选修实验真题汇总.docx
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选修实验真题汇总
选修真题汇总
1.(2015.10)科研人员拟将已知的花色基因(目的基因)转人矮牵牛的核基因组中,培育新花色的矮牵牛。
请回答:
(1)为了获得大量的目的基因,将其与含有抗生素抗性基因的质粒DNA形成重组DNA,再与经(A.氯化钙B.氯化钠C.蔗糖D.葡萄糖)处理的大肠杆菌液混合,使重组DNA进人大肠杆菌。
用的玻璃刮刀将稀释后的大肠杆菌液接种到含有抗生素的固体培养基上,经培养形成,再进行鉴定和扩大培养。
(2)从扩大培养的大肠杆菌中提取含有目的基因的DNA,用分别切割含目的基因的DNA和农杆菌的Ti质粒,然后用DNA连接酶连接,形成重组DNA并导入农杆菌。
(3)取田间矮牵牛的幼嫩叶片,经自来水冲洗,先用70%浸泡,再用5%次氯酸钠浸泡,最后用清洗,作为转基因的受体材料。
(4)将消毒后的矮牵牛叶片剪成小片,在含有目的基因的农杆菌溶液中浸泡后,取出并转移至加有适当配比生长调节剂的MS培养基(含蔗糖、琼脂和抗生素,下同)上,使叶小叶先脱分化形成。
再将其转移至另一培养基诱导形成芽,芽切割后转移至(A.LB培养基B.MS培养基+适宜浓度NAAC.MS培养基+适宜浓度BAD.NAA/BA小于1的MS培养基)上生根,形成完整植株。
(5)取出试管苗,在适宜的光照、温度和80%以上的等条件下进行炼苗。
提取叶片组织的DNA,采用PCR技术目的基因,鉴定目的基因是否成功导入。
(6)为判断本研究是否达到预期目的,可比较转基因植株和非转基因植株的性状。
2.(2016.4)回答下列
(一)、
(二)小题:
(一)请回答与“果汁中的果胶和果胶酶”实验有关的问题:
(1)果胶是细胞壁的重要组成成分,其化学本质是_______________(A.蛋白质B.脂质C.核酸D.多糖)。
它在细胞壁形成过程中的主要作用是将相邻的细胞在一起。
(2)制取果汁时,先用果胶酶将果胶分解成________________和半乳糖醛酸甲酯等物质,再用_______酶处理,可得到比较澄清的果汁。
用适量且浓度适宜的上述两种酶处理时,果汁的出汁率、澄清度与酶的_______________高低成正相关。
(3)由于果胶不溶于乙醇,故可用乙醇对果胶粗提物(经酶处理后的混合物)进行_______处理,从而得到干制品。
(二)兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶,拟利用基因工程技术将基因E转让入矮牵牛中,以提高矮牵牛对甲醛的代谢能力,请回答:
(1)从兔肝细胞中提取mRNA,在_______酶的作用下形成互补DNA,然后以此DNA为模板扩增得到基因E。
在相关酶的作用下,将基因E与Ti质粒连接在一起,形成______________,再导入用氯化钙处理的______________,侵染矮牵牛叶片。
将被侵染的叶片除菌后进行培养,最终得到转基因矮牵牛。
其中培养过程正确的是_______(A.叶片在含合适浓度生长素的培养基上分化形成愈伤组织B.愈伤组织在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽C.再生的芽在细胞分裂素含量高的培养基上生根D.愈伤组织在含合适浓度植物生长调节剂的培养基上脱分化形成再生植株)。
(2)取转基因矮牵牛叶片,放入含MS液体培养基和适量浓度甲醛且密封的试管中,将试管置于_______________上,进行液体悬浮培养。
一段时间后测定培养基中甲醛的含量,以判断基因E是否在转基因矮牵牛中正常表达。
培养过程中液体培养基的作用:
一是提供营养;二是_______________________________,从而使叶片保持正常形态。
3.(2016.10)回答下列
(一)
(二)小题
(一)请回答从土壤中分离产脲酶细菌和脲酶固定化实验的有关问题
(1)LB固体培养基:
取适量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl,加入一定量的蒸馏水溶解,再加,灭菌备用。
(2)尿素固体培养基:
先将适宜浓度的尿素溶液用灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤,因为G6玻璃砂漏斗,故用于过滤细菌。
然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中,备用。
(3)取适量含产脲酶细菌的10-4、10-5两种土壤稀释液,分别涂布接种到LB固体培养基和尿素固体培养基上,培养48h,推测固体培养基上生长的菌落数最少的是(A.10-5稀释液+尿素固体培养基B.10-5稀释液+LB固体培养基C.10-4稀释液+尿素固体培养基D.10-4稀释液+LB固体培养基)。
在尿素固体培养基上产脲酶细菌菌落周围出现,其原因是细菌产生的脲酶催化尿素分解产生所致。
(4)制备固定化脲酶时,用石英砂吸附脲酶,装柱。
再用蒸馏水洗涤固定化酶柱,其作用是。
(二)某小组欲进行烟草原生质体分离与培养的研究。
请回答:
(1)原生质体的分离:
在无菌条件下,取烟草无菌苗的叶片,放入含有0.5mol/L甘露醇(维持较高渗透压)的混合液处理,经过离心纯化后获得原生质体。
(2)原生质体的培养:
将原生质体进行培养,重新长出细胞壁,形成胚性细胞。
此时,应该培养基中甘露醇浓度,以利于胚性细胞继续培养形成细胞团,然后经两条途径形成再生植株。
途径一:
细胞团经球形胚、和胚状体,最后发育成植株。
途径二:
细胞团增殖为愈伤组织,然后在发芽培养基上诱导出芽,切割芽经过生根后形成完整植株。
上述发芽培养基中含量相对较高的激素是,胚性细胞的主要特点是:
。
(A.液泡小、细胞核小B.液泡大,细胞核大C.液泡大,细胞核小D.液泡小、细胞核大)
(3)为了对烟草的某些性状进行改良,分离的到两种烟草的原生质体后,通过方法将他们的遗传物质组合在一起,经培养获得具有新性状的再生植株。
提取再生植株的DNA,采用扩增相关基因,来鉴定遗传物质是否成功重组。
4.(2017.4)回答下列
(一)、
(二)小题:
(一)回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题:
(1)制作泡菜时,为缩短发酵周期,腌制前可加入乳酸菌。
取少量酸奶,用无菌蒸馏水稀释后,再用蘸取少量的稀释液,在MRS乳酸菌专用培养基的平板上划线,以获得乳酸菌单菌落。
下图所示的划线分离操作,正确的是。
(2)泡菜腌制过程中,会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐,其中醇类是由_______进行厌氧呼吸产生。
亚硝酸盐对人体有害,为测定泡菜中亚硝酸盐含量,从泡菜中提取亚硝酸盐,与_______发生重氮化反应,再与N-1-萘基乙二胺偶联,形成紫红色产物。
然后用光程为1cm的_______,在550nm光波下测定光密度值,与由已知浓度梯度亚硝酸钠制作的_______比对,计算样品中亚硝酸盐的含量。
(3)已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。
在一定的腌制时间内,随着腌制时间的延长,泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低,是由于在厌氧和_______环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。
(二)回答与生态工程有关的问题:
(1)对农作物秸秆多途径利用的基本过程示意图如下,贯穿全过程的核心技术是________技术。
其中“过腹还田”的具体途径是________。
将秸秆和动物粪便等通过微生物发酵产生沼气,这是利用了农业生态工程中的________技术。
(2)农业生产上,畜牧业依赖和受制于种植业,可以通过种植业和畜牧业的________技术提高经济和社会效益。
“退耕还林”后,林地的增加可以减少________,更有利于受损生态系统的恢复。
使用农药能有效控制农业害虫,但也使生态系统的________减少,因此利用生物的________进行生物防治是今后的发展方向。
5.(2017.11)回答下列
(一)、
(二)小题
(一)回答与酿酒和制醋有关的问题:
(1)为了获得优良的酿酒红曲霉菌株,将原菌株的孢子诱变处理后制成较稀浓度的单孢子悬液,这样做的目的是在培养时有利于获得_________。
(2)大米经蒸煮、红曲霉菌糖化后,用某念旧酵母进行酒精发酵,发酵完毕后得到新鲜红曲酒,酒中乙醇浓度不超过15%。
其主要原因是当发酵液中的乙醇浓度接近15%时,__________(A.乙醇氧化逐渐增强直至平衡B.葡萄糖分解逐渐增强直至平衡C.乙醇氧化逐渐减弱直至停止D.葡萄糖分解逐渐减弱直至停止)。
(3)已知葡萄糖与蒽酮试剂反应能产生颜色,采用光电比色法测定红曲酒中的葡萄糖含量的步骤如下:
第一步,标准曲线的制作。
用蒸馏水配置__________,与蒽酮试剂反应后,用比色计测定,并制作以__________________的标准曲线。
第二步,样品处理。
将待测酒样品通过活性炭脱色,其目的是__________________。
第三步,样品测定与计算。
(4)影响红曲酒风味的主要因素,除了温度、pH、氧气等环境因素外,还有__________________________________________(答出2点即可)。
(5)在红曲醋生产工艺中,将适量的红曲酒、水、醋化醋杆菌等混合。
再添加一定量谷壳糠等制成松散的发酵料,其目的是__________________________,以利于醋酸发酵。
(二)回答与植物克隆和动物克隆有关的问题:
(1)利用植物愈伤组织获得再生植株主要有两条途径:
一是由愈伤组织的细胞先分化产生芽和根后再形成一个完整植株的__________途径,二是由愈伤组织细胞产生胚状体后再萌发形成完整植株的胚胎发生途径。
另外也可不通过愈伤组织阶段而直接采用腋芽带的茎段培养成丛状苗,再诱导生根获得再生植株,其原因是腋芽中存在__________。
(2)利用植物克隆培育新品种,一方面可利用带有目的基因的__________侵染植株,或将目的基因通过__________方法导入植物细胞、组织、器官获得转基因植株,另一方面利用异源植株的__________进行融合产生杂种植株,或利用异源植物在试管内进行__________,对其产生的胚进行培养产生杂种植株。
(3)下列属于植物克隆和动物克隆共有培养方法是()
A.悬浮培养、器官培养B.贴壁培养、传代培养
C.器官培养、愈伤组织培养D.原生质体培养、传代培养
实验真题汇总
1.(2015.10)欲进行小鼠肝细胞在不同浓度NaCI溶液中发生体积和数量变化的实验,请根据以下提供的实验材料与用具,提出实验思路,预测实验结果并进行分析。
材料与用具:
小鼠肝细胞悬液(用质量分数为0.9%NaCI溶液配制)、质量分数为1.3%NaCI溶液、蒸馏水、试管若干支、血细胞计数板、显微镜(具有测距功能)等。
(要求与说明:
对NaCI溶液的具体稀释过程、细胞计数的具体操作过程不作要求。
不考虑细胞体积变化对计数的影响。
绘制曲线时的细胞体积指细胞的平均体积。
)请回答:
(1)实验思路:
①
(2)预测实验结果(在以下坐标系中,绘制细胞体积和细胞数量变化示意曲线):
(3)分析与讨论:
①当NaCI溶液浓度大于0.9%时,细胞体积与数量发生的变化及其原因是什么?
②基于上述实验,怎样才能用肝细胞分离得到纯度较高的细胞膜?
2.(2016.4)为研究某生物制剂(W)具有促进细菌B增殖的作用,请根据以下提供的实验材料,以细胞数变化为检测指标,提出实验思路,并预测实验结果。
实验材料:
培养瓶若干个、液体培养基、W、细菌B、细细胞计数板、显微镜等。
(要求与说明:
不考虑加入W后体积变化等因素;细胞计数的具体操作过程不作要求;培养过程中不更换培养液;培养液成分变化不利于细菌B生长不作要求;实验条件适宜)
请回答:
(1)实验思路:
①
……
(2)预测实验结果(设计一个坐标,,用柱形图表示至少3次的检测结果):
(3)分析与讨论
①培养过程中,细菌B的增长方式为_______形增长。
②为提取细菌B内的酶,对该菌进行破碎时,应将其_______。
A.置于蒸馏水中B.用纤维素酶水解
C.置于稀盐酸中D.冷冻研磨
3.(2016.10)设水稻细胞与染色剂甲反应呈红色,小麦细胞与染色剂乙反应呈黄色,大麦细胞与染色剂丙反应呈绿色。
现有A、B、C三瓶不同的细胞悬液,每瓶中可能含有一种或多种上述细胞。
欲用染色剂甲、乙、丙鉴别这三瓶细胞悬液中有几种细胞。
请根据以下提供的实验材料,提出实验思路,预测实验结果和结论。
材料与用具:
染色剂甲、乙、丙溶液各1瓶,A、B、C细胞悬液各1瓶,试管若干支,显微镜。
(要求与说明:
一种染色剂只与一种细胞产生反应;每支试管中只能加一种染色剂;装片的具体制作过程不做要求;实验条件适宜)
请回答:
(1)实验思路(其中实验分组用表格形式表示):
①
···
(2)预测实验结果与结论:
4.(2017.4)欲研究药物乙对海拉细胞增殖的抑制作用,请根据以下提供的材料与用具,以海拉细胞的细胞数变化为测定指标,完善实验分组设计和实验思路,预测实验结果并进行分析与讨论。
材料与用具:
海拉细胞悬液,药物甲溶液(对细胞增殖有影响),药物乙溶液,培养液,培养瓶,血细胞计数板,显微镜等。
(要求与说明:
细胞计数的具体操作过程不做要求,不考虑加入溶液对体积的影响,实验条件适宜)
回答下列问题:
(1)实验分组设计:
A组:
海拉细胞悬液+培养液。
B组:
海拉细胞悬液+培养液+药物甲溶液。
C组:
海拉细胞悬液+培养液+药物甲溶液,培养一段时间后,加入________。
(2)完善实验思路:
①
(3)预测实验结果(以坐标曲线图形式表示实验结果,并标出加入药物的时间点):
(4)分析与讨论:
药物甲的作用是________。
5.(2017.11)为了研究海拉细胞的细胞增殖,以总细胞数和细胞分裂指数(细胞群体中分裂细胞所占的百分比)为测定指标,完善实验思路,预测实验结果并进行分析与讨论(要求:
细胞培养至培养液中营养物质不足。
实验思路涉及的主要用具须写出,但具体操作过程不做要求。
实验条件适宜)
回答下列问题
(1)完善实验思路:
①将己知细胞密度的海拉细胞悬液,用移液管加入到各个含细胞培养液的培养瓶中,然后置于CO2培养箱中培养。
②__________________________________________
③对所得数据进行统计与处理
(2)预测实验结果(以坐标曲线图形表示实验结果):
(3)分析与讨论
①细胞计数时,见到压在方格线上的细胞如何计数?
②若要得到大量的G1期细胞,可采用的方法__________________,原因是__________________。
③若为了检测某种药物对该细胞的增殖有促进作用,可在培养液中加入同位素标记的物质是__________,原因是__________。
选修、实验题答案
32.(14分)
(1)A灭菌涂布菌落
(2)限制性核酸内切酶
(3)酒精无菌水(4)愈伤组织B(5)湿度扩增(6)花色
33.(10分)
(1)①取试管若干支,将质量分数为1.3%NaCl溶液由高到低进行浓度梯度稀释。
②向各支试管中分别加入肝细胞悬液,放置一定时间。
③取各试管中的肝细胞悬液,分别滴加到血细胞计数板上,在显微镜下计数并测量细胞直径,记录实验结果。
④对实验数据进行统计分析。
(3)①NaC1溶液浓度大于0.9%时,细胞体积变小,原因是细胞失水皱缩。
细胞数量不变,原因是细胞仍完整。
②将肝细胞置于蒸馏水中,细胞吸水胀破,然后进行离心等处理,从而得到纯度较高的细胞膜。
32.(14分,选择空每空2分,其余每空1分)
(一)
(1)D粘合
(2)半乳糖醛酸果胶甲酯活性(3)脱水(沉淀)
(二)
(1)逆转录重组DNA分子农杆菌B
(2)摇床维持渗透压
33.(10分)
(1)①取细菌B,经稀释后得到菌液,在显微镜下用血细胞计数板进行计数,并记录。
(1分)
②取菌液分别接种于以下两组培养瓶中,每组若干瓶。
甲组:
液体培液基(0.5分)
乙组:
液体培养基+W(0.5分)
③将上述两组样品培养一段时间后,分别取上述两组中的培养瓶内的菌液,在显微镜下用血细胞计数板分别进行计数,并记录。
(1分)
④每隔一段时间重复③。
(1分)
⑤对实验数据进行分析与处理。
(1分)
(2)
生物制剂W对细菌B增殖的影响
评分细则:
本小题共3分,其中坐标系与轴名称各0.5分,图例0.5分,3组柱各0.5分(其他合理答案也给分)
(3)①S(1分)②D(1分)
32.(14分)
(一)
(1)琼脂
(2)高压蒸汽孔径小,细菌不能滤过
(3)A红色环氨(或NH3)(4)除去游离的脲酶
(二)
(1)纤维素酶和果胶酶
(2)降低心形胚细胞分裂素D(3)原生质体融合PCR
33.【加试题】(10分)
(1)实验思路
①取试管9只,进行编号。
②实验分组:
表:
不同染色剂鉴别不同细胞悬液的实验分组
染色剂甲
染色剂乙
染色剂丙
细胞悬液A
1.A+甲
2.A+乙
3.A+丙
细胞悬液B
4.B+甲
5.B+乙
6.B+丙
细胞悬液C
7.C+甲
8.C+乙
9.C+丙
③按上述分组,在各试管中分别加入等量细胞悬液和染色剂溶液,摇匀。
④一段时间后,制作装片,显微镜下观察各试管中细胞的颜色,并记录。
(2)预测实验结果与结论
①若某瓶细胞悬液的分组试管中只有一支显色,则说明该瓶有一种细胞。
②若某瓶细胞悬液的分组试管中只有两支显色,则说明该瓶有两种细胞。
③若某瓶细胞悬液的分组试管中三支均显色,则说明该瓶有三种细胞。
32.(14分)
㈠⑴单菌落⑵D⑶一系列浓度的葡萄糖标准溶液葡萄糖浓度与光密度值关系排除原有颜色的干扰⑷不同的菌株、不同的原料⑸增加通气性
㈡⑴器官发生分生组织⑵农杆菌显微注射原生质体受精⑶A
33.(10分)⑴②每隔一段时间,用血细胞计数板在显微镜下计数并记录,同时制作临时装片,在显微镜下观察与计数分裂相细胞并记录
⑵
⑶①只计左线和上线上的细胞
②减少培养液中的营养物质成分
由于原料缺少使细胞合成有关物质如RNA和蛋白质等受阻,而停滞于G1期
③胸腺嘧啶脱氧核苷
胸腺嘧啶脱氧核苷是DNA合成的原料,其进入细胞的量可反映细胞的增殖情况
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