WJ现代生物科技专题知识点分类整理.docx

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WJ现代生物科技专题知识点分类整理

专题1基因工程1.1DNA重组技术的基本工具

1、基因工程的概念

⑴、按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的生物类型和生物产品。

⑵、基因工程也叫DNA重组技术。

⑶、基因工程属于分子生物学领域，是DNA分子水平的操作，是在细胞外环境进行的。

2、实施转基因操作包括哪些基本工作内容？

对DNA进行“切割”、改造、修饰、“拼接”、转化等。

3、实施转基因操作过程中至少需要哪些工具？

⑴、限制性核酸内切酶——“DNA分子手术刀”

⑵、DNA连接酶——“DNA分子缝合针”

⑶、基因进入受体细胞的载体——“DNA分子运输车”

4、什么是“限制性核酸内切酶”？

　⑴、概念：

是指能够识别DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开的酶。

可以简称“限制酶”

⑵、主要来源：

原核生物。

约有4000种。

⑶、特点：

①、主要切割外源DNA分子，对自身DNA不起作用。

②、只能能识别DNA分子的特定脱氧核苷酸序列。

③、只能在特定的部位进行切割，切割为点一般具有反向重复序列

⑷、作用实质：

催化DNA分子中特定部位的磷酸二酯键同时断开。

⑸、作用结果：

形成平末端和黏性末端。

5、DNA分子经限制酶“切割”后，片段末端有哪些形式？

（P-5图1-3）

⑴、平末端：

即末端处，DNA双链等长，碱基仍然互补配对。

⑵、黏性末端：

即末端处，DNA双链不等长，其中一条链有几个碱基没有互补配对。

⑶、EcoRⅠ、SmaⅠ两种限制酶的识别序列都是6个核苷酸。

6、什么是“DNA连接酶”？

⑴、概念：

是能够将两条DNA链同时连接起来的酶。

⑵、作用：

催化形成磷酸二酯键

⑶、作用特点：

两个DNA分子片段之间同时形成磷酸二酯键，连接成为一体。

⑷、种类：

①、E.coliDNA连接酶：

来源于大肠杆菌，只能连接具有黏性末端的DNA片段。

②、T4DNA连接酶：

来源于T4噬菌体。

既能连接具有黏性末端的DNA片段，也能连接具有平末端的DNA片段。

连接后者的效率较低。

⑸、作用实质：

恢复被限制酶破坏的磷酸二酯键。

⑹、DNA连接酶与DNA聚合酶的区别:

①、DNA连接酶能使两个DNA分子片段之间同时形成磷酸二酯键，连接成为一体。

②、DNA聚合酶只能使游离的脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键而成为DNA链。

7、什么是“基因进入受体细胞的载体”？

⑴、概念：

指能够将外源基因送入受体细胞的结构。

⑵、基因载体应具备的条件：

①、对受体细胞无害，不影响受体细胞正常的生命活动。

②、具有标记基因，便于鉴定目的基因是否进入受体细胞。

③、能自我复制，通过复制进行基因扩增，保证重组DNA的连续性。

④、具有一个或多个限制酶切割位点，便于目的基因的插入。

⑤、大小合适，便于操作。

⑶、载体种类：

细菌质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒。

其中，最为常用的是细菌质粒。

8、什么是质粒？

质粒是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外的具有自我复制能力的小型环状DNA。

9、什么是标记基因？

标记基因是质粒DNA上控制某种特殊化合物的合成的基因。

如四环素抗性基因等。

标记基因可以作为重组DNA的鉴定和选择的标志。

10、获取目的基因以及载体制作时，要用同一种限制酶进行切割。

11、天然质粒必须经过人工改建后，才能用作基因载体。

专题1基因工程1.2基因工程的基本操作程序

1、什么是目的基因？

是指基因工程操作中所需要的外源基因，主要是指编码蛋白质的结构基因。

如：

抗逆性基因、调控基因等

2、什么是基因文库？

⑴、概念：

指储存着某种生物不同基因的受体菌群。

⑵、特点：

分别储存着某种生物的不同基因。

⑶、获得方法：

将含有某种生物不同基因的DNA片段导入受体菌群中。

⑷、基因组文库：

含有某种生物全部基因的基因文库。

⑸、部分基因文库：

含有某种生物部分基因的基因文库。

cDNA文库：

指利用mRNA通过反转录获得的互补DNA片断。

⑹、构建基因文库的目的和作用：

目的：

为获取大量的目的基因做准备；作用：

大量储备同种基因。

3、基因、基因文库、目的基因之间有什么区别？

⑴、基因：

是有遗传效应的DNA片段，是控制生物形状遗传的遗传物质的功能的基本单位。

⑵、基因文库：

是储存着某种生物不同基因的受体菌群。

⑶、目的基因：

基因工程操作中所需要的外源基因。

4、原核细胞、真核细胞基因结构有什么不同？

⑴、不同点：

①、原核细胞基因结构简单，无内含子，编码区连续。

②、真核细胞基因结构复杂，有内含子，编码区不连续。

⑵、相同点：

①、基因结构中都有编码区、非编码区；②、非编码区都有调控遗传信息表达的脱氧核苷酸序列；③、编码区上游都有RNA酶结合位点（启动子）。

5、从基因文库中获取目的基因的依据是什么？

⑴、基因的脱氧核苷酸序列⑵、基因的功能⑶、基因在染色体上的位置⑷、基因的转录产物——mRNA⑸、基因的表达产物——蛋白质

6、什么是PCR技术？

⑴、概念：

PCR技术，就是聚合酶链式反应技术，就是在生物体外大量复制特定DNA片断。

⑵、条件：

已知所需要复制DNA（基因）的脱氧核苷酸序列。

⑶、过程：

热解旋，获得DNA单链（以作模板），单链与引物结合，DNA聚合酶催化，四种游离脱氧核苷酸作原料，形成子代DNA。

⑷、增长方式：

指数增长：

2n。

7、人工合成法：

适用于：

脱氧核苷酸序列已知、片段较小的基因。

8、DNA复制、PCR技术与基因克隆比较

DNA复制

PCR技术

基因克隆

场所

细胞核

生物体外

细胞内

酶

解旋酶、DNA聚合酶

Taq酶

限制酶、连接酶

载体

不需要

不需要

需要

遵循原则

碱基互补配对

碱基互补配对

碱基互补配对

结果

DNA分子

DNA分子片段

DNA分子片段

9、怎样构建基因表达载体？

⑴、用一定的限制酶切割质粒，使之出现一个黏性末端切口。

⑵、用同种限制酶切割目的基因，产生相同的黏性末端。

⑶、将目的基因片段插入质粒切口，加入适量DNA连接酶，使目的基因与质粒形成重组质粒。

⑷、基因表达载体的构成：

目的基因+启动子+终止子+标记基因

10、什么是启动子？

⑴、位置：

位于基因首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位。

⑵、结构：

特殊DNA片段⑶、作用：

启动基因的转录

11、什么是终止子？

⑴、位置：

位于基因尾端⑵、结构：

特殊DNA片段⑶、作用：

终止基因的转录

12、什么是转化？

⑴、转化是指目的基因进入受体细胞内并维持稳定和表达的过程。

⑵、转化的实质：

目的基因融合到受体细胞染色体基因组中。

13、受体细胞的种类：

⑴、微生物：

细菌细胞⑵、植物细胞：

卵细胞、受精卵、体细胞⑶、动物细胞：

受精卵、胚胎细胞

14、有哪些导入目的基因的方法？

⑴、微生物：

感受态细胞法

①、感受态细胞：

指细菌细胞经过Ca2+处理后，细胞壁透性增强，能够吸收周围环境中DNA分子的生理状态。

②、过程：

Ca2+处理细胞→感受态细胞→表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子。

⑵、植物细胞：

农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法

①、农杆菌：

土壤微生物，易感染双子叶植物和裸子植物；对大多数单子叶植物没有感染力。

②、Ti质粒的T_DNA可转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上。

③、过程：

目的基因插入T_DNA，T_DNA进入农杆菌，将农杆菌导入植物细胞。

⑶、动物细胞：

显微注射法

操作程序：

①、目的基因表达载体经过提纯备用，取得受体动物的卵（或受精卵）备用。

②、采用显微注射技术将目的基因表达载体注射到卵（或受精卵）中。

③、培养液培养成为早期胚胎。

④、将早期胚胎移植到雌性动物子宫内，发育成新个体。

15、怎样检测和鉴定目的基因？

⑴、检测：

①、导入检测：

检测受体细胞染色体DNA上是否含有目的基因。

DNA分子杂交法（DNA探针法）。

②、表达检测：

检测目的基因是否完成转录出mRNA。

分子杂交法检测RNA。

检测目的基因是否完成表达翻译成蛋白质。

提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。

⑵、鉴定：

个体生物学水平鉴定，鉴定抗性等。

专题1基因工程1.3基因工程的应用

1、植物基因工程有哪些成果？

⑴、成果：

提高农作物的抗逆能力、改良农作物的品质、利用植物生产药物等。

⑵、抗虫转基因植物

①、方法：

将Bt毒蛋白基因（来自苏云金芽孢杆菌）导入植物，使其具有抗虫性。

②、成果：

培育出各种抗虫作物。

如抗虫棉、抗虫水稻、抗虫玉米等。

③、意义：

减少化学农药的使用，降低生产成本，减少环境污染。

④、主要抗虫基因：

Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等。

⑶、抗病转基因植物

①、方法：

将抗病基因导入植物，使其具有抗病特性。

②、成果：

培育出各种抗病作物。

如抗病小麦、抗病甜椒、抗病番茄等。

③、意义：

提高作物抗病力，增产。

④、主要抗病基因：

抗病毒的外壳蛋白基因、抗病毒复制基因、抗真菌的几丁质酶基因、抗毒素

合成基因等。

⑷、抗逆转基因植物

①、方法：

将抗逆基因导入植物，使其具有抗逆特性。

②、成果：

培育出多种抗逆作物。

如抗盐碱好干旱的烟草、抗寒番茄、抗除草剂大豆和玉米等。

③、意义：

提高作物抗逆能力，稳产高产。

④、主要抗逆基因：

抗盐碱、抗干旱的渗透压调节基因、抗寒的抗冻蛋白基因、抗除草剂基因等。

⑸、改良品质转基因植物

①、方法：

将优良性状基因导入植物，获得必需氨基酸。

②、成果：

培育出赖氨酸含量高的玉米、耐储存番茄、新花色的矮牵牛花等。

③、意义：

改良植物的某些品质。

④、主要优良性状基因：

必需氨基酸含量高的蛋白质编码基因、控制番茄果实成熟的基因、与植物的花青素合成有关的基因等。

2、动物基因工程有哪些成果？

⑴、提高动物的生长速度

①、生长基因：

外源生长素基因②、成果：

转基因绵羊、转基因鲤鱼等

⑵、改良畜产品的品质

①、优良基因：

肠乳糖酶基因②、成果：

转基因牛乳汁中乳糖含量少

⑶、转基因动物生产药物

①、基因来源：

药用蛋白基因+乳腺蛋白基因的启动子②、成果：

乳腺生物反应器

⑷、转基因动物作器官移植的供体

①器官供体：

抑制或除去抗原决定基因②成果：

利用克隆技术培育没有免疫排斥反应的猪器官

3、基因工程药物有哪些成果？

⑴、药物来源：

转基因工程菌

⑵、成果：

利用工程菌生产细胞因子、抗体、疫苗、激素等。

⑶、作用：

预防和治疗人类肿瘤、心血管疾病、遗传病、各种传染病、糖尿病、类风湿等疾病。

4、基因治疗方面有哪些成果？

⑴、特点：

将正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，达到治疗疾病的目的。

⑵、成果：

将腺苷酸脱氨酶基因导入患者的淋巴细胞，治疗复合型免疫缺陷症。

⑶、途径：

分为体外治疗和体内治疗。

具体包括：

基因置换、基因修复、基因增补、基因失活

⑷、体外基因治疗：

①、从病人体内获得某种细胞进行培养②、体外完成基因转移③、筛选成功转移的细胞扩增培养④、将培养好的细胞重新输入患者体内。

⑸、体内基因治疗：

用基因工程的方法直接向患者体内转移基因。

5、乳腺生物反应器有什么优点？

产量高、质量好、成本低、易提取

6、乳腺生物反应器包括哪些操作过程？

⑴、获取目的基因（如血清蛋白基因）⑵、构建基因表达载体（如在血清蛋白基因前加特异表达启动子）⑶、显微注射导入动物受精卵中⑷、形成早期胚胎⑸、将早期胚胎移植到母体动物子宫内⑹、发育成转基因动物⑺、在雌性个体中，转入基因表达，从乳汁中提取所需蛋白质。

7、什么是“工程菌”？

工程菌，是用基因工程的方法，将外源目的基因导入细菌细胞，使外源基因高效表达的菌类细胞株。

专题1基因工程1.4蛋白质工程的崛起

1、什么是蛋白质工程？

⑴、概念：

是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作基础，通过基因修饰或基因合成，

对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质子，以满足人类的生产和生活需求。

⑵、实质：

将一种生物的基因转移到另一种生物体内，使后者产生它本来不能产生的蛋白质，从而产生新性状。

⑶、目的：

生产符合人们生活需要的、并非自然已经存在的蛋白质。

⑷、实例：

高游离赖氨酸玉米

细胞中赖氨酸含量过高时会抑制天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性，影响细胞继续合成赖氨酸。

利用蛋白质工程改变这两种酶的特性后，玉米细胞中赖氨酸的含量大大提高。

2、蛋白质工程原理是什么？

中心法则的逆推。

3、蛋白质工程的过程怎样？

⑴、首先，预期蛋白质的功能。

⑵、根据蛋白质功能设计预期的蛋白质结构⑶、根据蛋白质的结构推测应有的氨基酸序列⑷、最后找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）

4、注意理解P-27图1-29蛋白质工程流程图

专题2细胞工程2.1植物细胞工程2.1.1植物细胞工程的基本技术

1、什么是细胞工程？

细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。

细胞工程包括植物细胞工程和动物细胞工程。

2、什么是细胞全能性？

指具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。

3、细胞全能性表现的原因和条件是什么？

⑴、原因：

生物体的每个细胞都有发育成完整个体说必需的全部基因。

⑵、条件：

①、离体状态②、环境条件适宜（营养物质、激素、温度等）

4、细胞全能性的大小与细胞有什么关系？

⑴、总体上，细胞分化程度越低，细胞全能性越高。

⑵、细胞全能性大小依次是：

受精卵、生殖细胞、体细胞。

⑶、离体植物细胞全能性，在一定条件下能（直接）充分体现。

⑷、离体动物细胞全能性，需要借助卵细胞质才能体现。

⑸、未离体细胞的全能性不能表达，只能在机体调控下定向分化。

5、植物细胞工程的理论基础是什么？

是细胞的全能性。

6、什么是植物细胞的分化、脱分化、再分化？

需要哪些相关的条件？

⑴、细胞分化

①、概念：

细胞分化是细胞在形态结构和功能上发生的稳定性差异。

②、条件：

特定的时间和空间，基因的选择性表达。

⑵、脱分化

①、概念：

让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能，转变成未分化细胞。

②、结果：

形成愈伤组织——一团未分化的具有分生能力的薄壁细胞。

③、条件：

离体；一定的营养物质、激素；无菌、适宜的温度等。

⑶、再分化

①、概念：

就是愈伤组织的分化。

②、结果：

分化出幼根和芽，形成完整的小植株。

③、条件：

分化培养基培养，一定的营养物质、激素；无菌、适宜的温度等。

7、影响植物细胞脱分化和再分化的关键因素是什么？

是植物激素。

培养基中，细胞分裂素和生长素的比例不同，对脱分化和再分化的影响不同。

8、什么是植物组织培养？

就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。

9、植物组织培养的实验原理是什么？

离体的植物组织、器官、细胞，在一定的营养、激素作用下发生脱分化形成愈伤组织，愈伤组织在含有不同激素的分化培养基中培养，发生再分化形成胚状体或丛芽，最后发育成试管苗。

试验流程：

请参见P-34

10、植物体细胞杂交的原理、过程和优越性是什么？

⑴、植物体细胞杂交：

就是将不同种植物的体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。

⑵、原理：

细胞膜的流动性

⑶、过程（P-36、37）

①、制备原生质体：

（酶解法）将离体植物细胞用纤维素酶和果胶酶处理，去除细胞壁。

②、原生质体融合：

（人工诱导法）使两个原生质体融合成为一个原生质体（杂种细胞）。

人工物理诱导法：

离心、振动、电激等；

人工化学诱导法：

聚乙二醇（PEG）

③、融合原生质体再生出细胞壁，成为真正的杂种细胞。

④、组织培养，经过脱分化、再分化，发育成杂种植物。

⑷、优越性：

①克服植物有性杂交不亲和。

②打破物种之间的生殖隔离。

③扩大了遗传重组的范围。

专题2细胞工程2.1植物细胞工程2.1.2植物细胞工程的实际应用

1、有哪些植物繁殖的新途径？

微型繁殖、作物脱毒、人工种子。

2、什么是微型繁殖？

⑴、概念：

是指用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。

也叫快速繁殖技术。

⑵、特点：

保持优良品种的遗传特性。

⑶、意义：

高效快速地实现种苗的繁殖。

3、什么是作物脱毒？

⑴、概念：

是指培育无病毒作物。

⑵、选材：

无病毒的茎尖分生区组织。

⑶、结果：

获得优质高产的脱毒苗。

4、什么是人工种子？

⑴、概念：

是指以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。

⑵、特点：

①、后代无性状分离，能稳定遗传。

②、生产过程不受季节、气候和地域限制。

⑶、结构：

人工种皮+胚状体（或不定芽或顶芽或腋芽）。

⑷、获得方法：

植物组织培养

5、有哪些作物新品种的培育方法？

单倍体育种、利用突变体育种

6、什么是单倍体育种？

⑴、概念：

是指通过花药离体培养获得单倍体植株，再将单倍体植株染色体加倍来培育能稳定遗传的优良品种的方法。

⑵、优点：

①、后代无性状分离，都是纯种，能稳定遗传。

②、极大地缩短了育种年限。

7、怎样利用突变体育种？

⑴、突变体：

是指在组织培养过程中，发生了突变的细胞。

⑵、突变体来源：

组织培养过程。

⑶、利用：

筛选有用的突变体，培育成新个体。

8、细胞产物的工厂化生产的技术和产物是什么？

⑴、生产技术：

组织培养技术⑵、产物种类：

蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。

专题2细胞工程2.2动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术

1、动物细胞工程有哪些常用的技术手段？

动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等

2、什么是动物细胞培养？

就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞后，放在适宜的培养基中，使其生长和增值。

3、动物细胞培养包括哪些基本过程？

⑴、动物组织+胰蛋白酶或胶原蛋白酶，得到分散的单个动物细胞。

⑵、培养液稀释动物细胞，制成细胞悬浮液，培养瓶培养增值。

⑶、出现接触抑制时，再用胰蛋白酶处理成单个细胞的悬浮液，继续培养增值。

4、什么是细胞贴壁？

⑴、概念：

指培养过程中，细胞贴附在瓶壁上的现象。

⑵、培养贴附性细胞的要求：

培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒。

5、什么是接触抑制？

指贴壁细胞因为表面相互接触时导致细胞停止分裂增值的现象。

6、什么是原代培养？

指动物组织经过胰蛋白酶处理后的初次培养。

一般能传代约10代，得到细胞株。

7、什么是传代培养？

指贴壁生长的细胞（10代后）经胰蛋白酶处理后的继续培养，得到细胞系，能无限传代。

细胞系的细胞已经发生突变，基本上具有癌细胞的特性。

8、动物细胞培养需要哪些条件？

⑴、无菌无毒的环境：

培养液应事先进行灭菌处理。

⑵、营养（合成培养基的成分）：

糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血浆、血清等。

⑶、温度：

适宜温度未36.50C±0.50C

⑷、PH：

7.2~7.4

⑸、气体环境：

空气95%，CO25%

9、动物细胞培养技术有哪些应用？

⑴、生产病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。

⑵、用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。

10、什么是动物体细胞核移植技术？

⑴、概念：

就是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并

发育成一个新的胚胎，并使这个胚胎最终发育成为动物个体。

⑵、原理：

细胞核全能性

⑶、过程：

①、供体体细胞经细胞培养后，提取细胞核；②、提取卵巢卵母细胞，在其减数分裂第二次分裂中期除去细胞核，制成无核细胞质；③、将供体核与无核卵母细胞质融合，并培养成早期胚胎；④、将早期胚胎移植到代孕母体子宫内，发育成新个体。

11、怎样获得克隆动物？

⑴、原理：

细胞核全能性

⑵、技术支持：

动物体细胞核移植技术

⑶、应用：

①、加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。

②、保护濒危物种。

③、生产医用蛋白。

④、作为异种移植的细胞、组织或器官供体。

⑤、用于组织器官的移植

⑷、尚存问题：

克隆动物存在遗传和生理缺陷。

如体重较大、异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫失调等

12、什么是克隆动物？

指利用核移植方法的无性繁殖技术得到的动物。

补充说明：

⑴、动物核移植：

就是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，并使这个胚胎最终发育成为动物个体。

⑵、克隆牛过程中采用的另一种核移植方法：

将经过培养的供体细胞直接注入去核卵母细胞，并以此重构卵母细胞克隆牛。

专题2细胞工程2.1动物细胞工程2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体

1、什么是动物细胞融合？

⑴、概念：

指两个和多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。

也叫细胞杂交。

⑵、原理：

细胞膜流动性。

⑶、结果：

形成杂交细胞。

⑷、过程：

不同动物的两个细胞，在灭活病毒或PEG诱导下，融合形成杂交细胞。

⑸、意义：

克服远缘杂交不亲和性，打破种间生殖隔离的限制。

2、什么是杂交细胞？

⑴、概念：

指细胞融合形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。

⑵、提示：

细胞融合的结果并非只有杂交细胞，还会有多倍体细胞。

3、什么是单克隆抗体？

⑴、概念：

通过克隆单一的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞所得到的细胞群生产的抗体。

⑵、原理：

①、单一的B细胞（浆细胞、效应B淋巴细胞）能产生单一抗体，但不能增值；

②、骨髓瘤细胞能无线增值，但不能产生抗体。

③、杂交瘤细胞既能增值又能产生单一抗体。

⑶、技术支持：

动物细胞融合、动物细胞培养

⑷、单克隆抗体优点：

纯度高、特异性强、产量大。

⑸、制备单克隆抗体过程（P-53图2-24）

①、向小鼠注射特定抗原蛋白，使小鼠产生特定B淋巴细胞（浆细胞、效应B淋巴细胞）。

②、分离出效应B淋巴细胞，与培养好的骨髓瘤细胞混合，人工诱导细胞融合。

③、用选择性培养基培养杂交细胞，筛选出杂交瘤细胞。

④、体外培养杂交瘤细胞，从培养液中分离提取单克隆抗体。

④、或者，将杂交瘤细胞移植到小鼠腹腔内，从小鼠腹水中分离提取单克隆抗体。

⑹、应用：

①、用作诊断试剂：

准确识别各种抗原物质并与之特异性结合。

②、制成“生物导弹”：

用于治疗疾病和运载药物。

4、动物细胞培养与植物组织培养的区别

项目

原理

培养基

结果

培养目的

植物组织培养

细胞的全能性

固体；营养物质，激素

培养成植株

快速繁殖无病毒植株等

动物组织培养

细胞的增值

液体；营养物质，动物血清

培养成细胞系或细胞株

获得细胞产物或细胞系

5、植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别

植物体细胞杂交

动物细胞融合

原理

细胞膜的流动性

细胞膜的流动性

方法

用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后，诱导原生质体融合

用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散后，诱导细胞融合。

诱导手段

离心、电刺激、振动、显微操作、聚乙二醇等诱导

与植物体细胞相比，还可以用灭活病毒诱导

结