bc3000plus血细胞分析仪标准操作指南sop.docx

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bc3000plus血细胞分析仪标准操作指南sop

血细胞分析仪

标准操作规程

第1章仪器简介

1.1概述

仪器全称为BC-3000Plus全自动血细胞分析仪，用于在临床和实验室定量分析血液细胞、白细胞3分群计数的体外诊断设备。

BC-3000Plus全自动血细胞分析仪主要用于定量的测量血液中19项参数和3个直方图。

1.2检测原理

BC-3000Plus测量的血样先用稀释液进行指定比例的稀释，用以测量WBC、RBC、PLT和HGB等参数。

WBC、RBC计数池的稀释标本在负压作用下，分别通过各自的计数微孔，流入管道，通过两个光电传感器，在这两个光电传感器之间的液量就是仪器分析计数的标本量。

BC-3000Plus用阻抗法测量WBC、RBC和PLT的体积分布和数目。

电极插在液体中计数微孔的两边，在计数微孔的两边周围建立了一个电场环境，根据血细胞非传导性的性质，当有细胞通过计数微孔时，将引起阻抗的变化，阻抗变化的大小与细胞体积成正比。

WBC根据体积的大小，它有多种形态，由于稀释液、溶血剂和溶血时间的不同，WBC的体积大小会发生变化。

在一定的程序控制下，显示出WBC的三分类——淋巴细胞、中间细胞（嗜酸＋嗜碱＋单核）和中性粒细胞。

被稀释的血样加入溶血剂后，红细胞溶解，释放出血红蛋白，血红蛋白与溶血剂结合形成复合物，用波长525nm的单色光在WBC计数池内测定此化合物的透过光强，用这个透过光强与空白状态的透过光强相比较，得到血红蛋白浓度（空白状态是指WBC计数池中只有稀释液的状态）。

1.3性能参数

1.3.1分析参数

白细胞计数

WBC

淋巴细胞计数

Lymph#

中间细胞计数

Mid#

中性粒细胞计数

Gran#

淋巴细胞百分比

Lymph%

中间细胞百分比

Mid%

中性粒细胞百分比

Gran%

红细胞计数

RBC

血红蛋白

HGB

平均红细胞体积

MCV

平均红细胞血红蛋白含量

MCH

平均红细胞血红蛋白浓度

MCHC

红细胞分布宽度变异系数

RDW-CV

红细胞分布宽度标准差

RDW-SD

红细胞压积

HCT

血小板计数

PLT

平均血小板体积

MPV

血小板分布宽度

PDW

血小板压积

PCT

白细胞分布直方图

WBCHistogram

红细胞分布直方图

RBCHistogram

血小板分布直方图

PLTHistogram

1.3.2性能指标

●显示范围

参数

显示范围

WBC（109/L）

0.0~9

RBC（1012/L）

0

HGB（g/L）

0~300

MCV（fL）

0.0~

PLT（109/L）

0~2999

●本底范围

参数

本底范围

WBC

≤0.3⨯109/L

RBC

⨯1012/L

HGB

≤1g/L

HCT

≤0.5%

PLT

≤10⨯109/L

●线性范围

参数

线性范围

WBC（109/L）

0.0~99.9

RBC（1012/L）

0

HGB（g/L）

0~300

PLT（109/L）

0~999

●重复性指标

使用中值质控物连续计数11次，取第2到第11次的计数结果计算重复性。

参数

范围

重复性（CV%）

WBC

⨯109/L

RBC

0⨯1012/L

HGB

110~180g/L

MCV

~110.0fL

PLT

150~500⨯109/L

携带污染率

参数

携带污染率

WBC

≤%

RBC

≤%

HGB

≤%

PLT

≤1%

1.4试剂

稀释液

M-30PD稀释液

冲洗液

M-30PR冲洗液

溶血剂

M-30PCFL无氰溶血剂

E-Z清洗液（酶清洗液）

M-30PEE-Z清洗液

探头清洁液

M-30PP探头清洁液

1.5采样特性

1.5.1每次分析所需样本量

全血样本（静脉血）

13μL

预稀释样本（末梢血）

20μL

1.5.2溶血剂体积

全血

0.5mL

末梢血

0.36mL

1.5.3稀释比例

WBC/HGB

RBC/PLT

全血

1:

308

1:

44872

末梢血

1:

428

1:

43355

1.6运行条件

1.6.1运行环境

1．环境应尽可能无尘、通风良好。

2．应该在15~30℃温度范围内（最适温度为25℃）操作。

3．在30%-85%的相对湿度范围内使用。

4．如果室内温度和相对湿度不合适，需对该环境进行空气调节。

5．避免将该仪器安装在温度过高或过低的地方。

6．避免安装在阳光直射或置于热源及风源附近。

8．不要靠近电刷型电机、闪烁荧光灯和经常开关的电接触性设备；

9．电源电压变动在220v+10%之内、电源频率为50Hz，有保护性接地。

10.大气压范围70kPa～106kPa

1.6.2安全性

1.一般安全性

⑴在操作、维护、保养或修理本仪器时，遵循本手册中列出的所有步骤。

⑵不要触摸仪器内部的电路。

触摸电路是危险的，有可能被电击，尤其当你的手潮湿的时候。

⑶只能使用指定的工具和配件来保养和维修。

不要使用任何代用品，而且也不要对仪器做任何改动。

⑷避免头发、衣服、铁钉等落入所有运行的部件。

2．生物安全

⑴样本、质控物、校准物、废液等有潜在生物传染性的危险。

操作者在实验室接触相关物品时，应遵守实验室安全操作规定，并穿戴好个人防护装备（如实验室防护衣，手套等）。

⑵分析仪所有的部件和表面都有潜在的传染性，在操作和维修时应采取安全防护措施。

第2章血液样本分析

本章介绍了从分析仪的开启至关闭的整个日常操作过程，着重对全血样本分析和预稀释样本分析的操作过程进行详细的说明。

血样分析的流程如下：

2.1

开机前准备和开机启动过程

图21

图22

2.2室内质控操作

见第三章室内质控。

2.3

样本分析过程

2.3.1预稀释样本的准备

图23

2.3.2全血样本的准备

图24

2.3.3计数过程

图25

2.3.4关机过程

图26

第3章室内质控

为保证分析数据的可靠，建议对BC-3000Plus系统进行每日室内质控。

操作者只有熟悉质控的理论并掌握实际操作方法，才能有效地检测影响分析结果的误差，进而加以消除。

分析仪共提供九个质控文件，以便操作者保存质控参数和结果。

每个质控文件可自动保存最多31组质控结果。

当质控运行次数大于31时，新的质控结果将从头开始覆盖旧的结果。

3.1室内质控物

3.1.1室内质控物特性及说明

●质控物名称：

BC-12质控物

●生产厂家：

Bio-RadLaboratories,Inc.

●质控品水平：

低、中、高三个水平

●保存条件及稳定性

未开封，在2～8°C的环境下，质控物在保质期内将保持稳定。

开封后，盖紧瓶盖保存在2～8°C的环境下，质控物在21天内保持稳定。

3.1.2室内质控的项目

WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、Lymph#、Lymph%、Gran#、Gran%

3.2室内质控品的正确使用和保存

1.每个工作日进行一次质控测定，包括二个不同浓度水平的质控物。

2.使用时，轻轻旋动，使其混匀。

测定完成后，迅速将质控液小瓶再次密封贮存于2°C~8°C。

3.质控品必须由常规操作人员，按常规检测标本操作程序进行检测。

3.3室内质控的实际操作（室内质控图控制限的设定）

1.在开始室内质控时，首先要设定室内质控图的中心线（均值）。

均值必须在实验室内使用自己现行的测定方法进行确定。

定值质控物的靶值只能做为确定中心线的参考。

控制限通常以标准差的倍数表示。

2.新批号的质控物应与当前使用的质控物一起进行测定。

根据3-4天内获得的至少20次质控测定结果，对数据进行离群值检验（剔除超过3s外的数据），计算出平均数，作为暂定的中心线（均值）。

控制限（标准差）由均值乘以实验室该仪器检测相近水平质控物的RCV确定。

3.以此暂定的中心线（均值）和控制限（标准差）作为新批号质控物室内质控图的中心线和控制限进行室内质控；一个月结束后，将该月的在控结果与前20个质控测定结果汇集在一起，计算累积平均数和标准差（第一个月），以此累积的平均数和标准差做为下一个月质控图的中心线（均值）和控制限（标准差）。

4.更换质控物　

　准备更换新批号的质控物时，应在"旧"批号质控物使用完之前，将新批号的质控品与"旧"批号质控品同时测定，重复上述的过程，建立新的质控图的中心线和控制限。

5.绘制质控图及记录质控结果

1）据质控物的均值和控制限绘制Levey-Jennings质控图（单一浓度水平），须分别绘制不同浓度水平的质控图。

2）对每一质控物，Y轴为浓度单位，提供x-4s到x+4s浓度范围，X轴为按次序记录的分析日期。

画出的水平线相当于x、x+2s、x+3s。

3）每个工作日将原始质控结果记录在质控图表上。

保留打印的原始质控数据。

4）每台仪器必须分别进行室内质控，确定各自的室内质控图的中心线（均值）控制限（标准差），绘制质控图并保留打印的原始质控数据。

3.4质控编辑

图32

3.5质控物分析检测

图33

3.6质控图回顾

图34

3.7

质控规则

质控规则是解释质控数据和判断控制状态的标准。

当测定值不满足规则要求的条件时，则判断违背此规则。

判断为失控，不能报告患者的测定结果。

1.常用质控规则有：

（x平均数；s：

标准差）

12s:

一个质控测定值超过x±2s，提示警告。

13s:

一个质控测定值超过x±3s，提示存在随机误差。

22s:

检查同一批内不同水平的质控物，当两个质控测定值同时超过x+2s或x-2s时，表示存在系统误差。

检验同一质控物，当本批次的测定值与前面测定值同时超过x+2s或x-2s时，表示存在系统误差。

2.质控规则的应用

操作人员在完成每日质控物检测后，应使用质控规则检验每日质控结果，判断是否在控。

3.8失控处理

3.8.1失控情况处理

操作人员发现失控后，应立即通报科室主管。

失控期间，失控项目不得发出报告，如有发出应予以追回。

尽快查明引起失控的原因，采取相应的纠正措施。

3.8.2失控原因分析及采取相应纠正措施　

⑴首先立即重测同一质控物，以查明是否人为误差或偶然误差。

若重测结果在控，则为偶然误差。

若重测结果不在允许范围，应进行下一步操作。

⑵打开一瓶新质控物，重测失控项目。

如果新开的质控物结果正常，那么原来那瓶质控物可能过期或在室温放置时间过长而变质，或者被污染。

如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。

⑶检查仪器状态，进行仪器维护，重测失控项目。

如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。

⑷检查试剂，可更换试剂以查明原因。

如果结果仍不在允许范围，则进行下一步。

⑸对失控项目重新校准后再次进行室内质控物的测定，以排除校准的问题。

若重测结果不在允许范围，应进行下一步操作。

⑹用新的校准液重新校准仪器，重测失控项目，排除校准液的原因。

⑺如果上述步骤都未能得到在控结果，那可能是仪器出现了较大故障，应与仪器厂家联系请求他们的技术支援。

2．填写失控报告单（包括违背哪一项失控规则，失控原因，采取的纠正措施）。

附表：

室内质控失控报告单

3.8.3填写失控报告

纠正完毕后，须填写失控报告，由经手人、专业组长和科主任签字，并保存失控处理记录（附表1：

室内质控失控报告单）。

3.8.4室内质控数据的管理

1．每个月的月末，应对当月的所有质控数据进行汇总和统计处理，并填写当月所有测定项目的室内质控月报表（见附表2）。

2．每个月的月末，应对室内质控数据进行周期性评价。

如果发现有显著性的变异，就要对质控图的均值、标准差进行修改，并要对质控方法重新进行设计。

3．每个月的月末，应填写该月所有测定项目的室内失控情况汇总表（见附表3）。

附表1

室内质控失控报告单

编号：

单位名称：

科室：

仪器名称及型号：

失控日期：

质控物名称：

生产厂家：

质控物批号：

批号1：

批号2：

失控质控物批号：

批号1□　　　批号2□　　　　

失控项目：

WBC□RBC□HGB□HCT□

MCV□PLT□

违背的质控规则：

1-3s□2-2s□4-1s□10-x□

失控原因：

1.质控物　□

2.试剂　□

3.校准　□

4．其它：

纠正措施：

纠正后室内质控情况：

操专业组组长：

检验科主任：

附表2

室内质控月报表

单位名称：

科室：

仪器名称及型号：

质控物名称：

厂家：

批号：

开始日期：

结止日期：

当月

累积

项目

N

均值

标准差

变异系数

N

均值

标准差

变异系数

注意：

此表中的数据为同一批号质控检测结果。

附表3

室内失控情况汇总表

单位名称：

科室：

仪器名称及型号：

年月

质控物名称：

生产厂家：

批号：

失控报告数：

项目

质控结果个数

失控次数

违背的质控规则

偏离方向

失控原因

第4章校准

本分析仪在出厂前已完成了校准。

在以下情况下，操作者仍需对分析仪进行校准：

⏹血液分析仪在投入使用前；

⏹更换了影响计数性能的部件后；

⏹运行质控时发现系统存在明显的偏差（排除仪器故障和试剂的影响因素后）；

⏹对于开展常规检测的实验室，要求半年至少进行一次仪器校准。

4.1校准物

●校准物名称：

SC-6校准物

●生产厂家：

Bio-RadLaboratories,Inc.

●校准项目：

WBC、RBC、HGB、MCV、PLT

●保存条件及稳定性

SC-6校准物的储存温度范围是2℃-8℃（35℉-46℉）。

未开瓶状态下在有效期内是稳定的，每次使用后将校准物存放于冰箱内，开瓶后的有效期为7天。

4.2校准前的准备

图41

4.3校准物的混匀

图42

4.4仪器校准程序

4.4.1使用配套校准物进行仪器校准

⏹全血模式校准

图43

⏹预稀释模式校准

图44

4.4.2使用新鲜血进行仪器校准

使用可溯源至参考方法的定值新鲜血对血液分析仪进行校准。

校准方法如下：

1．校准项目：

WBC、RBC、HGB、PLT、HCT或MCV

2．校准方法：

1）仪器精密度的检测：

取EDTA抗凝的新鲜血，重复检测10次，计算10次检测结果的均值、标准差和CV，记录于精密度检测记录表中。

确认各参数检测结果的精密度在仪器说明书要求的范围内。

2）定值新鲜血作为校准物的使用方法：

⑴所提供的校准物有2管。

⑵用其中1管校准物，连续检测11次，第1次检测结果不用，以防止携带污染，将结果记录于仪器校准记录表1。

⑶用你室检测校准物的均值与定值比较，以判别是否需要调整仪器。

①计算各参数的均值与定值相差的百分数（不计正负号），即偏差。

计算公式：

×100%，用偏差与附表中的标准进行比较。

②各参数均值与定值的差异全部等于或小于附表中的第一列数值时，仪器不需进行调整，记录偏差的数据于仪器校准记录表2即可；若各参数均值与定值的差异大于附表中的第二列数值时，需请仪器维修人员检查原因并进行处理；若各参数均值与定值的差异在附表中第一列与第二列数值之间时，需对仪器进行调整，调整方法可按说明书的要求进行。

⑷若仪器需校准，则应记录校准系数（定值除以所测校准物的均值）、仪器原有的校准系数及新的校准系数（仪器原有的系数乘以校准系数，即为新的校准系数）记录于仪器校准记录表2。

附表.仪器校准的判别标准

百分数差异

参数——————————————————

一列二列

WBC1.5%10%

RBC1.0%10%

Hb1.0%10%

%10%

MCV1.0%10%

Plt3.0%15%

⑸校准的验证

将第2管未用的校准物充分混匀，在仪器上重复检测11次。

去除第1次结果，计算第2-11次检测结果的均值，记录于仪器校准记录表3。

根据检测均值和定值再次计算偏差并记录于仪器校准记录表4。

按前述方法与附表中的数值对照。

如各参数的差异全部等于或小于第一列数值，说明校准合格。

否则，重复上述校准过程。

附表1

仪器重复性检测记录

单位名称________________________科（室）_________________________

血液分析仪名称及型号____________________实验室仪器编号____________

试剂厂家_______________________

试剂批号（稀释液）_________________________

试剂批号（溶血剂）_________________________

试剂批号（冲洗液）_________________________

检测日期_______年___月___日

检测次数

WBC

（×109/L）

RBC

（×1012/L）

HGB

（g/L）

MCV

（fl）

PLT

（×109/L）

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

均值

SD

CV（%）

重复性

要求

结论

操作者:

负责人:

附表2

仪器校准记录

单位名称________________________　科（室）______________________

血液分析仪名称及型号_________________实验室仪器编号________________

试剂厂家________________________试剂批号（稀释液）_________________________

试剂批号（溶血剂）______________试剂批号（冲洗液）_________________________

校准物厂家_____________________校准物名称_______________________

校准物批号_______________________

本次校准开始时间:

__________年____月____日____时____分

校准物检测结果

检测次数

WBC

（×109/L）

RBC

（×1012/L）

HGB

（g/L）

MCV

（fl）

PLT

（×109/L）

1

2

3

4

5

均值

SD

CV（%）

校准前校准系数

参数

WBC

RBC

HGB

MCV

PLT

系数

校准后校准系数

参数

WBC

RBC

HGB

MCV

PLT

系数

校准结果的验证

检测次数

WBC

（×109/L）

RBC

（×1012/L）

HGB

（g/L）

MCV

（fl）

PLT

（×109/L）

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

均值

SD

CV（%）

参数

WBC

RBC

HGB

MCV

PLT

偏差（%）

本次校准完成时间:

________年___月___日___时___分

校准人:

负责人:

第5章日常维护

5.1分析前检查

分析仪外部分析仪外部无灰尘和划痕，管路连接良好，打印机或者记录仪不缺纸，无漏液，无物理损伤。

安全电源连接良好，接地良好。

试剂使用指定试剂，稀释液足够，冲洗液足够，溶血剂足够，废液桶排空。

操作日期和时间正确，按键能够正常使用，LCD背景灯亮。

5.2定期维护

每天若24小时不关机，应每天进行一次“E-Z清洗液浸泡”操作（建议浸泡时间不小于40分钟）。

每三天若24小时不关机，应每三天进行一次“探头清洁液浸泡”操作。

每周若每天执行正常关机操作，应每星期进行一次“探头清洁液浸泡”操作。

5.2.1

日维护

若24小时不关机，应每天进行一次“E-Z清洗液浸泡”操作。

图51

5.2.2

每三天

若连续不关机，应每三天进行一次“探头清洁液浸泡”操作。

图52

5.2.3

每周

若每天执行正常关机操作，应每星期进行一次“探头清洁液浸泡”操作。

图53

5.3

按需维护

⏹当样本全血计数累计达300个或者样本预稀释计数累计达150个时，系统会自动提示操作者执行“探头清洁液浸泡”操作；

图54

⏹当样本全血计数累计达2000个或者样本预稀释计数累计达4000个时，系统会自动提示操作者执行“清洗拭子”操作；

图55

⏹当分析仪2周以上不用时，执行“服务”菜单中的“打包”操作，完成分析仪液