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规范一移液枪使用说明
规范一、移液枪使用说明
移液枪简介及使用规范
1移液枪原理
微量加样器(移液枪)最早出现于微量加样器(移液枪)最早出现于1956年,由德国生理化学研究所的科学家SchnitgerSchnitger发明。
其后,在1958年德国EppendorfEppendorf公司开始生产按钮式微量加样器,成为世界上第一家生产微量加样器的公司。
加样的物理学原理有下面两种:
①使用空气垫(又称活塞冲程)加样;②使用无空气垫的活塞正移动加样。
上述两种不同原理的微量加样器有其不同的特定应用范围。
活塞冲程(空气垫)加样器可很方便地用于固定或可调体积液体的加样,加样体积的范围在小于1ul至l0ml之间。
加样器中的空气垫的作用是将吸于塑料吸头内的液体样本与加样器内的活塞分隔开来,空气垫通过加样器活塞的弹簧样运动而移动,进而带动吸头中的液体,死体积和移液吸头中高度的增加决定了加样中这种空气垫的膨胀程度。
因此,活塞移动的体积必须比所希望吸取的体积要大约2%~4%,温度、气压和空气湿度的影响必须通过对空气垫加样器进行结构上的改良而降低,使得在正常情况下不至于影响加样的准确度。
一次性吸头是本加样系统的一个重要组成部分,其形状、材料特性及与加样器的吻合程度均对加样的准确度有很大的影响。
以活塞正移动为原理的加样器和分配器与空气垫加样器所受物理因素的影响不同,因此,在空气垫加样器难以应用的情况下,活塞正移动加样器可以应用,如具有高蒸汽压的、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm3的液体;又如在临床聚合酶链反应(PCR)测定中,为防止气溶胶的产生,最好使用活塞正移动加样器。
活塞正移动加样器的吸头与空气垫加样器吸头有所不同,其内含一个可与加样器的活塞耦合的活塞,这种吸头一般由生产活塞正移动加样器的厂家配套生产,不能使用通常的吸头或不同厂家的吸头。
2移液枪品牌
1.Eppendorf(德国艾本德):
世界上第一支微量加样器的诞生地。
2.Glison(法国吉尔森):
著名的法国移液器生产商。
3.Mettler-Toledo:
德国著名的移液器、精密
3.2.3注意事项
错误操作:
在将枪头套上移液枪时,很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下。
这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住,严重的情况会将白套筒折断。
正确操作:
将移液器垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。
如果是多道(如8道或12道)移液枪,则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头,然后倾斜地插入,往前后方向摇动即可卡紧。
枪头卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
3.3设定容量
1、移液器要在规定的容量内使用,切勿超量程使用,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液器。
2、调整容量时,如果从大到小时,可以直接调到想要的容量;如果从小到大时,一定要调超三分之一圈,然后再调回来,这样做可以使弹簧完全放开,而且移液器总是在顺时针运转可以延长移液器的使用寿命。
3.4预洗
在我们安装了新的吸头或增大了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次,这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使整个移液过程具有极高的重现性。
其次,机溶剂和高挥发液体,会在白套筒室内形成负压,从而产生漏液的情况,这时就需要我们预洗四到六次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。
3.5吸液
1.连接恰当的吸嘴;
2.按下控制钮至第一档;
.3.将移液器吸嘴垂直进入液面下1--6mm(视移液器容量大小而定);0.1--10ul容量的移液器进入液面下1--2mm;2--200ul容量的移液器进入液面下2--3mm;1--5ml容量的移液器进入液面下3--6mm。
4.平稳松开按钮,切记不能过快。
移液之前,要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。
吸取液体时,移液器保持竖直状态。
5.移液器移出液面前略等1--3秒;1000ul以下停顿1秒;5--10ml停顿2--3秒
6.缓慢取出吸嘴,确保吸嘴外壁无液体。
3.4.2排液
1.将吸嘴以一定角度抵住容量内壁;
2.缓慢将控制钮按至第一档并等待约1-3秒;
3.将控制钮按至第二档过程中,吸嘴将剩余液体排净;
4.慢放控制钮;
5.按压弹射键弹射出吸嘴。
4移液枪的养护及注意事项
1.当移液器吸嘴有液体时切勿将移液器水平或倒置放置,以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞。
2.移液器使用完毕后,把移液器量程调至最大值,且将移液器垂直放置在移液器架上。
3.如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物。
4.平时检查是否漏液的方法:
吸液后在液体中停1--3秒观察吸头内液面是否下降;如果液面下降首先检查吸头是否有问题,如有问题更换吸头,更换吸头后液面仍下降说明活塞组件有问题,应找专业维修人员修理。
5.需要高温消毒的移液器应首先查阅所使用的移液器是否适合高温消毒后再行处理。
6.吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
7.吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,第二次吸取时的体积会大于第一次的体积。
8.卸掉的吸头一定不能和新吸头混放,以免产生交叉污染。
5移液枪的校准
校准应在无通风的房间,移液器和空气温度在20℃-25℃之间,相对湿度在55%以上。
特别是当移液量在50ul以下,空气湿度应越高越好,以减少蒸发损失的影响。
在万分之一级别天平上放置一个小三角烧瓶,用待标定的移液器吸取蒸馏水(隔夜存放或超声15min)加入小三角烧瓶内底部,每次称重后计量,去皮重后再加蒸馏水,连续加蒸馏水
10次。
加蒸馏水的量根据待标定的移液器不同规格而不同,见下表。
10次标定称量在所要求的重量范围之内为合格;不合格移液器需要进行调整。
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