生物实验中常用的化学试剂配制方法.docx
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生物实验中常用的化学试剂配制方法
生物实验中常用的化学试剂配制方法
1.乳酸苯酚固定液乳酸10g,结晶苯酚10g,甘油20g,蒸馏水10mL。
2.1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫1.6g溶于100mL乙醇中,贮存于棕色瓶中保存备用。
用作培养基指示剂时,每1000mL培养基中参加lmL1.6%溴甲酚紫即可。
3.V.P.试剂CuSO41g,蒸馏水l0mL,浓氨水40mL,10%NaOH950mL。
先将CuSO4溶于蒸馏水中,然后加浓氨水,最后参加10%NaOH。
4.0.02%甲基红试剂甲基红0.1g,95%乙醇760mL,蒸馏水100mL。
5.吲哚反响试剂对二甲基氨基苯甲醛8g,95%乙醇760mL,浓HCl160mL。
6.Alsever’s血细胞保存液葡萄糖2.05g,柠橡酸钠0.8g,NaCl0.42g,蒸馏水l00mL。
以上成分混匀后,微加温使其溶解后,用柠檬酸调节pH6.1,分装于三角瓶中(30~50mL/瓶),113℃湿热灭菌15min,备用。
7.Hank’s液(l)贮存液A液:
(I)NaCl80g,KCl4g,MgSO4·7H2O1g,MgCl2·6H2O1g,用双蒸馏水定容至450mL:
(II)CaCl21.4g(或CaCl2·2H2O1.85g)用双蒸馏水定容至50mL。
将I和II液混合,加氯仿1mL即成A液。
(2)贮存液B液:
Na2HPO4·12H2O1.52g,KH2PO40.6g,酚红0.2g,葡萄糖10g,用双蒸馏水定容至500mL,然后加氯仿1mL,酚红应先置研钵内磨细,然后按配方顺序一一溶解。
(3)应用液:
取上述贮存液的A和B液各25mL,加双蒸馏水定容至450mL,113℃湿热灭菌20min。
置4℃下保存。
使用前用无菌的3%NaHCO3调至所需pH。
注意:
药品必须全部用A.R试剂,并按配方顺序参加,用适量双蒸馏水溶解,待前一种药品完全溶解后再参加后一种药品,最后补足水到总量。
(4)10%小牛血清的Hank’s液:
小牛血清必须先经56℃、30min灭活后才可使用,应小瓶分装保存,长期备用。
用时按10%用量加至应用液中。
8.0.1mol/LCaCl2溶液双蒸馏水900mL,CaCl211g,定容至lL,可用孔径为0.22μm的滤器过滤除菌或12l℃湿热灭菌20min。
9.0.05mol/LCaCl2溶液双蒸馏水900mL,CaCl25.5g,定容至lL,可用孔径为0.22μm的滤器过滤除菌或12l℃湿热灭菌20min。
10.α淀粉酶活力测定试剂
(1)碘原液:
称取碘11g,碘化钾22g,加水溶解定容至500mL。
(2)标准稀碘液:
取碘原液15mL,加碘化钾8g,定容至500mL。
(3)比色稀碘液:
取碘原液2mL,加碘化钾20g,定容至500mL。
(4)2%可溶性淀粉:
称取枯燥可溶性淀粉2g,先以少许蒸馏水混合均匀,再**倾入煮沸的蒸馏水中,继续煮沸2min,待冷却后定容至100mL(此液当天配制使用)。
(5)标准糊精液:
称取分析纯糊精0.3g,用少许蒸馏水混匀后倾入400mL水中,冷却后定容至500mL,参加几滴甲苯试剂防腐,冰箱保存。
11.pH6.0磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液称取Na2HPO4·12H2O45.23g,柠檬酸(C6H8O7·H20)8.07g,加蒸馏水定容至1000mL。
12.0.lmol/L磷酸缓冲液(pH7.0)称取Na2HPO4·12H2O35.82g,溶于1000mL蒸馏水中,为A液:
称取NaH2PO4·2H2O15.605g,溶于l000mL蒸馏水中,为B液。
取A液61mL,B液39mL,可得到100mL0.lmol/LpH7.0的磷酸缓冲液。
13.测定乳酸的试剂(l)pH9.0缓冲液:
在300mL容量瓶中参加甘氨酸11.4g,24%NaOH2mL,加275mL蒸馏水。
(2)NAD溶液:
NAD600mg溶于20mL蒸馏水中。
(3)L〔+〕LDH:
加5mgL(+)LDH于lmL蒸馏水中。
(4)D(-)LDH:
加2mgD(-)LDH于lmL蒸馏水中。
14.Taq缓冲液(10×)Tris-HCl(pH8.4)100mmol/L,KCl500mmol/L,MgCl215mmol/L,BSA(牛血清清蛋白)或明胶lmg/mL15.dNTP混合液dATP50mmol/L,dCTP50mmol/L,dGTP50mmol/L,dTTP50mmol/L。
16.1%琼脂糖琼脂糖lg,TAE100mL,100℃融化后待凉至40℃倒胶,胶厚度约0.4~0.6。
17.TAETris碱4.84mL,冰乙酸1.l4mL,0.5mol/LpH8.0的EDTA-Na2·2H2O(乙二胺四乙酸钠盐)2mL18.0.5mol/LEDTA(pH8.0)在800mL蒸馏水中加186.lgEDTA,剧烈搅拌,用NaOH调pH至8.0(约20g颗粒),定容至lL,分装后121℃湿热灭菌备用。
19.硝酸盐复原试剂
(1)格里斯氏(Griess)试剂A液:
对氨基苯磺酸0.5g,稀醋酸(10%左右)150mLB液:
α萘胺0.1g,蒸馏水20mL,稀醋酸(10%左右)150mL
(2)二苯胺试剂:
二苯胺0.5g溶于l00mL浓硫酸中,用20mL蒸馏水稀释。
在培养液中滴加A、B液后溶液如变为粉红色、玫瑰红色、橙色或棕色等表示有亚硝酸盐复原,反响为阳性,如无色出现则可加1~2滴二苯胺试剂:
如溶液呈蓝色则表示培养液中仍存在有硝酸盐,从而证实该菌无硝酸盐复原作用:
如溶液不呈蓝色,则表示形成的亚硝酸盐已进一步复原成其他物质,故硝酸盐复原反响仍为阳性〔来源于一个博客-个人觉得好就给大家分享了
1,2-丙二醇1,2-Propanediol
1,3-丙二醇1,3-Propanediol
1,3-二甲基脲1,3-Dimethylurea
1,4-二硫代苏糖醇3,4-Dithiothreitol(DTT)
1-庚烷磺酸钠盐1-Heptanesulfonicacidsodiumsalt
1-己烷磺酸钠盐1-He*anesulfonicacidsodiumsalt
1-萘基磷酸脂二钠盐1-NaphthylPhosphateDisodiumSalt
1-戊烷磺酸钠盐1-Pentanesulfonicacidsodiumsalt
1-辛烷磺酸钠1-OctanesulfonicAcidSodiumSalt
2-(N-吗啉代)乙烷磺酸MES
2-(环己氨基)乙磺酸CHES(FreeAcid)
2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸(波长520-550nm)2,4,6-Tribromo-3-Hydro*ybenzonicAcid,TBHBA
2,4-二氯代-α-苯乙胺2,4-Dichloro-α-phenethylamine
2,4-二硝基苯肼2,4-Dinitrophenylhydrazine
2-氨基-2-甲基-1,3-丙醇AMPD
2-氨基-2-甲基-1-丙醇AMP,Buffer
2-硫代巴比妥酸2-ThiobarbituricAcid
2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷(P-AFu)2-Chloro-4-nitrophenyl-Alpha-L-Fucosidase(P-AFu)
2-氯-对硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷P-NAG
2-巯基乙醇2-Mercaptoethanol
2-脱氧胞苷(脱氧胞嘧啶)2'-Deo*ycytidine
2'-脱氧胞苷-5'-三磷酸二钠盐(dCTP)2'-Deo*ycytidine-5'-Triphosphatedisodiumsalt
2'-脱氧肌苷2'-Deo*yinosine
2'-脱氧肌苷-5'-三磷酸三钠盐(dITP)2'-Deo*yinosine-5'-Triphosphatetrisodiumsalt
2'-脱氧鸟苷(一水)2'-Deo*yguanosinemonohydrate
2'-脱氧鸟苷-5'-三磷酸二钠盐(dGTP)2'-Deo*yguanosine-5'-Triphosphatedisodiumsalt
2'-脱氧鸟苷-5'-三磷酸三钠盐(dGTP)2'-Deo*yguanosine-5'-Triphosphatetrisodiumsalt
2'-脱氧腺苷(一水)2'-Deo*yadenosinemonohydrate
2'-脱氧腺苷-5'-三磷酸二钠盐(dATP)2'-Deo*yadenosine-5'-Triphosphatedisodiumsalt
3-(3-胆胺丙基)二甲氨基-1-丙磺酸CHAPS
3-(3-胆胺丙基)二甲氨基-1-丙磺酸CHAPS
3-(N-吗啉代)-2-羟基丙磺酸MOPSO(FreeAcid)
3-(N-吗啉代)-2-羟基丙磺酸钠MOPSO(SodiumSalt)
3-(N-吗啉代)丙磺酸MOPS(FreeAcid)
3-(环己氨)-1-丙磺酸CAPS
3-(环己氨)-2-羟基丙磺酸CAPSO
3,3'-二氨基联苯胺四盐酸盐DAB(3,3'-Diaminobenzidine)Tetrahydrochloride
3,3'5,5'-四甲基联苯胺(硫酸盐)3,3'5,5'-TetramethylBenzidineH2SO4
3,3'5,5'-四甲基联苯胺(盐酸盐)3,3'5,5'-TetramethylBenzidine2HCl(TMB)
3,3'5,5'-四甲基联苯胺(游离胺)3,3'5,5'-TetramethylBenzidine
3,3-二氨基联苯胺3,3'-Diaminobenzidine(DAB)
3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠(波长520nm)DHBS,SodiumSalt
3α,7β-二羟基-5β-胆烷酸3α,7β-Dihydro*y-5β-cholanicacid
3-氨基-1,2,4-三唑3-Amino-1,2,4-triazole(3-AT)
3-氨基-9-乙基咔唑3-Amino-9-Ethylcarbazole(AEC)
3-磺丙基十二烷基二甲基甜菜碱3-(N,N-Dimethyldodecylammonio)propanesulfonate
3-磺丙基十六烷基二甲基甜菜碱3-(N,N-Dimethylpalmitylammonio)propanesulfonate
3-磺丙基十四烷基二甲基甜菜碱3-(N,N-Dimethylmyristylammonio)propanesulfonate
3-氯-2-羟基三甲基氯化铵D-CFZ
3-三羟甲基甲胺-2-羟基丙磺酸TAPSO(FreeAcid)
3'-脱氧腺苷3'-Deo*yadenosine
3'-脱氧胸腺苷-5'-三磷酸二钠盐(dTTP)3'-Deo*ythymidine-5'-Triphosphatedisodiumsalt
3-吲哚丙酸(IPA)3-Indolepropionicacid
3-吲哚丁酸(IBA)3-Indolebutyricacid
3-吲哚乙酸(IAA)3-Indoleaceticacid
4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷DMT-Cl
4-氨基安替比林4-Aminoantipyrin
4-氯-1-萘酚4-Chloro-1-Naphthol
4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷4-Choro-3-Indolyl-β-D-Galactopyranoside
4-硝基苯-α-D-半乳糖苷p-Nitrophenyl-alpha-D-galactoside
4-硝基苯-β-D-葡萄糖苷p-Nitrophenyl-beta-D-glucoside
5-氨基水杨酸5-Amino-O-hydro*ybenzoicAcid
5'-单磷酸-2'-脱氧胞苷2'-Deo*ycytidine-5'-Monophosphate(dCMP)
5'-单磷酸-2'-脱氧鸟苷二钠盐2'-Deo*yguanosine-5'-Monophosphate(dGMP),2Na
5'-单磷酸-2'-脱氧腺苷2'-Deo*yadenosine5'-Monophosphate(dAMP)
5'-单磷酸胞苷Cytidine5'-Monophosphate(CMP)
5'-单磷酸鸟苷Guanosine-5'-Monophosphate(GMP)
5'-单磷酸鸟苷二钠盐Guanosine-5'-Monophosphatesalt(GMP),2Na
5'-单磷酸尿苷二钠Uridine-5'-Monophosphatedisodiumsaltdihydrate
5'-单磷酸尿苷二钠盐Uridine-5'-Monophosphate(UMP),2Na
5'-单磷酸腺苷5'AMP
5'-单磷酸腺苷Adenosine-5'-Monophosphate(AMP)
5'-单磷酸胸苷二钠盐Thymidine-5'-Monophosphate(TMP),2Na
5'-二磷酸胞苷二钠盐Cytidine-5'-DiphosphateDisodiumSalt
5'-二磷酸鸟苷Guanosine-5'-Diphosphate(GDP)
5'-二磷酸尿苷钡盐Uridine-5'-Diphosphatebariumsalt
5'-二磷酸尿苷二钠盐Uridine-5'-Diphosphatedisodiumsaltdihydrate
5'-二磷酸尿苷三钠盐Uridine-5'-Diphosphatetrisodiumsalt
5'-二磷酸尿苷一钠盐Uridine-5'-Diphosphatemonosodiumsalt
5-氟尿嘧啶5-Fluorouracil
5-磺基水杨酸5-SulfosalicylicAcid
5'-三磷酸-2'-脱氧鸟苷三钠盐2'-Deo*yguanosine-5'-Triphosphate(dGTP),3Na
5'-三磷酸-2'-脱氧胸苷三钠盐dTTP,3Na
5'-三磷酸胞苷二钠盐Cytidine-5'-TriphosphateDisodiumSalt
5'-三磷酸鸟苷Guanosine-5'-Triphosphate(GTP)
5'-三磷酸尿苷(三钠)Uridine-5'-Triphosphatetrisodiumsaltdihydrate
5'-三磷酸尿苷(一钠)Uridine-5'-Triphosphatemonosodiumsalt
5'-三磷酸腺苷二钠ATP,DisodiumSalt(HPLC)
5-腺苷二磷酸二钠盐ADP,2Na
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷*-Gal
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡糖醛酸*-Gluc,Cyclohe*ylAmmoniumSalt
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖醛酸环己胺(*-Gluc)5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-glucuronicAcid
5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-phosphate(BCIP)
5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-Phosphate
6-苄氨基嘌呤(6-BA)6-BenzylaminoPurine
6-氮杂尿嘧啶6-azauridine
6-氯嘌呤6-Chloropurine
7-氨基-4-甲基香豆素7-Amino-4-Methylcoumarin(AMC)
8-苯胺-1-萘磺酸8-Anilino-1-naphthalenesulfonicacid
8-羟基喹啉8-Hydro*yquinoline
8-羟基喹啉-5-磺酸8-Hydro*yquinoline-5-sulfonicacid
ADOSADOS
ADP,K-2H2OADP,K-2H2O
ADPSN-Ethyl-N-(3-sulfopropyl)-3-metho*yaniline,sodiumsalt
AMPSO3-[(1,1-Dimethyl-2-hydro*yethyl)amino]-2-hydro*ypropanesulfonicacid
BCIP钠盐BCIP-Na2
CHAPSOCHAPSO
CM琼脂糖凝胶CL-6BCMSepharose"CL-6B
D-(-)-酒石酸二甲酯Dimethyl-D-tartrate
D-(-)-酒石酸二乙酯Diethyl-D-tartrate
D-(-)-酒石酸二异丙酯Diisoprropyl-D-tartrate
D-(+)-对甲基二苯甲酰酒石酸(无水物)Di-p-toluoyl-D-tartaricacid
D-(+)-对甲基二苯甲酰酒石酸(一水物)Di-p-toluoyl-D-tartaricacidmonohydrate
D-(+)-二苯甲酰酒石酸(无水物)Dibenzoyl-D-tartaricacid
D-(+)-二苯甲酰酒石酸(一水物)Dibenzoyl-D-tartaricacidmonohydrate
D(+)木糖D(+)*ylose
D(+)-苹果酸D-(+)-Malicacid
D+半乳糖D+Galactose
DAOSN-Ethyl-N-(2-hydrro*t-3-sulfopropyl)-3,5-dimetho*yaniline,sodiumsalt
DEAE葡聚糖DEAE(Diethaminoethyl)De*tran
DEAE琼脂糖凝胶CL-6BDEAESepharoseCL-6B
DL-丙氨酸DL-Alanine
DL-蛋氨酸(甲硫氨酸)DL-Methionine
DL-赖氨酸DL-Lysine
DL-酪氨酸DL-Tyrosine
DL-苹果酸DL-MalicAcid
DL-乳酸锂DL-LacticAcid,LithiumSalt
DL-天冬氨酸DL-AsparticAcid
DL-天冬氨酸钾盐DL-AsparticAcid(PotassiumSalt)
DL-天冬氨酸镁盐DL-AsparticAcid(MagnesiumSalt)
DL-天冬酰胺DL-Asparticmonohydrate
D-阿拉伯糖D(-)-Arabinose
D-氨基葡萄糖硫酸钾D-glucosaminepotassiumsulfate
D-氨基葡萄糖硫酸钠D-glucosaminesodiumsulfate
D-氨基葡萄糖盐酸盐D-glucosaminehydrochloride
D-半乳糖D-Galactose
D-苯丙氨酸D-Phenylalanine
D-丙氨酸D-Alanine
D-蛋氨酸(甲硫氨酸)D-Methionine
D-脯氨酸D-Proline
D-甘露醇D-Mannitol
D-谷氨酰胺D-Glutamine
D-果糖D-Fructose
D-核糖D-Ribose
D-精氨酸D-Arginine
D-酒石酸D-TartaricAcid
D-酪氨酸D-Tyrosine
D-亮氨酸D-Leucine
D-葡萄糖酸钠SodiumD-Gluconate
D-色氨酸D-Tryptophan
D-生物素D-Biotin
D-天冬酰胺D-Asparticmonohydrate
D-缬氨酰苯丙氨酰赖氨酰对硝基苯胺二盐酸盐H-D-Val-Phe-Lys-pNA-2HCl
G-418G-418
L-(-)-对甲基二苯甲酰酒石酸(无水物)Di-p-toluoyl-L-tartaricacid
L-(-)-对甲基二苯甲酰酒石酸(一水物)Di-p-toluoyl-L-tartaricacidmonohydrate
L-(-)-二苯甲酰酒石酸(无水物)Dibenzoyl-L-tartaricacid
L-(-)-二苯甲酰酒石酸(一水物)Dibenzoyl-L-tartaricacidmonohydrate
L-(+)-酒石酸二甲酯Dimethyl-L-tartrate
L-(+)-酒石酸二乙酯Diethyl-L-tartrate
L-(+)-酒石酸二异丙酯Diisopropyl-L-tartrate
L-阿拉伯糖L-Arabinose
L-半胱氨酸L-Cysteine
L-半胱氨酸盐酸盐L-Cysteinehydro*ychloride
L-苯丙氨酸L-Phenylalanine
L-丙氨酸L-Alanine
L-蛋氨酸(甲硫氨酸)L-Methionine
L-脯氨酸L-Proline
L-谷氨酸L-GlutamicAcid
L-谷氨酰胺L-Glutamine
L-精氨酸L-Arginine
L-精氨酸盐L-ArginineMono-HCl
L-抗坏血酸(维生素C)L-AscorbicAcid(FreeAcid)
L-赖氨酸醋酸盐L-LysineAc
L-赖氨酸盐酸盐L-LysineHCl
L-酪氨酸L-Tyrosine
L-酪氨酸甲酯L-Tyr-Ome
L-酪氨酸乙酯盐酸盐H-L-Tyr-OEt.HCl
L-亮氨酸(白氨酸)L-Leucine
L-鸟氨酸盐酸盐L-Ornithine-monohydrochloride
L-羟脯氨酸L-Hydro*yproline
L-色氨酸L-Tryptophan
L-色氨酸甲酯盐酸盐H-L-Trp-OMe.HCl
L-鼠李糖L-Rhamnose
L-丝氨酸L-Serine
L-苏氨酸L-Threonine
L-天冬氨酸L-AsparticAcid
L-天冬氨酸钾盐L-AsparticAcid(PotassiumSalt)
L-天冬氨酸镁盐L-AsparticAcid(MagnesiumSalt)
L-天冬酰胺L-Asparticmonohydrate
L-缬氨酸L-Valine
L-异亮氨酸Isoleucine
L-组氨酸盐酸盐L-Histidine
N
(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(丙谷二肽)N-
(2)-L-alanyl-L-glutamine(Ala-Gln)
N-(2-乙酰氨基)-2-氨基乙磺酸ACES
N-(2-乙酰氨基)亚氨基二乙酸ADA
N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙烷磺酸BES
N,N-双(2-羟乙基)甘氨酸Bicine
N,N'-羰基二咪唑CDI(N,N'-Carbonyldiimidazole)
N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸HEPES(FreeAcid)
N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸钠HEPES(SodiumSalt)
N-4-羟乙基哌嗪-N-2-丙磺酸HEPPS(FreeAcid)
N-4-羟乙基哌嗪-N-2-羟基丙磺酸HEPPSO(FreeAcid)
N-甲基-D-葡糖胺N-Methyl-D-gluc
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