高考生物实验检测附解析.docx
- 文档编号:28189827
- 上传时间:2023-07-09
- 格式:DOCX
- 页数:22
- 大小:68.04KB
高考生物实验检测附解析.docx
《高考生物实验检测附解析.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《高考生物实验检测附解析.docx(22页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
高考生物实验检测附解析
高考生物教材中所有实验归类
课本实验
(一)-----------提取鉴定类
一、生物组织中的还原糖、蛋白质的鉴定:
1.糖中的还原糖(如、和与温水浴发生生成砖红色沉淀的反应;脂肪可以被染色染成(或被染成),蛋白质与发生反应,可以产生。
2.做还原糖的鉴定实验,应选择含糖量、颜色为的植物组织,以、为最好。
做脂肪类鉴定实验,应该选择富含脂肪的为最好,实验前浸泡3—4h。
做蛋白质的鉴定实验,可用浸泡1—2d的(或),或用。
3.还原糖的鉴定过程:
⑴制备。
⑵实验操作方法和观察:
①取一支试管,向试管内注入2ml苹果组织样液;②向试管内注入2ml的刚配置的,振荡试管,使溶液,此时溶液呈;③将试管放入盛有开水的大烧杯中,用酒精灯。
斐林试剂的使用方法:
甲液:
乙液:
,现配现用,等量混合,需水浴加热至50-60℃。
脂肪的鉴定过程:
⑴制备;⑵实验操作方法和观察:
①用滴管在花生子叶薄片上滴;②用1-2滴体积分数为50℅的溶液洗去浮色;③制作;④低倍镜找目标;⑤高倍镜观察。
蛋白质的鉴定过程:
⑴制备生物或;⑵制备;⑶实验操作方法和观察:
①取一支试管,向试管内注入;②向试管内注入2ml的,振荡试管,此时颜色为;③再向试管中加入,此时颜色为。
双缩脲试剂的使用方法:
A液:
,B液:
,先加A液,后加B液,不加热。
二.叶绿体中色素的提取和分离
1.叶绿体色素能够滤纸上彼此分离的原因:
叶绿体色素在层析液中不同,其不同。
2.在圆形滤纸中央点上叶绿体色素滤液进行色素分离,会得到近似同心的四圈色素环,最外圈的
是。
3.在叶绿素色素的提取和分离实验中,丙酮(可用酒精代替)用来,层析液用来,实验中不让层析液没及滤液细线的原因是:
防止色素溶解在中;将滤纸条一端剪去两角的目的是:
使层析液在,以免色素重叠。
4.在叶绿素色素的提取和分离实验中:
⑴提取色素时,将剪碎的5g绿叶和少量的二氧化硅、碳酸钙和一起放入研钵中研磨。
研磨时迅速充分,这样操作的目的是:
缩短研磨时间,减少的挥发,最大限度的得到叶绿体色素。
加入二氧化硅、碳酸钙的目的分别是:
为了、防止研磨时被破坏。
若不加入二氧化硅,则色素量少,4条色素带均变窄;若不加入碳酸钙,叶绿素受到破坏,则两条叶绿素的色素会,而两条类胡萝卜素的色带。
⑵分离后的色素带中,最宽的是。
自下而上的色素带依次是、、、和。
⑶用毛细吸管画滤液细线时,为什么越细越齐越好?
避免。
三.模拟糖尿的检测实验
⑴原理:
葡萄糖试纸是一种酶试纸,由葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶和某种无色的化合物固定于滤纸上制成的。
当尿液滴到酶试纸上时,尿液中的葡萄糖在的催化作用下生成和,过氧化氢在过氧化氢酶的催化作用下形成水和氧气,氧可以将滤纸上的化合物氧化成的化合物,使滤纸呈现特定的颜色,再与比色卡相比对,即可知道尿液中葡萄糖的含量。
⑵取样:
正常人的尿液和糖尿病患者的尿液。
⑶检测方法:
试剂(水浴加热)或。
⑷结果:
(用斐林试剂检测)试管内出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。
因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖,与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无还原糖,所以没有发生反应。
课本实验
(二)-----------显微观察类
1、观察DNA和RNA在细胞中的分布
原理:
盐酸能改变,加速进入细胞,同时使染色体中的与分离。
甲基绿和吡罗红对DNA、RNA的不同,甲基绿使染成绿色,吡罗红使染成红色。
甲基绿吡罗红是混合染液,要。
步骤:
(1)制片:
将牙签刮下的口腔上皮细胞置于玻片上0.9%的NaCl溶液滴;②载玻片烘干。
(0.9%的NaC溶液防止,维持;烘干使固定在载玻片上。
(2)水解:
中30℃保温5min。
(3)冲洗:
用缓流冲洗10分钟;(4)染色:
2滴染色5分钟;(5)显微镜下观察。
分布:
真核生物的DNA主要分布在中,和也含有少量的DNA;RNA主要分布在中。
2、用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体及观察多种多样的细胞
高等绿色植物的叶绿体存在于,一般为扁平的或形状,可以用观察它的形态和分布。
用染液染色后的细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质染成无色。
高倍显微镜的使用:
在低倍镜下观察清楚,找到物像→将物像移到视野中央→转动换用高倍镜观察→转动,直到看清楚为止。
显微镜成的实像,物像的移动方向与玻片标本的移动方向。
例实物为字母“b”,则视野中观察为“q”。
若物像在偏,则装片应向移动。
移动规律:
向的方向移动。
但研究细胞质环流方向时,显微镜下观察的和实际环流方向一致。
三、观察植物细胞有丝分裂及低温诱导染色体数目加倍
1.观察有丝分裂实验时,装片的制作包括(常用试剂为的盐酸和体积分数为酒精溶液的混合物),、(染料为龙胆紫或醋酸洋红)、四个步骤,在低倍镜下观察,要首先找到细胞,其特点为核大,,细胞呈,排列紧密,有的细胞处于。
在高倍镜下观察,在一个视野中看到最多的是处
于细胞,原因是,形态最清晰的是。
2.低温诱导染色体数目加倍实验:
原理:
用低温处理植物分生组织细胞,能够的形成,以致影响拉向两极,细胞也不能分裂成两个细胞,于是,植物细胞发生变化。
方法步骤:
(1)洋葱长出约1cm左右的不定根时,放入冰箱的低温室内(4℃),诱导培养36h.
(2)剪取诱导处理的根尖约0.5-1cm,放入卡诺氏液中浸泡0.5-1h,以形态,然后用体积分数为冲洗2次。
(3)制作装片:
解离→漂洗→染色→制片(过程同观察细胞的有丝分裂的制片方法一样,染色剂是)。
(4)观察,比较:
视野中既有正常的,也有染色体改变的细胞。
(四)观察植物细胞的质壁分离与复原
1.实验的基本步骤有:
(1)制作装片:
①在洁净的载玻片上,滴一滴,注意水滴不要太大;②用镊子撕去一小块新鲜的洋葱鳞片叶(内或外)表皮放入水中展平,材料应薄而均匀;③盖上,并让其一侧先接触载玻片上的水面,轻轻倒下后再轻压,以防产生。
(2)观察洋葱细胞:
先用找到适合的部位,移于视野中央,看正常的细胞形态和液泡(色),原生质紧贴,再换成高倍镜观察。
(3)观察质壁分离:
用做质壁分离剂,从盖玻片一侧滴入,另一侧用吸引,重复数次,过一段时间后,看到液泡变,变,还应看到分离开来,由于蔗糖能自由通过,所以外界溶液即进入细胞壁与分离产生的空隙之间。
(4)观察复原,用做复原试剂,操作与观察同(3)相反。
2.发生质壁分离现象的外因:
植物细胞外界溶液浓度细胞液浓度,内因是相当于半透膜,比的伸缩性大。
3.若用纤维素酶处理植物细胞壁,再进行上述实验,能否看到质壁分离与复原现象?
为什么?
4.现提供适量的紫色的洋葱、蔗糖、蒸馏水及必要的仪器、工具等,请设计实验来测定洋葱表皮细胞浓度的方案。
(1)实验原理:
成熟的植物细胞是一个,当原生质层内外两侧的浓度存在时,植物细胞就可以通过。
当内外两侧溶液浓度相等时,及等渗条件,植物细胞也。
由此可以利用细胞的渗透作用来测定植物细胞液的浓度。
(2)实验方法与步骤:
①配制蔗糖溶液时,必须配制适当范围内的的蔗糖溶液;②制作装片,将撕取的洋葱表皮细胞制成若干个,用不同浓度的处理装片;③用显微镜观察时,必须观察情况,预计细胞液浓度。
(3)根据实验结果分析,该洋葱表皮细胞介于使洋葱表皮细浓度之间。
课本实验(三)—————比较探索类
一、酶的实验:
1.
(1)取三支洁净的试管,编号、、,并且分别注入可溶性淀粉溶液。
(2)将3支试管分别加入50℃、、0℃左右的热水,维持各自的温度分钟。
(3)在3支试管分别加入1ml新鲜的淀粉酶,摇匀后,维持各自的温度5分钟。
(4)在3支试管分别滴入1滴,然后。
(5)观察记录:
3支试管中溶液颜色的变化情况分别是50℃左右水浴加热的试管中成棕色,100℃的试管中成蓝色,0℃的试管中成蓝色。
2.酶专一性的验证实验
序号
项目
试管
1
2
1
注入可溶性淀粉
2ml
无
2
注入蔗糖溶液
无
2ml
3
50℃温水保温(第一次)
5min
5min
4
注入溶液
2mln振荡
2mln振荡
5
50℃温水保温(第二次)
5min
5min
6
加
1ml振荡
1ml振荡
7
将试管下部放入中
2min
2min
8
观察实验结果
结论
淀粉酶只能催化淀粉水解,不能催化蔗糖水解
3.比较过氧化氢在不同条件下分解的实验
自变量
因变量
无关变量
对照组
实验组
2号:
90℃水浴加热3号:
加入3.5%FeCl32滴
4号:
加入2%肝脏研磨液2滴
过氧化氢分解速度用产生的数目多少表示
加入过氧化氢的量:
实验室的温度;FeCl3和肝脏研磨液的新鲜程度
试管
试管
二、通过模拟实验探究膜的透性
1.实验原理:
某些半透膜(如动物的膀胱膜、肠衣等)可以让透过,而不能透过,或者(如玻璃纸)可以透过,而因为比较大,不能透过,可以用半透膜将不同浓度溶液分隔开,然后通过观察溶液变化,来观察半透膜的选择透过性,进而分析得出。
2.方法步骤:
(1)取2个长颈漏斗,分别在漏斗口处封上一层玻璃纸;
(2)在A漏斗处注入溶液,B漏斗中注入溶液,并加入少许,使其约呈红色;(3)将两个漏斗分别侵入盛有的烧杯中,在两漏斗的做记号;(4)静置一段时间后,观察烧杯中蒸馏水颜色的变化及长颈漏斗的变化,并将观察到的结果设计表格进行记录。
3.结果分析:
由于单位时间内透过进入的水分子数量多于从长颈漏斗渗出的水分子数量,使得管内液面升高。
如果烧杯中不是清水,而是同一浓度的蔗糖溶液,单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量渗出的水分子量,液面不会升高。
三.模拟探究细胞表面积与体积的关系
原理:
和酚酞相遇呈色。
在一定时间内,NaOH在琼脂块的每一侧扩散的距离大致相同。
步骤:
将含酚酞的琼脂块切成三块边长分别为cm、cm、cn的方形,放入烧杯中,加入溶液,10min后取出,用纸巾吸干,用塑料刀将琼脂块切成两半,观察切面,测量每一块扩散的
分析:
琼脂块表面积与体积之比(相当表面积)随着琼脂块的增大而,NaOH扩散的体积与整个琼脂块的体积之比也随着琼脂块的增大而减小。
结论:
,其相当表面积越小,细胞的物质运输的效率,细胞限制细胞长大。
四.探究酵母菌的核心方式
1.原理:
酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生,方程式:
在无氧时进行无氧呼吸,产生和。
方程式:
2装置:
下图为“探究酵母菌细胞呼吸的方式”的实验装置图,据图分析:
3.A瓶加入的试剂是NaOH,其目的是:
使进入B瓶的空气先经过NaOH处理,排除空气中对实验结果的干扰。
4.C瓶E瓶加入的试剂是澄清石灰水(或溴麝香草酚蓝水溶液),其作用是:
。
D瓶应封口放置一段时间后,再连通E瓶,其原因是:
D瓶耗完。
再连通E瓶,就可确保通入澄清石灰水(或溴麝香草酚蓝水溶液)的是酵母菌的所产生的。
5.检测:
(1)检测CO2的产生:
使澄清石灰水变浑浊,或溴麝香草酚蓝水溶液由变再变。
(2)检测酒精的产生:
色的溶液,在酸性条件下与酒精发生反应,变成色。
五、探究培养液中酵母菌数量的动态变化
探究原理:
酵母菌可以用培养基来培养。
培养基中酵母菌种群的增长情况与培养液中的、空气、、等因素有关。
可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线,从而掌握酵母菌的种群数量变化情况。
注意:
①在进行酵母菌计数时,由于酵母菌是单细胞生物,因此必须在显微镜下计数。
②从试管中吸取培养液进行计数前,需将试管轻轻振荡几次,目的是,以保证估算的正确性,减少误差。
③增长曲线的总趋势先增加再降低。
原因是在开始时培养液的营养充足,空间充裕,条件适宜,因此酵母菌大量繁殖,,随着酵母菌数量的不断增多,营养消耗,PH变化等,使生存条件恶化,酵母菌高于,种群数量下降。
④影响酵母菌种群数量的因素可能有、、、空间及等。
六、探究植物生长调节剂对插条生根的作用
1.实验原理是:
2.制作插条:
(1)选取长度相同,同种一年生的枝条5—6个。
(2)用2,4-D处理:
一组枝条用它浸泡,另一组不处理作对照。
(3)3—4周后观察扦插枝条的生根数,得出结论。
枝条生根容易程度和数量主要取决于和插枝在溶液中浸泡的。
实验中要注意:
温度一致、所用植物材料、设置(即每组多个枝条)。
课本实验(四)----------------调查实习类
1.调查人群中遗传病时最好选出群体中发病率较高的进行调查。
某种遗传病的发病率=某种遗传病的/某种遗传病的。
在分析统计结果时依据该遗传病在家庭(或家系)中发病情况。
一般可判断该遗传病的显隐性,依
据发病情况可确定该基因是否为伴性遗传。
2.取样调查法是指只计数种群的一小部分,用来估计整个种群的种群密度。
常用的方法是,选择一个该种群分布比较均匀的长方形地块来划取样方,样方面积为根据不同的情况选择。
特别注意:
调查时必须。
3.土壤动物丰富度的调查
(1)许多土壤动物有较强的,而且,因此不适应于用或进行调查,常用取样器取样法进行进行采集、调查。
(2)丰富度是指群落中的多少,即物种的,而不是具体的数目。
一般来说,环境条件越优越,群落发育的时间越长,物种越,群落结构也越。
(3)采集小动物时,要利用土壤动物的和。
4.探究水族箱(或鱼缸)中群落的演替
要求:
(1)水族箱必须是的,且是的,放置、光线良好的地方,但要避免阳光照射。
(2)组成成分:
、、消费者、分解者。
(3)各生物成分的数量,以免破坏。
实验原理:
在有限的空间内,依据生态系统的原理,将生态系统具有的成分进行组织,构建一个人工微型是可能的。
同时,这个人工生态系统的稳定性是有条件的,也可能是短暂的,它会发生群落的。
步骤:
(1)按100cmx70cmx50cm的标准制作生态缸框架。
(2)在生态缸内底部铺垫花土和沙土,花土在下面,一边高,一边低;沙土在上面,沙土厚5—7cm,在缸内底部倒入水。
(3)将采集或购买的动物和植物放在生态缸中。
(注意:
动物的个体不要太大,数量不要太多)(4)封上生态缸盖。
将生态缸放置在、的地方,但要避免阳光直接照射。
(5)每一天观察一次生态缸内生物种类与数量变化,并且进行记录,连续观察一星期。
将观察结果记录到表中。
5.探究土壤微生物的分解作用
(1)土壤微生物对落叶的分解作用:
对照组的土壤,实验组的土壤要,以尽可能排除的作用。
实验结果是观察到对照组的落叶与实验组的落叶相比腐烂程度要。
(2)土壤微生物对淀粉的分解作用:
A1、A2加蒸馏水,B1、B2加花泥(在室温20℃左右的环境下放置7天后),在A1、B1中加入,而在A2、B2中加入。
土壤对淀粉的分解作用观察到A1的溶液为色,B1的溶液颜色为色,而A2中则是的絮状沉淀,B2中则为色。
实验(五)----------------实验设计类
一、1.自变量:
也称为实验变量,指实验中由实验者所操纵的或。
因变量,亦称反应变量,指实验中由于而引起的变化和结果。
通常自变量是原因,因变量是结果,二者具有因果关系。
2.无关变量,亦称控制变量,指实验中除以外的影响实验现象或结果的因素或条件。
3.额外变量,也称为变量,指实验中由于其他原因或因素所引起的和。
二、实验分类:
和组。
实验组是指接受的对象组;对照组,亦称控制组,是不接受。
三、设计步骤:
一般分四步:
①取材、、编号(取材时要注意数量和生理及发育状态相同,用具要相同等);②处理和处理(根据实验变量设置对照。
注意:
单一因素不同,其他相同且最适);③培养:
进一步相同处理,其他因素相同且最适的继续处理;④、观察、、比较等
四、对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订(即找错误):
四步看:
一看、二看、三看、四看结果。
(依据实验设计的原则进行:
原则、原则、平行重复原则、原则等)。
高中生物学生实验归类答案
课本实验
(一)-----------提取鉴定类
二、生物组织中的还原糖、蛋白质的鉴定:
1.糖中的还原糖(如葡萄糖、果糖和麦芽糖与斐林试剂温水浴发生生成砖红色沉淀的反应;脂肪可以被苏丹Ⅲ染色染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色),蛋白质与双缩脲试剂发生反应,可以产生紫色反应。
2.做还原糖的鉴定实验,应选择含糖量较高、颜色为白色的植物组织,以苹果、梨为最好。
做脂肪类鉴定实验,应该选择富含脂肪的种子为最好,实验前浸泡3—4h。
做蛋白质的鉴定实验,可用浸泡1—2d的大豆种子(或用豆浆),或用鸡蛋蛋白。
3.还原糖的鉴定过程:
⑴制备生物组织样液。
⑵实验操作方法和观察:
①取一支试管,向试管内注入2ml苹果组织样液;②向试管内注入2ml的刚配置的斐林试剂,振荡试管,使溶液混合均匀,此时溶液呈蓝色;③将试管放入盛有开水的大烧杯中,用酒精灯加热。
斐林试剂的使用方法:
甲液:
0.1g/ml,乙液:
0.05g/mg的CuSO4溶液,现配现用,等量混合,需水浴加热至50-60℃。
脂肪的鉴定过程:
⑴制备生物组织实验材料;⑵实验操作方法和观察:
①用滴管在花生子叶薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液染色;②用1-2滴体积分数为50℅的酒精溶液洗去浮色;③制作临时装片;④低倍镜找目标;⑤高倍镜观察。
蛋白质的鉴定过程:
⑴制备生物大豆研磨液或豆浆;⑵制备蛋白质稀释液;⑶实验操作方法和观察:
①取一支试管,向试管内注入大豆组织样液;②向试管内注入2ml的双缩脲试剂A,振荡试管,此时颜色为白色;③再向试管中加入3-4滴双缩脲试剂B,此时颜色为紫色。
双缩脲试剂的使用方法:
A液:
0.1g/ml的NaOH溶液,B液:
0.01g/mlCuSO4溶液,先加A液2ml,后加B液3—4滴,不加热。
二.叶绿体中色素的提取和分离
1.叶绿体色素能够滤纸上彼此分离的原因:
叶绿体色素在层析液中溶解度不同,期扩散速度不同。
2.在圆形滤纸中央点上叶绿体色素滤液进行色素分离,会得到近似同心的四圈色素环,最外圈的是胡萝卜素。
3.在叶绿素色素的提取和分离实验中,丙酮(可用酒精代替)用来溶解色素,层析液用来分离色素,实验中不让层析液没及滤液细线的原因是:
防止色素溶解在层析液中;将滤纸条一端剪去两角的目的是:
使层析液在滤纸上扩散均匀,以免色素重叠。
4.在叶绿素色素的提取和分离实验中:
⑴提取色素时,将剪碎的5g绿叶和少量的二氧化硅、碳酸钙和无水乙醇一起放入研钵中研磨。
研磨时迅速充分,这样操作的目的是:
缩短研磨时间,减少无水乙醇的挥发,最大限度的得到叶绿体色素。
加入二氧化硅、碳酸钙的目的分别是:
为了研磨充分、防止研磨时色素被破坏。
若不加入二氧化硅,则色素量少,4条色素带均变窄;若不加入碳酸钙,叶绿素受到破坏,则两条叶绿素的色素会变窄或没有,而两条类胡萝卜素的色带不变。
⑵分离后的色素带中,最宽的是叶绿素a。
自下而上的色素带依次是叶绿素b、叶绿素a、叶黄素和胡萝卜素。
⑶用毛细吸管画滤液细线时,为什么越细越齐越好?
避免色素带重叠。
三.模拟糖尿的检测实验
⑴原理:
葡萄糖试纸是一种酶试纸,由葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶和某种无色的化合物固定于滤纸上制成的。
当尿液滴到酶试纸上时,尿液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下生成葡萄糖和过氧化氢,过氧化氢在过氧化氢酶的催化作用下形成水和氧气,氧可以将滤纸上无色的化合物氧化成有色的化合物,使滤纸呈现特定的颜色,再与标准比色卡相比对,即可知道尿液中葡萄糖的含量。
⑵取样:
正常人的尿液和糖尿病患者的尿液。
⑶检测方法:
斐林试剂(水浴加热)或尿糖试纸。
⑷结果:
(用斐林试剂检测)试管内出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。
因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖,与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无还原糖,所以没有发生反应。
4、DNA粗提取与鉴定实验
1.原理:
DNA的溶解性:
DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,通常选用2mol/LNaCl溶液溶解细胞中的DNA,此时杂质易沉淀;在0.1mol/LNaCl溶液在DNA溶解度最小,可使DNA析出。
酒精是一种常用的有机溶剂,DNA却不溶于酒精(特别是95%冷却酒精),但细胞中某些蛋白质可溶于酒精,利用这一点将DNA和蛋白质分离。
利用DNA对酶、高温和洗涤剂的忍受性原理来粗提纯DNA:
蛋白酶能专一性的水解蛋白质而不会对DNA产生影响,故可用蛋白酶处理达到粗提取DNA的目的;60--80℃的高温会使大多数蛋白质变性,而DNA在80℃以上才会变性,故可用60--80℃的高温处理处理以达到粗提取DNA的目的;洗涤剂能瓦解细胞膜,但对DNA没影响,故可用该试剂使细胞破裂,更好的提取DNA。
综上所述:
不同浓度的NaCl、酒精、蛋白酶、60--80℃的高温及洗涤剂均可用来提取DNA。
DNA的鉴定:
在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色,因此,可以作为鉴定DNA的试剂。
3.实验设计:
实验材料的选取:
不同生物组织中DNA含量不同。
在选取材料时,应本着DNA含量高、材料易得,便于提取的原则。
破碎细胞,获取含DNA的滤液:
如果选取鸡血作材料,可在鸡血中加入一定量蒸馏水(作用是使血细胞大量吸水而涨破),并用玻棒搅拌,过滤后收集滤液;如果用洋葱作材料,则要切碎洋葱,加入一定量的洗涤剂和食盐(洗涤剂是瓦解细胞膜;;食盐能溶解DNA);进行充分地搅拌和研磨(研磨能够破坏细胞壁,使DNA更多地溶解在NaCl溶液中),过滤后收集研磨液。
去除滤液中的杂质。
最初获得的DNA滤液含有蛋白质、脂质等杂质,需要进一步提纯DNA。
具体做法如下:
方案一:
滤液+NaCl(2mol/L)→过滤除去杂质→加入蒸馏水使NaCl溶液浓度为0.14mol/L→DNA析出→过滤得到过滤物→放到2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA→NaCl溶解液。
方案二:
滤液+嫩肉粉(木瓜蛋白酶)→静置10--15分钟→DNA滤液
方案三:
滤液→60---75℃处理→过滤获得DNA滤液。
方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案一的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。
(4)DNA析出的鉴定:
滤液与等体积的冷却酒精混合均匀,静置2--3分钟。
析出与白色丝状物是DNA,DNA的鉴定:
试管2支,编号甲、乙→各加2mol/L的NaCl溶液5ml→甲中放入少量白色丝状物,使之溶解→各加入4ml二苯胺,混合均匀→沸水浴5min→观察颜色变化。
课本实验
(二)-----------显微观察类
2、观察DNA和RNA在细胞中的分布
原理:
盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质分离。
甲基绿和吡罗红对DNA、RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA染成绿色,吡罗红使RNA染成红色。
甲基绿吡罗红是混合染液,要现配现用。
步骤:
(1)制片:
将牙签刮下的口腔上皮细胞置于玻片上0.9%的NaCl溶液滴;②载玻片烘干。
(0.9%的NaC溶液防止细胞破裂,维持细胞形态;烘干使细胞固定在载玻片上。
(2)水解:
8%HCl中30℃保温5min。
(3)冲洗:
用蒸馏水缓流冲洗10分钟;(4)染色:
2滴吡罗红甲基绿染色5分钟;(5)显微镜下观察。
分布:
真核生物的DNA主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体也含有少量的DNA;RNA主要分布在
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 高考 生物 实验 检测 解析