0.05），2年生存率及复发率（P<0.05），性别（P>0.05），年龄（P<0.05）密切相关。

见图3，表3。

2.4PMS2与C-met、MSH6的相关性PMS2表达与C-met表达呈负相关，PMS2表达与MSH6表达呈正相关，差异有统计学意义（P<0.05）。

见表4。

3讨论

胃癌是影响我国居民健康的主要恶性肿瘤，胃癌早期不易发现，而且胃的淋巴系统、血液系统、比邻器官（肝脏，胰腺，脾脏等）较多，导致胃癌容易局部侵犯，转移。

使得胃癌的清扫范围要求广，手术难度大。

胃癌的早期症状不典型，局部进展期的胃癌多见，使得胃癌预后差，5年生存率近些年尚未得到明显改善。

临床工作中以恶性肿瘤的TNM分期，有无脉管癌栓，有无局部侵犯等因素来预测胃癌患者的预后，但是经常遇到相同TNM分期的胃癌患者，预后却不完全相同[7]。

甚至TNM分期较早的患者预后却较TNM分期较晚的患者差。

临床迫切需要寻找更全面，更合适的标准来指导患者术后辅助治疗及预测预后。

错配修复（mismatchrepair，MMR）广泛存在于生物体内，是正常人体重要的修复方式。

基因的重组和复制在正常人体中每时每刻都在进行，在这一过程中不可避免会发生碱基的错配及重组的错配。

MMR的作用就在于使发生错配的核苷酸序列能够恢复到正常配对，从而有效的保持了生物体遗传物质的稳定性和准确性。

MMR系统几乎存在于所有生物体内。

主要的作用是对细胞复制过程中产生的错误进行修复。

MMR系统不仅可以检测而且可以纠正DNA在重组和复制过程中不可避免的错误，进而有效的保持基因复制过程中的正确性及遗传物质的稳定性。

在我们正常的机体内MMR系统具有以上重要的作用，然而这一修复系统一旦发生突变，将会不可避免的导致基因的错配修复的功能失效，导致正常人体内的DNA产生微卫星不稳定（MSI）及正常人体的DNA在修复过程中出现错误。

MSI的作用还表现为致癌基因与抑癌基因的平衡被打破。

这样正常人体细胞的突变频率便会增加，进一步突变为恶性肿瘤的可能性也将增加[8,9]。

MMR系统的失效成为恶性肿瘤发生发展的机制之一[10]。

MSH6、PMS2属于MMR修复系统，它的突变失效是胃癌发生发展主要原因[11]。

有研究证实，MMR的表达与胃癌患者的预后存在相关性。

MMR缺陷将会导致胃癌等恶性肿瘤的发生[12]。

在DNA的复制过程中碱基的错配主要依靠MMR系统来进行修复，从而维持DNA复制的稳定性,进而避免发生突变间接抑制肿瘤的发生,发展。

MMR基因（包括MSH6、PMS2、MSH2等[13]）。

Zaanan等[14]研究显示，胃癌患者均经规范手术切除。

MMR阳性表达组的5年无复发率及总生存率分别为80%、85%而MMR阴性表达组分别为56%、66%（P<0.01）。

本研究结果显示：

PMS2、MSH6在胃癌患者标本中的表达与TNM分期（P<0.05），肿瘤大小（P<0.05），分化类型（P<0.05），脉管癌栓（P<0.05）淋巴结转移（P>0.05），2年生存率及复发率（P<0.05）,性别（P>0.05）年龄（P<0.05）密切相关。

PMS2、MSH6同属于MMR系统。

阳性表达提示着修复系统存在。

能够对基因的重组及复制产生监控及错误的纠正。

这些功能使得生物体的遗传具有稳定性及准确性，从而避免了恶性肿瘤的发生，控制了恶性肿瘤的进展。

PMS2、MSH6表达阴性往往提示修复系统的失活，对生物体基因的复制及重组过程中产生的核苷酸错配失去监测及修复。

PMS2、MSH6阴性表达着往往提示肿瘤晚，进展快，预后差。

本研究PMS2、MSH6表达阳性者提示胃癌的分期早，无脉管癌栓，淋巴结转移少，预后较好。

本研究对分化类型，脉管癌栓，年龄，性别等做统计研究，使PMS2、MSH6在胃癌中的意义更加广泛，深入。

PMS2、MSH6同属于错配修复系统。

它们的表达，作用机制非常相似。

在我们的实际研究中应该对这两种蛋白进行统一的研究。

肝细胞生长因子受体（C-met）为原癌基因编码合成的[15]。

肝细胞生长因子受体具有广泛的生物学活性，其中最重要的生物学活性为酪氨酸激酶活性，这一活性的重要生物学功能为细胞，组织之间的信息传导，并且能够有效的控制细胞骨架结构的重排，这一功能对于细胞的分裂、增殖、衰亡，分化以及细胞的运动等基本功能有重要的控制及推进作用[16,17]。

C-met在正常机体的组织、细胞中表达低下，然而当正常组织发生，发展为恶性肿瘤组织时，由C-met基因编码合成的蛋白质水平则会明显升高，且与正常水平比较有统计学意义。

处于较高表达水平的C-met可以通过旁分泌和自分泌等途径来激活多种信号通路，从而刺激正常组织、细胞发生，发展为恶性肿瘤[18]。

C-met介导的信号转导通路在胃癌的发生、发展、转移等途径中起重要作用，提示C-met信号转导通路可能成为胃癌的潜在治疗靶点[19]。

Li等[20]检测114例胃癌组织中C-met的表达水平，为82.4%。

其研究提示：

C-met的表达水平与临床分期及淋巴结转移显著相关，C-met的高表达与胃癌的分期晚、易转移、预后差密切相关。

本研究结果证实：

C-met在胃癌患者标本中的表达与TNM分期（P<0.05），肿瘤大小（P<0.05），分化类型（P<0.05）,脉管癌栓（P<0.05）淋巴结转移（P<0.05），2年生存率及复发率（P<0.05），性别（P>0.05），年龄（P<0.05）密切相关。

本研究结果间接证实：

C-met表达阳性提示酪氨酸激酶活性强，对组织之间的信息传导，细胞骨架的重排具有促进作用。

C-met表达阳性还可以通过旁分泌和自分泌等多种途径来促进多种信号通路的激活，从而刺激正常组织、细胞发生，发展为恶性肿瘤。

C-met表达阴性提示这些作用较弱，往往预示着胃癌的分期早，无脉管癌栓，淋巴结转移少，预后较好。

C-met的作用结果与PMS2及MSH6的作用结果恰恰相反，C-met的作用结果与它的作用机制保持了一致性。

C-met的表达越强往往预示着胃癌患者的发展迅速，预后较差。

PMS2的表达与C-met的表达呈负相关；PMS2的表达与MSH6的表达呈正相关性，且均有统计学意义，PMS2与MSH6同属于错配修复基因；这两种蛋白的作用机制相似，PMS2、MSH6表达阳性者提示胃癌的分期早，无脉管癌栓，淋巴结转移少，预后较好。

这两种蛋白的表达缺失意味着胃癌的预后较差。

PMS2、MSH6的表达具有正相关性，这一结果与研究[21]一致。

说明它们之间的表达可能具有协同性或者相互促进作用。

PMS2的表达与C-met的表达呈负相关。

C-met在正常机体的组织、细胞中表达低下，然而当正常组织发生，发展为恶性肿瘤组织时，由C-met基因编码合成的蛋白水平则会明显升高，处于较高表达水平的C-met可以通过旁分泌和自分泌等途径来激活多种信号通路，从而刺激正常组织、细胞发生，发展为恶性肿瘤。

PMS2与C-met的作用机制完全不一样，它们的阳性表达意义相反。

本研究得出的结果与这两种蛋白的表达机制，理论结果保持一致。

本研究揭示了这三种蛋白与胃癌发展及胃癌预后的关系，从更多的角度统计这三种蛋白与胃癌患者的临床病理关系。

这样我们就有了更多、更全面的指标来预测胃癌患者的预后，在我们的临床工作中有着重要的意义。

这三种蛋白与胃癌患者的预后密切相关，它们的表达有希望成为胃癌患者药物治疗疗效的监测靶点。

有助于对于靶向药物开发的研究。

使我们对于胃癌患者的靶向治疗，精准治疗有了更多的参考依据，有可能提高胃癌患者的药物敏感性。

在我们今后的工作中应该更深入，更全面，更系统的研究胃癌的发病机制，胃癌的发展，转移机制，这样对于胃癌患者的治疗有着深远的意义。

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