生物工程概论复习题.docx

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生物工程概论复习题

第二章《基因工程》复习题

一、选择题

1.限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是（D）

A修复自身的遗传缺陷B促进自身的基因重组

C强化自身的核酸代谢D提高自身的防御能力

2.生物工程的上游技术是（D）

A基因工程及分离工程B基因工程及发酵工程

C基因工程及细胞工程D基因工程及蛋白质工程

3.基因工程操作的三大基本元件是:

（I供体II受体III载体IV抗体V配体）（A）

A.I+II+IIIB.I+III+IVC.II+III+IV

D.II+IV+V

4.多聚接头（Polylinker）指的是（A）

A.含有多种限制性内切酶识别及切割顺序的人工DNA片段

B.含有多种复制起始区的人工DNA片段

C.含有多种SD顺序的人工DNA片段

D.含有多种启动基因的人工DNA片段

5.下列五个DNA片段中含有回文结构的是（D）

A.GAAACTGCTTTGACB.GAAACTGGAAACTG

C.GAAACTGGTCAAAGD.GAAACTGCAGTTTC

6.若将含有5'末端4碱基突出的外源DNA片段插入到含有3'末端4碱基突出的载体质粒上，又必须保证连接区域的碱基对数目既不增加也不减少，则需用的工具酶是（D）

IT4-DNA聚合酶IIKlenowIIIT4-DNA连接酶IV碱性磷酸单酯酶

A.IIIB.I+IIIC.II+III

D.I+II+III

7.下列有关连接反应的叙述，错误的是（A）

A.连接反应的最佳温度为37℃

B.连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%

C.连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mM

D.连接酶通常应过量2-5倍

8.T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是（D）

A.2'-OH和5'–PB.2'-OH和3'-P

C.3'-OH和5'–PD.5'-OH和3'-P

9.载体的功能是（I运送外源基因高效进入受体细胞II为外源基因提供复制能力III为外源基因提供整合能力）（D）

A.IB.I+IIIC.II+III

D.I+II+III

10.克隆菌扩增的目的是（I增殖外源基因拷贝II表达标记基因III表达外源基因）（D）

A.I+IIB.I+IIIC.II+III

D.I+II+III

11.下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中，错误的是（C）

A.大肠杆菌－繁殖迅速B.枯草杆菌－分泌机制健全

C.链霉菌－遗传稳定D.酵母菌－表达产物具有真核性

12.考斯质粒（cosmid）是一种（B）

A.天然质粒载体

B.由λ-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体

C.具有溶原性质的载体

D.能在受体细胞内复制并包装的载体

13.某一重组DNA（6.2kb）的载体部分有两个SmaI酶切位点。

用SmaI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的SmaI酶切位点共有（D）

A.4个B.3个C.2个D.至少2个

14.外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是（I融合基因能稳定扩增II融合蛋白能抗蛋白酶的降解III表达产物易于亲和层析分离）（D）

A.IIIB.I+IIC.I+IIID.II+III

15.提高重组率的方法包括（I加大外源DNA与载体的分子之比II载体分子除磷III连接酶过量IV延长连接反应时间）（A）

A.I+IIB.I+II+IIIC.I+III+IVD.II+III+IV

16.识别基因序列不同，但酶切后产生的粘性末端相同的一类酶为（B）

A.同工酶B.同尾酶C.同裂酶D.同位酶

17.pBR322质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件（ABD）

A.AmPr和TetrB.ori复制子C.LacZ标记D.多克隆位点

18.λ噬菌体外包装目的基因片段的大小应为（D）

A.小于λ噬菌体DNA的50%B.小于噬菌体DNA的75%

C.大于λ噬菌体DNA的105%D.为λ噬菌体DNA的75%～105%

19.DNA连接酶的功能是（AB）

A.恢复3’-OH与5’-P之间的磷酸二酯键B.恢复缺口

C.恢复裂口D.可使平末端与粘性末端连接

20.PUC质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件（ABCD）

A.AmPrB.ori复制子C.LacZ标记D.多克隆位点

21.下列属于获取目的基因的方法的是（D）

①利用mRNA反转录形成②从基因组文库中提取

③从受体细胞中提取④利用PCR技术

⑤利用DNA转录⑥人工合成

A.①②③⑤B.①②⑤⑥C.①②③④D.①②④⑥

22.的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因在基因工程中的主要作用是B

A．提高受体细胞在自然环境中的耐药性

B．有利于对目的基因是否导入进行检测

C．增加质粒分子的分子量

D．便于与外源基因连接

23.有关基因工程的叙述正确的是D

A．限制酶只在获得目的基因时才用

B．重组质粒的形成是在细胞内完成的

C．质粒都可作为运载体

D．蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料

24.哪项不是基因表达载体的组成部分（B）

A.启动子B.终止密码

C.标记基因D.目的基因

25.下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法（B）

A．基因枪法B．显微注射法

C.农杆菌转化法D．花粉管通道法

26.以下说法正确的是（C）

A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

B、质粒是基因工程中唯一的运载体

C、运载体必须具备的条件之一是：

具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接

D、基因控制的性状都能在后代表现出来

27.不属于质粒被选为基因运载体的理由是（D）

A、能复制

B、有多个限制酶切点

C、具有标记基因

D、它是环状DNA

28.有关基因工程的叙述中，错误的是（A）

A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来

B、限制性内切酶用于目的基因的获得

C、目的基因须由运载体导入受体细胞

D、人工合成目的基因不用限制性内切酶

29.有关基因工程的叙述正确的是（D）

A、限制酶只在获得目的基因时才用

B、重组质粒的形成在细胞内完成

C、质粒都可作为运载体

D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料

30.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。

在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（C）

A、人工合成目的基因

B、目的基因与运载体结合

C、将目的基因导入受体细胞

D、目的基因的检测和表达

31.下列获取目的基因的方法中需要模板链是（B）

A.从基因文库中获取目的基因

B.利用PCR技术扩增目的基因

C.反转录法

D.通过DNA合成仪利用化学方法人工合成

32.下列有关基因工程的叙述中，错误的是AC

A、DNA连接酶将粘性末端的碱基对连接起来

B、基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子

C、基因治疗主要是对有缺陷的进行修复

D、蛋白质中氨基酸序列可为合成目的基因提供资料

二、是非判断题

1.DNA连接酶是一种能催化二条DNA链之间形成磷酸二酯键的酶，因此该酶既可修复基因序列中的缺口，也可修复裂口。

（×）

2.质粒提取后，在琼脂糖电泳出现一条带时说明质粒提取纯度高，当为三条带时为纯度不高。

（×）

3、入噬菌体的插入型载体只有一个单一限制酶切点，替换型载体有2个成对的限制性酶切点。

（√）

4、原核细胞和真核细胞转录的mRNA均具有与rRNA结合的SD序列，以利于进行有效的转录。

（×）

5、cDNA文库是包含有细胞中所有mRNA，因此该文库能包含细胞所有的遗传信息。

（X）

1．基因工程可改变生物或其分子的遗传物质（√）

2．通过限制性核酸内切酶和DNA连接酶等作用，在体外将不同来源的DNA片断重新组合成新的DNA分子（重组DNA）。

（√）

3．基因的“剪刀”是限制性内切酶（√）

4．基因的“针线”是DNA连接酶（√）

5．基因的“运输工具”是载体（√）

6．基因的“剪刀”是DNA连接酶（×）

7．基因的“针线”是限制性内切酶（×）

8．将目的基因与载体连接过程是由限制性内切酶来完成。

（×）

9.将目的基因与载体连接过程是由DNA连接酶来完成。

（√）

10.通过基因工程菌可生产胰岛素、人生长激素、干扰素等蛋白质药物。

（√）

三、填空题

1、在LacI标记基因插入外源基因，经IPTG诱导，在X-gal培养基中显白色，为阳性克隆，未插入基因的克隆显蓝色，为阴性克隆。

2、理想的质粒克隆载体应具备以下基本条件，如能自主复制、一种或多种限制酶的酶切位点、筛选标记、分子量小易拷贝。

3、点突变的基因系列在碱基替换中，若为一个嘌呤换成另一个嘌呤或一个嘧啶换成另一个嘧啶者称转换，若一个嘌呤换成一个嘧啶或一个嘧啶换成一个嘌呤者称颠换。

4、基因表达的四大表达系统分别为大肠杆菌、酵母菌、哺乳动物细胞、昆虫细胞。

5、基因与载体的平末端连接方法有哪些T4连接酶连接法。

末端核苷酸转移酶加同聚物尾巴后，再用DNA连接酶进行连接；化学合成衔接物后连接DNA分子。

5、目的基因与载体连接方式有哪些1）粘性末端连接；2）平头末端连接；3）人工接头法；4）同源多聚尾连接法

6、如何利用抗性标记基因筛选阳性克隆？

抗性标记筛选；抗性基因插入失活筛选；LacZ基因失活筛选。

7、核酸操作的基本技术有哪些①核酸提取与纯化②核酸的检测与保存③核酸的凝胶电泳④核酸分子杂交

8、基因工程所需的基本条件1、用于核酸操作的工具酶；2、用于基因克隆的载体；3、用于基因转移的受体菌或细胞。

9、Klenow酶在有dNTP情况下，呈现DNA聚合酶活性，在没有dNTP情况下呈现外切酶活性。

10、利用PCR技术扩增目的基因

①概念：

PCR全称为_____聚合酶链式反应__________，是一项在生物__体外__复制____特定DNA片段___的核酸合成技术

②原理：

__DNA复制________

③条件：

_____已知基因的核苷酸序列______四种脱氧核苷酸______一对引物______、

_____DNA聚合酶____________________.前提条件：

④方式：

以_指数____方式扩增，即__2n__（n为扩增循环的次数）

⑤结果使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增

11．PCR技术扩增过程

a、DNA变性（90℃-95℃）：

双链DNA模板

在热作用下，氢键断裂，形成____单链DNA

b、复性（55℃-60℃）：

系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部__双链______。

c、延伸（70℃-75℃）：

在Taq