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基因工程习题
第二章基因工程习题
一、选择题
1.基因工程的单元操作顺序是【】
A增,转,检,切,接
B切,接,转,增,检
C接,转,增,检,切
D检,切,接,增,转
E切,接,增,转,检
2.根据当今生命科学理论,基因工程的用途是【】
I分离纯化基因II大量生产生物分子III构建新型物种IV提高基因重组效率
AI+II+III
BI+II+IV
CI+III+IV
DII+III+IV
EI+II+III+IV
3.根据基因工程的定义,下列各名词中不能替代基因工程的是【】
A基因诱变
B分子克隆
CDNA重组
D遗传工程
E基因无性繁殖
4.下列有关基因的叙述,错误的是【】
A蛋白质是基因表达的唯一产物
B基因是DNA链上具有编码功能的片段
C基因也可以是RNA
D基因突变不一定导致其表达产物改变结构
E基因具有方向性
5.天然PstI限制性内切酶的来源是【】
ABacillusamyloliquefaciens
BEscherichiacoli
CHaemophilusinfluenzae
DProvidenciastuartii
EStreptomyceslividans
6.下列黏性末端属于同种内切酶切割而成的是【】
A①②B①③C①④D②③
7.若载体DNA用M酶切开,则下列五种带有N酶粘性末端的外源DNA片段中,能直接与载体拼接的是【】
M N
AA/AGCTTT/TCGAA
BC/CATGGACATG/T
CCCC/GGGG/GGCCC
DG/GATCCA/GATCT
EGAGCT/CG/AGCTC
8.T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起,其底物的关键基团是【】
A2'-OH和5'-P
B2'-OH和3'-P
C3'-OH和2'-P
D3'-OH和5'-P
E5'-OH和3'-P
9.下列哪一种酶作用时需要引物?
A限制酶
B末端转移酶
C反转录酶
DDNA连接酶
10.下列有关质粒分子生物学的叙述,错误的是【】
A质粒是共价环状的双链DNA分子
B天然质粒一般不含有限制性内切酶的识别序列
C质粒在宿主细胞内能独立于染色体DNA自主复制
D松弛复制型的质粒可用氯霉素扩增
E质粒并非其宿主细胞生长所必需
11.带有多个不同种复制起始区的质粒是【】
A穿梭质粒
B表达质粒
C探针质粒
D整合质粒
E多拷贝质粒
12.下列各常用载体的装载量排列顺序,正确的是【】
ACosmid>λ-DNA>Plasmid
Bλ-DNA>Cosmid>Plasmid
CPlasmid>λ-DNA>Cosmid
DCosmid>Plasmid>λ-DNA
Eλ-DNA>Plasmid>Cosmid
13.目前在高等动物基因工程中广泛使用的载体是【】
A质粒DNA
B噬菌体DNA
C病毒DNA
D线粒体DNA
E叶绿体DNA
14.若某质粒带有lacZ标记基因,那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入【】
A半乳糖
B葡萄糖
C蔗糖
D5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷(X-gal)
E异丙基巯基-b-半乳糖苷(IPTG)
15.质粒是基因工程中最常用的运载体,它的主要特点是( )
①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小
④蛋白质 ⑤环状RNA ⑥环状DNA
⑦能“友好”地“借居”
A①③⑤⑦
B②④⑥
C①③⑥⑦
D②③⑥⑦
16.双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于【】
ADNA的聚合反应
BDNA的连接反应
CDNA的降解反应
D特殊的DNA连接酶
E聚合单体2'和5'位的脱氧
17.下列三种方法中,能有效区分重组子与非重组子的是【】
I限制性酶切IIPCR扩增III抗药性筛选
AI
BI+II
CI+III
DII+III
EI+II+III
18.鸟枪法克隆目的基因的战略适用于【】
A原核细菌
B酵母菌
C丝状真菌
D植物
E人类
19.cDNA第一链合成所需的引物是【】
APolyA
BPolyC
CPolyG
DPolyT
E发夹结构
20.TaqDNA聚合酶的发现使得PCR技术的广泛运用成为可能,这是因为【】
ATaqDNA聚合酶能有效地变性基因扩增产物
BTaqDNA聚合酶催化的聚和反应不需要引物
CTaqDNA聚合酶具有极强的聚和活性
DTaqDNA聚合酶能使多轮扩增反应连续化
ETaqDNA聚合酶能使扩增反应在DNA变性条件下进行
21.为了利用PCR技术扩增下列染色体DNA片段上的虚线部分,应选用的引物顺序是【】
AI+II
BI+III
CI+IV
DII+III
EII+IV
22.构建基因文库一般使用的载体是【】
I质粒IIλ-DNAIIICosmid
AI
BII
CIII
DII+III
EI+II+III
23.强化基因转录的元件是【】
A密码子
B复制子
C启动子
D内含子
E外显子
24.启动子的特征之一是【】
AGC富积区
BTATABox
C转录起始位点
D长度平均1kb
E含有某些稀有碱基
25.下列基因调控元件中属于反式调控元件的是【】
A阻遏蛋白
B启动子
C操作子
D终止子
E增强子
26.包涵体是一种【】
A受体细胞中难溶于水的蛋白颗粒
B大肠杆菌的亚细胞结构
C噬菌体或病毒DNA的体外包装颗粒
D用于转化动物细胞的脂质体
E外源基因表达产物的混合物
27.外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是【】
I融合基因能稳定扩增II融合蛋白能抗蛋白酶的降解III表达产物易于亲和层析分离
AIII
BI+II
CI+III
DII+III
EI+II+III
28.第二代基因工程是指【】
A途径工程
B代谢工程
C蛋白质工程
DRNA基因工程
E细胞器基因工程
29.基因工程菌中重组质粒的丢失机制是【】
A重组质粒渗透至细胞外
B重组质粒被细胞内核酸酶降解
C重组质粒在细胞分裂时不均匀分配
D重组质粒杀死受体细胞
E重组质粒刺激受体细胞提高其通透性
30.利用毛细管作用原理,将凝胶电泳分离后的DNA片段转移至硝酸纤维素膜上并根据核酸杂交原理进行分析的技术是【】
AWestern印迹转移技术
BNorthern印迹转移技术
C基因的表现型分析法
DSouthern印迹转移技术
31.在翻译过程中.mRNA必需首先与核糖体相结合才能进行蛋白质合成。
在原核生物中,mRNA分子上有两个核糖体结合位点,一个是起始密码AUG,另一个是【】
A启动子
B调节基因
CSD序列
D终止子
二、填空题
1、Ⅱ型限制性内切酶可特异性地识别并进行切割。
如BstBⅠ(TTCGAA)消化可产生末端,PstⅠ(CTGCAG)消化可产生末端,而SmaⅠ(CCCGGG)消化产生末端。
2、识别顺序相同但切割位点不同者称酶,识别顺序与切割方式均相同者称酶,来源与识别顺序均不同,但切割后形成的限制性片段有相同的粘性末端,称酶。
3、受体细胞经过一些特殊方法(如:
CaCl2等化学试剂法)的处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许有外源DNA的载体分子通过,这种细胞称为。
4、在翻译过程中,mRNA必需首先与核糖体相结合才能进行蛋白质合成。
在原核生物中,mRNA分子上有两个核糖体结合位点,一个是,另一个是。
5、在提取分离DNA的过程中,加入酚-氯仿、去垢剂或酶的目的是,使用金属离子螯合剂如EDTA等的原因是。
在小批量碱变性提取质粒过程中加入醇溶液的目的是,加入Rnase的目的是。
6、PCR的全称是,它是一种在体外模拟DNA复制方式选择性地扩增DNA特殊区域的技术。
它是在四种存在下,以寡聚核苷酸为引物及为模板,经DNA聚合酶催化合成DNA互补链的过程,其基本反应步骤为、和,并循环n次,达到扩增目的。
7、采用光导原位合成或微量点样等方法,将大量生物大分子或其他生物样品有序地固化于支持物表面,然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交,通过特定仪器对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析,从而判断样品中靶分子的数量的技术称为,根据固定的探针不同,可分为、、和组织芯片。
该技术具有高通量、快速高效、高度灵敏等特点。
10、根据Southernblot的结果可以说明,Northernblot则用于,而Westernblot的结果可以说明。
11、基因工程中用来获得有功能的异源蛋白质的体系称为。
12、用火药爆炸或者高压气体加速将包裹了DNA的球状金粉或者钨粉颗粒直接送入完整的植物组织或者细胞中,这一方法称为。
三、问答题
1、基因工程的操作过程的主要步骤包括哪些?
2、什么是限制性核酸内切酶?
第二型限制酶有何特点?
3、分析影响限制性内切酶酶切的因素有哪些?
4、一个典型的原核表达质粒的主要元件有哪些?
5、以人工构建的pBR322质粒为例说明基因工程载体的特点。
6、小批量碱变性提取质粒DNA的原理与基本过程如何?
7、什么是基因文库?
基因组文库与cDNA文库制备方法有何区别?
8、PCR的定义、原理、方法?
在生命科学领域有何具体用途?
9、琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理是什么?
10、什么是原位杂交技术?
其基本过程如何?
11、什么是启动子?
什么是SD序列?
12、什么是操纵子?
请用简图表示操纵子的基本结构并以乳糖操纵子负调控系统(阻遏蛋白调控作用)为例说明其功能。
13、为什么用原核表达系统表达真核生物的蛋白质时,克隆的真核基因不能来自基因组文库?
真核基因应如何获得?
14、如何提高真核基因在原核宿主中的表达效率?
15、什么是基因诊断?
基因诊断中常用的方法有哪些?
试简述其中一种方法的原理。
16、名词解释:
基因探针基因芯片蛋白质工程
17、简述包含体形成的原因和包含体蛋白复性的主要步骤。
18、列表比较大肠杆菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞表达系统的优缺点。
19、利用基因工程菌生产有哪些特点?
有什么优势?
常用的宿主菌有哪些?
20、在基因工程菌培养过程中为什么质粒会丢失?
21、基因工程菌高表达的障碍是什么?
22、与大肠杆菌相比酵母作为宿主菌有什么优点?
23、现有一段A基因序列:
ATGGGTCGAGATCGTGATACAGATAATAATTTCTCAAAGGACCATGGTTGGTATTTAGCTTATTCTATACCTGACACAGGGGGATCCCAAATAAGAAAATTTTCAGCATTAGCTAGATATCATGTTAAGTTTGAGACTTTTGCAGAGGAAAGAAAAGAACAGTATAAAATAAACACAGCATGGTCAAAAGAATATGCAAGAGGTTTTGCTAAAACAGGAAAATCAGTAGCTTATGAATTC
已知:
①限制性核酸内切酶识别的碱基序列如下:
NcoI:
CCATGG,BamHI:
GGATCC,EcoRI:
GAATTC
②上述3种限制性核酸内切酶的5’端保护性碱基情况如下:
NcoI:
CATG,BamHI:
CGC,EcoRI:
CCG
③载体pET-28含有NcoI、BamHI、EcoRI、HindⅢ、SacI单一限制性核酸内切酶识别序列。
现在想将A基因克隆到载体pET-28上,请回答:
①在设计PCR引物时,P1引物中应该含有哪个限制酶的识别序列,P2引物中应该含有哪个限制酶的识别序列?
②设计1对PCR引物,写出P1和P2的引物序列。
③如果用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,应该用多少浓度的琼脂糖凝胶比较合适?
*提示:
不同浓度琼脂糖的凝胶与DNA分子有效分离范围对应值一般为:
琼脂糖凝胶浓度%(W/V)DNA分子的有效分离范围(Kb)
0.71-20
1.00.5-8
1.20.4-6
1.50.2-5
2.00.1-3
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