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酶的本质特性及相关实验探究
酶的本质、特性及相关实验探究
[最新考纲] 1.酶在代谢中的作用(Ⅱ)。
2.实验:
探究影响酶活性的因素。
1.酶的本质及作用
化学本质
绝大多数是蛋白质
少数是RNA
合成原料
氨基酸
核糖核苷酸
合成场所
核糖体
主要是细胞核
来源
一般来说,活细胞都能产生酶
生理功能
具有催化作用
作用原理
降低化学反应的活化能
■助学巧记
巧记酶概念的“二、一、一、一”
2.酶的作用原理
如图曲线表示在无酶催化条件和有酶催化条件下某化学反应的能量变化过程。
(1)无酶催化的反应曲线是②。
(2)有酶催化的反应曲线是①。
(3)ca段的含义是在无催化剂的条件下,反应所需要的活化能。
(4)ba段的含义是酶降低的活化能。
(5)若将酶催化改为无机催化剂催化该反应,则b点在纵轴上将向上移动。
3.比较过氧化氢在不同条件下的分解
(1)实验流程
(2)变量分析:
4.酶本质的探索(连一连)
提示
(1)-e
(2)-a (3)-c (4)-d (5)-b
1.甲、乙两种酶用同一种蛋白酶处理,酶活性与处理时间的关系如下图所示,请思考:
(1)甲、乙两种酶的化学本质分别是什么?
请说出判断依据。
(2)乙酶活性改变的机制是什么?
其活性能否恢复?
(3)欲让甲、乙两种酶的变化趋势换位,应加入何类酶?
提示
(1)观察曲线图可知,甲酶的活性始终保持不变,表明甲酶能抵抗该种蛋白酶的降解,则甲酶的化学本质不是蛋白质而是RNA,乙酶能被蛋白酶破坏,活性降低,则乙酶为蛋白质。
(2)乙酶被降解的过程中其分子结构会发生改变,从而使其活性丧失,这种活性的改变不可逆转,故无法恢复。
(3)RNA水解酶。
2.下列是与酶相关的两个实验,请仔细分析并思考:
实验二
(1)实验一的目的及结论①②分别是什么?
(2)实验二的目的及组①的作用是什么?
组②中“?
”处的内容是什么?
提示
(1)探究酶的化学本质,结论①的内容:
该酶是蛋白质;结论②的内容:
该酶是RNA。
(2)验证酶的催化作用;组①的作用是作为“对照组”;组②“?
”处的内容为“等量的相应酶溶液”。
酶的化学本质
1.(2015·海南卷,4)关于生物体产生的酶的叙述,错误的是( )
A.酶的化学本质是蛋白质或RNA
B.脲酶能够将尿素分解成氨和CO2
C.蛋白酶和淀粉酶都属于水解酶类
D.纤维素酶能够降解植物细胞壁和细菌细胞壁
解析 植物细胞细胞壁由纤维素和果胶组成,细菌细胞壁由肽聚糖等物质组成,而酶具有专一性,纤维素酶只能催化水解纤维素,D错误。
答案 D
2.(2016·山西康杰中学等联考)下列关于酶的叙述正确的是( )
A.酶是由腺细胞合成的具有催化作用的有机物
B.所有酶用双缩脲试剂进行检测都可以呈现紫色反应
C.酶分子在催化反应完成后立即被降解成氨基酸
D.消化酶在消化腺细胞内合成并分泌到细胞外的过程中共穿过0层磷脂双分子层
解析 酶是由活细胞合成的具有催化作用的有机物,A错误;酶的化学本质多数是蛋白质,少量的是具有催化活性的RNA,蛋白质用双缩脲试剂进行检测都可以呈现紫色反应,RNA不能,B错误;酶分子在催化反应完成后可以被再次利用,C错误;消化酶经合成并分泌到细胞外的过程是胞吐作用,不穿过膜,故共穿过0层磷脂双分子层,D正确。
答案 D
(1)从酶的化学本质上讲,绝大多数酶是蛋白质,少数酶是RNA。
在高中教材中常见的一些酶(如淀粉酶、蛋白酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶等),若无特别说明,其本质都是蛋白质。
(2)若题目信息中告知某催化功能的物质经蛋白酶处理后“丧失活性”,则该酶为蛋白质,仍具活性,则该酶为RNA。
酶的作用
1.(2013·课标Ⅱ,6)关于酶的叙述,错误的是( )
A.同一种酶可存在于分化程度不同的活细胞中
B.低温能降低酶活性的原因是其破坏了酶的空间结构
C.酶通过降低化学反应的活化能来提高化学反应速度
D.酶既可以作为催化剂,也可以作为另一个反应的底物
解析 低温只能降低酶的活性,并没有改变酶的空间结构,当温度回到最适温度时,酶的催化效率仍然可以达到最大;而高温、强酸和强碱会破坏酶的空间结构,从而导致酶活性的降低甚至丧失,所以B错误。
答案 B
2.(2016·安徽六校联考)下图表示某反应进行时,有酶参与和无酶参与的能量变化,则下列叙述正确的是( )
A.此反应为放能反应
B.曲线Ⅰ表示有酶参与
C.E1为反应前后能量的变化
D.酶参与反应时,所降低的活化能为E4
解析 曲线Ⅱ是有酶催化条件下的能量变化,其降低的活化能为E4,反应前后能量的变化应为E3,反应产物的能量值比原料的高,反应应为吸能反应。
答案 D
1.对酶在细胞代谢中作用的理解
(1)酶只能催化热力学上允许进行的反应。
(2)酶通过降低活化能加快化学反应速率。
(3)酶只提高化学反应速率,缩短反应时间,不会改变化学平衡的位置。
(4)在反应前后,酶的化学性质和数量将保持不变。
2.高考常考的10种酶及其作用归纳
(1)DNA聚合酶:
将单个的脱氧核苷酸通过磷酸二酯键连接成链。
(2)DNA连接酶:
将两个DNA片段连接起来。
(3)RNA聚合酶:
将单个的核糖核苷酸连接成链,并能够在转录时打开DNA碱基对间的氢键。
(4)解旋酶:
在DNA分子复制过程中打开DNA碱基对之间的氢键。
(5)ATP水解酶:
能打开远离腺苷的高能磷酸键。
(6)ATP合成酶:
能连接远离腺苷的高能磷酸键。
(7)限制性核酸内切酶:
识别特定的核苷酸序列,从固定的切点切开磷酸二酯键。
(8)蛋白酶:
将蛋白质的部分肽键切断,得到不同的肽链和氨基酸。
(9)纤维素酶、果胶酶:
水解纤维素、果胶,破坏植物细胞壁。
(10)胰蛋白酶、动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶——第一次为用其处理“剪碎的组织”以使分散成单个细胞,第二次为“用其处理贴于瓶壁生长的细胞”。
1.酶的特性
(1)高效性:
催化效率约是无机催化剂的107~1013倍。
(2)专一性:
每一种酶只能催化某一种或一类化学反应。
(3)作用条件较温和:
在最适温度和pH条件下,酶的活性最高;高温、过酸、过碱会使酶的空间结构遭到破坏而失活;低温条件下酶的活性很低,但空间结构稳定。
2.酶特性相关模型分析
(1)酶的高效性
①与无机催化剂相比,酶的催化效率更高。
②酶只能缩短达到化学平衡所需的时间,不能改变化学反应的平衡点。
(2)酶的专一性
①图像模型解读
解读:
图中A表示酶,B表示被酶催化的底物,E、F表示B被分解后产生的物质,C、D表示不能被A催化的物质。
②曲线模型解读
加入酶B的反应速率和无酶条件下的反应速率相同,说明酶B对此反应无催化作用。
加入酶A的反应速率随反应物浓度的增大明显加快,说明酶具有专一性。
(3)影响酶促反应速率的因素分析
1.真题重组 判断正误
(1)如图在t时加酶后反应曲线由Ⅰ变为Ⅲ(2015·广东卷,36A)(√)
(2)淀粉酶溶液中加入蛋白酶不会导致淀粉酶活性发生变化(2012·海南卷,T4B)(×)
(3)不同酶的最适温度可能相同(2013·海南卷,T3A)(√)
(4)随着温度降低,酶促反应的活化能下降(2013·海南卷,T3B)(×)
(5)酶活性最高时的温度不适合酶的保存(2013·海南卷,T3C)(√)
以上内容侧重于酶的本质、酶的催化特性及酶活性的影响因素的考查;相关内容对应教材P78~85,把握酶作用的三大特性及相关内涵是解题的关键。
2.(教材必修1P78“问题探讨”思考内容改编)1773年,意大利科学家斯帕兰札尼做了一个巧妙的实验:
将肉块放入小巧的金属笼内,然后让鹰把小笼子吞下去。
过一段时间后,他把小笼子取出来,发现笼内的肉块消失了,下列叙述错误的是( )
A.该实验要解决的问题是:
鸟类的胃是否只有物理性消化,没有化学性消化
B.该实验的推论是“是胃内的化学物质将肉块分解了”
C.欲证明相关推论可收集胃内的化学物质,看看这些物质在体外是否也能将肉块分解
D.胃内的化学物质只能在胃内发挥“分解肉块”的作用,若该物质“提取出来”,则不能将肉块分解
解析 胃内化学物质中含“胃蛋白酶”,即使在胃外,也能将肉块分解。
答案 D
酶的作用特性
1.(2015·江苏卷)下列关于酶的叙述,正确的是( )
A.发烧时,食欲减退是因为唾液淀粉酶失去了活性
B.口服多酶片中的胰蛋白酶可在小肠中发挥作用
C.用果胶酶澄清果汁时,温度越低澄清速度越快
D.洗衣时,加少许白醋能增强加酶洗衣粉中酶的活性
解析 高烧使体温升高,降低了体内酶的活性而不是失活,使消化功能减退,导致食欲减退,A错误;口服多酶片由于有糖衣的保护使胰蛋白酶到达小肠才被释放,发挥作用,B正确;在一定范围内,温度越低,酶活性越低,果汁中果胶的分解速度越慢,C错误;洗衣粉中的碱性蛋白酶在弱碱性条件下活性最强,D错误。
答案 B
2.下图是验证“酶的催化效率”活动的示意图。
甲、乙两试管中发生的现象可用于证明酶具有( )
A.高效性B.专一性
C.多样性D.易变性
解析 二氧化锰属无机催化剂,它和肝脏研磨液中过氧化氢酶相比较,通过后者催化产生较多气泡或气泡产生速率快可用于验证酶具高效性。
答案 A
影响因素制约酶活性的机理
(1)高温、过酸、过碱——可破坏酶分子空间结构而导致酶永久性失活(不可逆转)。
(2)低温——仅抑制酶活性,并不破坏酶分子空间结构,当温度适当升高时活性尚可恢复。
(3)酶活性还受某些激活剂或抑制剂的影响,前者可提升酶活性,后者则降低酶活性。
酶的活性影响因素曲线模型分析
【典例】(2016·全国课标卷Ⅱ,29)为了研究温度对某种酶活性的影响,设置三个实验组:
A组(20℃)、B组(40℃)和C组(60℃),测定各组在不同反应时间内的产物浓度(其他条件相同),结果如图。
回答下列问题:
(1)三个温度条件下,该酶活性最高的是________组。
(2)在时间t1之前,如果A组温度提高10℃,那么A组酶催化反应的速度会________。
(3)如果在时间t2时,向C组反应体系中增加2倍量的底物,其他条件保持不变,那么在t3时,C组产物总量________,原因是_________________________。
(4)生物体内酶的化学本质是________,其特性有______________________
___________________________________________________(答出两点即可)。
[慧眼识图 获取信息]
答案
(1)B
(2)加快 (3)不变 60℃条件下,t2时酶已失活,即使增加底物,反应产物总量也不会增加 (4)蛋白质或RNA 高效性、专一性
【对点小练】
(2016·江西师大附中月考)如图曲线b表示在最适温度和pH条件下,反应物浓度与酶促反应速率的关系。
据图分析正确的是( )
A.增大pH,重复该实验,A、B点位置都不变
B.B点后,升高温度,酶活性增加,曲线将呈现c所示变化
C.酶量增加后,图示反应速率可用曲线a表示
D.反应物浓度是限制曲线AB段反应速率的主要因素
解析 题干中提出“曲线b表示在最适温度和pH条件下”,因此如果增大pH,酶的活性会下降,A、B点位置都会下移,故A错误;曲线b是在最适温度条件下测得的,如果升高温度,酶活性将会下降,反应速率应在B点后下降,故B错误;曲线b在B点时反应速率不再增加,这是受酶的数量的限制,因此如果酶量增加,图示反应速率可用曲线c表示,故C错误;图中可以看出,在曲线AB段反应速率与反应物浓度呈正相关,因此反应物浓度是限制曲线AB段反应速率的主要因素,故D正确。
答案 D
“四看法”分析酶促反应曲线
方法1 用“试剂检测法”鉴定酶的本质
可采用“试剂检测法”或“蛋白酶水解法”确认酶的化学本质——若酶为蛋白质,则遇双缩脲试剂可呈紫色,并且用蛋白酶处理可失活。
同理若为RNA,则遇吡罗红呈红色,且用蛋白酶处理仍具生物活性,而用RNA水解酶处理会丧失活性。
方法2 用“对比实验法”探究或验证酶的高效性、专一性及影响酶活性的因素
(1)验证酶的高效性
①设计思路
验证酶高效性的方法是“对比法”,实验变量为不同类型催化剂,因变量为底物的反应速率进行比较。
②设计方案
项目
实验组
对照组
材料
等量的同一种底物
试剂
与底物相对应的“酶溶液”(如生物材料研磨液)
等量的“无机催化剂”
现象
反应速率很快,或反应用时短
反应速率缓慢,或反应用时长
结论
酶具有高效性
(2)酶的专一性的实验探究方法——对比法
①设计思路:
常见的方案有两种,即底物相同但酶不同或底物不同但酶相同,最后通过观察酶促反应能否进行得出结论。
②设计方案
方案一
方案二
③结果分析:
根据底物性质选用相应试剂检测,若实验组底物被分解,对照组底物不被分解,则证明酶具专一性。
④实验成功关键点
若选择淀粉、蔗糖、淀粉酶做酶的专一性实验,最好选用斐林试剂检测反应物是否被分解,一般不选用碘液,因其无法检测蔗糖是否被分解。
方法3 用“梯度法”探究影响酶活性的因素(温度或pH)
(1)设计思路:
设计实验时需设置一系列不同温度(或pH)的实验组进行相互对照,最后根据实验现象得出结论。
酶促反应所需时间最短的一组对应的温度(或pH)最接近最适温度(或pH)。
相邻组间的差值(即梯度值)越小,测定的最适温度(或pH)就越精确。
(2)设计方案
组别编号
1
2
…
n
实验材料
等量的同种底物和酶
温度(或pH)
t1(或a1)
t2(或a2)
…
tn(或an)
衡量指标
相同时间内,各组酶促反应中生成物量的多少,或底物剩余量的多少
实验结论
生成物量最多的一组,或底物剩余量最少的一组对应的温度(或pH)最接近最适温度(或pH)
【典例1】(2016·全国课标卷Ⅰ,3)若除酶外所有试剂已预保温,则在测定酶活力的试验中,下列操作顺序合理的是( )
A.加入酶→加入底物→加入缓冲液→保温并计时→一段时间后检测产物的量
B.加入底物→加入酶→计时→加入缓冲液→保温→一段时间后检测产物的量
C.加入缓冲液→加入底物→加入酶→保温并计时→一段时间后检测产物的量
D.加入底物→计时→加入酶→加入缓冲液→保温→一段时间后检测产物的量
解析 测定酶活力影响因素时,在改变被探究因素之前,务必防止酶与底物混合,故只有C选项所述操作顺序正确。
答案 C
【典例2】(2012·全国卷)某同学为了探究pH对人唾液淀粉酶活性的影响,设计了如下实验步骤:
①在A、B、C、D、E5支试管中分别加入pH5.0、6.0、7.0、8.0、9.0的适宜浓度缓冲液5mL,再分别加入质量分数为1%的淀粉液1mL。
②各试管中分别加入适当浓度的唾液稀释液1mL,摇匀。
③将5支试管放入70℃恒温水浴中,保温时间相同且合适。
④取出各试管,分别加入斐林试剂2mL,摇匀。
⑤观察各试管溶液的颜色,通过颜色深浅判断唾液淀粉酶作用的最适pH。
上述实验步骤中有2处错误,请更正并说明更正的理由(不考虑试剂的浓度和加入量、pH梯度以及实验重复次数),以便实验能得到正确的预期结果。
(1)_____________________________________________________________。
(2)_____________________________________________________________。
解析
(1)酶的活性受温度的影响,本题探究的是pH对酶活性的影响,因此,温度应为无关变量,必须适宜,而70℃恒温水浴的温度过高,会导致5组试管中的酶因高温而失活,最终使不同pH下的实验结果一样。
(2)本题使用的是斐林试剂,通过检测产物的生成量来确定酶的活性高低,用斐林试剂鉴定还原糖必须要加热,如果不加热,则任何一组都不会发生颜色反应。
答案
(1)③中70℃应改为37℃。
因为人唾液淀粉酶作用的最适温度为37℃
(2)在观察各试管中溶液的颜色之前应将各试管放在沸水浴中一段时间。
因为在高温条件下斐林试剂与还原糖反应显色
酶的化学本质、特性、影响因素及其在细胞代谢中的作用及相关实验探究等是本专题的高频考点,题目既有选择题,又有非选择题。
选择题通常是综合考查与酶有关的叙述的判断,或通过图示及坐标曲线考查对酶相关知识的分析理解,非选择题则以实验设计与分析的形式考查酶的特性,如2016、2013、2012、2011全国卷均考查了酶相关实验设计。
【对点小练】
(原创)下表为某探究实验的步骤,请分析并回答下列问题:
序号
加入试剂或处理方法
试管
A
B
C
a
b
c
1
可溶性淀粉溶液
2mL
2mL
2mL
/
/
/
新鲜唾液淀粉酶溶液
/
/
/
1mL
1mL
1mL
2
保温5min
37℃
80℃
0℃
37℃
80℃
0℃
3
将a液加入到A试管中,b液加入到B试管中,c液加入到C试管中,摇匀
4
保温5min
37℃
80℃
0℃
5
滴入碘液,摇匀
2滴
2滴
2滴
6
观察现象并记录
(1)此探究实验的课题名称是____________。
(2)在此实验中,因变量是用________检测的。
A、B、C三支试管中,________试管中酶的活性最高。
(3)实验结束后,将B试管所处温度降到唾液淀粉酶的适宜温度,现象是__________________________________________________________________。
(4)有人建议用淀粉酶探究温度对酶活性的影响,用过氧化氢酶探究pH对酶活性的影响,而不能将实验所用酶互换,试说明提出此建议的理由:
__________
__________________________________________________________________。
解析
(1)从表中信息可知,温度是自变量,所以本实验探究的是温度对酶活性的影响。
(2)可溶性淀粉在唾液淀粉酶的作用下可被分解为还原糖,淀粉遇碘变蓝,还原糖遇碘颜色不发生变化,所以可用碘液来检测因变量。
唾液淀粉酶的最适温度是37℃,所以A试管中酶的活性最高。
(3)实验时,B试管所处的温度为80℃,此时酶已失活,实验结束后,将B试管所处温度降到唾液淀粉酶的适宜温度,酶的活性不会恢复,故B试管中的现象是没有发生变化。
答案
(1)探究温度对酶活性的影响
(2)碘液 A (3)没有变化 (4)酸能催化淀粉水解,过氧化氢随温度升高分解加快,这些因素都会对实验结果造成干扰
酶活性实验探究中的“三宜”“四不宜”
(1)若底物选择淀粉和蔗糖,用淀粉酶来验证酶的专一性时,检测底物是否被分解的试剂宜选用斐林试剂,不宜选用碘液,因为碘液无法检测蔗糖是否被分解。
(2)若选择淀粉和淀粉酶探究酶的最适温度,检测底物被分解的试剂宜选用碘液,不宜选用斐林试剂,因为用斐林试剂鉴定时需水浴加热,而该实验中需严格控制温度。
(3)在探究酶的适宜温度的实验中,不宜选择过氧化氢(H2O2)和过氧化氢酶作实验材料,因为过氧化氢(H2O2)在常温常压时就能分解,加热的条件下分解会加快,从而影响实验结果。
(4)在探究pH对酶活性影响时,宜保证酶的最适温度(排除温度干扰),且将酶溶液的pH调至实验要求的pH后再让反应物与底物接触,不宜在未达到预设pH前,让反应物与酶接触。
易错·防范清零
[易错清零]
易错点1 对酶产生场所、化学本质、作用、来源等存在系列误区
点拨 防范“酶”的错误说法
项目
正确说法
错误说法
化学本质
绝大多数是蛋白质,少数是RNA
酶的本质是蛋白质
产生部位
一般来说,凡是活细胞都能产生酶(不考虑哺乳动物的成熟红细胞)
具有分泌功能的细胞才能产生酶
合成原料
氨基酸或核糖核苷酸
氨基酸
合成场所
核糖体或细胞核等
核糖体
生理功能
生物催化剂,只起催化作用
酶具有调节、催化等多种功能
来源
生物体内合成
有的来源于食物
作用场所
既可在细胞内,也可在细胞外、体外发挥作用
只有细胞内起催化作用
温度影响
低温影响酶的活性,不破坏酶的结构,但高温易使酶失活
低温会引起酶变性失活
易错点2 混淆激素、酶、抗体等5类常考的“专一性”物质
点拨 着眼于四角度比较“酶”与“激素”
易错点3 混淆“酶促反应速率”与“酶活性”
点拨 酶促反应速率不同于酶活性:
①温度、pH都能影响酶的空间结构,改变酶的活性,进而影响酶促反应速率。
②底物浓度和酶浓度是通过影响底物与酶的接触面积而影响酶促反应速率的,并不影响酶的活性。
[纠错小练]
1.下列关于酶的论述,正确的是( )
①对底物有严格的选择性 ②酶在体内不能更新 ③温度越高酶的活性越大 ④酶制剂通常在低温下保存 ⑤酶能降低化学反应的活化能 ⑥酶只能在细胞内发挥催化作用 ⑦酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物
A.①④⑤⑦B.②④⑤⑦
C.②③④⑥D.①②⑥⑦
解析 绝大多数酶是蛋白质,在体内不能贮存,所以要不断更新。
温度过高会使酶失活。
酶可以在细胞内、细胞外、体外发挥催化作用。
只要是活细胞(哺乳动物成熟红细胞除外)就可以合成酶,酶的合成场所主要是核糖体,有的是在细胞核中,所需原料为氨基酸或核糖核苷酸。
酶的催化作用具有专一性,故对底物有严格的选择性。
酶的作用本质是降低化学反应的活化能。
低温和高温均可使酶活性降低,但机理不同,低温只是抑制酶的活性,不会使酶变性失活,而一定的高温会使酶活性降低,温度过高会使酶变性失活。
答案 A
2.(2016·山东师大附中三模,10)下列关于酶的叙述中,正确的是( )
A.能产生激素的细胞一定能产生酶
B.能产生酶的细胞一定能产生激素
C.人体中酶只在内环境中起作用
D.酶都是由内分泌腺细胞合成的
解析 几乎所有活细胞都能产生酶,而激素仅由内分泌腺细胞产生,A正确,B、D错误;酶可在细胞内、细胞外发挥作用,在体外也能发挥作用,C错误。
答案 A
3.某同学在研究化合物P对淀粉酶活性的影响时,得到如图所示的实验结果。
下列有关叙述中正确的是( )
A.在一定范围内,底物浓度影响着酶活性
B.曲线②为对照组实验结果
C.若反应温度不断升高,则A点将持续上移
D.P对该酶的活性有抑制作用
解析 底物浓度可影响酶促反应速率,但不影响酶活性,A不正确;曲线①为对照组,②为实验组,由图可知,化合物P对该酶的活性有抑制作用,D项正确;其他条件适宜,当反应温度超过最适温度后,温度不断升高,酶活性将减弱,A点下降,C项错误。
答案 D
随堂·真题演练
1.(2016·江苏卷,8)过氧化物酶能分解H2O2,氧化焦性没食子酸呈橙红色。
为探究白菜梗中是否存在过氧化物酶,设计实验如下表。
下列相关叙述正确的是( )
管号
1%焦性没食子酸/mL
2%
H2O2/mL
缓冲液/mL
过氧化物酶溶液/mL
白菜梗提取液/mL
煮沸冷却后的白菜梗提取液/mL
1
2
2
2
-
-
-
2
2
2
-
2
-
- 配套讲稿:
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- 本质 特性 相关 实验 探究