临床检验仪器学考试复习资料重点 2.docx
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临床检验仪器学考试复习资料重点2
仪器学
第一章概论
1.临检仪器特点:
涉及的技术领域广,结构复杂,技术先进,精度高,对使用环境要求高。
2.临检仪器分类:
分离分析检验仪器,光谱分析检验仪器,目视检验仪器,细胞及分子生物学检验仪器,临床检验常规检验仪器,其他临床检验仪器。
3.临床检验仪器的常用性能指标:
灵敏度,误差,噪声,最小检测量,精确度,可靠性,重复性,分辨率,测量范围和示值范围,线性范围,响应时间,频率响应范围。
第二章离心机
1.离心技术:
应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术。
(离心现象:
指物体在离心力场中表现的沉降运动现象)。
2.离心机工作原理:
离心是利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或悬浮密度的差异进行分离、浓缩和提纯生物样品的一种方法。
悬浮液在高速旋转下,由于巨大的离心作用,使悬浮的微小颗粒以一定的速度沉降,从而使溶液得以分离,颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度。
微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态密度、重力场的强度及液体的黏度有关。
4.离心机按转速分可分为:
低速,高速,超高速。
5.离心机主要参数:
最大转速、最大离心力、最大容量(离心机一次可分离样品的最大体积,通常表示为m×n,一次可容纳最多离心管×一个离心管容纳样品最大体积,单位是ml。
)、调速范围、温度控制范围、工作电压、电源功率。
第三章显微镜
1.光学显微镜的工作原理:
利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。
由两组会聚透镜组成光学折射成像系统。
把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组成为物镜;焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。
被观察物体位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作第二级放大,得到最大放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明视距离处。
相对于物镜的成像条件及最后二次成像于观察者的明视距离等条件的满足,是通过仪器的机械调焦系统来实现的。
2.光学显微镜的基本结构:
包括光学系统(是显微镜的主体部分,包括物镜、目镜、聚光镜及反光镜)和机械系统(包括聚光镜升降、调焦系统、载物台和物镜转换器等运动夹持部件以及底座、镜臂、镜筒等支持部件)
3.显微镜的性能参数:
物镜放大倍数和数值孔径、镜筒长度和盖玻片厚度、目镜放大倍数和最小视场宽度等。
4.光学显微镜照明设置部件:
光源、滤光器、聚光镜、玻片。
第四章紫外-可见分光光度计
1.紫外-可见分光光度计工作原理:
光照射到物质可发生折射、反射和透射,一部分光会被吸收,其能量以热释放出来。
利用测量物质对某些波长光的吸收来了解物质特性。
不同物质会吸收不同波长的光。
改变入射光波长,并记录物质对不同波长光的吸收程度,得该物质吸收光谱,可根据物质吸收光谱分析物质结构、含量和浓度。
光的吸收定律:
即郎伯-比尔定律,是比色分析的基本原理。
当一束单色光透过溶液后,由于光吸收了一部分光能,光的强度就会减弱。
设入射光强度I,当透过浓度为c、液层厚度为b的溶液后,透射光强度为I,透射光强度与入射光强度的比值为透光度,也叫透射率,用T表示。
T=I/I。
表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的函数关系。
A=-lgI/I0=lgI0/I=lg1/T=kbc
2.紫外-可见分光光度计的基本结构:
光源(提供入射光,常用光源:
钨灯或卤钨灯、氢灯或氘灯、汞灯等)、单色器(将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束)、吸收池(又称比色皿、比色杯、样品池或液槽,在可见光范围内,常用无色光学玻璃或塑料制作;在紫外区,需用能透紫外线的石英玻璃或蓝宝石制作。
)、检测器(将光信号转换为电信号)、信号显示系统(把放大的信号以适当的方式显示或记录下来)。
第五章血细胞分析仪
1.血细胞分析仪(BCA):
又称血细胞自动计数仪(ABCC)、血液自动分析仪(AHA)等,是对一定体积全血内血细胞数量和异质性进行自动分析的常规检验仪器。
其主要功能是血细胞计数、白细胞分类、血红蛋白测定、先关参数计算等。
2.电阻抗型血细胞分析仪的计数原理:
血细胞与等渗的电解质溶液相比为不良导体,其电解质比稀溶液大。
当血细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,其内外电极之间的恒流电路上的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号。
脉冲信号数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积成正比。
根据欧姆定律,在恒电流电路上,电压变化与电阻变化成正比,电阻值又同细胞体积成正比,血细胞体积越大,电压越高,产生信号的脉冲幅度就越大。
各种大小不同的细胞产生的脉冲信号分别被送入仪器的检测通道,经计算机处理后,以体积直方图显示出特定细胞群中的细胞体积和细胞分布情况。
最后得出WBC、RBC、PLT。
(该原理称库尔特血细胞检测原理)
2.联合检测型血细胞分析仪的细胞计数原理:
联合检测型BCA主要体现在白细胞分类部分的改进,实质是选用较特异的方法将血中含量较少的嗜酸性、嗜碱性粒细胞检出,完成较准确的白细胞五分类并发现异常血细胞,克服了电阻抗法的不足,联合分类技术是以流式技术为基础在联合使用流式、激光、射频、电导、电阻抗、细胞化学染色等多项技术进行细胞分析,并综合分析监测数据,从而得出较为准确的“五分类”结果。
其共有特点是均使用了流式细胞技术,形成流体动力聚焦的流式通道,使单细胞流在鞘液的包裹下通过流式通道,将重叠限制到最低限度。
(容量、电导、光散射联合检测原理)、(多角度激光散射、电阻抗联合技术原理)、(光散射与细胞化学联合计数原理)、(电阻抗、射频与细胞化学联合计数原理)。
容量、电导、光散射联合检测原理(VCS):
体积V表示应用电阻抗测定的细胞体积大小,电导性C可粗略了解细胞质和细胞核中的颗粒大小和密度,光散射S表示对细胞颗粒的构型和颗粒质量的鉴别能力。
采用高频电磁探针测量单个细胞的电导性,可以确定细胞内核浆比例,质粒的大小和密度,从而区别体积完全相同而性质不同的两个细胞。
多角度激光散射、电阻抗联和计数原理:
是将同一白细胞用多个角度的激光照射,测定不同角度下的散射光强度,从而对白细胞进行分类;再用电阻抗计数红细胞、血小板或某一类白细胞。
光散射与细胞化学联合计数原理:
应用激光散射与细胞化学染色技术对白细胞进行分类计数。
其白细胞分类原理是利用细胞大小不同,其散射光强度也就有差异,再结合五种白细胞结合化学染料的差异,计算机综合分析同一白细胞在不同角度下的散射光强度和染色差异,得到较准确的白细胞分类结果。
电阻抗、射频与细胞化学联合计数原理:
是利用电阻抗、射频这一成熟细胞计数技术结合细胞化学技术,通过4个不同的检测系统对白细胞、幼稚细胞进行分类和计数。
3.网织红细胞计数分析基本原理:
采用激光流式细胞分析技术与细胞化学荧光染色技术联合对网织红进行分析,利用网织红中残存的嗜碱性物质—RNA,在活体状态下与特殊荧光染料(新亚甲蓝等)结合,激光激发产生荧光,荧光强度与RNA含量成正比;用流式细胞技术检测单个的网织红的大小和细胞内RNA含量及Hb含量。
由计算机处理,得出网织红技术及其他参数。
4.血细胞分析仪测定血红蛋白(Hb)的原理:
除干式离心分层型、无创型外,各种BCA对Hb测定都采用光电比色原理。
血细胞悬液中加入溶血剂后,RBC溶解释放出Hb,后者与溶血剂中有关成分形成Hb衍生物,进入Hb测试系统。
在特定波长(多为530~550nm)下进行光电比色,吸光度值与所含Hb含量成正比。
与不同型号BCA配套的溶血剂不同,形成Hb衍生物也不同,吸收光谱也有差异,但最大吸收峰都接近540nm,因为国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的氰化高铁(HiCN)法的最大吸收峰在540nm,仪器Hb的校正必须以HiCN值为标准。
5.血液凝固分析仪ACA:
是采用一定分析技术,对血栓与止血有关成分进行自动检测的临床常规仪器。
6.血凝仪检测原理:
血凝仪使用的主要检测技术方法有凝固法、底物显色法、免疫学法,干化学法等。
凝固法是血栓/止血实验中最基本、最常用的方法。
半自动血凝仪以凝固法检测为主,全自动血凝仪还可使用底物显色发和免疫学法等。
7.凝固法:
是通过检测血浆在凝血激活剂作用下一系列物理量(光、电、超声、机械运动等)的变化,再由计算机分析所得数据并将之换算成最终结果的方法,故也称生物物理法。
按测量原理可分为电流法、超声分析法、光学法、磁珠。
第六章临床血液流变学检验仪器
1.血液粘度计分类:
(1).按工作原理:
分为毛细管粘度计和旋转式粘度计。
前者按结构分为奥氏粘度计和乌氏粘度计,后者按结构分为筒-筒式、锥-板式、锥-锥式、棱-球式等。
(3.红细胞沉降率:
是指红细胞在一定条件下沉降的速度,简称血沉。
是应用于临床诊断和观察某些疾病活动情况的一项重要参数。
在血液流变学测定中常作为红细胞聚集、红细胞表面电荷、红细胞电泳的通用指标,其结果对许多疾病的活动、复发、发展有监测作用。
4.自动血沉仪工作原理:
所以自动血沉仪的原理和方法都是建立在魏氏法的基础上,利用光学阻挡原理进行测量;也有采用红外线障碍法或激光光源扫描微量全血进行检测。
5.红细胞沉降曲线:
是表示血沉管内血液高度H(mm)与时间t(min)关系的曲线。
分为红细胞不下沉的悬浮期、红细胞缗线状形成的聚集期、红细胞等快速下降的快速沉降期、红细胞开始积压的缓慢沉降期。
6.影响红细胞(RBC)沉降的因素:
红细胞的形态和大小、红细胞的变形性、红细胞的聚集性、红细胞间的相互作用、血细胞比容、血浆介质及沉降管的倾斜度等。
7.自动血沉仪基本结构:
光源:
采用红外光源
自动血沉分析仪的质量控制中标本的采集与抗凝:
静脉采血:
要求在30秒内完成1ml左右的采血,且不能淤血和溶血。
第七章临床尿液检验仪器
1.尿液分析:
是临床诊断泌尿系统疾病的重要措施之一,通过对尿液的物理学检查和化学检查,可观察尿液物理性状和化学成分的变化。
在尿沉渣检查中能够看到的有形成分为红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、巨噬细胞、肿瘤细胞、细菌、精子以及由尿液中沉析出来的各种结晶(包括药物结晶)等。
这些检查资料对肾和尿路疾患的诊断、鉴别诊断以及疾病的严重程度和预后的判断,都有极重要的意义。
2.尿液分析仪的检测原理:
尿液分析仪的试剂带结构:
单项试剂带以滤纸为载体,将各种试剂成分浸渍后干燥,作为试剂层,再在其表面覆盖一层纤维素膜作为反射层。
一般把这样一条上面附有试剂块的塑料条叫做试剂带。
尿液侵入试剂带后,与试剂发生反应,可产生颜色变化。
试剂带的反应原理:
①pH测定:
pH指示剂原理②尿蛋白质测定:
pH指示剂蛋白质误差的远离③尿葡萄糖测定:
一种是基于葡萄糖氧化酶法原理,另一种是基于铜还原法的原理④尿酮体测定:
采用亚硝基铁氰化钠反应测量酮体⑤尿隐血测定:
血红素具有过氧化物酶样作用,能催化过氧化氢释放出新生态氧,使色原氧化而显色,其颜色深浅与血红蛋白含量有关⑥尿胆红素测定:
采用重氮反应法原理⑦尿胆原测定:
采用Ehrlich醛反应原理或重氮反应原理⑧尿亚硝酸盐测定:
尿亚硝酸盐试验⑨尿白细胞测定⑩尿比重测定11尿维生素C测定12尿液颜色13测定尿浊度测定
试剂带的应用:
不同型号的尿液分析仪一般使用自己配套的专用试剂带。
试剂块要比测试项目多一个空白块,有些仪器还多一个位置参考块。
。
各试剂块与尿液中被测定成分反应而呈现不同颜色。
空白块是为了消除尿液本身的颜色及试剂块分布的状态不均等产生出测试误差,提高测量准确度而设置的。
2).尿液分析仪的检测原理:
把试剂带浸入尿液中后,除了空白块外,其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应而产生了颜色的变化。
试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有关,颜色越深,相应某种成分浓度越高,吸收光量值越大,反射光量值越小,反射率也越小;反之,反射率越大。
因为颜色的深浅与光的反射率成比例关系,而颜色和深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系,所以只要测得光的反射率即可以求得尿液中各种成分的浓度。
尿液分析仪一般采用双波长法测定试剂块的颜色变化。
3.尿液分析仪的质量控
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