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污水化验实际检测注意事项

污水化验实际检测要点

（芦溪污水处理厂）易韶萍

内容

一、BOD5及DO测定注意事项

二、重铬酸钾标准法测量COD注意事项

三、测定总氮的几个要点

四、配制和标定硫代硫酸钠标准溶液注意事项

五、测定氨氮的注意事项

六、总磷测定中标准曲线与工作曲线的比较

七、总磷测定的几个要点

八、浅淡校准曲线（专家论文）

九、部分药剂保存方法及保质期

BOD5及DO测定注意事项

一、淀粉指示剂的加入：

淀粉溶液作为指示剂与其他大部分指示剂不同，它不能过早加入试样中，这与淀粉特殊的结构以及淀粉变色反应的机理有关系。

可溶性淀粉呈螺旋状结构，可以弱键结合游离碘，开始出现变色反应，随结合量的增加，颜色由红紫色变为蓝色，这就是淀粉遇碘变色的机理。

间接碘量法在接近终点时加入淀粉指示剂使少量未反应碘和淀粉结合显色有利于终点的观察和滴定精度的提高。

提前加淀粉指示剂的话，部分碘已经提前参与反应，淀粉变色将会提前，影响到滴定终点颜色的变化，对滴定终点的判断会产生误差。

二、水样DO测定注意事项：

水样取回来后要静止一段时间后取上清液测定。

（1）如水样中含有氧化物质（如游离氯大于0.1mg/L时），应预先加入相当量的硫代硫酸钠去除。

即用两个溶解氧瓶各取一瓶水样，在其中一瓶加入5mL（1∶5）硫酸和1g碘化钾，摇匀，此时游离出碘。

以淀粉作为指示剂，用硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色刚褪，记下用量。

于另一瓶水样中，加入同样量的硫代硫酸钠溶

液，摇匀后，按上述步骤进行固定和测定。

（2）水样中如含有大量悬浮物，由于吸附作用要消耗较

多的碘而干扰测定，可在采样瓶中用吸管插入液面下，如

加入1mL的10%明矾[KAl（SO4）2．12H2O]溶液，再加入1~2mL浓氨水，盖好瓶塞，颠倒混合，放置10min后，将上清液虹吸至溶解氧瓶中，进行固定和测定。

（3）水样中如含有较多亚硝酸盐氮和亚铁离子，由于它们的还原作用而干扰测定，可采用叠氮化钠修正法进行测定。

三、水样BOD5测定注意事项：

1.必须要根据水样做一些估计,方能正确测量做BOD5之前最好先做CODCr，看看他的COD值是多少。

再根据这个估计BOD5，再稀释估计需要的倍数。

一般比较脏的水的COD都比较高，BOD也是。

2.水样悬浮物多，一般BOD也会高，应该适当稀释水样再测试溶解氧。

如果干扰还是存在，可考虑改用溶解氧仪测定5天前后的水样溶解氧。

3.PH值也要注意7.0。

如果水样呈强酸性或强碱性，可用氢氧化钠或硫酸溶液调至中性后再测定。

4.做BOD5最主要是确定稀释比，可先做高锰酸盐指数或COD，再定稀释比。

重铬酸钾标准法测量COD注意事项

1、使用0.4g硫酸汞络合氯离子的最高量可达40mg，如取用20.00mL水样，即最高可络合2000mg/L氯离子浓度的水样。

若氯离子的浓度较低，也可少加硫酸汞，使保持硫酸汞:

氯离子=10:

1（W/W）。

若出现少量氯化汞沉淀，并不影响测定。

   2、本方法测定COD的范围为50—500mg/L。

对于化学需氧量小于50mg/L的水样，应改用0.0250mol/L重铬酸钾标准溶液。

回滴时用0.01mol/L硫酸亚铁铵标准溶液。

对于COD大于500mg/L的水样应稀释后再来测定。

3、水样加热回流后，溶液中重铬酸钾剩余量应为加入量的1/5—4/5为宜。

4、用邻苯二甲酸氢钾标准溶液检查试剂的质量和操作技术时，由于每克邻苯二甲酸氢钾的理论CODCr为1.176g,所以溶解0.4251g邻苯二甲酸氢钾（HOOCC6H4COOK）于重蒸馏水中，转入1000mL容量瓶，用重蒸馏水稀释至标线，使之成为500mg/L的CODcr标准溶液。

用时新配。

　校核试验：

按测定水样的方法分析20.0ml上述邻苯二甲酸氢钾标准溶液的cod值，用以检验操作技术及试剂纯度。

 该溶液的理论cod值为500mg／l，如果校核试验的结果大于该值的96％，即可认为实验步骤基本上是适宜的，否则，必须寻找失败的原因，重复实验，使之达到要求。

5、每次实验时，应对硫酸亚铁铵标准滴定溶液进行标定（至少做两个平行样）。

室温较高时尤其注意其浓度的变化。

（也可在滴定后的空白中再加入10.0ml重铬酸钾标准溶液,加3滴（约0.15ml）试亚铁灵指示剂。

用硫酸亚铁铵滴定至终点.）　标定后一定要按实际硫酸亚铁铵溶液的浓度计算结果，不能统一按滴定时所耗硫酸亚铁铵体积乘以40来计算。

6、水样应保证新鲜，尽快测定。

对于污染严重的水样。

可选取所需体积1／10的试料和1／10的试剂，放入10×150mm硬质玻璃管中，摇匀后，用酒精灯加热至沸数分钟，观察溶液是否变成蓝绿色。

如呈蓝绿色，应再适当少取试料，重复以上试验，直至溶液不变蓝绿色为止。

从而确定待测水样适当的稀释倍数。

7、所用移液管和容器及滴定管一定要洗至不挂一点水珠，吸取水样及药剂时一定准确。

此试验操作过程中极小的差异，也会对结果造成较大的误差。

8、吸取水样时，先用所取样品润洗吸管，并且一定要在充分摇匀后立即吸取样品。

移取三个样品（空白，进、出水）停留时间要相同。

尤其是移取重铬酸钾时最为重要（直接对结果造成较大的误差）。

三个样品一定要使用同一根移液管吸取（标定时也要使用同一根移液管）。

以免移液管本身带来的误差。

9、加热回流时：

①冷却水不能太小，达不到冷却效果，致使有机物及部分药剂等随水蒸汽逸出。

但也不能大太，小心水管因水冲击太大曝裂或者脱落冷凝管接口处。

保证出水温度不热就行。

②打开进水后，开启通风机。

从冷凝管上端加入硫酸-硫酸银时，一定要沿着冷凝管内壁缓缓加入，不断旋动锥形瓶使之混合均匀，保证烧瓶口跟冷凝管下端紧密接触。

以防止低沸点有机物的逸出。

③加热火力不能太大，保证刚好沸腾（有气泡）就可以了。

仔细观察冷凝管内，热汽不能逸出冷凝管。

保持热汽在冷凝管最下部。

④加热回流2小时后，关火，冷却水不能停。

稍冷后关小冷却水，完全冷至室温后加入90ML水，使冷凝管内壁冲洗干净流入烧瓶。

加入水后烧瓶的温度会再次升高，若烧瓶较热的话暂不停冷却水（待只有微热了才停水），不热的话关水，取下烧瓶冷至室温后再进行滴定。

10、指示剂的加入不能过早,在每个试样滴定前加入效果最好,不能统一加指示剂,再依次滴定,这样会造成实验误差。

测定总氮的几个注意事项

一、药剂空白高的问题

造成药剂空白高主要原因是过硫酸钾纯度不够。

空白高于0.030，就需要提纯过硫酸钾。

提纯方法就是二次结晶过硫酸钾：

1.（可以同时做两份）在1L的大烧杯中加入约800mL水，50摄氏度的水浴锅上加热（水浴锅的温度要用温度计检测下是不是正常，以免超过60摄氏度。

过硫酸钾在60摄氏度以上会分解）。

我的经验是先加入90克过硫酸钾，用一滤纸盖在上面（避免污染），溶解速度慢，可以边做别的事边提纯，有空就去搅拌几下，全部溶解之后（速度较慢）。

用勺子逐渐向烧杯中加入过硫酸钾，一次不要加太多，溶了再加，直至不管怎样搅拌，隔了近一小时多都不能溶解为止（刚好有一丁点儿不能溶解最好），这个过程挺漫长。

2.把完全溶解的饱和溶液放在室温中自然冷却，用一干净的塑料袋包住烧杯口，并用皮筋扎紧，再放进冰箱里（调到最低温度），放置一晚上，重结晶。

建议同时用一个1L的广口瓶放一瓶无氨水在冰箱里冷藏（用于冲洗用）。

3.重结晶一夜后，第二天早上拿出来立即倒掉上清液，重结晶的晶体会结成一块沉在瓶底，但其实结构很松散，用钢勺什么的弄两下就离散开了，然后再清洗：

用冰好的无氨水清洗几遍，尽量不要让下面的结晶流失。

4.二次结晶：

清洗后的烧杯里只剩下下面的结晶，向烧杯中加入约400ML的无氨水，搅拌溶解，这次跟第一次结晶不同的是向烧杯中慢慢地加入无氨水，一开始可以一次稍多点水（看结晶的多少），剩下不多时要等久些，加的水也要少，直到有一丁点儿结晶不能溶解为止。

5.然后重复第2步骤（二次结晶）、第3步骤（清洗）。

6.清洗后倒掉上清液，把结晶移入一250ML的烧杯中，然后放入50摄氏度烘箱烘干即可（烘箱里的温度要用温度计检测是否正常）。

烘干箱里不要放入其它物品，以免再次污染。

烘干时间较长，（我的烘了二天三夜）可以晚上放烘干箱里烘，白天放在50度水浴锅上蒸干一定。

完全烘干后的药品跟原来的药品一样松散干燥，搅动会发出清脆的声音。

7．烘干后的药品从烘箱里拿出要放在干燥器里冷却一小时以上。

冷却后用干净的聚乙烯瓶装好盖紧。

8.实验过程中加碱性过硫酸钾的时候一定要避免加在瓶口处。

二、总氮取水体积：

因为碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定总氮取水样量为10ML时，测定范围为0.20mg/l—7.00mg/l。

总氮高于7mg/l时要适当减少取水样量。

如果取5ML水样再稀释至10ML进行测定的话，最高检出限是14mg/l。

当总氮高于14mg/l时取水量就要再减少进行测定。

我一般是取2ML水样进行测定。

出水总氮低时可以取5ML水样进行测定。

吸取水样时要取静止一定时间后的上清液。

三、要用新鲜的无氨水。

整个总氮的测定过程中所用的无氨水，包括加药前稀释至10ML用的无氨水，消解后加的无氨水，以及测定吸光值时参比样用的无氨水，都必须使用同一瓶水。

以免不同无氨水不同带来的误差。

四、密封事项

比色管盖子用生料带缠好，这样密封性更好，防止氨氮跑出。

生料带对药剂没影响不会影响结果。

但缠在盖子上的生料带要保持完好无损，以免碎屑掉入比色管内，影响吸光值，从而影响化验结果。

比色管盖子一定要塞紧，然后用纱布和绳子扎紧。

扎好后把纱布边沿往下拔，使纱布紧密包住盖子。

五、灭菌锅的温度

灭菌锅的温度设定为125度，消解时间设定为1小时。

六、趁热拿出

消解结束后，待灭菌锅压力降为0后，马上打开放气阀放气，放气后马上打开灭菌锅盖，立即拿出装比色管的烧杯，把总氮的比色管（压住总氮比色管的盖子）趁热多次摇匀，放回烧杯中，自然冷却。

七、加入1+1盐酸后，10分钟之后测定吸

光值（只要是10分钟后就行，时间长些不要紧，但要避免污染。

）。

分光光度计要预热30分钟以上，测定总氮的吸光值时，要先测220波长的吸光值，全部测完了再测275波长的吸光值。

配制和标定硫代硫酸钠标准溶液注意事项

一、硫代硫酸钠溶液不稳定的原因

⑴与溶解在水中的CO2反应：

Na2S2O3+CO2+H2O＝NaHCO3 +NaHSO3+S↓

⑵与空气中的O2反应：

Na2S2O3+O2＝2Na2SO4+2S↓

⑶与水中的微生物反应：

    Na2S2O3   =Na2SO3+S↓

⑷此外水中微量元素等也能促进硫代硫酸钠溶液分解。

二、Na2S2O3溶液的配制注意事项

根据上述原因Na2S2O3溶液的配制应采取下列措施：

①应将配制溶液所用的水煮沸一段时间，以除去CO2和杀灭微生物。

②配制时，为防止其酸性分解和除去水中含有的铜离子，加入少量Na2CO3使溶液呈弱碱性（在此条件下微生物活动力低），使溶液的浓度稳定。

③将配制溶液置于棕色瓶中放置14天，再用基准物标定，若发现溶液浑浊需重新配制。

④配制工作中的各步操作均应非常细致，所用仪器必须洁净。

三、标定

标定硫代硫酸钠标准溶液的基准物有KIO3、KBrO3和K2Cr2O7等。

国家标准规定用K2Cr2O7基准物标定硫代硫酸钠标准溶液，其方法为：

称取1g碘化钾置于碘量瓶中，加入100mL蒸馏水，加10ML0.025mol/l的重铬酸钾浓溶液，再加入5mL（1+1）硫酸溶液，摇匀，盖好盖。

于暗处放置5min后，用配制好的硫代硫酸钠标准溶液滴定，近终点（淡黄色）时加1.5mL淀粉指示液（10g/L），继续滴定至溶液蓝色完全退去。

滴定至终点后，经过5分钟以上，溶液又出现蓝色，这是由于空气氧化I-所引起的，不影响分析，但如果到终点后溶液又迅速变蓝，表示Cr2O72-与I-的反应不完全。

发生反应时溶液的温度不能高，一般在室温下进行。

需注意事项：

1、滴定时不要剧烈摇动溶液。

2、析出I2后不能让溶液放置过久。

3、滴定速度宜适当地快些。

4、淀粉指示液应在滴定近终点时加入，如果过早地加入，淀粉会吸附较多的I2，使滴定结果产生误差。

5、所用KI溶液中不应含有KIO3或I2，如果KI溶液显黄色或将溶液酸化后加入淀粉指示液显蓝色，测应重新配制碱性碘化钾。

四、贮存和使用

1、硫代硫酸钠标准溶液应保存在棕色玻璃瓶中，配得和标定后的溶液均应保存在温度接近68℉并没有阳光直射的地方，并且不应受到不良气体的影响。

2、贮存溶液的瓶子瓶口要严密。

3、每次取用时应尽量减少开盖的时间和次数。

4、存放过程中，若发现溶液浑浊或表面有悬浮物，需过滤重新标定后使用，必要时重新制备。

氨氮测定的几个要点

一、药剂的空白值≦0.030。

空白值太高，主要是酒石酸钾钠不纯造成。

解决方法是在已配制好的酒石酸钾钠溶液中每100ML加入2ml纳氏试剂，置于暗处两三天后用定性滤纸过滤。

过滤方法：

先用无氨水淋洗滤纸三次，再用少量药剂淋洗滤纸二至三次，淋洗液不要（即初滤液20ml弃去），之后开始过滤。

过滤后的酒石酸钾钠溶液过一段时间后还会有一些黄色沉淀，可再次进行过滤。

吸取时不要吸到下面的沉淀。

滤纸中常含痕量铵盐，使用时注意用无氨水洗涤。

所用玻璃器皿应避免实验室空气中氨的沾污。

二、纳氏试剂：

配制后静置24小时，取上清液备用。

之后如有沉淀要去除。

可放在冰箱里保存，保存期更长，但使用前要恒温至室温后使用，以免温度太低影响显色。

可以每天上班提早从冰箱里取出备用.需要注意的是：

纳氏试剂中碘化汞与碘化钾比例，对显色反应的灵敏度有较大影响。

静置后生成的沉淀应除去。

三、除清洁水样外，水样有悬浮物或色度影响要凝沉淀法预处理：

取三个100ML比色管分别取100ML无氨水、进水、出水，（进、出水为混匀样），盖好盖，加入1ML的硫酸锌，摇匀；再加入0.1-0.2ML的25﹪的氢氧化钠溶液（用PH试纸检测，调节PH值为10.5左右），摇匀。

静置，沉淀。

吸取上清液分析，或者用中速定性滤纸过滤。

四氨氮测定方法中取50ML水样时，最低检出浓度为0.1mg/l，最高测定上限为2mg/l。

当氨氮含量高于2mg/l时要适当取少量水样进行测定：

取25ML水样时，检测结果最高限为4mg/l；取10ml水样时，检测结果最高限为10mg/l。

取5ml水样时，检测结果最高限为20mg/l。

适当调整取水样量，使检测结果误差在最小范围。

总磷测定中标准曲线与工作曲线的比较（专家论文）

⏹摘要：

通过对钼锑抗分光光度法测定总磷的标准曲线和工作曲线的比较试验，并应用数理统计方法对结果加以分析，证明总磷测定中标准曲线与工作曲线无显著性差异（显著性水平为0.05，样本数为6），且两者具有相似的精密度和准确度。

校准曲线是描述待测物质浓度或量与相应测量仪器响应值或其他指示量之间的定量关系曲线。

校准曲线包括工作曲线（绘制标准曲线的溶液需与样品分析步骤完全相同）和标准曲线（标液的分析步骤有所省略，如不经过前处理等）。

今通过试验，并经数理统计检验总磷测定中标准曲线和工作曲线间有无显著性差异。

1       实验部分

1.1试剂

⏹5%（m/V）过硫酸钾溶液；

⏹（1：

1）硫酸；

⏹10%（m/v）抗坏血酸溶液；

⏹钼酸盐溶液；

⏹磷酸盐储备溶液；

⏹磷酸盐标准液

⏹上述溶液均按文献[1]配制。

1.2仪器

⏹760CRT双束紫外可见分光光度计（上海科学精密仪器有限公司）；

⏹医用蒸汽灭菌锅；

⏹玻璃器皿，所用的玻璃器皿用（1+5）盐酸浸泡2h，用水冲洗数次。

1.3实验操作方法

1.3.1标准曲线的绘制

向系列50ml比色管中分别加入0、0.50、1.00、3.00、5.00、10.0、15.0ml磷酸盐标准液，用水稀释至50ml标线，制得标准系列溶液，向标准系列溶液中加入显色剂1ml10%（m/v）抗坏血酸溶液、2ml钼酸盐溶液），15min后比色由比色结果拟合计算出标准曲线。

1.3.2工作曲线的绘制

向系列50ml比色管中分别加入0、0.50、1.00、3.00、5.00、10.0、15.0ml磷酸盐标准液，稀释至25ml标线处，加过硫酸钾溶液4.00ml，加塞后管口包一纱布并用线扎紧，以免加热时玻璃塞冲出，将具塞比色管放在烧杯中置于高压灭菌锅中加热，待锅内压力达1.1kg/cm2（相应的温度为120℃）时，调节电炉温度使其保持此压力30min后，停止加热，待压力表指针降至零后取出放冷，用水稀释至50ml标线，制得标准系列溶液，向标准系列溶液中加入显色剂（1ml10%（m/v）抗坏血酸溶液、2ml钼酸盐溶液），15min后比色，由比色结果拟合计算出工作曲线。

1.3.3重复性试验

选一具有代表性的水样，经高温高压过硫酸钾溶液消解的预处理后，分别用两条曲线进行测定，并以工作曲线测定的结果作为参照，计算相对误差，再通过数理统计方法判断两组数据的一致性，结果见表2。

2       分析结果与讨论

2.1标准曲线与工作曲线的测定结果

⏹通过上述（1.3.1、1.3.2、1.3.3）步骤，总磷测定中标准曲线与工作曲线的测定结果见表1。

表1.标准曲线与工作曲线的测定结果

序号

测定方法

标准曲线的斜率（xi）

工作曲线的斜率（yi）

1

钼锑抗分光光度法

51.60

52.55

2

51.90

52.30

3

51.97

51.82

4

51.83

51.80

5

51.91

52.00

6

51.74

51.22

2.2重复性试验结果

表2：

测定水样中总磷含量的重复性试验结果

2.3讨论

2.3.1两条曲线斜率的一致性检验

⏹对表1中结果进行t检验。

⏹假设H0：

μ1=μ2（双侧检验）（μ为总体均值）

⏹由表1测定结果进行统计计算可得标准曲线与工作曲线的斜率的差的均值

⏹d=[∑（xi-yi）]/n=0.1933（n为样本数）

⏹标准偏差Sdi=｛[∑di2－（∑di）2/n]/（n－1）｝1/2=0.4775

⏹均值的标准偏差Sd=Sdi/n1/2=0.1949

⏹自由度f=n－1=5

⏹统计量t=（│d│－0）/Sd=0.9916

⏹判定：

对于给定的显著性水平α为0.05，自由度为5时的统计量t0.05（5）=2.571，而我们研究的对象︱t︱=0.9916＜2.571=t0.05（5），故不拒绝假设H0，即可认为两种方法测定的曲线无显著性差异。

2.3.2重复性试验中测定结果的一致性检验

⏹对表2中测定结果进行分析，检验σ1=σ2（σ为总体标准偏差），同样进行t检验。

⏹假设H0：

μ1=μ2（双侧检验）（μ为总体均值）

⏹令x1=4.90，x2=5.07（x为样本均值）

⏹S12=4.922=24.21，S22=5.162=26.63（S为样本标准偏差）

⏹自由度f=n1+n2－2=10（n为样本量）

⏹统计量t=（x1－x2）[n1n2f/（n1+n2）]1/2[（n1－1）S12+（n2－1）S22]－1/2=（4.90－5.07）[6×6×10/（6+6）]1/2（5×24.21+5×26.63）－1/2=－3.4×10-3

⏹判定：

对应的显著性水平α=0.05查表得显著性水平α为0.05，自由度为10时的t0.05（10）=2.228。

试验中所得的统计量︱t︱=3.4×10-3＜2.228=t0.05（10），故不拒绝假设H0，即可认为两种方法测定结果间无显著性差异，且具有相似的精密度和准确度。

3结论

⏹在总磷测定中，总磷标液经消解和不消解绘制成的曲线，即工作曲线与标准曲线相比，其斜率间无显著性差异（显著性水平为0.05，样本数为6），且应用两条曲线测定的结果具有相似的精密度和准确度。

由此看来，总磷标液系列的高温高压过硫酸钾消解操作步骤可以省去，即采用钼锑分光光度法测定总磷时，可以使用标准曲线代替工作曲线。

[参考文献]

[1]国家环境保护总局《水和废水监测分析方法》编委会.水和废水监测分析方法

.第四版，北京：

中国环境科学出版社，2002.244-248.

[2]中国环境监测总站《环境水质监测质量保证手册》编写组.环境水质监测质量保证手册.第二版,北京:

化学工业出版社,1994.262-266.

测定总磷的几个要点

1、总磷测定方法中取25ML水样时，最低检出浓度为0.01mg/l，最高测定上限为0.6mg/l。

当总磷含量高于0.6mg/l时要适当取少量水样进行总磷测定：

取10ML水样

时，检测结果最高限为1.5mg/l；取5ml水样时，检测结果最高限为3mg/l。

取适当的水样量，使检测结果误差在最小。

2、不能用塑料瓶采样。

取混匀的样品进行检测。

（酸化保存的水样要调至中性后再吸取进行测定）

3、新鲜蒸馏水，整个试验中所用蒸馏水为同一瓶。

药剂空白值要低于0.003。

4、显色时间是15分钟至30分钟。

即加入钼酸盐溶液后开始计时15分钟后测定吸值，30分钟内测完吸光值。

如果室温低于13摄氏度，可20—30摄氏度水浴显色15分钟（也可放入培养箱里）。

5、加入钼酸盐溶液后混匀，显色开始，不要再摇动比色管，测定吸光值时取上清液进行测定吸光值。

测定每个样品前要用所测样品润洗两至三次。

浅谈校准曲线

文章作者：

马桂平 

校准曲线是描述待测物质浓度或量与检测仪器响应值或指示量的定量关系的曲线。

根据朗伯——比耳定律，一束单色光通过一定厚度吸光池的稀溶液时，吸光度与吸光物质（被测定的物质）的浓度成正比。

若以吸光度为纵轴，被测物质的含量为横轴作图，应得到一通过坐标原点的直线，这条直线既校准曲线（工作曲线或标准曲线）。

理论上讲，自变量被测物质的含量与因变量吸光度是呈一次线性函数关系，实际上，两变量仅有直线趋势，而且当标准溶液的浓度过大时，直线的上端将无直线趋势。

现就工作中，校准曲线的绘制，相关系数检验及截距检验、斜率检验，谈点肤浅认识。

一、校准曲线的绘制

在实际工作中，不同浓度的标准溶液系列，用分光光度计测定对应的吸光度是个随机变量，以吸光度为纵轴，标准溶液浓度为横轴，点绘两变量关系图时呈直线趋势。

若所用试剂和蒸馏水等含有与标准溶液相同的物质，则标准溶液系列中的零管所对应的吸光度将不等于零。

故绘制标准曲线时，必须考虑基体的影响。

通常做法是：

首先将标准溶液系列所对应的吸光度进行试剂空白校正（系统误差校正），然后根据最小二乘法原理进行回归分析，绘制标准曲线。

在实际工作中经常遇到标准曲线不成直线的情况，特别是当吸光物质的浓度较高时，明显的表现标准曲线向下或向上偏离。

这中情况为偏离朗伯——比耳定律现象。

故使用校准曲线时，应选用曲线的直线部分和最佳测量范围，不得任意外延。

1、回归校准曲线的精密度检验

精密度是指使用待定的分析程序，在授控条件下重复分析测定均一样品所获得测定值之间的一致性程度。

回归曲线的精密度检验：

既线性检验。

对于以4-6个浓度单位所获得的测量信号值绘制的校准曲线，分光光度法一般要求其相关系数∣r∣≥0.9990,否则应找出原因并加以纠正，重新绘制合格的校准曲线。

根据数理统计知识，若两变量呈线性关系，则关系的密切程度可用相关系数r测定。

其数学表达式为：

y=a+bx

2、回归校准曲线的截距检验