实验十从自然界中分离筛选优良微生物菌种.docx

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实验十从自然界中分离筛选优良微生物菌种

实验十---从自然界中分离筛选优良微生物菌种

实验十从自然界中分离筛选优良微生物菌种

一．实验目的

学会用倾注（涂布）法从甜酒曲中分离纯化优良根霉糖化菌株。

二．实验原理

甜酒药中的米根霉是优良的糖化菌种，有时也见华根霉。

本实验采用平板涂布法从甜酒曲中分离纯化优良的根霉糖化菌株，为制备纯种甜酒曲提供优良的菌种。

三．实验材料及用具

材料安琪甜酒曲、马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）、牛肉膏蛋白胨培养基（PCA）、孟加拉红培养基、生理盐水

用具涂布器、酒精灯、具塞试管、移液枪

四．实验流程

取样→10倍梯度稀释→0.1mL涂布PDA平板、PCA平板、孟加拉红平板（倾注2板）→28℃恒温培养3d观察结果

①在电子天平上取2.0g安琪酒曲;

②将酒曲倒入盛有8mL无菌生理盐水的具塞试管中，震荡均匀，制得10-1稀释液，然后用移液枪移取1mL10-1稀释液于另一管盛有9ml无菌生理盐水的试管中，制得10-2稀释液，同理依次制得10-3、10-4、10-5稀释液；

③用移液枪分别移取各稀释度菌液0.1ml,注入已经冷却的PDA平

PDA:

现象：

在三个连续梯度的平板中，10-1、10-3中均有菌落生长，其中10-1中有大量菌落，10-3中菌落较少，而10-2平板中却几乎没有可见菌落。

分析：

接种过程中，10-2平板可能未冷却至46℃，以致温度过高将菌液中的微生物全部烫死。

孟加拉红培养基：

注意事项：

①操作过程中应严格遵守无菌操作；

②注意在接种前一定要待培养基完全冷却，以免菌种被烫死；

③培养时将平板倒置，以免冷凝水滴入培养基内，冲散菌落。