微生物学实验教案.docx
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微生物学实验教案
微生物实验教案
实验一显微镜油镜的使用和细菌形态的观察
一、实验目的
以染色玻片为例,熟练掌握显微镜油镜的使用方法。
二、实验原理
1显微镜油镜使用的原理
(1)光学部分:
接目镜、接物镜、照明装置(聚光镜、虹彩光圈、反光镜等)。
它使检视物放大,造成物象。
(2)机械部分:
镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转
移器、粗调节器、细调节器等部件。
它起着支持、调节、固定等作用。
2显微镜的放大倍数和分辨率
(1)放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数
(2)显微镜的分辨率:
表示显微镜辨析物体(两端)两点之间距离的能力,可用公式表示为:
D=λ/2n·sin(
α/2)
式中D:
物镜分辨出物体两点间的最短距离。
λ:
可见光的波长(平均0.55μm)
n:
物镜和被检标本间介质的折射率。
a:
镜口角(即入射角)。
3油镜使用的原理
油镜,即油浸接物镜。
当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时,由于空气与玻片的密度不同,使光线受到曲折,发生散射,降低了视野的照明度。
若中间的介质是一层油(其折射率与玻片的相近),则几乎不发生折射,增加了视野的进光量,从而使物象更加清晰。
三、实验材料
1显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、载玻片、盖玻片、接种环、镊子、酒精灯、火柴、玻璃铅笔、蒸馏水等。
2枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的玻片染色标本。
四、实验方法与步骤
(1)用前检查:
零件是否齐全,镜头是否清洁。
(2)调节光亮度。
(3)低倍镜观察:
先粗调再微调至物象清晰。
(4)转入中倍、高倍观察,每一不只需调微调旋纽即可看到清晰的物象。
(5)油镜观察:
高倍镜下找到清晰的物象后,旋转转换器,在标本中央滴一滴香柏油,使油镜镜头浸入香柏油中,细调至看清物象为止。
(6)绘出所观察到的细菌形态图像。
(7)、换片:
另换新片观察,必须从(3)步开始操作。
(8)、用后复原:
观察完毕,上悬镜筒,先用擦镜纸擦去油镜头上的香柏油,然后再用
擦镜纸沾取少量二甲苯擦去残留的油,最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯,后将镜体全部复原。
五、实验报告
油镜使用的原理绘制细菌形态六、思考题
1油镜与普通物镜在使用方法上有何不同?
应特别注意些什么?
2使用油镜时,为什么必须用镜头油?
七、实验注意事项
1不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。
2镜面只能用擦镜纸擦,不能用手指或粗布,以保证光洁度。
3观察标本时,必须依次用低、中、高倍镜,最后用油镜。
当目视接目镜时,特别在使用油镜时,切不可使用粗调节器,以免压碎玻片或损伤镜面。
4观察时,两眼睁开,养成两眼能够轮换观察的习惯,以免眼睛疲劳,并且能够在左眼观察时,右眼注视绘图。
5拿显微镜时,一定要右手拿镜臂,左手托镜座,不可单手拿,更不可倾斜拿。
6显微镜应存放在阴凉干燥处,以免镜片滋生霉菌而腐蚀镜片。
八、教学反馈
实验二细菌的简单染色
一、实验目的
熟练掌握显微镜油镜的使用方法。
学习染色的基本技术,二、实验原理
简单染色的原理
大多数微生物细胞质是带负电荷,简单染色时采用已知的、带正电荷的碱性染料。
染料适用于热固定的涂片,染料与菌体细胞质黏附使菌体着色。
经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明对比。
三、实验材料
1显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、载玻片、盖玻片、接种环、镊子、酒精灯、火柴、玻璃铅笔、蒸馏水等。
2、培养12-18h的枯草芽孢杆菌和大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌。
3、简单染色液(美蓝染色液、黑色素液或炭素墨水)
四、实验方法与步骤
1、活菌制片观察
取一张干净的载玻片,在其中央滴上一滴干净的蒸馏水,取培养
12-18h
的枯草芽孢杆
菌一小环,在水滴上反复涂抹至菌体充分分散,盖上盖玻片,
用吸水纸吸去多余的水分,按
照油镜的使用步骤,观察草芽孢杆菌形态,边观察边绘图。
2、简单染色
(1)涂片:
取两块干净的载玻片,各滴一小滴生理盐水于载玻片中央,用无菌操作分别
挑取金黄色葡萄球菌和大肠杆菌于二载玻片的水滴中(每一种菌制一片),调匀并涂成薄膜。
注意滴生理盐水时不宜过多,涂片必须均匀。
(2)干燥:
自然气干或酒精灯高处微微加热。
(3)固定:
于火焰上通过2—3次。
(4)染色:
在整个涂面上滴加齐氏石炭酸复红,染色1分钟。
(5)水洗:
倾去染液,用自来水细流冲洗至流下的水中无染料颜色为止。
(6)干燥:
空气中自然干燥或在酒精灯高处微微加热。
(7)镜检:
在油镜下观察细菌形态。
五、实验报告
油镜使用的原理绘制细菌形态
六、思考题
1镜检标本时,为什么先用低倍镜观察,而不是直接用高倍镜或油镜观察?
2根据实验体会,你认为制备染色标本时,应注意哪些事项?
七、教学反馈
实验三细菌的革兰氏染色
一、实验目的
1掌握革兰氏染色。
2了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。
二、实验原理
1革兰氏染色的原理
革兰氏阳性菌的细胞壁主要有肽聚糖形成的网状结构组成,在染色过程中,当用95%乙
醇处理时,由于脱水而引起网状结构中的孔径变小,细胞壁的通透性降低,使结晶紫-碘复
合物被保留在细胞壁内而不易脱色,因此呈蓝紫色。
革兰氏阴性菌的细胞壁中肽聚糖含量低,
脂类物质含量高,当用乙醇处理时,脂类物质溶解,细胞壁的通透性增加,使结晶紫-碘复合物容易被乙醇抽提出来而脱色,然后又被染上了复染剂的颜色,因此呈现红色。
三、实验材料
1大肠杆菌24h的斜面培养物。
2葡萄球菌24h的斜面培养物。
4革兰氏染色液(结晶紫染液、卢戈氏碘液、95%乙醇、石碳酸复红)
5载玻片、盖玻片、接种环、镊子、酒精灯、火柴、玻璃铅笔、蒸馏水等。
6显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸等。
四、实验方法和步骤
附表1细菌染色法分类
附表2微生物染色常用染料
A酸性染料:
如酸性复红、刚果红、伊红、藻红、苯胺黑等。
B碱性染料:
一般有碱性复红、中性红、孔雀绿、番红、结晶紫、美兰、甲基紫等,细菌易被碱性染料染色。
C中性(复合)染料:
如伊红、美兰等,Wright染料和Gimsa染料等(常用于细胞核染色)。
D单纯染色:
这类染料物,不溶于水,但溶于脂肪溶剂中,如苏丹类(Sudanb)的染料
2革兰氏染色
(1)涂片。
(2)初染:
在做好的涂面上滴加草酸铵结晶紫染液,染1分钟,倾去染液,流水冲洗
至无紫色。
(3)媒染:
先用新配的卢哥氏碘液冲去残水,而后用其覆盖涂面1分钟,后水洗。
(4)脱色:
除去残水后,滴加95%酒精进行脱色约30秒,后立即用流水冲洗。
(5)复染:
滴加番红染色液,染1分钟,水洗后用吸水纸吸干。
(6)镜检:
观察染色结果。
五、实验报告
1革兰氏染色的基本原理和意义
2革兰氏染色成败的关键六、思考题
1根据实验体会,你认为制备染色标本时,应注意哪些事项?
2制片为什么要完全干燥后才能用油镜观察?
3做革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚?
其染色成败的关键一步是什么?
4当你对一株未知菌进行革兰氏染色时,怎样能确证你的染色技术操作正确,结果可靠?
七、教学反馈
实验四培养基的配制
一、实验目的
1学习和掌握配制培养基的一般方法和步骤
2学会实验室灭菌锅的使用方法二、实验材料
1
牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖、孟加拉红、链霉素、
1mol/LNaOH、
1mol/LHCl、KNO3、NaCl、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、FeSO4.·7H2O。
2
试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、牛角匙、
pH试纸、棉花、牛皮纸、
记号笔、线绳、纱布。
3灭菌锅
三、实验方法
(一)牛肉膏蛋白胨培养基的配制
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
其配方如
下:
牛肉膏3g,蛋白胨10g.NaCl5g,琼脂15-20g,水1000mL,pH7.4-7.6。
1称药品:
按实际用量计算后,按配方称取各种药品放入大烧杯中。
牛肉膏可放在
小烧杯或表面皿中称量,用热水溶解后倒入大烧杯;也可放在称量纸上称量,随后放人热水中,牛肉膏便与称量纸分离,立即取出纸片。
蛋白胨极易吸潮,故称量时要迅速。
2加热溶解:
在烧杯中加入少于所需要的水量,然后放在石棉网上,小火加热,并
用玻棒搅拌,待药品完全溶解后再补充水分至所需量。
若配制固体培养基,则将称好的琼脂放入已溶解的药品中,再加热融化,此过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底或
溢出,最后补足所失的水分。
3调pH:
检测培养基的pH,若pH偏酸,可滴加1滴1mol/LNaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸检测,直至达到所需pH范围。
若偏碱,则用1mol/LHCl进行调节。
pH的调节通常放在加琼脂前。
应注意pH值不要调过头,以免回调而影响培养基内各离子的浓度。
4过滤:
液体培养基可用滤纸过滤,固体培养基可用4层纱布趁热过滤,以利结果
的观察。
5分装:
按实验要求,可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免培养基沾在管口或瓶口上面造成污染。
分装量:
固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面。
分装入三角瓶内
以不超过其容积一半为宜。
半固体培养基以试管高度的
1/4
为宜,灭菌后垂直待凝。
6加棉塞:
试管口和三角瓶口塞上用普通棉花
(非脱脂棉
)制作的棉塞。
棉塞的形状、
大小和松紧度要合适,四周紧贴管壁,不留缝隙,才能起到防止杂菌侵入和有利通汽
的作用。
要使棉塞总长约3/5塞人试管口或瓶口内,以防棉塞脱落。
有些微生物需
要更好的通气,则可用8层纱布制成通气塞。
有时也可用试管帽或塑料塞代替棉塞。
7包扎:
加塞后,将三角瓶的棉塞外包一层牛皮纸或双层报纸,以防灭菌时冷凝水
沾湿棉塞。
若培养基分装于试管中,则应先把试管扎成捆后,再于棉塞外包一层牛皮纸。
然后用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
8灭菌:
将上述培养基于121.3℃湿热灭菌20min。
如因特殊情况不能及时灭菌,则应放人冰箱内暂存。
9摆斜面:
灭菌后,如制斜面,则需趁热将试管口端搁在一根长木条上,并调整斜
度,使斜度的长度不超过试管总长度的1/2。
10无菌检查:
将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24-48h,无菌生长即可使用。
或储存于冰箱清洁的橱内,备用。
四、实验结果和报告
记录本实验配制培养第的名称、数量,并图解说明其配制过程,指明要点。
五、问题和思考
1
配制培养基有哪几个步骤?
在操作过程中应注意些什么问题
?
为什么?
2
培养基配制完成后,为什么必须立即灭菌
?
若不能及时灭菌应如何处理?
如何进行
无菌检查,
3试设计实验对饮料进行无菌检查。
六、演示
1培养基的分装方法。
2试管斜面的搁置方法
七、注意事项
称药品用的牛角匙不要混用,称完药品应及时盖紧瓶盖。
调PH时要小心操作,
避免回调。
不同培养基各有配制特点,要注意具体操作。
八、教学反馈
实验五土壤的稀释、分离、纯化及无菌操作技术
一、实验目的和内容
1学习从上壤中分离微生物的方法,学习无菌操作技术。
2用稀释法分离细菌、放线茵和霉菌。
3用平板划线法分离微生物。
4学习平板接种等无菌操作技术。
二、实验材料
1金黄色葡萄球菌和普通变形菌斜面菌种。
2
已灭菌的牛肉膏、高氏
1号、土豆蔗糖固体培养基各
1瓶。
3
无菌培养皿12
套、无菌EP管10支、土壤样品、天平、称量纸、药匙、试管架、
记号笔、涂布器、1000ul
移液器、200ul移液器、20ul
移液器、1000ul枪头、200ul
枪头、20ul枪头。
4
无菌水(49.5mL、带玻璃珠)1瓶、80%乳酸、10%酚液、95%乙醇。
三、实验方法
(一)土壤稀释分离
1
取土壤:
取表层以下
5-10ml处的土样.放入灭菌的袋中备用,或放在
4℃冰箱
中暂存。
2
制备稀释液
(1)制备土壤悬液:
称土样0.5g,迅速倒人带玻璃珠的无菌水瓶中,
振荡5-10min,
使土壤充分打散,即成为
10-2的土壤悬液。
(2)梯度稀释:
用移液器吸10-2的土壤悬液100ul,放入装有900ul无菌水的EP管
中,上下颠倒数次,即为10-3的稀释液,如此重复,可依次制成10-3-10-8的稀释液。
注意:
每一个稀释度换用一支枪头。
(二)平板划线分离微生物
1倒平板:
按无菌操作要求,在火焰旁操作,取融化并冷却至不烫手的固体培养基
(约50℃),倒入无菌培养皿中,倒量以铺满皿底为限,平放桌上待其充分凝固,备
用。
2划线分离:
使用接种环,从待纯化的菌落或待分离的斜面菌种中沾取少量菌样,在相应培养基平板中划线分离,划线的方法多样,目的是获得单个菌落。
3培养:
方法同“土壤稀释分离”
(三)平板接种培养
1混合平板培养法将无菌平板编上10-7、10-8、10-9号码,每一号码设置三个
重复,用无菌吸管按无菌操作要求吸取
10-9
稀释液各
1ml
放入编号
10-9
的3个平
板中,同法吸取
10-8
稀释液各
lml
放入编号
10-8
的3个平板中,再吸取
10-7
稀释
液各
lml
放入编号
10-7
的3个平板中(由低浓度向高浓度时,吸管可不必更换)
。
然后在
9个平板中分别倒入已融化并冷却至
45—50℃的细菌培养基
(图22-2)
,轻轻
转动平板,使菌液与培养基混合均匀,冷疑后倒置,适温培养。
至长出菌落后即可
计数。
2涂抹平板计数法涂抹平板计数法与混合法基本相同,
所不同的是先将培养基熔
化后趁热倒入无菌平板中,待凝固后编号,然后用无菌吸管吸取
0.1ml菌液对号接
种在不同稀释度编号的琼脂平板上(每个编号设三个重复)
。
再用无菌刮铲将菌液在
平板上涂抹均匀(图22-3),每个稀释度用一个灭菌刮铲,更换稀释度时需将刮铲灼
烧灭菌。
在由低浓度向高浓度涂抹时,也可以不更换刮铲。
将涂抹好的平板平放于
桌上20—30min,使菌液渗透入培养基内,然后将平板倒转,保温培养,至长出菌落
后即可计数。
四、实验结果和报告
1记录土壤稀释分离结果,并计算出每克土壤中的细菌、放线曲和霉菌的数量。
计算方法:
选择长出菌落数30-300之间的培养皿进行计数,技以下公式:
总个数/g=同一稀释度几次重复的菌落平均数x稀释倍数
2分别记录平板划线、平板接种的结果,并自我评价。
五、问题和思考
1在测定土壤微生物含量中,除混菌法外还可用什么方法?
2试设计实验,从土壤中分离出酵母菌,并进行计数。
3试设计实验,从水或者空气中分离微生物,并进行计数。
六、注意事项
1一般土壤中,细菌最多,放线菌及霉菌次之,而酵母菌主要见于果园及菜园土壤中,故从土壤中分离细菌时,要取较高的稀释度,否则菌落连成一片不能计数。
2在土壤稀释分离操作中,每稀释10倍,最好更换一次移液管,使计数准确。
3放线菌的培养时间较长,故制平板的培养基用量可适当增多。
六、教学反馈
实验六水中细菌总数和大肠菌群的检测
一、实验目的
(1)了解和学习水中细菌总数和大肠菌群的测定原理和测定意义。
(2)学习和掌握用稀释平板计数法测定水中细菌总数的方法。
(3)学习和掌握水中大肠菌群的检测方法。
二、实验原理
水是微生物广泛分布的天然环境。
各种天然水中常含有一定数量的微生物。
水中微
生物的主要来源有:
水中的水生性微生物(如光合藻类)、来自土壤径流、降雨的外来菌群和
来自下水道的污染物和人畜的排泄物等。
水中的病原菌主要来源于人和动物的传染性排泄
物。
水的微生物学的检验,特别是肠道细菌的检验,在保证饮水安全和控制传染病上有
着重要意义,同时也是评价水质状况的重要指标。
国家饮用水标准规定,饮用水中大肠菌群
数每升中不超过3个,细菌总数每mL不超过100个。
所谓细菌总数是指1mL或1g检样中所含细菌菌落的总数,所用的方法是稀释平板计
数法,由于计算的是平板上形成的菌落(colony-formingunit,cfu)数,故其单位应是
cfu/g(mL)。
它反映的是检样中活菌的数量。
所谓大肠菌群,是指在37℃24h内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革兰氏阴性
无芽胞杆菌的总称,主要由肠杆菌科中四个属内的细菌组成,即埃希氏杆菌属、柠檬酸杆菌
属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。
水的大肠菌群数是指100mL水检样内含有的大肠菌群实际数值,以大肠菌群最近似
数(MPN)表示。
在正常情况下,肠道中主要有大肠菌群、粪链球菌和厌氧芽胞杆菌等多种细菌。
这些细菌都可随人畜排泄物进入水源,由于大肠菌群在肠道内数量最多,所以,水源中
大肠菌群的数量,是直接反映水源被人畜排泄物污染的一项重要指标。
目前,国际上已公认大肠菌群的存在是粪便污染的指标。
因而对饮用水必须进行大肠菌群的检查。
水中大肠菌群的检验方法,常用多管发酵法和滤膜法。
多管发酵法可运用于各种水样的检验,但操作繁琐,需要时间长。
滤膜法仅适用于自来水和深井水,操作简单、快速,但不适用于杂质较多、易于阻塞滤孔的水样。
多管发酵法包括初(步)发酵实验、平板分离和复发酵实验三个部分。
1、初(步)发酵实验:
发酵管内装有乳糖蛋白胨液体培养基,并倒置一德汉氏小套管,乳糖能起选择作用,因为很多细菌不能发酵乳糖,而大肠菌群能发酵乳糖而产酸产气,为便于观察细菌的产酸情况,
培养基内加有溴甲酚紫作为pH指示剂,细菌产酸后,培养基即由原来的紫色变为黄色,溴甲酚紫还有抑制其他细菌如芽孢细菌生长的作用。
水样接种于发酵管内,37℃下培养,24小时内小套管中有气体形成,并且培养基混浊,颜色改变,说明水中存在大肠菌群为阳性结果,但也有个别其他类型的细菌在此条件下也可能产气;此外产酸不产气的也不能完全说明是阴性结果,在少量的情况下,也可能延迟到
48小时后才产气,此时应视为可疑结果,因此,以上两种结果均需继续做下面两部分实验,才能确定是否是大肠菌群。
48小时后仍产气的阴性结果。
2、平板分离:
平板培养基一般使用复红亚硫酸钠琼脂(远藤氏培养基,Endo’smedium)或尹红美蓝琼脂(eosinmethyleneblueagar,EMBagar),前者含有碱性复红染料,在此作为指示剂,它可被培养基中亚硫酸钠脱色,使培养基呈淡粉红色,大肠菌群发酵乳糖后产生的酸和乙醛即和复红反应,形成深红色复合物,使大肠菌群菌落变为带金属光泽的深红色。
亚硫酸钠还可抑制其他杂菌的生长,尹红美蓝琼脂平板含有与美蓝染料,在此亦作为指示剂,大肠菌群发酵乳糖造成酸性环境时,该两种染料即结合成复合物,使大肠菌群产生与远藤氏培养基上相似的、带核心的、有金属光泽的深紫色(龙胆紫的紫色)菌落。
初发酵管24小时内产酸产气和48小时产酸产气的均需在以上平板上划线分离菌落。
3、复发酵实验:
以上大肠菌群阳性菌落,经涂片染色为革兰氏染色阴性无芽孢杆菌者,通过此实验再进
一步证实。
原理与初发酵实验相同,经24小时培养产酸又产气的,最后确定为大肠菌群阳性结果。
三、实验器材
1菌落总数的测定:
1)培养基:
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,无菌生理盐水。
2)器材:
灭菌三角瓶,灭菌的具塞三角瓶,灭菌平皿,灭菌吸管,灭菌试管等。
2大肠菌群的测定;
(1)、培养基:
乳糖蛋白胨发酵管(内有倒置小套管),三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵管(瓶)(内
有倒置小套管),尹红美蓝琼脂平板;
2)、材料:
无菌水、载玻片、灭菌带玻璃塞空瓶、无菌吸管、无菌试管等。
四、实验方法
(1)水样的采集:
1)自来水:
先将自来水龙头用酒精灯火焰灼烧灭菌,再开放水龙头使水流5min,以
灭菌三角瓶接取水样以备分析。
2)池水、河水、湖水等地面水源水:
在距岸边5m处,取距水面10-15cm的深层水样,先将灭菌的具塞三角瓶,瓶口向下浸入水中,然后翻转过来,除去玻璃塞,水即流入瓶中,
盛满后,将瓶塞盖好,再从水中取出。
如果不能在2h内检测的,需放入冰箱中保存。
(2)细菌总数的测定:
1)水样稀释及培养:
①按无菌操作法,将水样作10倍系列稀释:
⑦根据对水样污染情况的估计,选择2-3个适宜稀释度(饮用水如自来水、深井水等,
一般选择1、1:
10两种浓度;水源水如河水等,比较清洁的可选择
三种稀释度;污染水—被选择1:
100、1:
1000、1:
10000三种稀释度
1:
10、1:
100、1:
1000
),吸取1mL稀释液于灭
菌平皿内,每个稀释度作
3个重复。
③将熔化后保温度
45℃的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基倒平皿,
每皿约
15mL,并趁热转
动平皿混合均匀。
④待琼脂凝固后,将平皿倒置于37℃培养箱内培养24±1h后取出,计算平皿内菌
落数目,乘以稀释倍数,即得1mL水样中所含的细菌菌落总数。
2)计算方法:
作平板计数时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。
在记下各平板的
菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落数。
3)计数的报告:
①平板菌落数的选择:
选取菌落数在30-300之间的平板作为菌落总数测定标准。
一个稀释度使用两个重复
时,应选取两个平板的平均数。
如果一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以
无片状菌落生长的平板计数作为该稀释度的菌数。
若片状菌落不到平板的一半,而其余一半
中菌落分布又很均匀,可计算半个平板后乘2以代表整个平板的菌落数。
②稀释度的选择:
a.应选择平均菌落数在30-300之间的稀释度,乘以该稀释倍数报告之(表1例1)。
b.若有两个稀释度,其生长的菌落数均在30-300之间,则视二者之比如何来决定。
若其比值小于2,应报告其平均数;若比值大于2,则报告其中较小的数字(l例2、例3)。
c.若所有稀释度的平均菌落均大于300,则应按稀释倍数最低的平均菌落数乘以稀释倍数
报告之
(l
例4)。
d.若所有稀释度的平均菌落数均小于30、则应按稀释倍数最低的平均菌落数乘以稀释倍数
报告之(1例5)。
e.若所有稀释度均无菌落生长,则以小于
1乘以最低稀释倍数
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- 微生物学 实验 教案