ABI Veriti 梯度PCR仪使用说明.docx
- 文档编号:28679857
- 上传时间:2023-07-19
- 格式:DOCX
- 页数:16
- 大小:563.04KB
ABI Veriti 梯度PCR仪使用说明.docx
《ABI Veriti 梯度PCR仪使用说明.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《ABI Veriti 梯度PCR仪使用说明.docx(16页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
ABIVeriti梯度PCR仪使用说明
ABIVeriti梯度PCR仪使用说明
哈尔滨德远科技开发有限公司
操作步骤:
1、打开PCR仪的热盖,插入0.2ml的样品管。
盖好热盖。
2、打开PCR仪的电源,仪器程序开始初始化,需等待几分钟。
3、初始化完成后,显示主菜单:
4、点“Browse/NewMethods”,进入PCR程序列表:
5、可以直接点一个PCR程序,选择“StartRun”运行;点右边的
符号,可以选择不同的文件夹。
如要新建一个PCR程序,点“New”,出现PCR程序:
6、添加一段程序:
点中上方的“Stage”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一段新的程序。
7、修改循环数、温度、时间:
点中循环次数、温度或时间位置,下方出现数字键。
依次点数字键,出现合适数字后,点“Done”确定。
8、增加一个步骤:
点“Step”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一个新的步骤。
9、删除一个步骤:
点“Step”位置,在点“Delete”,软件将该步骤删除。
10、建立梯度模式:
1)点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下
2)点“VeriFlexstep”,出现梯度创建窗口:
输入6个梯度温度,温度下方的“1-2”是指对应的1、2两行加热孔,全部输好后,点“Done”确定。
注意:
相邻的两个梯度温度之差最大不能超过5℃!
11、建立渐变模式:
1)点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下
2)点“AutoDelta”,出现渐变模式创建窗口。
点“StaringCycle”,输入起始循环数;点“DeltaTemperature”,输入温度变化值;点“DeltaTime”,输入时间变化值。
渐变模式适用于touchdownPCR,可以提高PCR反应的特异性。
例:
输入起始循环数为2,温度变化值为+0.5℃,时间变化值为+5s,则表示从第2个循环开始,每循环一次升温0.5℃,时间增加5s。
12、增加暂停步骤:
1)点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项如下
3)点“Pause”,出现如下窗口。
输入暂停的起始位置,暂停间隔和暂停时间,点“Done”确定。
上图表示每隔10个循环暂停10s,在10个循环的第1个循环之前暂停。
13、编辑PCR程序完成后,点“Save”保存。
点“RunMethod”,输入PCR程序名称;点
,选择保存PCR程序的文件夹(如果要保存在USB文件夹中,需要先插U盘)。
再输入反应体积和热盖温度(这两项在运行程序时可以修改)。
点“SaveδExit”确定。
14、回到PCR程序列表界面,选择新建的PCR程序。
15、点“StartRun”,出现运行参数设置窗口
输入反应体积和热盖温度,点“StartRunNow”开始运行PCR程序。
16、仪器运行选中的PCR程序,显示运行监视窗口。
A-运行状态栏,显示运行温度和剩余时间
B-加热警示标记C-阶段指示
D-步骤温度E-步骤时间F-步骤指示
C-状态报告,显示日期、时间和仪器状态
D-延伸箭头,点箭头可以显示更多的步骤
16、暂停运行:
点“PauseRun”,仪器暂停,出现暂停选项栏
“RemainingTime”显示暂停剩余时间,“ElapseTime”显示已暂停时间。
如果需要修改暂停时间,点
,输入时间值,点“Done”确定;点“ResumeRun”,结束暂停,继续运行PCR程序。
17、终止运行:
点“Stop”可以终止整个PCR程序。
18、反应报告:
PCR程序结束后,仪器会自动生成反应报告,显示当次反应的各项指数。
该报告可以保存和打印。
19、PCR反应结束后,打开热盖,取出样品,关闭仪器电源。
并开盖放置,使热盖和加热模块正常降温。
应用软件使用
一、使用9700模式运行PCR程序
Veriti和9700具有不同的升降温控制模式,但是在Veriti中可以通过模式转换,使仪器运行9700的升降温模式。
对于已在9700上摸索好的PCR程序,可以直接在Veriti上运行,不用再修改反应条件。
1、在主菜单,点“ToolsManu”,
2、点“ConvertaMethod”,
3、选中“9700MaxMode”,点
箭头
输入9700上的PCR反应条件,设定PCR程序,点
箭头
4、在保存程序窗口,输入名称,选择文件夹保存程序。
5、回到PCR程序列表界面,选择新建的9700模式PCR程序,运行程序。
二、Tm值计算
1、在主菜单,点“ToolsManu”,
2、点“CalculateTm”
3、输入盐浓度和引物浓度,在“Primer1Sequence”和“Primer2Sequence”分别输入引物的序列,再点“Calculate”,软件计算显示Primer1和Primer2的Tm值。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- ABI Veriti 梯度PCR仪使用说明 梯度 PCR 使用说明