沈萍版微生物简答题《打印版》.docx
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沈萍版微生物简答题《打印版》
1、如果希望从环境中分离得到厌氧固氮菌,你该如何设计实验?
(1)根据选择分离的原理设计不含氮的培养基,在这种培养基上生长的细菌,其氮素应来自固氮作用。
(2)将环境样品(例如土样)稀释涂布到选择平板上,放置于厌氧罐中。
对厌氧罐采用物理、化学方法除去氧气,保留氮气。
培养后在乎板上生长出来的细菌应是厌氧固氮菌或兼性厌氧固氮菌。
(3)挑取一定数量的菌落,对应点种到两块缺氮的选择平板上,分别放置于厌氧罐内、外保温培养。
在厌氧罐内外均能生长的为兼性厌氧固氮菌,而在厌氧罐外的平板上不生长,在厌氧罐内的平板上生长的即为可能的厌氧固氮菌。
(4)对分离得到的厌氧固氮菌菌落样品进行系列稀释,涂布于相应的选择平板,重复上述步骤直到获得厌氧固氮菌的纯培养。
2.对细菌的细胞形态进行观察和描述时应注意哪些方面?
你是否能很快地在显微镜下区分同为单细胞的细菌、酵母菌和原生动物?
(1)首先应使用稀释涂布等方法对待检菌株的纯度、群落形态、生理特性等进行检查、确认。
(2)选用正常的新鲜培养基和新鲜培养物进行培养和观察,避免培养过程中一些物理、化学条件的改变或培养时间过长等因素对细胞形态的影响。
(3)报告细胞大小时应选用多个细胞检测的平均数,并记录所用的实验方法,包括培养条件、培养时间、样品制备方法和染色方法等。
(4)可从大小和形态上对细菌、酵母菌和原生动物进行区分。
酵母菌、原生动物个体较大,一般可用低倍镜观察,酵母菌细胞一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形,不具运动性,原生动物细胞形态多变,能够运动。
相比较而言,细菌细胞一般较小,需用高倍镜或油镜才能看清。
3.以紫色非硫细菌为例,解释微生物的营养类型可变性及对环境条件变化适应能力的灵活性。
紫色非硫细菌在没有有机物时可同化CO2进行自养生活,有有机物时利用有机物进行异养生活,在光照及厌氧条件下利用光能进行光能营养生活,在黑暗及好氧条件下利用有机物氧化产生的化学能进行化能营养生活。
4.如果要从环境中分离得到能利用苯作为碳源和能源的微生物纯培养物,你该如何设计实验?
(1)从苯含量较高的环境中采集土样或水样;
(2)配制培养基,制备平板,一种仅以苯作为惟一碳源(A),另一种不含任何碳源作为对照(B);
(3)将样品适当稀释(十倍稀释法),涂布A平板;
(4)将平板置于适当温度条件下培养,观察是否有菌落产生;
(5)将A平板上的菌落编号并分别转接至B平板,置于相同温度条件下培养(在B平板上生长的菌落是可利用空气中C02的自养型微生物);
(6)挑取在A平板上生长而不在B平板上生长的菌落,在一个新的A平板上划线、培养,获得单菌落,初步确定为可利用苯作为碳源和能源的微生物纯培养物;
(7)将初步确定的目标菌株转接至以苯作为惟一碳源的液体培养基中进行摇瓶发酵实验,利用相应化学分析方法定量分析该菌株分解利用苯的情况。
5.某些微生物对生长因子的需求具有较高的专一性,可利用它们通过“微生物分析”(microbiologicalassay)对样品中维生素或氨基酸进行定量。
试设计实验利用某微生物对某一 样品维生素B12的含量进行分析。
A将缺乏维生素B12但含有过量其他营养物质的培养基分装于一系列试管,分别定量接入用于测定的微生物;
B在这些试管中分别补加不同量的维生素B12标准样品及待测样品,在适宜条件下培养;
C以微生物生长量(如测定OD600nm)值对标准样品的量作图,获得标准曲线;
D测定含待测样品试管中微生物生长量,对照标准曲线,计算待测样品中维生素B12的含量。
6.以伊红美蓝(EMB)培养基为例,分析鉴别培养基的作用原理。
EMB培养基含有伊红和美蓝两种染料作为指示剂,大肠杆菌可发酵乳糖产酸造成酸性环境时,这两种染料结合形成复合物,使大肠杆菌菌落带金属光泽的深紫色,而与其他不能发酵乳糖产酸的微生物区分开。
7.某学生利用酪素培养基平板筛选产胞外蛋白酶细菌,在酪素培养基平板上发现有几株菌的菌落周围有蛋白水解圈,是否能仅凭蛋白水解圈与菌落直径比大,就断定该菌株产胞外蛋白酶的能力就大,而将其选择为高产蛋白酶的菌种,为什么?
不能。
因为,
(1)不同微生物的营养需求、最适生长温度等生长条件有差别,在同一平板上相同条件下的生长及生理状况不同;
(2)不同微生物所产蛋白酶的性质(如最适催化反应温度、pH、对底物酪素的降解能力等)不同;(3)该学生所采用的是一种定性及初步定量的方法,应进一步针对获得的几株菌分别进行培养基及培养条件优化,并在分析这些菌株所产蛋白酶性质的基础上利用摇瓶发酵实验确定蛋白酶高产菌株。
8.以大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸一糖磷酸转移酶系统(PTs)为例解释基团转位。
大肠杆菌PTs由5种蛋白质(酶I、酶Ⅱa、酶Ⅱb、酶Ⅱc及热稳定蛋白质HPr)组成,酶Ⅱa、酶b、酶Ⅱc3个亚基构成酶Ⅱ。
酶I和HPr为非特异性细胞质蛋白,酶Ⅱa也是细胞质蛋白,亲水性酶Ⅱb与位于细胞膜上的疏水性酶Ⅱc相结合。
酶Ⅱ将一个葡萄糖运输进入胞内,磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)上的磷酸基团逐步通过酶I和HPr的磷酸化和去磷酸化作用,最终在酶Ⅱ的作用下转移到葡萄糖,这样葡萄糖在通过PTs进入细胞后加上了一个磷酸基团。
9.试分析在主动运输中,ATP结合盒式转运蛋白(ABc转运蛋白)系统和膜结合载体蛋白(透过酶)系统的运行机制及相互区别。
AABC转运蛋白常由两个疏水性跨膜结构域与胞内的两个核苷酸结合结构域形成复合物,跨膜结构域在膜上形成一个孔,核苷酸结合结构则可结合ATP。
ABc转运蛋白发挥功能还需要存在于周质空间(G+菌)或附着在质膜外表面(G一菌)的底物结合蛋白的帮助。
底物结合蛋白与被运输物质结合后再与ABC转运蛋白结合,借助于ATP水解释放的能量,ABC转运蛋白将被运输物质转运进入胞内。
B膜结合载体蛋白(透过酶)也是跨膜蛋白,被运输物质在膜外表面与透过酶结合,而膜内外质子浓度差在消失过程中,被运输物质与质子一起通过透过酶进入细胞。
C被运输物质通过ABC转运蛋白系统和通过透过酶进入细胞的区别在于能量来源不同,前者依靠ATP水解直接偶联物质运输,后者依靠膜内外质子浓度差消失中偶联物质运输。
10.比较酵母菌和细菌的乙醇发酵。
主要差别是葡萄糖生成丙酮酸的途径不同。
酵母菌和某些细菌(胃八叠球菌、肠杆菌)的菌株通过EMP途径生成丙酮酸,而某些细菌(运动发酵单胞菌、厌氧发酵单胞菌)的菌株通过ED途径生成丙酮酸。
丙酮酸之后的途径完全相同。
11.试比较底物水平磷酸化、氧化磷酸化和光合磷酸化中ATP的产生。
底物水平磷酸化,发酵过程中往往伴随着一些高能化合物的生成,如EMP途径中的1,3一二磷酸甘油酸和磷酸烯醇式丙酮酸。
这些高能化合物可以直接偶联ATP或GTP的生成。
底物水平磷酸化可以存在于发酵过程中,也可以存在于呼吸过程中,但产生能量相对较少。
氧化磷酸化,在糖酵解和三羧酸循环过程中,形成的NAD(P)H和FADH,通过电子传递系统将电子传递给电子受体(氧或其他氧化性化合物),同时偶联ATP合成的生物过程。
光合磷酸化,光能转变成化学能的过程。
当一个叶绿素(或细菌叶绿素)分子吸收光量子时,叶绿素(或细菌叶绿素)即被激活,导致叶绿素(或细菌叶绿素)分子释放一个电子被氧化,释放出的电子在电子传递系统的传递过程中逐步释放能量,偶联ATP的合成。
主要分为光合细菌所特有的环式光合磷酸化和绿色植物、藻类和蓝细菌所共有的产氧型非环式光合磷酸化作用。
12.什么是无氧呼吸?
比较无氧呼吸和有氧呼吸产生能量的多少,并说明原因。
无氧呼吸是微生物在降解底物的过程中,将释放出的电子交给NAD(P)+、FAD或FMN等电子载体,再经电子传递系统传给氧化型化合物,作为其最终电子受体,从而生成还原型产物并释放出能量的过程。
一般电子传递系统的组成及电子传递方向为:
NAD(P)一FP(黄素蛋白)一Fe·s(铁硫蛋白)一CoQ(辅酶Q)一cytb—Cytc—Cyta—cyta3。
无氧呼吸的最终电子受体不是氧,而是像NO3—、N02—、SO42—、S2O3一、CO2等,或延胡索酸(fumarate)等外源受体,氧化还原电位差都小于氧气,所以生成的能量不如有氧呼吸产生的多。
13.比较光能营养微生物中光合作用的类型。
①光合细菌→环式光合磷酸化;
②绿硫细菌的非环式光合磷酸化;
③嗜盐细菌的光合磷酸化是一种只有嗜盐菌才有的,无叶绿素或细菌叶绿素参与的独特的光合作用。
是目前所知的最简单的光合磷酸化。
嗜盐细菌紫膜上的细菌视紫红质吸收光能后,在膜内外建立质子浓度差。
非环式光合磷酸化是绿色植物、藻类和蓝细菌所共有的产氧型光合作用。
光能驱动下,电子从光反应中心I(PsI)的叶绿素a出发,通过电子传递链,连同光反应中心Ⅱ(PsⅡ)水的光解生成的H+,生成还原力;光反应中心Ⅱ(PsⅡ)由水的光解产生氧气和电子,电子通过电子传递链,传给光反应中心PsI,期问生成ATP。
环式光合磷酸化为光合细菌所特有。
光能驱动下,电子从菌绿素分子出发,通过电子传递链的循环,又回到菌绿素,期间产生ATP,还原力来自环境中的无机化合物供氢,不产生氧气。
有些光合细菌虽只有一个光合系统,但也以非环式光合磷酸化的方式合成ATP,如绿硫细菌和绿色细菌,从光反应中心释放出的高能电子经铁硫蛋白、铁氧还蛋白、黄素蛋白,最后用于还原NAD+生成NADH。
反应中心的还原依靠外源电子供体如S2-、S2O32一等。
外源电子供体在氧化过程中放出电子,经电子传递系统传给失去了电子的光合色素,使其还原,同时偶联ATP的生成。
嗜盐细菌的光合磷酸化是一种只有嗜盐菌才有的,无叶绿素或细菌叶绿素参与的独特的光合作用。
是目前所知的最简单的光合磷酸化。
嗜盐细菌紫膜上的细菌视紫红质吸收光能后,在膜内外建立质子浓度差,再由它来推动ATP酶合成ATP。
14.简述化能自养微生物的生物氧化作用。
化能自养微生物氧化无机物而获得能量和还原力。
能量的产生是通过电子传递链的氧化磷酸化形式,电子受体通常是O2,因此,化能自养菌一般为好氧菌。
电子供体是H2、NH4+、H2S和Fe2+还原力的获得是逆呼吸链的方向进行传递,同时需要消耗能量。
A氨的氧化。
NH3和亚硝酸(N02-)是作为能源的最普通的无机氮化合物,能被亚硝化细菌和硝化细菌氧化。
B硫的氧化。
硫杆菌能够利用一种或多种还原态或部分还原态的硫化合物(包括硫化物、元素硫、硫代硫酸盐、多硫酸盐和亚硫酸盐)作能源。
H2S首先被氧化成元素硫,随之被硫氧化酶和细胞色素系统氧化成亚硫酸盐,放出的电子在传递过程中可以偶联产生ATP。
C铁的氧化。
从亚铁到高铁的生物氧化,对少数细菌来说也是一种产能反应,但这个过程只有少量的能量被利用。
亚铁的氧化仅在嗜酸性的氧化亚铁硫杆菌(Thiobacillusferrooxidans)中进行了较为详细的研究。
在低pH环境中这种细菌能利用亚铁氧化时放出的能量生长,在该菌的呼吸链中发现了一种含铜的铁硫菌蓝蛋白(rusticyanin),它与几种cytc和一种cyta,氧化酶构成电子传递链。
D氢的氧化。
氢细菌能利用分子氢氧化产生的能量同化CO2也能利用其他有机物生长。
氢细菌的细胞膜上有泛醌、维生素K:
及细胞色素等呼吸链组分。
在这类细菌中,电子直接从氢传递给电子传递系统,电子在呼吸链传递过程中产生ATP。
15.说明革兰氏阳性细菌细胞肽聚糖合成过程以及青霉素的抑制机制。
革兰氏阳性菌肽聚糖合成的3个阶段。
A细胞质中的合成。
①葡萄糖→N-乙酰葡糖胺一UDP(G-UDP)→N-乙酰胞壁酸-UDP(M—UDP)
②M-UDP→“Park”核苷酸,即UDP-N-乙酰胞壁酸五肽
B细胞膜中的合成。
“Park”核苷酸-→肽聚糖单体分子。
C细胞膜外的合成。
青霉素抑制转肽酶。
青霉素是肽聚糖单体五肽尾末端的D-丙氨酸-D-丙氨酸的结构类似物,两者竞争转肽酶的活力中心。
16.蓝细菌是一类放氧性光合生物,又是一类固氮菌,说明其固氮酶的抗氧保护机制。
有两种特殊的保护系统。
A分化出异形胞,其中缺乏光反应中心Ⅱ,异形胞的呼吸强度大于正常细胞,其超氧化物歧化酶的活性高。
B非异形胞的保护方式:
①时间上的分隔保护,白天光合作用,晚上固氮作用;②群体细胞中的某些细胞失去光反应中心Ⅱ,而进行固氮作用;③提高过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性来除去有毒氧化物。
17.说明次级代谢及其特点。
如何利用次级代谢的诱导调节机制及氮和磷调节机制来提高抗生素的产量?
相对于初级代谢而言,一般认为,微生物在一定的生长时期,以初级代谢产物为前体,合成一些对微生物自身生命活动无明确生理功能的物质的过程,称为次级代谢。
这一过程形成的产物,即为次级代谢产物。
次级代谢产物大多是分子结构比较复杂的化合物。
根据其作用,可将其分为抗生素、激素、生物碱、毒素、色素及维生素等多种类别。
次级代谢特点:
A次级代谢的生理意义不像初级代谢那样明确,次级代谢途径某个环节发生障碍,致使不能合成某个次级代谢产物,而不影响菌体的生长繁殖。
B次级代谢与初级代谢关系密切,初级代谢的关键性中间产物往往是次级代谢的前体。
C次级代谢一般发生在菌体指数生长后期或稳定期,也会受到环境条件的影响。
D次级代谢产物的合成,因菌株不同而异,但与分类地位无关,两种完全不同来源的微生物可以产生同一种次级代谢产物。
E质粒与次级代谢的关系密切,控制着多种抗生素的合成。
F次级代谢产物通常都是限定在某些特定微生物中生成,因此与现代发酵产业密切相关。
G次级代谢产物的合成通常被细胞严密控制。
某些抗生素的产生可以被加在发酵培养基中的诱导物诱导产生,可在发酵培养基中加入诱导物来增加产量。
易代谢氮源如铵盐以及高浓度的磷酸盐,对某些抗生素的产生有抑制作用。
在发酵培养基避免使用高浓度的铵盐和使用低浓度或亚适量的磷酸盐可以防止抑制作用。
18.如何利用营养缺陷突变株进行赖氨酸发酵工业化生产?
在微生物中,以天冬氨酸为原料,通过分支代谢合成赖氨酸、苏氨酸和甲硫氨酸。
为了解除正常的代谢调节以获得赖氨酸的高产菌株,工业上选育了谷氨酸棒杆菌的高丝氨酸缺陷型菌株作为赖氨酸的发酵菌种。
这个菌种由于不能合成高丝氨酸脱氢酶(HSDH),故不能合成高丝氨酸,也就不能产生苏氨酸和甲硫氨酸。
添加适量高丝氨酸(或苏氨酸和甲硫氨酸)的条件下,在含有较高糖和铵盐的培养基上,能产生大量的赖氨酸。
19.试述单个细菌细胞的生长与细菌群体生长的区别。
单个细菌细胞的生长,是细胞物质按比例不可逆地增加使细胞体积增大的过程;细菌群体生长,是细胞数量或细胞物质量的增加。
细菌的生长与繁殖两个过程很难绝对分开,接种时往往是接种成千上万的群体数量,因此,微生物的生长一般是指群体生长。
20.用来测定细菌生长量的直接计数法和间接计数法一般采用什么具体的方法?
并从实际应用、优点、使用的局限性3个方面加以具体分析。
直接计数法通常是利用细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下直接计算一定容积里样品中的微生物的数量。
该方法简便、易行,成本低,且能观察细胞大小及形态特征。
该法的缺点是:
样品中的细胞数不能太少,否则会影响计数的准确性,而且该法不能区别活细胞和死细胞。
间接计数法又称活菌计数法,一般是将适当稀释的样品涂布在琼脂培养基表面,培养后活细胞能形成清晰的菌落,通过计算菌落数就可以知道样品中的活菌数。
平板涂布和倾倒平板均可用于活菌计数。
平板计数简单灵敏,广泛应用于食品、水体及土壤样品中活菌的计数。
该法的缺点有:
可能因为操作不熟练使得细胞未均匀分散或者由于培养基不合适不能满足所有微生物的需要而导致结果偏低,或使用倾倒平板技术时因培养基温度过高损伤细胞等原因造成结果不稳定等。
21.封闭系统中微生物的生长经历哪几个生长期?
以图表示并指明各期的特点。
如何利用微生物的生长规律来指导工业生产?
细菌生长曲线图参见教材第六章。
封闭系统中微生物的生长经历迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期等4个生长时期。
在迟缓期中细胞体积增大,细胞内RNA、蛋白质含量增高,合成代谢活跃,细菌对外界不良条件反应敏感。
在迟缓期细胞处于活跃生长中,但分裂迟缓。
在此阶段后期,少数细胞开始分裂,曲线略有上升。
对数期中细菌以最快的速度生长和分裂,导致细菌数量呈对数增加,细胞内所有成分以彼此相对稳定的速度合成,细菌为平衡生长。
由于营养物质 消耗,代谢产物积累和环境变化等,群体的生长逐渐停止,生长速率降低至零,进入稳定期。
稳定期中活细菌数最高并保持稳定,细,菌开始储存糖原等内含物,该期是发酵过程积累代谢产物的重要阶段。
营养物质消耗和有害物的积累引起环境恶化,导致活细胞数量下降,进入衰亡期。
衰亡期细菌代谢活性降低,细菌衰老并出现自溶,产生或释放出一些产物,菌体细胞呈现多种形态,细胞大小悬殊。
在工业发酵和科学研究中迟缓期会增加生产周期而产生不利影响,因此需采取必要措施来缩短迟缓期。
对数期的培养物由于生活力强,因而在生产上普遍用作“种子”,对数期的培养物也常常用来进行生物化学和生理学的研究。
稳定期是积累代谢产物的重要阶段,如某些放线菌抗生素的大量形成就在此时期,因此如果及时采取措施,补充营养物或去除代谢物或改善培养条件,可以延长稳定期以获得更多的菌体或代谢产物。
22.与分批发酵相比,连续培养有何优点?
由于连续培养中微生物的生长一直保持在对数期,生物量浓度在较长时间内保持恒定,因此与单批发酵相比,连续培养:
能缩短发酵周期,提高设备利用率;便于自动控制;降低动力消耗及体力劳动强度;产品质量较稳定
23.说明温度对微生物生长的影响,详述温度对微生物生长的影响的具体表现。
微生物的生长具有相当高的温度依赖性,有最低、最适和最高生长温度这几个基本温度。
最适温度总是更靠近最高生长温度而不是最低生长温度。
温度对微生物生长的影响的具体表现在:
①影响酶活性,温度变化会影响酶促反应速率,最终影响细胞物质合成。
②影响细胞质膜的流动性,温度高则流动性高,有利于物质的运输;温度低则流动性低,不利于物质的运输。
因此,温度变化影响营养物质的吸收和代谢物质的分泌。
③影响物质的溶解度,温度上升,物质的溶解度升高,温度降低,物质的溶解度降低,机体对物质的吸收和分泌受影响,最终微生物的生长受影响。
温度过高时酶和其他蛋白质变性,细胞质膜熔化崩解,细胞受到损害。
温度很低时,细胞质膜冻结,酶也不能迅速工作,因此,在温度高于或低于最适生长温度时生长速度会降低。
24.详述嗜冷菌、嗜温菌、嗜热菌和极端嗜热菌的不同。
嗜冷菌生长的温度范围是0—20~C,最适生长温度为15℃;嗜温菌生长的温度范围是15—45℃,最适生长温度为20~45℃;嗜热菌生长的温度范围是45~80℃以上,最适生长温度为55—65℃;极端嗜热菌生长的温度范围是80℃以上,最适生长温度为80~113℃,低于55℃通常不会生长。
嗜冷菌的运输系统和蛋白质合成系统在低温下能很好地发挥功能,其细胞膜含有大量的不饱和脂肪酸,能在低温下保持半流质状态。
当温度高于20℃时,细胞膜被破坏,细胞内组分流出。
嗜热菌具有能在高温条件下发挥功能的酶和蛋白质合成系统,细胞膜脂类物质的饱和程度高,因此融点高,能保持高温下的细胞完整。
25.哪几种氧形式对细胞有毒性?
微生物细胞具有什么酶来解除氧的毒性?
氧气受到辐射可被还原为超氧化物自由基、过氧化氢、羟基自由基等,它们是强氧化剂,能迅速破坏细胞组分。
专性好氧和兼性厌氧微生物的细胞中含有超氧化物歧化酶和过氧化氢酶,能破坏超氧化物自由基、过氧化氢。
另外,细胞中的过氧化物酶也能降解过氧化氢。
26.过滤除菌有些什么方法?
哪种方法较为经济实惠?
过滤除菌有3种:
深层过滤、膜过滤和核孔过滤。
深层过滤器是由纤维或颗粒状物质制成的过滤板层;膜过滤器是由醋酸纤维素、硝酸纤维素或其他合成物质制成的具有微孑L的滤膜;核孔过滤器是由核辐射处理后再经化学蚀刻的薄聚碳酸胶片而制成。
深层过滤较为经济实惠,多用于工业发酵,后两种方法主要用于科学研究。
27.近年来是什么原因导致抗生素不敏感的抗性菌株的增多?
10.主要有以下5个原因:
①细胞质膜透性改变使药物不能进入细胞;②药物进入细胞后又被细胞膜中的移位酶等泵出胞外;③细菌产生了能修饰抗生素的酶使之失去活性;④药物作用靶发生改变从而对药物不再具有敏感性;⑤菌株改变代谢途径以绕过受药物抑制的过程或增加靶代谢物的产物。
28.病毒区别于其他生物的特点是什么?
结构简单,独特的繁殖方式,绝对的细胞内寄生,生命形式的二重性。
不同处:
1.形体极其微小。
只有在电子显微镜下才能观察到。
一般能通过细菌滤器
2.化学组成简单,主要是蛋白质和核酸
3.只有一种核酸,DNA或RNA
4.无细胞结构,仅为核酸包于蛋白质外壳中的病毒粒子。
5.缺乏独立代谢能力
6.繁殖方式独特,只能在活细胞内利用宿主细胞的代谢机器,通过核酸复制和蛋白质合成,然后在装配的方式来增值.
7.具有双重存在方式,时而在活细胞内寄生,时而在细胞外以大分子颗粒状态存在。
29.病毒分类原则与命名规则的主要内容有哪些?
分类原则,包括病毒形态、毒粒结构,基因组、复制、化学组成在内的毒粒性质,病毒的抗原性质及生物学性质。
命名规则:
分类等级、病毒“种”及种的命名,病毒属、病毒科、病毒亚科
30.病毒学研究的基本方法有哪些,这些方法的基本原理是什么?
病毒的分离:
标本的采集与处理、标本接种与病毒认定、盲传;病毒纯化:
纯化标准、纯化方法依据;
病毒的测定:
病毒物理颗粒计数,包括噬菌斑、蚀斑测定和终点法的病毒感染性测定;
病毒的鉴定:
根据病毒的生物学性质、理化性质、免疫学性质和分子生物学性质进行的鉴定。
31.病毒壳体结构有哪几种对称形式?
毒粒的主要结构类型有哪些?
螺旋对称、二十面体对称、复合对称。
裸露的螺旋对称毒粒和二十面体毒粒,有包膜的螺旋状毒粒和二十面体毒粒、复杂毒粒。
32.病毒的复制循环分为哪几个阶段,各个阶段的主要过程如何?
吸附:
病毒吸附蛋白、细胞受体、辅助受体、病毒的吸附过程;
侵入:
噬菌体、动物病毒、植物病毒的侵入方式;
脱壳:
病毒的包膜和/或壳体除去而释放出病毒核酸;
病毒大分子合成:
噬菌体、动物病毒、植物病毒大分子合成的特点;
装配与释放:
噬菌体、动物病毒、植物病毒装配与释放
33.病毒的非增殖性感染有哪几类?
引起病毒非增殖性感染的原因是什么?
类型:
流产感染、限制性感染、潜伏感染。
原因:
细胞的非允许性、缺损病毒。
34.噬菌体感染可能给宿主细胞带来什么影响?
抑制宿主细胞大分子合成:
抑制宿主基因的转录、蛋白质合成、DNA合成;
宿主限制系统的改变;
噬菌体释放对细胞的影响:
细胞表面免疫学性质的改变,细胞膜失去稳定;
溶源性感染对细胞的影响:
免疫性;溶源性转变
35.动物病毒感染可能给宿主细胞带来什么影响?
病毒感染的致细胞病变效应:
病毒基因产物的毒性作用,病毒复制的次级效应;
对宿主大分子合成的影响:
宿主细胞转录、翻译及DNA复制的抑制;
对细胞结构的影响:
对宿主细胞膜、细胞结构的影响、包涵体、细胞凋亡
36.构成机体病毒感染的主要类型和构成机体病毒感染的宿主因素分别有哪些?
根据感染症状明显程度分为显性感染和隐性感染;
根据感染过程、症状和病理变化发生的主要部位分为局部感染和系统感染;
根据病毒在机体存留时间长短分为急性感染和持续性感染。
构成机体病毒感染的因素有病毒、机体、环境条件。
37.亚病毒因子有哪些类,各有何特点?
要点:
类病毒:
裸露的低相对分子质量侵染RNA,无蛋白质外壳、无编码功能、利用宿主RNA聚酶Ⅱ进行复制;
卫星病毒:
有核酸基因组,依赖辅助病毒复制,特异性外壳壳体化;
卫星RNA:
低相对分子质量RNA,被辅助病毒的质外壳包装、依赖辅助病毒复制;
朊病毒:
蛋白质侵染颗粒、无核酸,为亚
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