生物学常用染色液汇总.docx
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生物学常用染色液汇总.docx
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生物学常用染色液汇总
常用染料介绍
(一)天然染料
1、苏木精
苏木精是从南美的苏木(热带豆科植物)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一。
苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。
苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。
被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。
常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优良材料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。
2、洋红
洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末,提取出虫红,再用明矾处理,除去其中杂质,就制成洋红。
单纯的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。
常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料,染色的标本不易褪色。
用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。
(二)人工染料
人工染料,即苯胺染料或煤焦油染料,种类很多,应用极广。
它们的缺点是经日光照射容易褪色,苯胺蓝、亮绿、甲基绿等更易褪色。
在制片中注意掌握酸碱度,并避免日光直射,也能经几年不褪色。
1、酸性品红
酸性品红是酸性染料,呈红色粉末状,能容于水,略溶于酒精(0.3%)。
他是良好的细胞制染色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。
他跟甲基绿同染,能显示线粒体。
组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色力。
酸性品红容易跟碱起作用,所以染色过度,易在自来水中褪色。
2、刚果红
刚果红是酸性染料,呈枣红色粉末状,能溶于水喝酒精,遇酸呈蓝色。
他能作染料,也用作指示剂。
他在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。
他用来染细胞质时,能把胶制或纤维素染成红色。
在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。
刚果红可以跟苏木静作二重染色,也可用作类淀粉染色,由于他能溶于水和酒精,所以洗涤和脱水处理要迅速。
3、甲基蓝
甲基蓝是弱酸性染料,能溶于水和酒精。
甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。
他跟伊红合用能染神经细胞,也是细菌制片中不可缺少的染料。
它的水溶液是原生动物的活体染色剂。
甲基蓝极易氧化,因此用他染色后不能长久保存。
4、固绿
固绿是酸性染料,能溶于水(溶解度为4%)和酒精(溶解度为9%)。
固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂,在染细胞和植物组织上应用极广。
他和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。
5、苏丹Ⅲ
苏丹Ⅲ是弱酸性染料,呈红色粉末状,易溶于脂肪和酒精(溶解度为0.15%)。
苏丹Ⅲ是脂肪染色剂。
6、伊红
这类染料种类很多。
常用的伊红Y,是酸性染料,呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状,溶于水(15摄氏度是溶解度达44%)和酒精(溶于无水酒精的溶解度为2%)。
伊红在动物制片中广泛应用,是很好的细胞质染料,常用作苏木精的衬染剂。
7、碱性品(复)红
碱性品红是碱性染料,呈暗红色粉末或结晶状,能溶于水(溶解度1%)和酒精(溶解度8%)。
碱性品红在生物学制片中用途很广,可用来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜复红性颗粒和中枢神经组织的核质。
在生物学制片中用来染维管束植物的木质化壁,又作为原球藻、轮藻的整体染色。
在细菌学制片中,长用来鉴别结核杆菌。
在尔根氏反应中用作组织化学试剂,已核查脱氧核糖核酸。
8、结晶紫
结晶紫是碱性染料,能溶于水(溶解度9%)和酒精(溶解度8.75%)。
结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广,是一种优良的染色剂。
他是细胞核染色常用的,用来显示染色体的中心体,并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。
凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞核不能成功时,用它能得到良好的结果。
用番红和结晶紫作染色体的二重染色,染色体染成红色,纺锤丝染成紫色,所以也是一种显示细胞分裂的优良染色剂。
用结晶紫染纤毛,效果也很好。
用结晶紫染色的切片,缺点是不易长久保存。
9、龙胆紫
龙胆紫是混合的碱性染料,主要是结晶紫和甲基紫的混合物。
在必要是,龙胆紫能跟结晶紫互相替用。
医药上用的紫药水,主要成分是甲基紫,需要时能代替龙胆紫和结晶紫。
10、中性红
中性红是弱碱性染料,呈红色粉末状,能溶于水(溶解度4%)和酒精(溶解度1.8%)。
它的碱性溶液中呈现黄色,在强碱性溶液中呈蓝色,而在弱酸性溶液中呈红色,所以能用作指示剂。
中性红无毒,常做活体染色的染料,用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。
陈久的中性红水溶液,用作显示尼尔体的常用染料。
11、番红
番红是碱性染料,能溶于水和酒精。
番红是细胞学和动植物组织学生常用的染料,能染细胞核、染色体和植物蛋白质,示维管束植物木质化、木栓化和角质化的组织,还能染孢子囊。
12、亚甲蓝或美蓝
亚甲蓝或美蓝是碱性染料,呈蓝色粉末状,能溶于水(溶解度9.5%)和酒精(溶解度6%)。
亚甲蓝是动物学和细胞学染色上十分重要的细胞核染料,其优点是染色不会过深。
13、甲基绿
甲基绿是碱性染料。
它是绿色粉末状,能溶于水(溶解度8%)和酒精(溶解度3%)。
甲基绿是最有价值的细胞和染色剂,细胞学上常用来染染色质,跟酸性品红一起可作植物木质部的染色。
1.碘-硫酸法
植物细胞细胞壁的主要成分是纤维素,纤维素被硫酸水解后,遇碘呈蓝色反应。
因此用碘-硫酸法可鉴定细胞壁的成分。
试剂配制方法:
1%碘液将1.5克碘化钾溶于100毫升的蒸馏水中,待完全溶解后,加入1克碘,震荡溶解。
66.5%硫酸7份浓硫酸加入3份蒸馏水配制而成。
配制时要将浓硫酸慢慢地加入水中,并不断地用玻璃棒搅拌,否则会因急剧发热,而使容器炸裂。
2.苏丹Ⅲ反应
苏丹Ⅲ可将细胞中脂肪、栓质、角质染为桔红色,因此可用此染料显示出上述物质在细胞中的分布和位置。
配制方法:
将苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染料0.1克,溶于10毫升95%酒精中,然后加入10毫升甘油。
3.间苯三酚反应法
间苯三酚反应是植物显微化学中确定木质化细胞壁的最常用和最简单的方法。
这一反应的原理是当间苯三酚在酸性环境下与细胞壁中的木质素相遇时,发生樱桃红色或紫红色反应。
其方法是将要鉴定的切片先用一滴1mol/L盐酸浸透(间苯三酚要在酸性环境下才能与木质素起作用),然后滴一滴5-10%间苯三酚的85%酒精溶液,木质化的细胞壁即发生颜色反应。
4.碘液测试淀粉法
淀粉遇碘呈蓝色反应,它是鉴定淀粉的最常用方法。
碘液配制方法:
将2克碘化钾放入5毫升蒸馏水中,加热使其完全溶解;然后加入1克碘,完全溶解后用蒸馏水稀释至300毫升,放入具有毛玻璃塞的棕色玻璃瓶中,置于暗处保存。
测定淀粉时,可将上述溶液稀释2-10倍,使染色不致过深,效果更好。
5.压片法常用的染料
(1)醋酸洋红为压片法中最常用的染料。
配制方法是:
先将100毫升45%醋酸水溶液放于烧瓶中煮沸,移去火焰,停止加热。
然后缓慢加入1克洋红粉末,全部加入后再煮沸1-2分钟。
此时可将一枚生锈铁钉用棉线悬入溶液中约1分钟后取出(铁为媒染剂)。
静置12小时后经过过滤,放入磨口玻璃塞棕色瓶中保存备用。
(2)石炭酸---品红为近年创用的一种优良核染色剂,将细胞核和染色体染为红紫色,细胞质一般不着色,背景清晰。
其配制方法有二:
配方Ⅰ:
原液A:
取3克碱性品红溶于100毫升的70%酒精中(此液体可长期保存)。
原液B:
取10毫升原液A,加入90毫升5%的石炭酸(酚)水溶液中(可保存两周)。
染色液:
取55毫升原液B加6毫升冰醋酸和6毫升37%甲醛。
此染色液因含有较多的甲醛,可使原生质体硬化,而能保持其固有的形态。
但也因此不易使组织软化,因而不太适用于植物组织的染色体压片染色(本染色液适于植物原生质体培养中使用)。
在此基础上加以改进的配方Ⅱ,则可普遍地用于一般植物组织的染色体压片的染色。
配方Ⅱ:
取配方Ⅰ中的染色液20毫或加80毫升45%醋酸和1.8克山梨醇。
染色液配制后为淡品红色,如立即使用染色较浅。
放置2周后,染色能力显著增强,而且放置时间越久,染色效果越好。
6.铬酸-硝酸离析法
为了观察一个细胞完整的立体形态结构,可以用一些化学药品把细壁中的中层物质(果胶质)溶解,使细胞分离散开,便于观察。
离析前先把材料洗净,用刀切成1-2毫米宽的狭条(如叶片)或切成火柴棍粗细的长约1厘米的小条(如根或茎)。
然后把切好的材料放进小玻璃瓶中,加入离析液(加入量约为材料的20倍),塞紧瓶塞,放于30-40℃温箱中。
浸渍时间因材料性质而异,叶片和幼嫩的根茎组织3-4小时即可,而有些次生结构(如木质部)则需要更长的时间。
离析情况应随时检查,检查的方法是取少许离析材料,放在载玻片上,加一滴水,盖上盖玻片,然后用解剖针尖端轻轻敲打,如果材料分离则表明浸渍时间已够。
浸渍时间超过一天以上时,应更换离
析液一次。
离析时间已够的材料,用水洗净后放入70%酒精中保存。
离析液配方:
10%铬酸1份
10%硝酸1份
两种溶液应在使用时才混合,混合均匀后再使用。
二、常用染色液的配制
1、吕氏(Loeffer)碱性美蓝染液
A液:
美蓝(methyleneblue)
0.06g
95%乙醇
30mL
B液:
KOH
0.01g
蒸馏水
100mL
分别配制A液和B液,配好后混合即可。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液
A液:
碱性复红(basicfuchsin)
0.3g
95%乙醇
10mL
B液:
石炭酸
5.0g
蒸馏水
95mL
配制方法:
将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%乙醇,继续研磨使其溶解,配成A液。
将石炭酸溶于水中,配成B液。
混合A液及B液即成。
通常可将此混合液稀释5~10倍使用,稀释液易变质失效,一次不宜多配。
3、革兰氏(Gram)染色液
(1).草酸铵结晶紫染液
A液:
结晶紫(crystalviolet)
2g
95%乙醇
20mL
B液:
草酸铵(ammoniumoxlate)
0.8g
蒸馏水
80mL
混合A液及B液,静置48h后使用。
(2).卢戈氏(Lugol)碘液
碘片
1g
碘化钾
2g
蒸馏水
300mL
配制方法:
先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液中,待碘全溶后,加足水分既成。
(3).95%的乙醇溶液
(4).番红复染液
番红(safranineO)
2.5g
95%乙醇
100mL
取上述配好的番红乙醇溶液10mL与80mL蒸馏水混匀既成。
4、芽孢染色液
(1).孔雀绿染液
孔雀绿(malachitegreen)
5g
蒸馏水
100mL
(2).番红水溶液
番红
0.5g
蒸馏水
100mL
(3).苯酚品红溶液
碱性品红
11g
无水乙醇
100mL
配制方法:
取上述溶液10mL与100mL5%的苯酚溶液混合,过滤备用。
(4).黑色素(nigrosin)溶液
水溶性黑色素
10g
蒸馏水
100mL
配制方法:
称取10g黑色素溶于100mL蒸馏水中,置沸水浴中30min后,滤纸过滤两次,补充水到100mL,加0.5g甲醛,备用。
5、荚膜染色液
(1).黑色素水溶液
黑色素
5g
蒸馏水
100mL
福尔马林(40%甲醛)
0.5mL
配制方法:
将黑色素在蒸馏水中煮沸5min,然后加入福尔马林作防腐剂。
(2).番红染液
与革兰氏染液中番红复染液相同。
6、鞭毛染色液
(1).硝酸银鞭毛染色液
A液:
单宁酸
5g
FeCl3
1.5g
蒸馏水
100mL
福尔马林(15%)
2mL
NaOH(1%)
1mL
冰箱内可以保存3~7天,延长保存期会产生沉淀,但用滤纸除去沉淀后,仍能使用。
B液:
AgNO3
2g
蒸馏水
100mL
配制方法:
待AgNO3溶解后,取出10mL备用,向其余的90mLAgNO3中滴入NH4OH,使之成为很浓厚的悬浮液,再继续滴加NH4OH,直到新形成的沉淀又重新刚刚溶解为止。
再将备用的10mLAgNO3慢慢地滴入,则出现薄雾,但轻轻摇动后,薄雾状沉淀又消失,再滴入AgNO3,直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止。
冰箱内保存通常10天内仍可使用。
如雾重,则银盐沉淀出,不宜使用。
(2).Leifson氏鞭毛染色液
A液:
碱性复红
1.2g
95%乙醇
100mL
B液:
单宁酸
3g
蒸馏水
100mL
C液:
NaCl
1.5g
蒸馏水
100mL
临用前将A,B,C液等量混合均匀后使用。
三种溶液分别于室温保存可保存几周,若分别置冰箱保存,可保存数月。
混合液装密封瓶内置冰箱几周仍可使用。
(六)染色剂
1、细菌染色剂
配方一齐氏(Ziehl)石炭酸品红染液
甲液取石炭酸5克,溶解在95毫升蒸馏水中。
乙液取0.3克碱性品红,放入研钵中研磨,逐渐加入10毫升95%酒精,继续淹没,使它溶解。
将甲液和乙液混合后,摇匀,过滤,装瓶,备用。
配方二罗氏(Loeffler’s)美蓝染液
甲液取5克美蓝,溶于100毫升95%酒精中,制成美蓝—酒精饱和液。
乙液取氢氧化钾0.01克(或1%氢氧化钾溶液1毫升),溶液也可用于放线菌染色,0.1%浓度可用于酵母菌染
色。
配方三革兰氏(Gram’s)染液
用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,用丙液处理,最后用丁液复染。
四种液体的配方如下:
甲液(结晶紫液)
(1)结晶紫2克95%酒精20毫升
(2)草酸铵0.8克蒸馏水80毫升
使用钱江
(1)、
(2)液相混,静置48小时后使用。
乙液(碘液)
碘1克碘化钾2克蒸馏水300毫升
将碘化钾溶于少量蒸馏水中,然后加入碘,待碘全部溶解后,加水稀释至300毫升。
丙液95%酒精溶液
丁液(番红花红液)
2.5%番红花红酒精溶液10毫升蒸馏水100毫升
2、细菌特殊染色剂
配方一芽孢染液用此配方染色是用甲液染色后,用乙液复染。
甲液取5克孔雀绿,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,即成孔雀绿染液。
乙液取番红花红0.5克,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,集成番红花红复染液。
配方二荚膜染液此配方先用甲液染色,后用乙液复染。
甲液取结晶紫0.1克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到100毫升,再加入0.25毫升冰醋酸一结晶紫染液。
乙液取硫酸铜()31.3克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到100毫升,即成20%硫酸铜脱色剂。
配方三鞭毛染液
甲液
饱和明矾溶液2毫升5%石炭酸溶液5毫升
20%丹宁酸溶液2毫升
乙液
碱性品红11克95%酒精100毫升
使用前取甲液9毫升和乙液1毫升相混,过滤即可。
3、植物细胞壁染色剂
配方一纤维素细胞壁染液(Ⅰ)
取固绿0.1克,溶于100毫升95%酒精中,即成0.1%固绿—酒精溶液。
该液能染色纤维素细胞壁,还用于动植物中作浆质染色剂。
配方二纤维素细胞壁染液(Ⅱ)
氯化锌20克碘化钾6.5克
碘1.5克蒸馏水加至100毫升
先把氯化锌溶于少量蒸馏水中,再加入6.5克碘化钾,在碘完全溶解后,用蒸馏水稀释到100毫升,即成碘—
氯化锌溶液。
该染液能把细胞壁染成紫色,胞质染成淡黄色,胞核染成棕色。
配方一纤维素细胞壁染液(Ⅲ)
甲液取1克碘和1.5克碘化钾,溶于100毫升蒸馏水中,即成1%碘液。
乙液取7份硫酸和3份蒸馏水相混,即成66.5%硫酸溶液。
染色时,在材料上滴加甲液,再加一滴乙液,纤维素细胞壁就染成黄色。
配方四木质化细胞壁染液(Ⅰ)
硫酸化苯胺(或盐酸话本安)1份
蒸馏水70份95%酒精30份
硫酸30份
将上述各组分相混,将细胞材料放入混合液里染色,可是木质化细胞壁呈鲜黄或姜黄色。
配方五木质化细胞壁染液(Ⅱ)
取间苯三酚4~5克,溶于100毫升95%酒精中,即成间苯三酚—酒精液。
先在材料上滴上1滴浓盐酸,然后滴上间苯三酚—酒精液1滴,木质化的细胞壁就染上樱红或紫红色。
配方六木质化细胞壁染液(Ⅲ)
取1克番红,溶于99毫升蒸馏水中,即成1%番红溶液。
4、细胞质染色剂
配方一伊红染液
伊红染液一般配用水溶液和酒精溶液两种。
(1)取1克伊红,溶于99毫升蒸馏水中,即成1%伊红水溶液(市售红墨水内含伊红成分,可以用红墨水稀
释液来代替本溶液)。
(2)取1克伊红,溶于99毫升70%酒精中,即成1%伊红—酒精溶液。
配方二甲基蓝染液
取1克甲基蓝,溶于29毫升70%酒精中,加入70毫升蒸馏水,即成1%甲基蓝染液。
配方三亮绿染液
取0.5克亮绿,溶解在100毫升蒸馏水中,即成0.5%亮绿溶液。
5、细胞核染色剂
配方一甲基绿染液
取1克甲基绿,溶于99毫升蒸馏水中,加入1毫升冰醋酸。
本染液能染细胞核,还用来染木质化细胞壁。
配方二龙胆紫染液
取1克龙胆紫,溶于少量2%醋酸溶液中,加2%醋酸溶液,直到溶液不呈深紫色止。
配方三美蓝(亚甲基蓝)染液
取0.5克美蓝,溶于30毫升95%酒精中,加100毫升0.01%氢氧化钾溶液,保存在棕色瓶内。
此溶液能染细胞核,还用来染细菌、血和神经组织等。
配方四硼砂—洋红染液
取4克硼砂,溶于96毫升蒸馏水中。
再加入2克洋红,加热溶解后煮沸30分钟,静置3日,用100毫升70%
酒精冲淡,放置24小时后过滤。
此染液能染细胞核,还用来染糊粉粒和一般动物、植物的整体染色,如水螅、血吸虫等整体标本。
配方五德氏(Delafield’s)苏木精染液
甲液取1苏木精,溶于6毫升无水酒精中,即成苏木精—酒精溶液。
乙液取10克铵矾溶于90毫升蒸馏水中,即成10%铵矾水溶液。
取甲液逐滴加入到乙液中,用纸遮盖,放在阳光明亮处,使它充分氧化。
3~4天后将溶液过滤,在滤液中加
入25毫升甘油和25毫升甲醇,保存在密闭玻璃瓶内。
静置1~2个月,待该液颜色变深时过滤,可长久保存。
本染液是染色体的优良染色剂,除能染细胞核外,还用来染纤维素、细胞壁和动植物组织。
配方六席夫(Schiff’s)试剂
称取0.5克碱性品红,加到100毫升煮沸的蒸馏水中,再微微加热5分钟,不断搅拌,使它溶解。
在溶液冷却
到50摄氏度时过滤,滤液中加入10毫升1N盐酸。
再冷却到25摄氏度时加入0.5克偏重亚硫酸钠()或无
水亚硫酸氢钠()。
把溶液装入棕色试剂瓶内,摇荡后,塞紧瓶塞,放在黑暗中24小时。
在溶液颜色退到淡
黄色时,加入0.5克活性炭,用力摇荡1分钟,过滤后把滤液贮在棕色试剂瓶内,塞紧瓶塞,滤液应该是无色
的。
在使用时勿让溶液长时间暴露在空气中和见光(瓶外用黑纸或暗盒遮光)。
如溶液变成红色,即失去染色
能力。
碱性品红是较强的核染色剂,在孚尔根氏(Feulgen’s)反应中作为组织化学试剂,以检查DNA。
6、染色体染色剂
配方一醋酸—洋红染液
取45毫升冰醋酸,加蒸馏水55毫升,煮沸后徐徐加入洋红1克,搅拌均匀后加入1颗铁锈钉,煮沸10分钟,
冷却后过滤,贮存在棕色瓶内。
配方二醋酸—地衣红染液
取45毫升醋酸,跟55毫升蒸馏水相混,加热,徐徐加入地衣红粉末1~2克,搅拌溶解后,缓缓煮沸2小时。
冷却后过滤,贮存在棕色瓶里。
配方三龙胆紫染液
取1克龙胆紫,用少量蒸馏水溶解后,加蒸馏水,稀释到100毫升,保存在棕色瓶内。
配方四甲苯胺蓝染液
取0.5克甲苯胺蓝,溶解在100毫升蒸馏水中,即成0.5%甲苯胺蓝水溶液。
7、线粒体染色剂
配方一詹钠斯绿B(Janu’sgreen酒精饱和溶液
取125毫升詹钠斯绿B,加入到62.5毫升无水酒精中,搅拌,即成烟鲁绿B酒精饱和染液。
(1)取詹钠斯绿酒精饱和染液按1:
30000比例加蒸馏水稀释,用来染原生动物线粒体。
(2)取詹钠斯绿酒精饱和液,按1:
10000比例加蒸馏水稀释,用来染新鲜蛙血线粒体。
配方二詹钠斯绿B中性红染液
先配制詹钠斯绿B和中性红酒精饱和液。
詹钠斯绿酒精饱和液见配方一。
中性红酒精饱和液配制方法:
取125
毫升中性红,加入到50毫升无水酒精中,搅拌。
在10毫升生理盐水(两栖类生理盐水浓度为0.65%;哺乳类生理盐水浓度为0.9%)中,加入詹钠斯绿B酒精
饱和液0.7~1毫升,中性红酒精饱和液2毫升,混合。
詹钠斯绿B稀释液是活体染液。
8、脂肪染色剂
苏丹Ⅲ染液
取0.1克苏丹Ⅲ,溶于20毫升95%酒精中,即成0.5%苏丹Ⅲ染液。
这染液能染脂肪,还能染木栓、角质层。
9、血液染色剂
配方一瑞氏(Wright’s)染液
取瑞氏染料粉末0.1克和甲醇60毫升。
把染料放在研钵内,加少量甲醇研磨,使染料溶解,然后把溶解的染
料倒入干净的棕色玻璃瓶。
并用完甲醇为止。
配制好的染液在室温中保存,即可使用。
新鲜配制的染液偏碱性,
放置后呈酸性,染液贮存愈久染色愈好。
这染液的适宜pH值是6.4~6.8。
因此,染色时加入缓冲液,可维持
一定的酸碱度,使染色效果更好。
这种染液除能染血液,还能染疟原虫。
瑞氏染料可以自制。
在100毫升0.5%碳酸氢钠水溶液里加入1克美蓝,溶解后放在锅内,蒸上1小时,取出
冷却后过滤。
在滤液里加入0.1%伊红水溶液500毫升,随加、随搅拌,使混合液呈紫色。
静置一夜后,用滤
纸过滤。
滤纸上的沉淀物,在室内风干或放在干燥箱内,充分干燥后研磨成粉末,即成瑞氏染料。
配方二甲基紫染液
取甲基紫0.5克,加到100毫升生理盐水中,溶解后加入冰醋酸0.02毫升。
10、吸虫染色剂
梅耶氏(Mayer’s)明矾—洋红染液
取铵明矾(硫酸铝铵)5克,溶于95毫升蒸
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