高二生物人教版选修一专题二知识点总结测试无答案.docx

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高二生物人教版选修一专题二知识点总结测试无答案

选修一《生物技术实践》知识点（填空式）

专题二微生物的培养与应用

课题1微生物的实验室培养

1.法国科学家巴斯德研究发现导致葡萄糖酒变酸、变味的根源在于发酵物中____________。

若要对某种微生物加以研究和应用，首先要获得该微生物的_________________，而获得纯净培养物的关键是。

可见，________________________________________是研究和应用微生物的前提。

在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供合适的，另一方面需要确保_________________________________。

2.培养基是指按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质。

培养

基一般都含有、、、四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对、以及的要求。

例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加；培养霉菌时需要将培养基的PH调至；培养细菌时需要将培养基的PH调至或；培养厌氧微生物时需要提供的条件。

根据培养基的物理性质可将培养基可以分为______、________和。

液体培养基与固体培养基的差别在于前者____________，半固体培养基与固体培养基的差别在于前者所含的凝固剂____________，状态介于液态和固态之间，呈半固体状态。

实验室最常用的固体培养基之一是__________，微生物在这种培养基的表面生长，可以形成肉眼可见的_________。

3．配制固体培养基时，用作凝固剂的有______（在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常规培养条件下呈现固态）、明胶、硅胶等。

物理性质不同的培养基具有不同作用，________培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面；_______培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业的大规模培养；_____________培养基可用于观察细菌的运动、鉴定菌种等方面。

用液体培养基培养微生物的过程中，震荡培养基的目的有：

增加培养液中的含量；使培养的微生物与培养液均匀且充分接触，提高微生物对的利用率。

4．消毒是指，（杀死/不杀死）芽孢和孢子，常用的消毒方法______________、_____________和______________；灭菌是指____________________________________________________________，（杀死/不杀死）

芽孢和孢子，常用的灭菌方法______________、_____________和______________。

5．日常生活中常用的消毒方法是，此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用

、等，实验室常用的消毒方法有消毒法（如，牛奶的消毒）、消毒

法、消毒法和消毒法。

实验室常用的灭菌方法有灭菌、灭

菌（温度，时间）、灭菌（压力、温度，时间）。

接种针、接种环、涂布器、试管口和瓶口等用灭菌；玻璃器皿用灭菌；培养基用______

灭菌。

对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和，将用于微生物培养的器

皿、接种用具和培养基等进行。

接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可以用______

，以杀死物体表面或空气中的微生物。

为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应

在_________________附近进行。

6．牛肉膏蛋白胨培养基中的牛肉膏提供的主要营养：

，蛋白胨提

供的主要营养：

____________________________________。

制备牛肉膏蛋白胨固体平板培养基的方法步骤：

→→→_______→。

“灭菌”与“调pH”应先，待培养基冷却至℃左右时，在附近倒平板。

平板冷凝后，将平板倒置的原因是

_________。

（1）根据牛肉膏蛋白胨培养基的配方（100mL培养基：

牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g琼脂

20.0g），称取的牛肉膏（连同称量纸）放入烧杯，加少量水并加热，待牛肉膏熔化后，取出称量纸，

加入称好的蛋白胨和氯化钠，用玻棒搅拌使其溶解，再加入______，加热使其熔化，最后补加________

至100mL。

加入琼脂后，需用玻棒不断搅拌，以防止________糊底而导致烧杯破裂。

（2）倒平板前需对培养基和培养皿进行_______处理：

将配制好培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包

上牛皮纸，用皮筋勒紧，放入_______________，在压力为_______kPa，温度为_______℃条件下灭菌

_______分钟；将5～8套培养皿用几层旧报纸包好放入__________内，在__________℃下灭菌2h。

（3）为了防止杂菌污染平板培养基，倒平板操作应在_________________进行，除此之外，防止污染

杂菌的措施还有：

①将锥形瓶中的培养基倒入培养皿前，让锥形瓶口通过_____________；②倒培养

基时，控制打开培养皿的缝隙_______（稍大于/远大于/小于）锥形瓶口，倒完后立即盖上培养皿盖；

③平板冷凝后，将平板_________放置。

④_________（使用/不使用）倒平板的过程中培养基溅到皿

盖与皿底之间的平板，等等。

（4）倒平板操作的有关问题分析：

①培养基灭菌后，为什么要冷却到50℃左右时才倒平板？

如何估计培养基的温度？

因为50℃左右时的培养基呈_________，便于倒平板，且盛有该温度培养基的锥形瓶________（不会/不会）烫手。

用手触摸盛有培养基的锥形瓶可以__________（大致估计/准确确定）培养基的温度，感觉锥形瓶的温度下降到_______________时，培养基的温度大约在50℃左右。

②将锥形瓶中的培养基倒入培养皿前，为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？

因为培养基冷却过程中，锥形瓶口可能有_________附着，通过酒精灯灼烧灭菌，可防止_______

_______________________。

③为什么不使用倒平板的过程中培养基溅到皿盖与皿底之间的平板？

因为_______________可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，会导致______________。

7．分离纯化微生物的接种方法中最常用的是和。

平板划线法是指____。

平板划线法接种的工具是，接种操作要求：

在操作的第一步以及每次划线之前都要接种环，在划线操作结束时，仍然需要接种环；在灼烧接种环之后，要等其后再进行划线（以免接种环温度太高，杀死菌种），在作第二次以及其后的划线操作时，都要从上一次划线的开始划线，原因：

；稀释涂布平板法指_______。

在

足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成_________，从而能在培养基表面形成单个

的。

稀释涂布平板法使用的涂布工具是。

菌落是指________________________

。

8.将接种大肠杆菌的培养基和一个未接种的培养基都放入中培养，如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长，说明培养基的制备是________（成功/失败）的，如果培养基上有菌落生长，说明________________，需要重新制备；若未接种的培养基无菌落生长，接种了大肠杆菌的培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作________（符合/不符合）要求；若及时并细致观察，可以观察到培养12h与24h的大肠杆菌菌落的大小_________（明显不同/大致相同），并能观察到培养24h的菌落比培养12h的菌落颜色_______、光泽___________。

9．菌种的保藏方法：

（1）临时保藏的方法：

将菌种接种到试管的上，在合适的温度下培养，长成后，放入冰箱中保藏。

该保藏方法的缺点是：

①每3～6个月，需_______________________

____________；②保存时间；③菌种容易被或产生_________。

（2）长期保存方法：

法，将需要长期保藏的菌种（1mL培养的菌液）与甘油（1mL

灭菌的甘油）充分混匀后放在℃冷冻箱中保存。

10.无菌技术意义：

①______________________________________；②______________________

_______________________________。

11．微生物培养所用材料或器具需要用不同方法进行消毒或灭菌：

玻璃器皿（培养皿、玻棒、试管、烧瓶和吸管等）和金属用具能够_______、又需要保持______的物品，采用_____________法灭菌，所用灭菌器械是______________；培养微生物的培养基、无菌水因残留水分_____（会/不会）对培养基浓度或无菌水造成影响，采用___________灭菌，所用灭菌器械是______________；接种工具（接种环、接种针、涂布器或其它金属用具等）、接种过程中的试管口、瓶口等容易被污染的部位采用_________灭菌；实验操作者的双手擦拭________加以_______。

饮用水的水源通常用氯气进行______

________。

12．平板划线操作的讨论

（1）为什么在操作的第一步以及每次划线之前和划线操作结束时都要灼烧接种环？

操作的第一步灼烧接种环是为了避免________________________________；每次划线前灼烧接种环是为了杀死_________________________________________，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于____________________，从而通过________次数的增加，使每次划线时菌种的数目_______

_______，以便得到由___________繁殖而来的_________。

划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染_______和感染____________。

（2）在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？

灼烧接种环之后待其冷却后再划线以免接种环__________________________。

（3）在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？

每次划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处________，从上一次划线的_________开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步________，最终能得到由___________繁殖而来的________。

（4）烧红的接种环在酒精灯火焰附近冷却，用手触摸，感觉接种环刚刚不烫手再沾取菌液，避免温度太高杀死菌种。

这种说法对吗？

为什么？

__________________________________________

（5）划线时最后一区能不能与第一区相连？

______________

（6）为什么划线用力大小要适当？

_______________________________________

13．平板划线操作中采取了那些措施防止杂菌污染？

①沾取菌液前，先将接种环放在_________________上灼烧，直到烧红，然后在_________冷却；

②盛菌种的试管打开棉塞后，将试管口通过_______，用接种环沾取菌液后，将试管口通过____，再塞上棉塞；

③在平板上划线时，培养皿盖只打开一条_______，划线后立即盖上皿盖；

④划线后的平板______置放入培养箱培养。

14．系列稀释操作的有关问题：

①将培养的菌液稀释101～106倍，从稀释105的稀释液中取0.1mL，经显微镜直接计数，统计结果为175个，则该菌液的密度为___________个/mL

②进行系列稀释操作时，6支盛有9mL水的试管经_____________灭菌，按101～106的顺序编号，刻度移液管经_________法灭菌，吸取菌液前，用手指轻压移液管上的像皮头，吹吸三次，使菌液中的细菌________，然后吸取培养的菌液1mL，注入编“101”的试管中，吹吸三次，使菌液与水________，再依次从101～105的试管中吸取稀释液1mL，注入_________试管中，完成系列稀释操作；

③为了避免空气中的杂菌污染稀释液，系列稀释操作必需在离酒精灯火焰________cm处进行，因为酒精灯火焰周围存在________区，减少了污染杂菌的机会。

1～2

15.涂布平板操作步骤：

取0.1mL菌液滴加到_________（固体/液体）培养基表面→涂布器灭菌、冷却→涂布

16．涂布平板操作的有关问题：

（1）如何对涂布器进行灭菌？

在烧杯中盛一定量________，将涂布器浸在其中，取出涂布器在__________上引燃，让涂布器上沾有的__________燃尽，在________________________冷却8～10s。

（2）取菌液滴加到培养基表面应如何进行无菌操作？

①带橡皮头的刻度移液管经______________灭菌，并在火焰附近1～2cm处_________；

②盛菌液的试管打开棉塞后，试管口经____________后再取菌液，取出菌液后，试管口经___

__________后再塞上棉塞；

③平板培养基放在_____________附近，距离要合适，整个涂布操作均在____________进行；

④滴加菌液时，只将皿盖打开一条__________（略大于/略小于）移液管直径的__________；

⑤带橡皮头的刻度移液管用过之后及时_________处理。

（3）为了使菌液在平板培养基上分布均匀，涂布时该如何操作？

转动_________，用灭菌后的__________将菌液均匀地涂布在平板培养基表面。

17微生物的实验室培养有关问题：

（1）食品保存有哪些方法？

这些保存方法如何阻止或抑制微生物生长？

食品保存的方法有：

____________、_____________和____________等方法。

由于微生物的生长需要_________、_____________和______________等，干燥保存的食品缺乏微生物的生长所需的__________；真空保存的食品缺乏微生物的生长所需的_________；冷藏食品使微生物生长没有适宜的__________。

（2）无土栽培、植物组织培养和微生物培养技术在设计思路和具体操作上有何异同？

相同之处：

这三种技术都需要为培养物提供______________。

不同之处：

无土栽培技术的操作

__________（需要/不需要）保证无菌的条件，而其他两种技术都要求严格的__________条件。

（3）巴斯德设计的鹅颈瓶实验有力地驳斥了“自然发生论”证明了微生物只能由微生物产生，不能从没有生命的物质自然产生。

鹅颈瓶实验的原理是什么？

该实验对微生物学的进步、微生物学的研究方法及食品保存产生那些影响？

巴斯德设计的鹅颈瓶实验利用____________原理，自变量是连接鹅颈管的烧瓶______（有/没有）空气中的微生物进入肉汤，敞口烧瓶______（有/没有）无空气中的微生物进入肉汤，而连接鹅颈管的烧瓶与敞口烧瓶都有新鲜空气进入肉汤，这是________变量，结果是连接鹅颈管的烧瓶中的肉汤比敞口烧瓶的肉汤保持不腐败变质的时间更________（长/短），由此得出“微生物只能由微生物产生，不能从没有生命的物质自然产生”的结论。

正是由于鹅颈瓶实验证明了微生物不是自发产生的，____________才可能发展成为一门独立的学科；微生物学研究才有_____________作为实验材料；实验中用到的_____________的方法导致了有效的灭菌方法的出现，而这一原理也适用于食品的保存等。

课题二微生物的分离与计数

1．尿素是一种重要的氮肥，农作物不能直接吸收利用，尿素只有通过酶的催化作用分解成之后，才能被植物吸收利用。

土壤中存在能分解尿素的细菌，这种细菌能合成____

。

筛选尿素分解菌的选择培养基以作为惟一氮源，按物理性质归类为__________培养基。

尿素分解产生的_______会使培养基的碱性增强，PH_________，在培养基中加入指示剂，培养土壤中的细菌后，如果pH升高，指示剂将变，通过检测培养基变化来判断尿素分解反应是否发生,据此判断某种该细菌能不能分解尿素。

2.实验室中筛选微生物应用的原理是人为提供有利于生长的条件（包括_______、

、等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到中去寻找。

3.选择培养基是指允许____________微生物生长，同时_____其他种类微生物生长的培

养基。

利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来，广泛用于菌种的________。

鉴别培养基是指在培养基中加入某种_________（试剂或化学药品），使目的菌的无色代谢产物发生显色反应，用肉眼就能辨别目的菌菌落的培养基，用于_________不同类型的微生物。

4.“微生物的天然培养基”指的是，同其他生物环境相比，土壤中微生物数量、

种类。

土壤微生物主要分布在土壤的_______，因为这里富含__________，土壤微生物中数量最多（约70～90%）的是________，它适宜在距地表cm的近中性潮湿土壤层中生长，取样时要铲去_________。

5．测定微生物数量的常用方法有和，常用来统计样品中活菌数目的方法是。

即当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的。

通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数，计数公式：

_____________________________________________。

利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是恰当的。

由于土壤中各种微生物的数量不同，分离不同的微生物需采用不同的________，这将直接影响平板上生长的菌落数目，为了保证获得菌落数在的平板。

细菌稀释度为，放线菌稀释度为，真菌稀释度为。

为获得不同类型的微生物，还应当有针对性地提供选择培养的条件。

另外，细菌数目还可以通过来测定，将一定体积的水过滤后，将_____放在___________培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现_____色，可以根据培养基上大肠杆菌菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。

6．一般来说，统计的菌落数往往比活菌的实际数目。

这是因为_________

。

因此，统计结果一般用而不是活菌数来表示。

7．A、B两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数106的培养基中，A同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230，由于该同学______________________，因此结果不具有说服力；B同学在该浓度下涂布了三个平板，统计的菌落数分别为21、212和256，设置了重复组，_________能不能将该同学的3个平板的计数值用来求平均值,为什么？

____________

________________________________________。

8．对照实验是指除了的条件以外，其他条件都相同的实验。

设置对照实验的主要目的

是排除对实验结果的影响，提高实验结果的_______度，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。

9．某实验小组同学用稀释涂布平板法筛选土壤样品中的尿素分解菌，甲同学在对应稀释倍数106的培养基中筛选出150个菌落，其它同学用相同土样在同样稀释度下只筛选出大约50个菌落，为了确定甲同学培养基是否受到污染，设置空白对照的方法是_____________________________________，

若对照培养基______________，说明培养基没有受到污染，造成差异的原因可能是________________

_______________________________等环节错误。

10．为了确定筛选尿素分解菌的选择培养基是否具有筛选作用，对照实验的设置方法是将相同稀释度的土壤溶液分别接种到__________培养基和__________培养基上，在____________条件性培养一段时间，若前者的____________明显大于后者的数目，说明选择培养基已筛选出一些菌落。

11．判断样品的稀释操作是否成功的依据：

如果得到了_____________菌落数目在___________之间的平板，则说明稀释操作比较成功，若各平板的菌落数______________，即可进行菌落的计数。

如果重复组的结果相差太远，则应分析产生差异的原因，重新进行实验。

12．对菌种进行分类可以根据菌落特征，菌落的特征包括有、、及________等。

13．从土壤中筛选尿素分解菌的实验设计包括对，所需的、________、_______

和，具体的___________以及时间安排等的综合考虑和安排。

实验流程：

―→

―→

―→

―→

（1）取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要________。

（2）称取土样配制土壤溶液及土壤溶液的稀释，每一部都要在______________操作。

（3）不同种类的微生物，往往需要不同的培养和培养。

在实验过程中，一般每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止_____

___。

测定每克样品中的菌株数时，为了减少误差，统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好统计______个平板的菌落数，取平均值，按照“每克样品中的菌株数=________________________________”进行计数，结构用__________（菌落/菌株）数表示。

（4）在进行多组实验过程中，应注意做好标记，其目的是。

（5）对所需的微生物进行初步筛选，只是分离纯化菌种的第一步，要对分离的菌种进行一步的鉴定，还需要借助的方法。

（6）使用后的培养基丢弃前一定要进行处理，以免污染环境。

14.牛、山羊等反刍动物的瘤胃中生活着多种厌氧微生物．其中也包括分解尿素的微生物。

为了分离出高效的尿素分解菌，科学家从牛瘤胃中获取内容物，经过选择培养后，接种在鉴别培养基上初筛分离得到5个菌株，观察结果如下．

菌株编号

1

2

3

4

5

红色圈直径R

0.4

1.1

2.0

2.1

0.55

菌株直径r

0.3

0.6

0.8

0.9

0.3

R/r

1.3

1.8

2.5

2.3

1.8

回答下列问题；

（1）培养该尿素分解菌，除了需要适宜的温度、pH外，还需要在_______环境中进行。

（2）将选择培养后的菌种接种在经_____________法灭菌的鉴别培养基上．培养基成分中的尿素被尿素分解菌分解产生的氨使pH升高，________变红色，该培养基属于_________（填“液体”或“固体”）培养基。

（3）据表分析，最可能具有较高产脲酶的能力且酶活性也较高的菌株是_______号菌株，理由是____

________________________。

为确定此结论可继续进行实验，对脲酶分解尿素后所产生的__________

_____进行定量测定

15．据某微生物培养基的配方表回答下列问题

编号

①

②

③

④

⑤

成分

（NH4）2SO4

KH2PO4

FeSO4

CaCl2

H2O

含量

0