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第一章蛋白质化学
一.填空题(每题2分)
1.已知蛋白质的二级结构的基本组成方式有()、()和()和()。
2.因为()、()和()三种氨基酸残基侧链基团在紫外区有光吸收能力,所以在()nm波长的紫外光吸收常被用来定性或定量检测蛋白质。
3.带电氨基酸有()氨基酸和()氨基酸两类,其中前者包括()、()。
4.当氨基酸溶液的pH=pI时,氨基酸以()离子形式存在,所带净电荷为();当pH>pI时,氨基酸以()离子形式存在;当氨基酸溶液的pH<pI时,氨基酸以()离子形式存在。
5.氨基酸具有两性解离特性,因此它既可以被()滴定,又可以被()滴定。
丙氨酸的pK(α-COOH)=2.34,pK(α-NH3+)=9.69,其pI=(),在pH=7时,在电场中向()极方向移动。
6.蛋白质中存在()种氨基酸,除了()氨基酸外,其余氨基酸的α-碳原子上都有一个自由的()基和一个自由的()基。
7.α-螺旋中相邻螺圈之间形成链内氢键,氢键的取向几乎与()平行。
氢键是由每个氨基酸的()与前面隔三个氨基酸的()形成的,它允许所有的()都能参与氢键的形成。
8.稳定蛋白质胶体状态的因素是蛋白质分子上的()及()。
应用蛋白质胶体性质,分离蛋白质的方法有()、()等。
9.加入低浓度的中性盐可使蛋白质的溶解度(),这种现象称();而加入高浓度的中性盐,当达到一定的盐饱和度时,可使蛋白质的溶解度(),这种现象称()。
10.维持蛋白质一级结构的化学键有()和()。
维持二级结构主要靠(),维持三级结构的作用力除了以上几种外还需要()、疏水作用力和范德华力等。
11.由于体内的含氮物质以()为主,大多数蛋白质中氮的含量较恒定,平均为()%,这是()法的理论基础。
如测得1g样品含氮量为10mg,则蛋白质的含量是()%。
12.精氨酸的pK(α-COOH)=2.17,pK(α-NH3+)=9.04,pK(R基)=12.48,其pI值为(),将其溶于pH=7的缓冲液中,此时精氨酸pI()环境pH,则精氨酸带上()电荷,如置于电场中,应向电场的()极移动。
13.在20种氨基酸中,碱性氨基酸有精氨酸、()和(),具有羟基的氨基酸是()和()。
14.氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧反应生成()色化合物,而()与茚三酮反应不释放()而生成()化合物。
15.用电泳方法分离蛋白质的原理,是在一定的pH值条件下,不同蛋白质的()、()和()不同,而在电场中移动的()和速率不同,从而使蛋白质得到分离。
16.现有甲、乙、丙、丁四种蛋白质,它们的等电点分别为8.0,4.5,6.8以及10.0,当在pH=8.0缓冲液中,它们在电场中电泳的方向为:
甲(),乙(),丙(),丁()。
17.谷氨酸的pK1(α-COOH)=2.19,pK2(α-NH3+)=9.67,pKR(R基)=4.25,其pI值为(),将其溶于pH=7的缓冲液中,此时谷氨酸pI()环境pH,则谷氨酸带上()电荷,如置于电场中,应向电场的()极移动。
18.蛋白质变性主要是因为破坏了维持和稳定空间构象的各种()键,但不改变蛋白质的(),使天然蛋白质原有的()和()性质发生改变。
19.蛋白质为两性电解质,大多数在酸性溶液中带()电荷,在碱性溶液中带()电荷,当蛋白质的净电荷为(),此时溶液的pH值为()。
20.蛋白质中相邻的()组合在一起,形成有规则的、在空间上能辨认的二级结构组合体称为蛋白质的超二级结构。
超二级结构的基本组合方式有()()()。
21.氨基酸分子上α-碳原子上的()基团的()及()、()等对α-螺旋的形成和稳定有影响。
22.α-螺旋和β-折叠结构属于蛋白质的()级结构,稳定其结构的作用力是()。
若某肽链的相对分子质量为22000(氨基酸的平均分子量为110),则全为α-螺旋时肽链的长度为()nm,全为β-折叠时肽链的长度为()nm。
23.肌红蛋白的氧解离曲线为(),血红蛋白的氧解离曲线为(),说明血红蛋白第一个亚基与O2结合可()第二个亚基与O2结合,这种现象被称为()效应。
二.选择题(每题1分)
1.茚三酮与脯氨酸发生反应时,在滤纸层析谱上呈现()色斑点。
A.蓝紫B.红C.黄D.绿
2.下列关于蛋白质叙述()是正确的?
A.通常蛋白质的溶解度在等电点时最大
B.大多数蛋白质在饱和硫酸铵中溶解度最大
C.蛋白质分子的净电荷为零时的pH是它的等电点
D.以上各项全不正确
3.盐析法沉淀蛋白质的原理是()。
A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷,破坏水膜
C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液pH到等电点
4.蛋白质的基本组成单位是()
A.肽平面B.核苷酸C.肽D.氨基酸
5.蛋白质的一级结构指的是()
A.蛋白质的α-螺旋B.蛋白质分子的无规则卷曲
C.蛋白质分子内氨基酸以肽键相连接D.蛋白质分子内氨基酸的排列顺序
6.维持蛋白质二级结构的主要作用力是()
A.氢键B.二硫键C.疏水键D.离子键
7.关于蛋白质中β-折叠的叙述,下列()是正确的?
A.β-折叠中氢键与肽链的长轴平行B.氢键只在不同肽链之间形成
C.β-折叠中多肽链几乎完全伸展D.β-折叠又称β-转角
8.具有四级结构的蛋白质的特征是()
A.分子中必有辅基B.含有两条或两条以上的多肽链
C.每条多肽链都具有独立的生物学活性D.依赖肽键维系蛋白质分子的稳定
9.关于蛋白质亚基的下列描述中,()是正确的。
A.一条多肽链卷曲成螺旋结构B.两条以上多肽链卷曲成二级结构
C.两条以上多肽链与辅基结合成蛋白质D.每个亚基都有各自的三级结构
10.下列对于蛋白质变性的描述()是正确的。
A.蛋白质变性后溶解度增加B.蛋白质变性后不易被蛋白酶水解
C.蛋白质变性后理化性质不变D.蛋白质变性后丧失原有的生物活性
11.下列()不影响蛋白质α-螺旋的形成?
A.碱性氨基酸相近排列B.酸性氨基酸相近排列
C.脯氨酸的存在D.丙氨酸的存在
12.谷氨酸pK1(α-COOH)=2.19,pK2(α-NH3+)=9.67,pKR(R基)=4.25,环境如果pH=10时,谷氨酸的主要存在形式是()。
A.Glu2-B.Glu+、Glu2-C.Glu±D.Glu+
13.赖氨酸的pK(α-COOH)=2.18,pK(α-NH3+)=8.95,pK(R基)=10.53,其pI为()。
A.9.74B.5.57C.10.53D.8.95
14.关于蛋白质构象的下列描述,其中正确的是()
A.指手性碳原子上某一原子或基团的方位
B.指几何异构体中顺式或是反式
C.指多肽链中一切原子(基团)绕α-碳原子旋转,盘曲而产生的空间排布
D.指原子或基团改变涉及共价键的生成或断开
15.中性溶液中,下列显碱性的氨基酸是()
A.组氨酸B.谷氨酸C.天冬氨酸D.苏氨酸
16.下列()不是蛋白质的性质之一。
A.处于等电状态时溶解度最小B.加入少量中性盐溶解度增加
C.变性蛋白质的溶解度增加D.有紫外吸收特性
17.下列()不是蛋白质α-螺旋结构的特点。
A.天然蛋白质多为右手螺旋B.肽链平面充分伸展
C.每隔3.6个氨基酸螺旋上升一圈D.每个氨基酸残基上升高度为0.15nm
18.现有A、B、C、D四种蛋白质的混合液,等电点分别为5.0;8.6;6.8;9.2,在pH=8.6的条件下用电泳分离,四种蛋白质电泳区带自正极开始的排列顺序是()。
A.ACBDB.ABCDC.DBCAD.CBAD
19.下列因素有利于蛋白质二级结构(α-螺旋)形成的因素是()。
A.氢键B.带同种电荷的侧基集中
C.Pro出现D.Gly多次出现
20.蛋白质分子构象的结构单元是()。
A.肽平面B.肽键C.氨基酸残基D.二硫键
21.蛋白质变性不包括()。
A.氢键断裂B.肽键断裂C.疏水键断裂D.盐键断裂
22.蛋白质一级结构与功能关系的特点是()。
A.相同氨基酸组成的蛋白质,功能一定相同
B.一级结构相近的蛋白质,其功能类似性越大
C.一级结构中任何氨基酸的改变,其生理活性即消失
D.不同生物来源的同种蛋白质,其一级结构相同
23.血清中的清蛋白pI=4.9、血红蛋白的pI=6.8,它们的混合物在pH()的缓冲液中进行电泳,分离效果最好?
A.(4.9+6.8)÷2=5.85B.<4.9C.>6.8D.=4.9
24.下列关于蛋白质L-氨基酸之间的大多数肽键的论述()是不正确的?
A.肽键具有部分双键的特性
B.肽键比正常的碳—氮单键短
C.构成肽键的两个氨基酸残基的α-碳为反式构型
D.肽键完全可以自由旋转
25.在寡聚蛋白质中,亚基间的立体排布、相互作用以及接触部位间的空间结构称为()。
A.三级结构B.缔合现象C.四级结构D.变构现象
26.形成稳定的肽链空间结构,非常重要的一点是肽键中的四个原子以及和它相邻的两个α-碳原子处于()。
A.不断绕动状态B.可以相对自由旋转
C.同一平面D.随不同外界环境而变化的状态
27.凝胶过滤法分离蛋白质时,从层析柱上先被洗脱下来的蛋白质是()。
A.分子量大的B.分子量小的C.带电荷多的D.带电荷少的
28.下列氨基酸()为环状亚氨基酸。
A.GlyB.ProC.TrpD.Tyr
29.氨基酸不具有的化学反应是()。
A.双缩脲反应B.茚三酮反应C.DNFB反应D.PITC反应
30.血红蛋白的α亚基与O2结合后产生变构效应,从而()。
A.促进其他亚基与CO2结合
B.促进其他亚基与O2结合
C.促进α亚基与O2结合,抑制β亚基与O2结合
D.抑制α亚基与O2结合,促进β亚基与O2结合
31.在凝胶过滤(分离范围是5000—400000)中,下列最先被洗脱下来的是()。
A.细胞色素C(13370)B.肌球蛋白(400000)
C.过氧化氢酶(247500)D.血清清蛋白(68500)
32.下列()方法可以用于测定蛋白质的相对分子质量?
A.260/280nm紫外吸收比值B.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
C.凯氏定氮法D.荧光分光光度法
33.下列关于蛋白质的叙述,()是正确的。
A.大多数蛋白质在含有中性盐的溶液中会沉淀析出
B.蛋白质分子的净电荷为零时的pH值是它的等电点
C.由于蛋白质在等电点时溶解度最大,所以沉淀蛋白质时应远离等电点
D.以上各项均不正确
34.关于β-折叠片的描述,下列()是错误的。
A.β-折叠片的肽链处于曲折的伸展状态
B.其结构是借助链内氢键稳定的
C.有的β-折叠片结构是通过几段肽段平行排列而成的
D.氨基酸之间的轴距为0.35nm
三.名词解释(每题2分)
1.等电点2.肽键:
3.肽平面4.蛋白质的一级结构:
5.蛋白质的二级结构:
6.蛋白质的三级结构:
7.蛋白质的四级结构:
8.超二级结构:
9.结构域:
10.蛋白质的变性:
11.蛋白质的复性:
12.二面角:
13.蛋白质的变构效应:
四.问答题(每题7分)
1.举例说明蛋白质的一级结构与功能之间的关系。
2.举例说明蛋白质的空间构象与功能之间的关系。
3.一个含有13个氨基酸残基组成的十三肽的氨基酸组成为:
Ala、Arg、Asp2、Glu2、Gly3、Leu、Val3。
部分水解得到以下肽段,其序列由Edman降解法测定后确定,试推断出该肽链的原始氨基酸序列。
4.实验分析题:
有一蛋白质混合液含有3种蛋白质,他们的相对分子质量和等电点如下,
蛋白质相对分子质量等电点
A200008.5
B210005.9
C50006.0
请设计一个实验来分离这3种蛋白质。
5.有人纯化了一个未知肽,其氨基酸组成为:
Asp1,Ser1,Gly1,Ala1,Met1,Phe1和Lys2,又做了一系列分析,其结果如下:
(1)DNFB与该肽反应再用酸水解得DNP-Ala;
(2)胰凝乳蛋白酶CT消化后,从产物中分离出一个纯四肽,其组成为:
Asp1,Gly1,Lys1,Met1,此四肽的DNFB反应降解产物为DNP-Gly;(3)胰蛋白酶T消化该肽后又可以得到组分分别为Lys1,Ala1,Ser1及Phe1,Lys1,Gly1的两个三肽,以及一个二肽,此二肽被CNBr处理后游离出自由天冬氨酸。
请列出八肽的全顺序并简述推导过程。
6.某天然九肽的组成为:
Gly2,Phe2,Tyr1,Met1,Asp1,Arg1和Pro1,经胰凝乳蛋白酶CT水解后,可得到一个五肽和一个四肽,四肽的组成为:
Phe1,Tyr1,Gly1和Pro1。
此九肽的CNBr处理物经阳离子交换树脂层析并洗脱的一个组成为Arg1,Phe1和Gly1的三肽;此九肽如经胰蛋白酶水解可得Phe,如用DNFB反应后再水解测得DNP-Tyr。
请写出此九肽的全顺序解析过程。
7.Lys、Arg、Asp、Glu、Thr和Ala混合液在pH值为12时,加到阴离子交换树脂上,用连续递减的pH值溶液洗脱时,请预测这些氨基酸的洗脱顺序。
8.
(1)一个Ala、Ser、Phe、Leu、Arg、Asp和His的混合液在pH3.9时进行纸电泳,指出哪些氨基酸向阳极移动,哪些氨基酸向阴极移动?
(2)带相同电荷的氨基酸,如Gly和Leu在纸电泳时常常稍能分开,解释其原因。
(3)假如有一个Ala、Val、Glu、Lys和Thr的混合液,在pH6.0时进行纸电泳,然后用茚三酮显色。
请画出电泳后氨基酸的分布图,分别标明向阳极或阴极移动、停留在原点、分不开的氨基酸的位置。
9.用阳离子交换树脂分离下列氨基酸,用pH7.0的缓冲液来洗脱时,那种氨基酸先被洗脱下来?
(1)Asp和Lys;
(2)Arg和Met;(3)Glu和Val;(4)Gly和Leu;(5)Ser和Ala;
10.用酸水解一种六肽,定量回收得到甘氨酸及另一种氨基酸。
用胰蛋白酶处理该肽生成的产物,在不同的层析和电泳系统中均只有一个单一的斑点,但迁移率与未经处理的六肽不同。
用胰凝乳蛋白酶水解原来的六肽,生成的产物中有一游离氨基酸并有紫外吸收,试从上述实验结果排出该六肽的氨基酸顺序。
11.根据实验结果推断一多肽链的氨基酸顺序:
(1)酸水解和氨基酸组成为Ala2,Arg,Lys2,Met,Phe,Ser2;
(2)羧肽酶A水解得一氨基酸为Ala;(3)胰蛋白酶水解得4个肽段,其氨基酸组成分别是①Ala,Arg,②Lys,Phe,Ser,③Lys,④Ala,Met,Ser;(4)溴化氰水解得两个肽段,其氨基酸组成是①Ala,Arg,Lys2,Met,Phe,Ser;②Ala,Ser;(5)嗜热蛋白酶水解得两个肽段,其氨基酸组成如下①Ala,Arg,Ser;Phe,②Ala,Lys2,Met,Ser。
12.某同学洗衣服,将羊毛衫和丝绸裙子放进热水中清洗后,再放入电干燥器中烘干,结果发现羊毛衫变小了,而丝绸裙子却没有什么变化,请运用生物化学知识解释此现象。
五.计算题(每题5分)
1.已知天冬氨酸的解离常数精氨酸的pK(α-COOH)=2.09,pK(α-NH3+)=9.82,pK(R基)=3.86,其pI值为求天冬氨酸的等电点是多少?
在pH=7的缓冲液中,天冬氨酸带何种电荷?
2.1.0毫克纯酶的氨基酸分析得到58.1微克的亮氨酸(分子量=131.2),36.2微克的色氨酸(分子量=204.2),计算此酶的最小分子量。
3.一个大肠杆菌细胞中含106个蛋白质分子,假设每个蛋白质分子的平均相对分子量为40000,并且所有分子都处于α-螺旋构象,试计算每个大肠杆菌细胞中的蛋白质多肽链的总长度。
(设氨基酸残基的平均相对分子量为118)
4.某蛋白质多肽链有一些区段为α螺旋构象,另一些区段是β折叠构象,该蛋白质相对分子量为240000,多肽外形总长5.06×10-5cm,计算多肽链中α螺旋构象占分子长度的百分之多少?
(设氨基酸残基的平均相对分子量为120)
5.已知牛血清白蛋白含色氨酸0.58%(按质量计),色氨酸的相对分子量为204,
(1)计算最低相对分子质量;
(2)用凝胶过滤测得牛血清白蛋白的相对分子质量大约为70000,问牛血清白蛋白分子中含有几个色氨酸残基?
6.人的头发每年以20cm的速度生长,头发主要是α-角蛋白纤维,是在表皮细胞的里面合成和组装成的“绳子”。
α-角蛋白纤维的基本结构单元是α-螺旋。
如果α-螺旋的生物合成是头发生长的限速因素,请问,α-螺旋链每秒钟合成多少个肽键才能解释头发每年的生长速度。
第二章核酸的结构与功能
一、选择题(每题1分)
1.组成核酸的基本结构单位是()。
A.单核苷酸B.戊糖和脱氧戊糖C.磷酸和戊糖D.含氮碱基
2.下列DNA双链中,Tm值最高的是()。
A.(G+C)﹪=25﹪B.(A+T)﹪=25﹪
C.(G+C)﹪=60﹪D.(A+T)﹪=55﹪
3.G—C含量越高,Tm值越高的原因是()。
A.G—C之间形成了离子键B.G—C之间形成了两个氢键
C.G—C之间形成了一个共价键D.G—C之间形成了三个氢键
4.将脱氧核苷酸彻底水解时产物中含有()。
A.D-α-脱氧核糖、磷酸、含氮碱基(A、G、T、C)B.核糖、磷酸
C.D-核糖、磷酸、含氮碱基(A、G、U、C)D.脱氧核苷和核糖
5.下列关于DNA变性的表述()是正确的。
A.随温度逐渐升高,紫外吸收值逐渐增大
B.Tm值只与DNA分子的大小有关而与构成无关
C.DNA变性从微观考虑是个瞬时过程
D.溶液的构成对DNA分子的Tm值没有影响
6.核苷中核糖与碱基之间的连接键是()。
A.戊糖的C1与嘧啶的N1形成的N-糖苷键
B.戊糖的C6与嘧啶的N2形成的N-糖苷键
C.戊糖的C4与嘧啶的N1形成的N-糖苷键
D.戊糖的C4与嘧啶的N2形成的N-糖苷键
7.下列关于DNA的描述中,()是错误的。
A.在二级结构基础上往往形成超螺旋结构
B.维持二级结构的作用力主要是氢键
C.线粒体中的DNA呈环状
D.提出DNA双螺旋结构的主要依据是chargaff原则和X射线衍射图谱
8.下列DNA碱基组成规律()是错误的?
A.分子中A=C,G=T
B.分子中A+G=C+T
C.同一个体不同组织器官其DNA碱基组成相同
D.年龄、营养状态及环境的改变不影响DNA碱基组成
9.DNA的一级结构是指()。
A.各核苷酸之间的连接键性质及核苷酸的排列顺序
B.核糖与含氮碱基的连接键性质
C.各核苷酸中核苷与磷酸的连接键性质
D.DNA分子由数目庞大的C.A.U.G四种核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键连接而成
10.热变性的DNA分子在适当条件下可以复性,条件之一是()。
A.骤然冷却B.缓慢冷却C.浓缩D.加入浓的无机盐
11.下列关于核酸的描述中,()是错误的?
A.多核苷酸链的3’端为磷酸基团
B.核酸分子具有极性
C.多核苷酸链的5’端为磷酸基团
D.核酸链的书写方向为5’→3’方向,其5’端总是在左边
12.组成DNA的两条核苷酸链是()。
A.反向平行绕同一中心轴构成双螺旋B.交叉扭在一起
C.顺向平行绕同一中心轴构成双螺旋D.均为左手螺旋
13.在适宜条件下,核酸分子两条链通过杂交作用可自行形成双螺旋,这取决于()。
A.DNA的Tm值B.碱基序列的重复程度
C.核酸链的长短D.碱基序列的互补
14.tRNA的分子结构特征是()。
A.有密码环B.有反密码环和3’端有-CCA序列
C.有反密码环和5’端有-CCA序列D.5’端有-CCA序列
15.具5’-CGGTA-3’顺序的单链DNA能与下列()RNA杂交。
A.5’-GCCA-3’B.5’-GCCAU-3’C.5’-UACCG-3D.5’-TACCG-3’
16.真核生物染色质的基本结构单位是()。
A.核小体B.DNAC.染色单体D.核心颗粒
17.RNA和DNA彻底水解后的产物是()。
A.核糖相同,部分碱基不同B.碱基相同,核糖不同
C.部分碱基不同,核糖不同D.碱基不同,核糖相同
18.真核生物细胞中核小体的组成是()。
A.DNA和组蛋白B.DNA和酸性蛋白C.rRNA和组蛋白D.核心颗粒
19.下列关于mRNA描述()是错误的?
A.原核细胞的mRNA在翻译开始前不需要加“polyA”尾巴
B.原核细胞的mRNA在翻译开始前需要加“polyA”尾巴
C.真核细胞的mRNA在5’端有特殊的“帽子”结构
D.真核细胞的mRNA在3’端有特殊的“尾巴”结构
20.核酸溶液的紫外吸收峰在波长()nm处。
A.260B.280C.230D.220
21.核酸的紫外吸收特性来自()。
A.嘌呤、嘧啶、碱基B.戊糖C.磷酸二酯键D.磷酸核糖
22.核酸变性后,可发生()效应。
A.失去对紫外线的吸收能力B.增色
C.最大吸收峰波长发生转移D.减色
23.DNA变性是指()。
A.链间氢键断裂,双螺旋结构解开B.分子中3’-5’磷酸二酯键断裂
C.核苷酸游离于溶液中D.黏度增加,ε(P)值低
24.下面关于Tm值的论述中()是错误的。
A.含G-C多的DNA,其Tm值较低B.不同种属的DNA有其特定的Tm值
C.Tm值与介质中离子强度有关D.介质离子强度低时,DNA的Tm值也低
25.某DNA双螺旋的一条多核苷酸碱基序列为ACCTTAGA,另一条链的碱基顺序为()。
A.TGGAATCTB.AGATTCCAC.TCTAAGGTD.ACCTTAGA
26.下列()为tRNA三级结构的描述。
A.具有倒L型高级结构B.呈三叶草形
C.三个突环好像三片小叶D.双螺旋结构区为三叶草的柄
27.tRNA的氨基酸接受臂的特点是()。
A.3’-端有CCA结构B.5’-端有羟基
C.3’-端有磷酸基D.富含腺嘌呤
28.DNA螺旋结构的特点之一是()。
A.碱基朝向螺旋内侧B.碱基朝向螺旋外侧
C.磷酸核糖基朝向螺旋内侧D.碱基平面与螺旋轴平行
29.关于tRNA下列表述()是错误的?
A.tRNA的二级结构是三叶草型
B.是RNA中含量最多的分子
C.是RNA中稀有碱基最多的
D.tRNA的3’端几乎都有CCA结构
30.DNA样品中G-C含量高时,()。
A.Tm值高B.Tm值低C.不影响Tm值D.Tm值范围宽
31.DNA溶液离子强度高时,()。
A.Tm值高B.Tm值低C.不影响Tm值D.Tm值范围宽
32.DNA样品不均一时,()。
A.Tm值高B.Tm值低C.不影响Tm值D.Tm值范围宽
33.含有稀有碱基比例较多的核酸是()。
A.胞核DNAB.线粒体DNAC.tRNAD.mRNA
34.在DNA双螺旋结构中,碱基配对的规律是()。
A.A=T、G≡CB.A=U、G≡TC.
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