免疫学检验技术教学大纲章.docx

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免疫学检验技术教学大纲章

《免疫学检验技术》教学大纲

课程编码：

；总学时（实践学时）：

72（22）；学分：

4.5；

授课学期：

4；

一、课程简介

《免疫学检验技术》是医学检验技术专业依据高职医学检验技术专业人才培养目标要求，基于职业岗位群职业能力分析需要所设计的一门专业核心课程。

授课对象为三年制专科层次学生，通过本课程的学习，使学生掌握并运用医学免疫检验中常用的技术，掌握对检测数据的处理、临床结果及临床意义进行合理判断分析，能及时、准确地对疾病的诊断、治疗和预防提供科学依据。

其前导课程为生物化学及检验技术、体液检验技术、血液分析技术等，后续课程为细菌检验技术、病毒检验技术。

二、课程目标

1．专业能力

具有免疫检验技术基本知识，掌握免疫检验中常用的技术，能够对临床结果及临床意义进行合理判断分析，能及时、准确地对疾病的诊断、治疗和预防提供科学依据；具有正确使用常用的检验仪器以及一般的维修能力。

2．社会能力

具有良好的心理素质、规范的职业行为和较好的人际沟通能力；具有刻苦学习的态度和严谨求实的工作作风，培养良好的敬业精神和职业道德；具有良好的团队合作能力、环境适应能力和自我发展能力；具有一定的就业能力和创业能力。

3．方法能力

具有自主学习、获取新知识、新技能的能力；具有必备的外语应用能力；具有评判性思维能力和提出问题、分析问题与解决问题的基本能力；具有信息的收集及处理能力。

三、学习内容

第一章免疫学的基本内容

（一）学习目标

1．掌握免疫应答的类型和特征，T细胞亚群及其主要功能。

2．熟悉免疫学检验，中枢免疫器官、外周免疫器官，B细胞和大颗粒细胞。

3．了解免疫学发展简史，淋巴细胞再循环，免疫器官、免疫细胞和免疫分子的关系。

（二）学习内容

1．免疫学和免疫学检验概况：

免疫应答的类型和特征、免疫学发展简史及免疫学检验。

2．免疫器官：

中枢免疫器官和外周免疫器官。

3．免疫细胞：

淋巴细胞、免疫辅佐细胞及其他具有免疫活性的细胞。

4．免疫分子。

第二章免疫化学

（一）学习目标

1．掌握抗原的概念和性能，抗原的异物性和理化特性，抗原决定簇，根据诱导的免疫应答分类、根据抗原与宿主的亲缘关系分类，抗体与免疫球蛋白的概念，免疫球蛋白的基本结构，五类免疫球蛋白的特性和功能，抗原抗体反应的特异性、比例性、可逆性，凝集反应概念，直接凝集试验的概念、玻片凝集试验、试管凝集试验，间接凝集反应，沉淀反应概念和类型，单向琼脂扩散试验，免疫电泳技术的概念、对流免疫电泳和火箭免疫电泳的原理及操作，补体和补体系统的概念，补体系统的理化性质，经典激活途径，补体的生物学作用，血清总补体溶血活性测定原理和方法。

2．熟悉抗原免疫原性的其它影响因素，共同抗原和交叉反应，免疫球蛋白的功能区，免疫球蛋白的酶解片段，抗体的生物学活性，抗原抗体结合力、抗原抗体亲和力和亲合力，影响抗原抗体反应的反应物自身因素及环境条件，抗原抗体反应的基本类型，絮状沉淀试验，环状沉淀试验，双向琼脂扩散试验，补体系统的组成和命名，旁路激活途径，补体结合试验的原理。

3．了解抗原的其它分类方法，免疫球蛋白的抗原特异性，免疫球蛋白的基因表达，亲水胶体转化为疏水胶体，免疫电泳和免疫固定电泳，甘露聚糖结合凝集素激活途径，补体激活的共同末端效应,补体激活的调控，C4溶血活性测定，补体单一成分检测。

（二）学习内容

1．抗原的性质：

异物性、理化性质和其他因素（宿主反应性和免疫方法）。

2．抗原的特异性：

抗原决定簇、共同抗原和交叉反应。

3．抗原的分类：

根据抗原特异性的分类、根据抗原诱导的免疫应答分类、根据抗原与机体的亲缘关系分类及其他分类方法。

4．免疫球蛋白的结构：

免疫球蛋白的基本结构、功能区及基因表达。

5．免疫球蛋白的抗原特异性：

同种型、同种异型及独特型。

6．抗体的生物学活性：

IgV区的功能、IgC区的功能。

7．五类免疫球蛋白的特性和功能。

8．抗原抗体反应的基本原理：

抗原抗体结合力、抗原抗体的亲和力和亲合力、亲水胶体转化为疏水胶体。

9．抗原抗体反应的特点：

特异性、可逆性、比例性和阶段性。

10．抗原抗体反应的影响因素：

反应物自身因素、环境条件和温度。

11．抗原抗体反应的类型：

凝集反应（直接凝集反应和间接凝集反应）、沉淀反应（液相内沉淀反应、凝胶内沉淀反应和凝胶免疫电泳技术）。

12．概述：

补体、补体系统、补体系统的组成和命名、补体的理化性质。

13．补体系统的激活：

经典激活途径、MBL激活途径、旁路激活途径及补体激活的调控。

14．补体的生物学作用：

溶解细胞作用、调理作用、清除免疫复合物作用、炎症介质作用和免疫调节作用。

15．补体的测定方法和临床意义：

溶血试验、补体结合试验和补体的单一成分检测。

实验一肥达反应

（一）学习目标

1．掌握肥达反应的原理。

2．熟悉肥达反应的操作方法，观察试验的结果。

（二）学习内容

肥达反应

实验二凝集反应

（一）学习目标

1．掌握凝集试验的原理。

2．熟悉凝集试验的操作方法，观察凝集的试验结果。

（二）学习内容

1．抗链球菌溶血素“O”试验。

2．RF测定

3．妊娠试验

实验三免疫扩散试验

（一）学习目标

1．掌握免疫扩散试验的原理。

2．熟悉免疫扩散试验的操作方法，观察试验结果。

（二）学习内容

免疫扩散试验

第三章免疫分子

（一）学习目标

1．掌握主要组织相容性复合体的概念，HLA－Ⅰ类分子和HLA－Ⅱ类分子的分布和功能，黏附分子的概念、共同特点及主要生物学作用，细胞因子概念、分类和共同特点。

2．熟悉HLA－Ⅰ类分子和HLA－Ⅱ类分子的结构，HLA的主要生物学作用及医学意义，免疫膜分子的概念和分类，白细胞分化抗原的概念，细胞因子的主要生物学作用。

3．了解HLA复合体的基因组成，白细胞分化抗原的种类和黏附分子的种类，细胞因子的医学意义。

（二）学习内容

1．人类主要组织相容性复合体：

HLA－Ⅰ类分子、HLA－Ⅱ类分子和HLA－

分子。

2．人类主要组织相容性抗原的结构和功能。

3．人类白细胞抗原的主要生物学作用及医学意义。

4．免疫膜分子：

概念和分类。

5．白细胞分化抗原：

概念及种类。

6．黏附分子：

分类、共同特点及主要生物学作用。

7．细胞因子的概念和分类。

8．细胞因子的共同特性。

9．细胞因子简介：

白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子、集落刺激因子、趋化性细胞因子及转化生子因子β。

10．细胞因子的主要生物学作用：

免疫调节作用、免疫效应作用、刺激造血功能、参与炎症反应及其他作用。

11．细胞因子的医学意义：

细胞因子及其受体的缺陷、细胞因子表达过高、可溶性细胞因子受体水平升高及细胞因子在疾病防治中的应用。

第四章免疫应答

（一）学习目标

1．掌握免疫应答的概念、分类和基本过程，抗原的加工、处理和提呈过程，T细胞应答的效应，抗体产生的一般规律及其效应，超敏反应的概念与分型，Ⅰ型超敏反应发生机制、临床常见疾病。

2．熟悉细胞免疫的过程，TD抗原介导的体液免疫应答过程，免疫耐受的概念，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型超敏反应及其发生机制、临床常见疾病。

3．了解TI抗原介导的体液免疫应答过程，免疫耐受形成的条件和发生的机制。

（二）学习内容

1．免疫应答的概念和分类。

2．免疫应答的基本过程：

感应阶段、反应阶段和效应阶段。

3．抗原的加工、处理和提呈过程。

4．T细胞介导的细胞免疫应答：

细胞免疫的过程及生物学效应。

5．B细胞介导的体液免疫应答：

TD抗原介导的体液免疫应答过程、TI抗原介导的体液免疫应答过程及抗体产生的一般规律。

6．免疫耐受的概念。

7．免疫耐受形成的条件：

抗原因素、机体因素。

8．免疫耐受发生的机制：

中枢免疫耐受和外周免疫耐受。

9．超敏反应的概念及分型。

10．Ⅰ型超敏反应：

概念、发生机制、临床常见疾病及防治原则。

11．Ⅱ型超敏反应：

概念、发生机制及临床常见疾病。

12．Ⅲ型超敏反应：

概念、发生机制及临床常见疾病。

13．Ⅳ型超敏反应：

概念、发生机制及临床常见疾病。

第五章抗体的制备技术

（一）学习目标

1．掌握佐剂的概念，免疫方案的确定，单克隆抗体的概念和特点。

2．熟悉常用佐剂的种类和制备、佐剂的应用原则，动物釆血法，单克隆抗体的应用，基因工程抗体的应用。

3.了解细胞性抗原制备、可溶性抗原制备及鉴定、人工免疫原的制备，选择免疫动物及饲养、免疫血清的分离及保存，抗体的纯化和鉴定，杂交瘤技术的基本原理、制备单克隆抗体的技术要点，基因工程抗体的优点和种类。

（二）学习内容

1．免疫原的制备：

颗粒性免疫原的制备、可溶性抗原的制备、半抗原免疫原的制备及免疫佐剂。

2．抗血清的制备：

用于免疫的动物、免疫剂量、途径和时间、动物采血法、抗血清的鉴定和保存、抗血清中抗体的纯化。

3．单克隆抗体的制备：

单克隆抗体技术的基本原理、制备单克隆抗体的基本方法及单克隆抗体在医学中的应用。

4．基因工程抗体：

人源化抗体、小分子抗体、特殊基因工程抗体及完全人源化抗体。

第六章免疫比浊分析

（一）学习目标

1．掌握免疫比浊分析的主要影响因素及临床应用。

2．熟悉免疫比浊分析的种类及原理。

（二）学习内容

1．免疫比浊技术原理：

透射免疫比浊法、散射免疫比浊法、速率散射免疫比浊法及免疫胶乳比浊法。

2．自动化免疫比浊分析：

主流免疫比浊仪器概况、免疫比浊分析的主要影响因素及临床应用。

实验四免疫球蛋白的测定

（一）学习目标

1．掌握免疫球蛋白测定的原理。

2．熟悉免疫球蛋白测定的操作方法，免疫球蛋白测定的结果判断。

（二）学习内容

1．IgG的测定

2．IgA的测定

3．IgM的测定

第七章酶免疫分析技术

（一）学习目标

1．掌握酶免疫技术的基本原理，酶联免疫吸附试验的基本原理和技术类型、常用ELISA方法操作及临床应用。

2．熟悉酶免疫技术类型、技术要点和方法评价。

3．了解酶标记物的制备，其他酶标记免疫技术。

（二）学习内容

1．酶免疫技术的原理及类型。

2．概述：

酶和酶底物、酶标抗体（抗原）的制备、固相载体和酶标比色仪。

3．酶联免疫吸附试验：

基本原理、技术类型、最适工作浓度的选择、酶联免疫吸附试验的应用和注意事项。

4．其他酶标记免疫测定技术：

均相酶免疫测定、非均相液相酶免疫测定、固相膜免疫测定、生物素-亲和素标记技术在ELISA中的应用。

实验五HBsAg、抗HBs、HBeAg的测定

（一）学习目标

1．掌握双抗体（原）夹心法的测定原理。

2．熟悉操作方法及结果判断。

（二）学习内容

1．HBsAg的测定。

2．抗HBs的测定。

3．HBeAg的测定。

实验六抗HBe、抗HBc的测定

（一）学习目标

1．掌握竞争法的测定原理。

2．熟悉操作方法及结果判断。

（二）学习内容

1．抗HBe的测定。

2．抗HBc的测定。

第八章荧光免疫技术

（一）学习目标

1．掌握荧光免疫技术的基本原理、类型，荧光免疫显微技术的基本原理、技术类型、临床应用，荧光免疫测定技术。

2．熟悉免疫芯片技术。

3．了解荧光的基本知识，荧光标记物的制备，荧光免疫显微镜，共聚焦显微镜技术。

（二）学习内容

1．荧光免疫技术的基本原理及类型。

2．概述：

荧光的基本知识、荧光抗体的制备。

3．荧光免疫显微技术：

标本的制作、荧光抗体染色的技术类型、荧光显微镜检查。

4．共聚焦显微镜技术：

工作原理、技术及其特点、临床应用。

5．荧光免疫测定技术：

荧光偏振免疫测定、时间分辨荧光免疫测定。

6．免疫芯片技术：

检测原理、关键技术及分类。

第九章其他标记免疫分析技术

（一）学习目标

1．掌握放射免疫分析及免疫放射分析的基本原理及临床应用，斑点金免疫渗滤试验及免疫层析试验的基本原理及临床应用，电化学发光免疫测定技术。

2．熟悉发光酶免疫测定，化学发光免疫测定。

3．了解胶体金的一般特性，发光基本知识。

（二）学习内容

1．放射免疫技术：

放射免疫分析方法、免疫放射分析方法、IRMA和RIA的比较及放射免疫分析技术的应用。

2．金标记免疫分析技术：

胶体金的一般特性、斑点金免疫渗滤试验、斑点金免疫层析试验、临床应用及评价。

3．发光免疫分析技术：

发光基本知识、化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析、电化学发光免疫分析。

实验七金免疫测定技术

（一）学习目标

1．掌握金免疫测定技术的原理。

2．熟悉金免疫测定技术的操作方法，观察金免疫测定试验的结果。

（二）学习内容

1．尿HCG的测定。

2．HbsAg的测定。

第十章免疫细胞的分离和功能检测

（一）学习目标

1．掌握外周血单个核细胞分离的原理和操作，T细胞数量检测，T细胞功能检测的原理及操作，中性粒细胞功能检测的原理及操作。

2．熟悉白细胞的分离，巨噬细胞功能检测。

3．了解淋巴细胞的纯化与亚群分离，吞噬细胞的分离，B细胞数量检测，B细胞功能检测、NK细胞活性测定。

（二）学习内容

1．吞噬细胞的分离及功能检测：

吞噬细胞的分离、相关功能检测。

2．外周血单个核细胞的分离和纯化：

Ficoll分离法、Percoll分层液法。

3．淋巴细胞及其亚群的分离：

淋巴细胞的纯化、淋巴细胞亚群的分离及相关功能检测。

实验八中性粒细胞吞噬实验

（一）学习目标

熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。

（二）学习内容

中性粒细胞吞噬试验。

实验九外周血单个核细胞分离

（一）学习目标

掌握外周血单个核细胞分离的原理和操作。

（二）学习内容

外周血单个核细胞的分离。

第十一章流式细胞术

（一）学习目标

1．掌握流式免疫荧光技术的应用。

2．熟悉流式细胞仪的检测分析。

3．了解流式细胞术的原理、流式细胞仪的技术要点。

（二）学习内容

1．流式细胞术的原理：

细胞分析原理、细胞分选原理、流式细胞术的特点及流式细胞术定量分析的注意事项。

2．流式细胞仪的技术要点：

FCM单细胞标本的制备、FCM样品的荧光染色及FCM常见荧光染料的种类和特性。

3．流式细胞仪的检测分析：

单参数直方图、双参数直方图及多维数据的显示。

4．流式免疫荧光技术的应用：

淋巴细胞亚群分析、白血病免疫表型分析、细胞凋亡分析及其他应用。

第十二章免疫学检验的质量保证

（一）学习目标

1．掌握质量保证的有关概念、免疫学实验常用评价指标。

2．熟悉基本概念、定量、半定量和定性实验。

3．了解标准品、检测试剂的批间差异、检测试剂的稳定性。

（二）学习内容

1．免疫检验质量控制的概念：

基本概念、质量保证的有关概念。

2．免疫检验质量控制的特殊性：

标准品、定量、半定量和定性实验、检测试剂的批间差异、检测试剂的稳定性。

3．免疫学实验常用评价指标：

诊断灵敏度、特异度和正确诊断指数、Cutoff值。

第十三章感染性疾病的免疫学检验

（一）学习目标

1．掌握固有免疫、固有免疫和适应免疫的区别、人工主动免疫和人工被动免疫的区别、抗体、抗原检测的应用评价。

2．熟悉病原体感染的特点。

3．了解计划免疫。

（二）学习内容

1．固有免疫：

固有免疫的屏障结构、效应细胞、效应分子、应答机制及生物学意义。

2．人工抗感染免疫：

人工主动免疫、人工被动免疫、计划免疫及疫苗接种效果监测。

3．有关检测抗体的感染诊断试验：

不同病原体感染抗体产生的特点、检测抗体诊断感染的应用评价。

4．有关检测抗原的感染诊断试验：

不同微生物感染标本中的抗原特点、检测抗原诊断感染的应用评价。

第十四章超敏反应性疾病的免疫学检验

（一）学习目标

1．掌握皮肤试验的概念、判断标准及临床意义，PEG比浊法检测循环免疫复合物，抗球蛋白试验。

2．熟悉支气管激发试验，IgE的测定，循环免疫复合物的其他检测方法。

3．了解药物过敏筛选实验。

（二）学习内容

1．激发试验：

皮肤试验、支气管激发试验、食物激发试验及其他方法。

2．IgE的检测：

IgE的测定、特异性IgE的测定。

3．免疫复合物检测：

抗原非特异性CIC检测技术、CIC检测方法评价及应用、沉积于组织中的IC测定。

4．抗球蛋白试验：

直接抗球蛋白试验、间接抗球蛋白试验。

5．药物过敏筛选实验：

组胺含量测定、特异性的抗体测定。

第十五章自身免疫性疾病的免疫学检验

（一）学习目标

1．掌握自身免疫病的概念和基本特征，抗核抗体和类风湿因子的组成，临床意义及测定方法。

2．熟悉自身免疫病的分类，自身免疫病的发病机制，自身抗体的检测实验选择的原则。

（二）学习内容

1．概述：

自身免疫病与风湿性疾病、自身免疫病的共同特征、分类及发病机制。

2．自身免疫性疾病的免疫学检查：

抗核抗体测定、类风湿因子测定、其他自身抗体测定。

3．自身抗体的检测实验选择的原则：

自身抗体检测的一般原则、实验室方法的选择及结果的确认。

实验十自身抗体的测定

（一）学习目标

1．掌握抗核抗体、类风湿因子测定的原理。

2．熟悉操作方法，观察试验结果。

（二）实验内容

1．抗核抗体的测定。

2．类风湿因子的测定。

第十六章肿瘤标志物检验

（一）学习目标

1．掌握肿瘤抗原的概念，常见肿瘤标志物的临床意义。

2．熟悉单克隆免疫球蛋白增殖病的免疫学检验，肿瘤标志物的检测和联合应用。

（二）学习内容

1．概述：

肿瘤抗原、肿瘤标志物。

2．常见肿瘤标志物：

胚胎抗原类肿瘤标志物、糖链抗原类肿瘤标志物、酶类肿瘤标志物、激素类肿瘤标志物、蛋白质类肿瘤标志物及其他常用的肿瘤标志物。

3．单克隆免疫球蛋白增殖病的免疫学检测：

血清蛋白区带电泳、血清免疫球蛋白定量、免疫固定电泳及其他相关的检测。

4．肿瘤标志物的检测和联合应用：

肿瘤标志物的检测技术及肿瘤标志物的联合应用。

实验十一CEA的测定

（一）学习目标

1．掌握CEA测定的原理。

2．熟悉CEA测定的操作方法，观察实验结果。

（二）学习内容

CEA的测定。

第十七章器官移植及其免疫检测

（一）学习目标

1．掌握移植类型和移植排斥反应的类型。

2．熟悉组织配型及配型方法。

3．了解避免排斥反应的免疫学检验及意义，移植后的免疫监测，移植的结局及对策。

（二）学习内容

1．有关移植的主要概念：

供体、受体、自体移植、同系移植、同种移植及异种移植。

2．移植排斥反应的类型和机制：

超急性排斥反应、急性排斥反应、慢性排斥反应及移植物抗宿主反应。

3．组织配型及配型方法：

HLA分型、红细胞血型抗原、交叉配型。

4．避免排斥反应的免疫学检验及意义：

HLA抗原配型、其他组织相容性抗原配型、新的组织配型策略及受者体内抗HLA抗体筛选。

5．移植后的免疫监测：

淋巴细胞亚群的百分比和功能测定、杀伤细胞活性测定、免疫分子水平测定。

6．移植的结局及对策：

免疫抑制剂的使用、移植免疫学面临的主要问题和解决方案设想。

学时分配表

序

号

理论部分

实验部分

合计

教学内容

学时数

实验内容

学时数

1

第一章免疫学的基本内容

2

2

2

第二章免疫化学

8

实验一肥达反应

2

14

实验二凝集试验

2

实验三免疫扩散试验

2

3

第三章免疫分子

4

4

4

第四章免疫应答

4

4

5

第五章抗体的制备技术

4

4

6

第六章免疫比浊分析

1

实验四免疫球蛋白的测定

2

3

7

第七章酶免疫分析技术

3

实验五HBsAg、抗HBs、HBeAg的测定

2

7

实验六抗HBe、抗HBc的测定

2

8

第八章荧光免疫技术

2

2

9

第九章其他标记免疫分析技术

2

实验七金免疫技术的测定

2

4

10

第十章免疫细胞的分离和功能检测

4

实验八中性粒细胞吞噬试验

2

8

实验九外周血单个核细胞的分离

2

11

期中测试

2

2

12

第十一章流式细胞术

1

1

13

第十二章免疫学检验的质量保证

1

1

14

第十三章感染性疾病的免疫学检验

2

2

15

第十四章超敏反应性疾病的免疫学检验

2

2

16

第十五章自身免疫性疾病的免疫学检验

2

实验十自身抗体的测定

2

4

17

第十六章肿瘤标志物检验

2

实验十一CEA的测定

2

4

18

第十七章器官移植及其免疫检测

2

2

19

复习

2

2

合计

50

22

72

五、考核方式建议

本门课程为考试课。

考核成绩中期末成绩占总成绩的50%，平时成绩占总成绩的20%，实验成绩占总成绩30%。