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PRRS的诊断与控制张国红
猪繁殖呼吸障碍综合症的诊断与控制
猪繁殖—呼吸综合征(porcineReproductveandRespivatorg,PRRS),以前曾称为“猪神秘病”、“猪蓝耳病”等。
1987年在美国首次报道了此病,1988年发生于加拿大,1990年11月暴发于西德,很快蔓延于邻近国家,荷兰(1991)、比利时(1991)、英国(1991)、法国(1991)、希腊(1992)、澳大利亚(1992)、日本(1993)、菲律宾(1993)、朝鲜(1993)、韩国(1993)等地相继报道,并成为世界范围内猪的传播性疾病。
。
1991年,荷兰中央兽医研究所以怀疑患有该病的猪场首次分离到猪生殖和呼吸综合症病毒,定命为Lelystad病毒(LV)。
我国于1996年郭宝清等调查证实该病的存在,血清学调查表明北京、河北、河南、广东、辽宁、黑龙江、上海等地区的猪场均有PRRSV感染,且阳性率都很高。
本病主要以导致母猪流产和仔猪的严重呼吸道症状,以高死亡率为特征,严重危害世界养猪业。
1、病原与流行病学特点
自荷兰于1991年首次从病猪分离到病毒,并以地名来命名为莱利斯塔病毒(Lelystadvirus),该病的研究更加深入。
该病毒在国际病毒分类委员会第六次报告中(1996),归属于冠状病毒科动脉炎病毒属,系正股单股RNA病毒。
PRRSV能通过200nm滤膜,直径为48-83nm,核衣壳直径为25-30nm外具囊膜。
PRRSV的复制不受DNA合成抑制化合物处理的影响,核酸类型为RNA。
该病毒在氯化铯密度梯度中浮密度为1.13-1.19g/cm3,在蔗糖密度梯度中浮密度为1.18-1.23g/cm3。
常温(25度)下病毒在血清中可维持其活力,但在组织中却不能。
在自然环境下,感染性病毒可因干燥而迅速失活,但在潮湿的环境有助于维持PRRSV活力。
PRRSV和在-20度和-70度稳定,在4度以上则逐渐失去感染性,PH值小于5或大于7的条件下,其感染力下降90%。
PRRSV对多种动物的细胞无血凝性,与其他39种感染脊椎动物的有囊膜RNA病毒的抗血清无交叉反应。
最适于在猪的肺泡巨噬细胞上生长繁殖,也能在外周血单核细胞、肺血管内巨噬细胞、脾巨噬细胞、脑小神经胶质细胞等上复制。
抗体依赖性增强作用(ADE)是PRRSV的一个重要生物学特征。
有研究发现,甚至可提高10-100倍。
据认为,ADE的产生机制是,病毒抗原与抗体形成免疫复合物后,借助细胞表面后受体与PAM结合,从而促进病毒进入细胞,建立有效复制和感染。
不同毒株对抗体中和作用的易感染性与同种抗体存在下的病毒产量呈负相关。
PRRSV存在显著的抗原多样性,各毒株在毒力上的所不同。
猪是PRRSV唯一的天然宿主,各种年龄、各品种的猪均可感染,尤以妊娠母猪和仔猪更易感染,某些绿头鸭、珠鸡、鸡和麝鸭等禽类也可无症状感染。
PRRSV感染猪(包括亚临床感染猪)是本病的传染源。
感染猪可通过其唾液、鼻腔分泌物、精液、粪尿以及乳汁等方式向外排毒。
病猪与健康猪接触,病猪的分泌物和排泄物污染饲料和饮水传播该病,通过风和猪只移动而造成本病的流行。
有研究表明,病毒可在受感染公猪的精液中存留35天,患病公猪可能通过PRRSV。
鸟类也能参与本病毒的传播,有人曾在绿头鸭、珍珠鸡和康尔杂交鸡的粪便中均分离出了PRRSV,啮齿类如小鼠、大鼠及豚鼠等不是本病的贮藏宿主。
2、临床症状与病理解剖
感染PRRSV后,母猪常表现为食欲不振、高热、咳嗽、呼吸迫促、倦怠;少数猪腹部、耳部、阴唇等出现蓝红色的紫绀,故称“蓝耳病”,持续时间不长;发情延迟,妊娠率下降,屡配不孕,怀孕母猪发生流产、早产、死胎、木乃伊,出现率约为20%。
新生仔猪主要表现为咳嗽、打喷嚏、腹式呼吸、流泪、结膜炎和结膜部位水肿;糊状下痢,有些则排出灰色或黑色焦油状稀粪,少数带血,架子猪和育肥猪表现为呼吸道病发生率增加,病猪抵抗力下降,增重缓慢,生产性能降低5%-20%。
公猪表现为短暂昏睡、抑郁、厌食、轻度发热、性欲减退,出现轻度呼吸道症状,少数猪可出现一过性耳部紫绀。
猪只感染PRRSV后,常继发感染的病原有:
猪副嗜血杆菌、猪链球菌、霍乱沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、猪呼吸道冠状病毒等。
本病眼观病变不甚明显,除肺前叶部分硬化,并伴有淋巴结轻度水肿外,一般未见显著产病变。
仔猪和育肥猪还可见眼睑水肿、皮下水肿、淋巴结肿大、心包积液、水肿。
组织学及超微结构观察表明,仔猪体表皮下轻度淤血、肌肉灰白色;肺间质增宽,有不同程度的水肿,肺泡及肺泡隔水肿和炎性细胞浸润,大脑软脑膜实质毛细血管淤血,透明血栓形成。
肾小囊扩张,积液,肾小管出现蛋白管型和细胞管型,肾髓质出血。
肝脏髓外出血较明显。
肺脏、肺淋巴结、脾脏、肝脏和大脑组织均无病毒包涵体染色反应。
PRRSV毒株的毒力差别影响着感染器官系统的数目、病变和疾病的严重性。
3、诊断
3.1病毒分离取典型症状的仔猪肺、脾、扁桃体、淋巴结、血清以及死亡、流产胎猪胸水,用以分离病毒。
本病毒在猪肺泡巨噬细胞(SAM)和CL2621细胞生长繁殖。
3.2常用的血清学方法
3.2.1酶联免疫吸咐试验(ELISA)将PRRS抗原包被于微量板反应孔,洗染后加入一定稀释度的血清样品,感作并洗去未与抗体结合的抗体,再加入梅标记的抗猪IgG(二抗),感作并洗涤,最后加入底物显色,测定492nm光密度值(OD492nm)。
根据样品与阳性对照OD值的比值(S/P)进行判定。
当被检抗原与阴性对照孔OD值之比大于1.5时可判为阳性。
王永康等(1997)运用ELISA法就上海市的猪场检测,共采77份,结果表明肉猪的阳性率为30.1%,母猪的阳性率为85.7%。
赵德明等(1996)、晁学元等(1999)等分别就北京、青海地区用ELISA作血清学调查,被检猪只检出阳性率分别为100%、9.76%。
目前,许多国家已有商品的ELISA试剂盒出售,ELISA已是检测PRRS最常用的方法,主要是因为该方法经济简便、检测结果快、重复性好、相对客观、能自动显示结果,可大批量操作便于大规模检疫。
3.2.2免疫过氧化酶细胞单层试验(IPMA)IPMA是最早报道的检测PRRS抗体的血清学试验方法,试验证实该方法具高度的特异性,但对个体检测的敏感性较差。
王刚等(1996)在国内首次成功地建立了IPMA检测PRRS抗体。
应用该方法检测了北京地区3个猪场94份血清,英国株抗体阳性检出率为9.6%,美国株M1的抗体阳性检出率为51%,同间接荧光抗体试验IFA比较阳性检出率基本一致。
3.3免疫组织化学
应用特异性单克隆抗体,以免疫金银色法(IGSS)染色,可见感染PRRSV的猪肺泡巨噬细胞浆被染成特异性的深暗色,通过观察胞浆是否呈特异性深暗色着染进行判定。
免疫金银染色法也成功地用于检测福尔马林固定和石腊色埋的肺组织冰冻切片中的PRRSV抗原。
用单抗提高该技术的通用性和特异性。
3.4生物技术检测
用逆转录—PCR检查本病,敏感性、特异性均较好。
此外,还有人用单克隆抗体及核酸探针检测本病。
3.5临床感性诊断标准
荷兰科研人员研究总结认为,下三项指标同时发生两项即可诊断为可疑:
母猪的死胎20%;流产和提前产仔为80%;断奶前仔猪死亡率为25%。
3.6鉴别诊断
应与其他引起繁殖失败和呼吸障碍的疾病进行鉴别,尤其是应排除猪伪狂犬病、猪细小病毒感染、猪瘟、猪流感、猪乙型脑炎、呼吸道冠状病毒、猪脑心肌炎和猪血凝性脑脊髓炎等。
4、综合防制措施
4.1强化免疫接种,加强新型疫苗研制
在美国和欧洲有由PRRSV分离致弱的疫苗生产,但不用于种猪,而且有引起繁殖障碍的报告,在胎儿和死胎可分离疫苗毒。
西班牙生产了一种灭活苗保护母猪的感染,它是用PAM生产的,数量有限。
新一代疫苗可能为基因工程苗。
PRRSV的不同特异性蛋白产生的抗体在时间上有差别,这一点有利于基因工程苗的研究和开发。
在国内郭宝清等已研制出PRRSV灭活疫苗,初步应用具有一定的保护效力;弱毒疫苗株正在选育之中。
仇华吉等构建军了CH-la株ORFs的真核表达质粒,为PRRSV基因免疫奠定了基础。
尽管我国目前建立了比较完善的培养方法和检测手段,掌握了充足的各地流行毒株,但全国性PRRSV流行病学资料尚不充分,国内分离株的免疫生物特性还有待于明确,诊断试剂与新型疫苗的研究尚需攻关。
对猪免疫接种,有学者推荐;30天内通过用MLV疫苗对所有猪只免疫接种2次,同时在60天内停止引进未接种的易感猪,以切断PRRSV在感染的育肥猪中的传播。
在常规出栏销售过程中,于空栏后对畜舍进行清扫、消毒并干燥2天。
4.2加强饲养管理,尽量减少感染
坚持自繁自养,尽量少从或不从有PRRS病史中的猪群中购入种猪;运输车辆在出入猪舍时均应消毒;饲养人员出入猪舍要更衣换靴;推行“全进全出”的饲养制度;妥善处理排泄物、垫料及流产与早产和死产胎儿,最好的办法是焚烧与深埋。
若有PRRSV阳性时,应当注意:
仅在仔猪出生后24小时内进行交叉寄养;仔猪产后只能在产房内移动,避免在猪舍间流动;建立严格的全进全出的哺乳猪流动模式;每两批猪间应有2-3天的清扫和消毒时间;尽量避免猪只发生应激。
4.3加强发病猪只管理,有效控制继发感染
PRRS病猪暂无有效治疗方法。
采取如下综合措施,可减少猪只死亡率:
(1)选用中华神力注射液或华西喘迪灵注射液,按每公斤体重肌注0.1-0.15ml,一日一次,连用2日;同时在另一侧肌肉注射健胃驱虫灵注射液,每公斤体重7.5mg,一日一次,连用2日。
可有效增强病猪免疫力、提高抗体生存量,同时控制继发感染,减少发热。
(2)补充Ve和微量元素硒,肌注百毒杀注射液,另一侧肌注黄芪多糖和Vc注射液。
(3)注意兽医常规卫生,并实施对症治疗,可促进病猪康复。
对于妊娠70天以后流产的母猪,3周后方可配种;70天以内流产可重新配种;妊娠后期的母猪要加强护理和观察,丧失全部全猪的母猪应留在产房直到正常断乳时为止。
5、结语
猪繁殖——呼吸综合征是在80年代中后期新发现的一种繁殖障碍传染病,主要引起猪繁殖障碍、早产、流产、死胎、木乃伊胎等,还可引致成年猪长年呼吸道症状,给养猪业带来重大损失和严重威胁。
对于本病,目前尚没有确切有效的防制方法,因此加强饲养管理、严把猪只繁育、强化兽医卫生常规显行十分重要。
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