学年高中生物 第二章 克隆技术 第一节 什么是克隆.docx
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学年高中生物第二章克隆技术第一节什么是克隆
第一节 什么是克隆(略)第二节 植物的克隆
1.简述植物细胞全能性的含义。
2.简述植物组织培养的程序。
(重点) 3.举例说明植物细胞全能性的体现。
4.简述植物细胞、器官培养的方法和意义。
(重点) 5.简述植物原生质体获得的方法及理解植物细胞工程的概念、操作过程和应用。
(难点) 6.简述多途径的植物克隆实践。
一、植物组织培养
1.理论基础——植物细胞的全能性
(1)含义:
植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性,因而都具有发育成完整植株的潜能。
(2)特点
①不同种类植物或同种植物的不同基因型个体的细胞全能性的表达程度大不相同。
②长期培养中,培养物的胚胎发生和器官形成能力下降。
2.程序
(1)半固体培养基的配制:
培养基中含有适当营养物质、植物生长调节剂及0.7%~1%的琼脂;把培养基倒入灭菌试管中凝固成半固体。
(2)小组织块的切取:
从消毒的根、茎、叶上切取。
(3)愈伤组织的获得:
植物组织块切口处的细胞在创伤的刺激下发生脱分化,成为分裂的细胞。
在创伤表面形成一种由相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织,即为愈伤组织。
(4)新植株的再生
①诱导愈伤组织,使其产生出芽和根的顶端分生组织,并由此再生出新的植株。
②将愈伤组织分散成单个细胞,再在适宜培养基上培养发育成胚状体,进而发育成新的植株。
3.成功的条件
(1)深入探讨特定植物细胞全能性的表达条件。
(2)在植物克隆试验研究中,尽量选择性状优良、细胞全能性表达充分的基因型。
1.植物组织培养过程中,应如何操作才能成功?
提示:
离体条件;无菌操作。
二、细胞培养和器官培养
1.措施:
通过平衡的植物激素配比进行调控。
(1)适量的激动素和细胞分裂素配比可诱导芽的分化。
(2)适量的吲哚乙酸及适当减除其他某些激素,可诱导生根。
2.意义
(1)利于植物的受精过程、胚胎发育过程及调节控制这些过程的环境因素、遗传基础和分子及生理生化机理的研究。
(2)通过遗传工程的操作,研究与植物生长发育有关的重要基因或影响因素。
(3)培育植物新品种。
三、原生质体培养与植物细胞工程
1.原生质体的获得方法
在0.5~0.6mol/L的甘露醇溶液环境(较高渗透压)下用纤维素酶和果胶酶混合液处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞,除去细胞壁。
2.植物细胞工程
(1)操作过程
―→
(DNA) (包括原生质体受体)
(2)应用
①培育作物新品种。
②为遗传学、植物生理学和细胞生物学问题提供了良好的研究系统。
2.利用紫草细胞经植物组织培养,一般到哪一阶段,便可大量生产提取中药紫草素?
提示:
愈伤组织阶段。
细胞全能性及其表现条件
1.生物细胞的全能性
生物体细胞一般都是由受精卵经有丝分裂形成,因而都含有生物一整套的遗传物质,都具有发育成完整个体的潜能。
但在生物体上时不能表现出全能性,只能通过细胞分化形成不同的组织、器官,这是在特定的环境、激素等的影响下基因选择性表达的结果。
2.细胞表现全能性的条件
(1)首要条件是脱离母体。
(2)植物组织培养时,培养基中除含有一定的水分、无机盐外,还要添加一定的植物激素(如生长素、细胞分裂素),这有助于愈伤组织分化为不同组织、器官。
(3)在植物组织培养的前期对光照无需求,在后期需要光照条件,这有利于细胞生长、分化。
(4)动物细胞由于受到某些因素的制约,其全能性不易表达,但其核仍具有全能性。
3.细胞全能性高低的比较
(1)植物细胞>动物细胞。
(2)受精卵>生殖细胞(精子、卵细胞)>体细胞。
(3)幼嫩细胞>衰老的细胞。
(4)分化程度低>分化程度高(体细胞)。
以下不能说明细胞全能性的实验是( )
A.胡萝卜韧皮部细胞培育出植株
B.紫色糯性玉米种子培育出植株
C.转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株
D.番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株
[解析] 细胞的全能性应是离体的已分化的细胞在一定条件下培养,具有发育成完整个体的潜能。
玉米种子有完
整的胚,自然条件下种植即可发育成新个体,不能说明细胞具有全能性。
[答案] B
[思维升华]
(1)有人说只要找到秋海棠的一个细胞,就能再生出秋海棠,这依据的生物学原理是什么?
提示:
能让一个细胞发育成一个个体,依据的是细胞的全能性。
(2)全部基因等同于全套基因吗?
提示:
全套基因≠全部基因:
细胞具有全能性是因为细胞中具有发育成完整个体所必需的“全套基因”而不是“全部基因”,配子中有全套基因,因此仍然具有全能性。
(1)只有由单个细胞发育成完整个体,才算是体现出了细胞的全能性,仅发育成一部分,不能体现出全能性。
例如,壁虎断尾之后,仍可长出,就不是全能性的体现。
(2)全能性降低的因素
①由于染色体畸变、细胞核变异或非整倍体产生;
②激素平衡被打破或细胞对外源生长物质的敏感性发生改变;
③缺乏成胚性的细胞系。
下列关于植物细胞全能性的叙述,错误的是( )
A.植物细胞表达全能性的根本原因是细胞核内含有本物种的全套基因
B.植物细胞的全能性比动物细胞更容易体现
C.不同个体之间细胞全能性的表达程度不同
D.培养物可无限制地长期克隆
解析:
选D。
在长期培养过程中,培养物由于染色体畸变、细胞核变异或非整倍体产生等,而且这些变异皆不可逆,从而导致培养物的胚胎发生和器官形成受阻,因此,培养物不可能无限制地克隆下去。
植物组织培养
1.原理:
植物细胞具有全能性。
2.过程
外植体(离体的植物器官、组织或细胞)
愈伤组织
根、芽―→植物体。
3.培养过程中应注意的问题
(1)所有实验用具要严格灭菌。
(2)接种过程要求无菌操作。
(3)适宜的温度和光照。
愈伤组织培养最初避光培养,后期见光培养。
(4)激素:
主要是细胞分裂素和生长素。
(5)试管苗培养:
要先进行生芽培养,再进行生根培养;试管苗的培养需要在光照条件下进行。
4.与植物细胞培养的区别
(1)含义不同
①植物组织培养:
指在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下,把植物离体的器官、组织或细胞培养成完整的植物体。
②植物细胞培养:
是将组织培养过程中形成的愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中,进行悬浮培养,得到分散游离的悬浮细胞,通过继代培养使细胞增殖,从而获得大量的细胞群体的一种技术。
(2)目的不同
①植物组织培养:
得到更多的植物体。
②植物细胞培养:
获得人类所需要的细胞代谢产物。
5.植物克隆的应用
(1)培育抗逆、高产及优质的转基因植株。
(2)细胞重要次生代谢产物(如某些中药)的工业化生产。
(3)在培养基中加入不同浓度的NaCl或病原体的毒蛋白,诱发和筛选抗盐或抗病突变体。
(4)在培养基中加入不同浓度的赖氨酸类似物,筛选出抗赖氨酸类似物突变体。
脱分化、再分化和细胞分化
(1)脱分化:
由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化,或者叫做去分化(分化程度较高→分化程度较低)。
(2)再分化:
脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根、芽等器官,这个过程叫做再分化(针对于脱分化,分化程度较低→分化程度较高)。
(3)细胞分化:
指在个体发育过程中,细胞在形态、结构和功能上的特化过程(分化程度较低→分化程度较高)。
如图表示植物组织培养过程,据图回答下列问题:
(1)图中①过程获得的细胞是正常植物体经__________形成的,在这一过程中的染色体的变化是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)要顺利完成③过程,除了需要各种无机营养物质外,还需要在培养基中加入________、________(两类不同功能的物质)。
该过程形成的细胞与正常体细胞相比,具有____________________________的特点。
(3)从过程④的结果看,它的实质是____________________________________________
________________________。
(4)某人在探究细胞脱分化和再分化的实验中,得到了如下结果:
①只有细胞分裂素时,组织块产生愈伤组织;
②细胞分裂素=生长素时,愈伤组织不分化;
③细胞分裂素>生长素时,愈伤组织分化出芽;
④细胞分裂素<生长素时,愈伤组织分化出根。
由实验结果,你能得出什么结论?
[解析]
(1)单倍体性细胞是经减数分裂形成的,其特点是染色体复制一次,细胞分裂两次,子细胞中染色体数目减半。
(2)图中③是脱分化,在培养基中除需加入无机营养物质外,还需加入有机营养物质和植物激素,形成的愈伤组织是高度液泡化、无定形状态的薄壁细胞。
(3)图中④是再分化,从结果上看是基因的选择性表达。
(4)分析实验结果可得出的结论是:
细胞分裂素与生长素含量不同,对愈伤组织的形成和分化的影响不同。
[答案]
(1)减数分裂 染色体复制一次,细胞分裂两次,子细胞中染色体数目是亲代细胞的一半
(2)有机营养物质 植物激素 排列疏松、高度液泡化、细胞壁薄
(3)基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果
(4)植物激素的种类和含量不同,对愈伤组织的形成和分化的影响不同。
[思维升华]
(1)若题干④过程只分裂,但没有根和茎的分化,可能的原因是什么?
提示:
植物激素的配比不对。
(2)由该胚状体产生的个体都是纯合子吗?
提示:
是否是纯合子,取决于亲本。
(1)植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物组织细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、根、芽,最终形成完整的植株。
(2)愈伤组织再分化产生新植株的途径中其中的两条是:
可以直接诱导出芽和根,也可以诱导出胚状体,再发育成植株,取决于培养基中激素的配比。
植物组织培养过程可以归纳为①
②
③―→④,下列相关叙述错误的是( )
A.通常选取根尖、茎叶、形成层等诱导形成愈伤组织
B.②
③过程中,细胞增殖的方式为有丝分裂
C.①―→③培养过程中,应在培养基中加入水、无机盐、蔗糖、氨基酸、植物激素等物质
D.将①经脱分化培养成②时,得到胚状体或丛芽
解析:
选D。
外植体通常选用根尖、茎尖、形成层等容易诱导形成愈伤组织的部位,A正确;②
③过程中,细胞增殖的方式为有丝分裂,B正确;①―→③培养过程中,应在培养基中加入水、无机盐、蔗糖、氨基酸、植物激素等物质,C正确;将①经脱分化培养成②时,得到愈伤组织,将②经再分化培养成③时,得到胚状体或丛芽,D错误。
[随堂检测]
1.细胞的全能性是指( )
A.生物体内的细胞形成完整个体的特性
B.生物体的细胞具有细胞膜、细胞质和细胞核的特性
C.生物体的细胞能完成各种生理活动的特性
D.生物体内的高度成熟和分化的细胞形成完整个体的潜能
解析:
选D。
所谓细胞全能性是指生物体内的高度成熟和分化的细胞形成完整个体的潜能。
生物体的每一个细胞包含有该物种所特有的全套基因,都有发育成个体所必需的全套遗传信息,因而从理论上讲,生物的每一个体细胞都具有全能性,所以只要条件适宜,都能发育成一个完整的个体。
2.下列关于愈伤组织的叙述,不正确的是( )
A.是高度液泡化呈无定形状态的一群薄壁细胞
B.是失去分裂能力高度分化的一群细胞
C.既有分裂能力又有分化能力的一群细胞
D.具有发育成完整植物体的潜能
解析:
选B。
愈伤组织是高度液泡化呈无定形状态的一群薄壁细胞,具有分裂和分化能力,并且具有发育成完整植物体的潜能。
3.如图为植物组织培养过程,下列有关说法不正确的是( )
A.B试管中细胞全能性最高
B.D试管中培育出的个体都是纯合子
C.A→B的过程需要激素的刺激
D.A→D的细胞分裂都是有丝分裂
解析:
选B。
植物组织培养能保持亲本的优良性状。
A→B需要激素刺激。
A→D只发生有丝分裂,不发生减数分裂。
D试管中是否为纯合子取决于亲本。
4.下图表示利用棉花叶肉细胞原生质体进行遗传改良的过程,据图分析下列叙述错误的是( )
A.①过程需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶的混合物处理
B.②过程能定向诱导原生质体产生优良性状的改变
C.③过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能
D.④过程需用适宜配比的激素处理
解析:
选B。
植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,因此常选用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,A正确;紫外线照射诱导生物变异属于基因突变,具有多方向性,B错误;③过程为脱分化,其目的是使原有细胞恢复分裂和分化能力,即失去了其特有的结构和功能,C正确;④过程为再分化,需用适宜浓度配比的激素进行诱导,D正确。
5.某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉,其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。
下列有关叙述错误的是( )
A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害
B.在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂,可获得染色体加倍的细胞
C.出芽是细胞再分化的结果,受基因选择性表达的调控
D.生根时,培养基通常应含α萘乙酸等生长素类调节剂
解析:
选B。
消毒主要是为了杀死材料表面的微生物,同时要注意减少消毒剂对植物细胞的伤害,A项正确;植物细胞融合前必须先去除细胞壁才能诱导融合,直接在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂,不能得到融合细胞,B项错误;出芽从细胞水平上看,是细胞分化的结果,从分子水平上看,是基因选择性表达的结果,C项正确;生长素类调节剂可促进愈伤组织生根,因此生根时,培养基中应含有生长素类调节剂,D项正确。
6.某二倍体植物是杂合子,下图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。
据图回答下列问题:
(1)图中①表示的是该花粉培养过程中的____________过程,②表示的是________过程。
X代表的是________,③表示的是________过程,④表示的是诱导________过程。
(2)图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条,具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中________的种类及其浓度配比,最后获得的来源于未成熟花粉的完整植株都称为________植株(甲)。
未成熟花粉经培养能形成完整植株,说明未成熟花粉具有__________________。
(3)对植株甲进行________,才能使其结实产生后代(乙),否则植株甲只有通过________的方式才能产生后代(丙)。
乙、丙两种植株中,能产生可育花粉的是______植株,该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为________种,该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为________种。
花药培养在育种上的特殊意义是______________________________,从而开辟育种新途径。
解析:
(1)图示①过程形成愈伤组织,所以应是脱分化过程,②过程形成丛芽,说明是再分化过程,而丛芽经过④过程形成植株,说明是分化生根的过程。
另外愈伤组织在不同的培养基上也可先生根,再分化形成芽,形成完整植株,所以X就是胚状体。
(2)培养基中所含的激素种类和比例不同,诱导形成的结构不相同。
花粉细胞含有本物种全套的遗传信息,具有发育的全能性,离体培养成的个体都是单倍体。
(3)植物甲为单倍体,只含有配子的染色体组成,是高度不育的,只有其染色体加倍后,才能产生正常的配子,因染色体加倍后形成的是纯合子,每株植物减数分裂只能形成一种基因组成相同的配子,因杂合子植株含有多对等位基因,所以这样的群体产生的配子有许多种。
因单倍体育种形成的是纯合子,自交后代不发生性状分离,在育种上可明显地缩短育种年限。
答案:
(1)脱分化 再分化 胚状体 分化(或发育) 生根
(2)激素 单倍体 细胞的全能性
(3)染色体加倍 无性繁殖 乙(或经过染色体加倍的) 一 多 缩短育种年限
[课时作业]
一、选择题
1.生物体内细胞没有表现出全能性,而是分化为不同的组织、器官,这是因为( )
A.细胞丧失了全能性
B.基因的选择性表达
C.不同的细胞内基因不完全相同
D.在个体发育的不同时期,细胞内的基因发生了变化
解析:
选B。
在正常个体中,细胞全能性受到限制,因为基因是选择性表达的,只有当细胞处于离体状态并给予一定的外界条件如营养物质及激素时,才能表现出全能性。
2.下列实例中能体现细胞全能性的是( )
①用液体悬浮培养的胡萝卜单个细胞培养成了可育的植株
②植物用种子进行繁殖 ③烟草花药离体培养得到了单倍体植株
A.①② B.①③
C.②③D.①②③
解析:
选B。
全能性的体现,要使单个细胞发育成完整个体,而种子不是单个细胞,所以不是。
3.在脱分化形成愈伤组织的过程中,下列各项为非必要条件的是( )
A.培养基需消毒灭菌B.给予适宜的温度
C.给予充足的光照D.给予适宜的养料和激素
解析:
选C。
在植物组织培养过程中,将离体的组织细胞置于相应的培养基中,在一定的激素刺激下,使其发生脱分化形成愈伤组织,并在此基础上逐渐再分化形成具有根、芽的植物胚状体。
同时在脱分化形成愈伤组织的过程中,由于植物细胞脱离了植物体,所有营养必须从培养基中获得,并且在此过程中易受到细菌的感染而死亡,因此必须对培养基进行消毒灭菌。
愈伤组织再分化成根、芽时,需给予光照刺激,以促进叶绿素的合成,为随后的光合作用提供有利条件,而在细胞脱分化形成愈伤组织的过程中光照是非必要条件。
4.下列关于植物细胞工程的叙述,不正确的是( )
A.离体的组织块在脱分化形成愈伤组织过程中,需在培养基中添加有机物
B.由于同种植物的不同基因型个体之间遗传性的差异,细胞全能性表达程度大不相同
C.用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁,可以获得植物细胞原生质体
D.愈伤组织细胞的特点是细胞质丰富、液泡小、细胞核小
解析:
选D。
愈伤组织细胞的特点是细胞质丰富、液泡小、细胞核大,是一种相对没有分化的活的薄壁细胞。
5.玉米是一种重要的农作物,为了提高玉米的产量,科学家在玉米育种和栽培中做了大量的研究。
下图是关于玉米培养的过程,据图判断下列说法中错误的是( )
A.从繁殖原理上分析,A→D属于无性繁殖
B.植株D和G中的染色体组数不同
C.E→G不能体现细胞的全能性
D.E→F过程中获得的植株一般不能直接应用于大田生产
解析:
选C。
E→G是植物组织培养过程,属于无性繁殖,进行有丝分裂,染色体数目不变,也体现了细胞的全能性。
6.辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。
辣椒素的获得途径如图。
下列叙述中错误的是( )
A.图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的脱分化(或去分化)和再分化过程
B.图中获得愈伤组织、脱毒苗和高产细胞系的培养基中都有凝固剂——琼脂
C.②过程中,培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值低时,有利于芽的分化
D.用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时,常用的酶是纤维素酶和果胶酶
解析:
选B。
外植体形成愈伤组织为脱分化,愈伤组织形成根、芽为再分化。
培养高产细胞系的培养基是液体培养基,不含琼脂。
再分化过程中,生长素和细胞分裂素用量的比值低时有利于芽的分化。
用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时常用的酶是纤维素酶和果胶酶。
7.下列对如图所示的培养过程的叙述,正确的是( )
A.a、b、c、d中的植物细胞都具有完全相同的DNA和RNA
B.a→b与b→c的培养过程中,植物生长调节剂的种类可能相同,但比例不同
C.此为植物花药离体培养,其中花药经a~d发育成试管苗的过程中可能存在基因突变、基因重组和染色体畸变等变异
D.d中的试管苗可以直接转移至土中培养
解析:
选B。
a、b、c、d中的植物细胞都具有完全相同的DNA,但因细胞分化,细胞中的RNA不同;a→b与b→c分别是脱分化和再分化,两过程均需要相同的植物激素调节,但比例不同;花药经a~d发育成试管苗的过程中可能存在基因突变和染色体畸变等变异;d为单倍体,需要用秋水仙素处理后再移栽土中。
8.下列有关高等植物原生质体制备和培养的叙述,正确的是( )
A.纤维素酶和果胶酶混合液可用于制备悬浮培养细胞的原生质体
B.加入0.6mol/L甘露醇的目的是保护纤维素酶和果胶酶
C.从不同植物组织分离得到的原生质体大小、形状相同
D.愈伤组织经原生质体培养均可得到再生植株
解析:
选A。
植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶;加入0.6mol/L甘露醇的目的是保护植物细胞去除细胞壁后获得的原生质体;从不同植物组织分离得到的原生质体大小不同,形状均为球形。
二、非选择题
9.铁皮石斛是中国特有的名贵药材,有关铁皮石斛的研究已成为国内外生命科学研究的热点和前沿,为提高其药用价值,铁皮石斛种子随“神九”进行了一次太空之旅,其种植前景将更加广阔。
结合已有知识回答下列问题:
(1)铁皮石斛有性生殖繁殖率很低,所以繁殖常用无性繁殖方式进行,如分株、扦插,也可用现代生物技术如____________的方式进行繁殖。
通过此方法利用茎尖繁殖的植株几乎无病毒,主要原因是____________。
若取同一株铁皮石斛不同部位的细胞进行培养获得的愈伤组织的基因型____________(填“相同”或“不一定相同”)。
(2)某小组为研究培养铁皮石斛的培养基中蔗糖和光的各自作用,进行了对照实验,结果如下:
培养条件
加蔗糖
不加蔗糖
光
正常生长,分化
不生长,死亡
暗
只生长,不分化
不生长,死亡
根据以上实验结果,你得出的结论是__________________________________________
________________________________________________________________________。
解析:
(1)依据题意,铁皮石斛的有性生殖繁殖率很低,故采用无性繁殖,除题中提及到的无性繁殖方式外,还可以利用植物组织培养的方法,通过此方法利用茎尖繁殖的植株几乎无病毒,主要原因是新形成的茎尖几乎不含有病毒。
若取同一株铁皮石斛不同部位的细胞进行培养获得的愈伤组织的基因型不一定相同,如取其花粉进行培养时,所得的植株体细胞中细胞核中的基因只是正常植株体细胞中的一半。
(2)从表中提供的信息可以看出在加蔗糖的情况下,有光则能分化,无光则不能分化,说明光影响细胞的分化;不加蔗糖,不管有没有光,都不能生长,故蔗糖是植物组织培养必需的物质,它可为生长、分化提供能量等。
答案:
(1)植物组织培养 茎尖几乎无病毒 不一定相同
(2)蔗糖为生长、分化提供能量,光促进细胞分化
10.红豆杉是濒危植物,其树皮产生的紫杉醇对癌症有一定的疗效。
如图是红豆杉植株组织培养和细胞培养的流程图。
请据图回答下列问题:
(1)图中②为愈伤组织,通过B过程可最终产生新的植株,通过C过程可产生大量细胞,则图中A、B、C分别表示的过程为________________。
其中B过程的实质是________________。
(2)对⑤的培养一般要采用________培养基,且要不断通入无菌空气并进行搅拌,其目的是________________________________________________________________________
_________________
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- 学年高中生物 第二章 克隆技术 第一节 什么是克隆 学年 高中生物 第二 什么是 克隆