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柱压问题文档

色谱柱在HPLC中是超级关键的部件。

一台色谱仪若是没有色谱柱几乎什么工作也做不To色谱柱是消耗品，有必然寿命，利用中也超级容易出问题。

普通的正相反相色谱柱利用适当可用一、两年。

利用不适当用两、三个月就可能损坏。

所以利用中应该超级注意，

1.

在使用一根新的色谱柱之前，一定要看柱说明书，将柱于的使用压力、pH值、温度范围和所用流动相种类都要弄清楚。

接触最多的是C18色谱柱，它对试剂应用的范围非常广,甲醇、水、乙睛、四氢咲喃、三氯甲烷、正乙烷、各种缓冲盐都适用。

但其他的色谱柱所使用的试剂就有一定的要求，有的色谱柱只能使用水，不能使用有机试剂，有的色谱柱只能使用有机试剂，而且使用指定是某一种，象GPC色谱柱。

这些事情一定搞清楚，如果流动相使用不对，柱于很快会损坏。

另外在更換柱于时不能让不能使用的流动相进入柱于。

2.

柱于是有方向的，柱于上箭头的方向就是流动相流动的方向。

当換新柱于时，不要马上就接到检测器上使用。

将柱于入口处接在迸样器的出口，柱于出口处（即箭头的一端）先不接检测器，按箭头方向垂直朝上，用流动相（甲醇）以lml/min的流速冲洗Imin左右。

将柱于里的小气泡全部赶走以后再接到检测器上，否则小气泡跑到检测池里，就很难赶走，检测器产生噪声信号，基线也就走不奸。

3.

关于压力对色谱柱的影响：

常用的正反两相色谱柱一般耐压在12~20MPa之间，生产厂家不同，耐压也不同，从理论上讲耐压高的色谱柱柱效就高，但柱效高低不仅与耐压的高低有关，还有其他因素。

从使用中看，在保证柱效的同时，耐压不要太高，仪器所显示的.压力是流路、混合器、自动迸样器、柱压、流通池总体的压力，检査柱压力应分段检査。

压力过高不仅柱于受不丁，其他的部件也会出问题，例如自动进样器。

4.

色谱柱对pH值是有一定的使用范围。

以硅胶为担体的柱于一般使用范围在2~7pH。

耐碱性能不太好，流动相的pH大于8会使硅胶溶解。

有些分析条件须用碱性流动相，这时必然要选耐碱性奸的色谱柱，流动相的PH值太高或太低，流动相利用纯水，利用高浓度诫酸盐缓冲溶液，利用离于对试剂等，都可能造成色谱柱埴料被化学破坏，这种对色谱柱固定相及键台相的破坏一般是不可修复的。

5.

色谱柱的使用温度不要超过说明书上规定的混度。

一般使用温度在6（FC以下，典型硅胶基质色谱柱的利用混度在5°C与6（）°C之间，高温利用会缩短柱寿命。

6.

色谱柱使用过程中压力的骤然波动，温度的骤然变化或机械撞击都会对色谱柱床产生影响。

进样过程中，进样阀转动太慢引起压力波动；流速的突然増大都应在日常分析中尽長避免。

一般说来，在低柱压下操作可大大减少由压力波动造成的柱效损失。

这种问题是不可修复的

7.

色谱柱内存在缓冲盐时，如果用高浓度甲醇或其他有机溶剂冲洗色谱柱，会导致柱内缓冲盐结晶析出，造成柱压明显升高。

出现该问题时，反相色谱柱首先应使用20%左右有机溶剂的水溶液低流速冲洗色谱柱，使柱内的盐全部溶解冲出，再换成高浓度甲醇或其他有机溶剂的流动相。

8.

样品的预处理，许多样品，特别是生物样品与中药材，其组分复杂，样品预处理是影响色谱柱寿命的关键。

样品经过常规的前处理后，进样前还雲进行以下步骤：

a.用微孔过滤膜出除去样品中的不溶颗粒，以免赌塞柱头筛板及柱内埴充床，使柱压升高。

b.将样品用流动相溶解或用与流动相互溶的溶剂溶解。

9.

为了保护色谱柱，在色谱柱前接丁一个保护柱。

保护柱通常是比较短的分析柱，通过吸附可能污染分析柱的强保留杂质，达到保护色谱柱的目的。

保护柱的筛板与在线过滤器一样可以阻拦微粒杂质。

为了达到舅奸的保护效果同时避免导致色谱结果的改变，最好选用与分析柱相同或相似的埴料這充保护柱。

10.

色谱柱用适台的溶剂保留，若为C18柱推荐用甲醇保留。

在日常分析中，流动相含有的不纯物质和样品中的某些组分会吸附在色谱柱中，随着分析时刻的延长，吸附星会越多，所以柱于要常常清洗，一般柱于利用一两个礼拜洗一次，柱于不同清洗的流动相就不同，C18柱于常常利用甲醇清洗，不要用水清洗这对柱于不奸，一般清洗3~4小时，另外色谱柱长时刻不用，寄存时要将柱于洗干净，脏柱于放直时刻越长，柱效会大大降低。

寄存时，柱内应充满溶剂（甲醇或乙睛），两头封死。

影响柱压的因素一般有如此几种:

1、流动相的配比（如甲醇水体系在50:

50周围柱压是最大的）；

2、流速的影响，流速越大柱压越高；

3、利用的溶剂，专门是水一般不该该超过一周（最好2~3天就换一次），水很容易生细菌从而堵掉系统的（不明白楼主用的是什么水，最好用二次蒸他水或娃哈哈也行）；

4、整个色谱系统有三重防堵办法，一是溶剂瓶中的砂心过滤，二是两种溶剂混台后有个过滤器，三是迸柱于之前有个保护柱（不知楼主的色谱装了保护柱没有，很重要的，不然柱于寿命会缩短很多，有些柱于有保护柱可用40（）h还没问题，而没保护柱利用不到10（）h就不行了，固然，保护柱有好几种功能的），前两个地方一般因为溶剂不纯（包括前面讲的水生细菌）而堵，而保护柱前则会因为前面的原因与所分析的样品性质一路影响而堵，所以每次分析完后必然要先用水冲洗，再用甲醇冲洗（一般各为20分钟左右，冲到柱压不变，像分析专业的一般都会冲洗留宿），必然要冲洗干净，不然用一次下次就会堵了！

近几年化验室用的液相色谱仪是愈来愈多，所用色谱柱的种类也愈来愈多，问题出的也较多，值得注意的是，不论如何对色谱柱进行处置，一般都很难恢复到原有水平，因此，大家再利用色谱柱之前必然要看说明书，把以上几项问题弄清楚后再利用，尽可能避免发生如上问题。

色谱柱在利用中最多见的问题就是柱压升高，若是柱压是在长时刻利用进程中缓慢增加，属于正常现象。

但柱压在利用进程中突然升高（系统管路堵塞及压力传感器故障除外），可能的原因有如下几点：

（1）、色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染；

（2）、色谱柱头的填料被样品污染;

（3）、色谱柱内缓冲液中的盐遇到髙浓度的甲醇或其他有机溶剂，形成结晶析出；

（4）、流动相PH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。

解决办法如下：

（1）、如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染，可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力，或者卸下色谱柱头，将其放在10%的稀硝酸内超声清洗10分钟，后再用纯水超声1（）分钟，重新装入色谱柱。

（2）、如确定色谱柱头的填料被污染，将柱头螺丝卸下，挖出柱内前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔细修复后，重新安装上柱头螺丝。

（3）、如确定定是盐结晶，用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解,再换高浓度甲醇。

（4）、如果因PH值使用不当，很难恢复。

色谱柱在使用中最常见的问题就是柱压升高，如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加，属于正常现象。

但柱压在使用过程中突然升高（系统管路堵塞及压力传感器故障除外），可能的原因有如下几点：

（1）、色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染；

（2）、色谱柱头的填料被样品污染;

（3）、色谱柱内缓冲液中的盐遇到髙浓度的甲醇或其他有机溶剂，形成结晶析出；

（4）、流动相PH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。

解决办法如下：

（1）、如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染，可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力，或者卸下色谱柱头，将其放在10%的稀硝酸内超声清洗10分钟，后再用纯水超声1（）分钟，重新装入色谱柱。

（2）、如确定色谱柱头的填料被污染，将柱头螺丝卸下，挖出柱内前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔细修复后，重新安装上柱头螺丝。

（3）、如确定定是盐结晶，用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解,再换高浓度甲醇。

（4）、如果因PH值使用不当，很难恢复。

高效液相色诸中常遇见的问题及处置方式（申请加分）1色诸住跑干了，处置方式：

将叱液和装入重蒸水，第一按purged,将柱前气住排出，若无法排出，可将色谱柱前拆下，用注射器抽吸。

待柱前气体排空后，连接色港拄，用水高低流速交晉冲洗色港柱，宜至柱压稳固为止。

2•基线不柜，有静电，处置方式：

检査接地是不是良奸。

3」坛面积转变超仅大，处置肓式：

检査是不是进样阀堵寒c

4-基线突然提高，变怛，处置冇式：

笛查样品池能霆若低干正常值，说明检测器污染。

5.柱压变更范闫较大，处置方式：

条为进气泡。

高低流速交替沖洗。

6.柱效或峰形突然变舍，处置方式：

改换预柱。

7塔板教低：

色诸柱选择不对，二次保留、峰形不好的影响

8色诣拄易变性：

色说柱选择不对，二次保田的影响

9色诣拄寿命短：

色诸柱选择不对，样品需预处置（PH<3或PH>7）

10保田道捷变：

色诸柱平衡不密，流勒相较例改变

11出现新的干扰峰：

初贖分离不幣或初灼样品无代表性

选择波长要从以下几个方面琴虑：

1.检测波长要大干港剂截止波长。

若是所选择的波长下溶剂有很强的吸收固然是不這台的。

洛剂有强吸收后，基线举高，滅小检测的线性范医丽且会加大基线噪声，对滂质的检測灵敏度下降。

2.对各组分都更有适当的吸收。

一般是不可能做到的。

所以只要选择一个对大条敎组分都有较大吸收的波长就可以^To

3-外極法定重时，要选择被测组份最大吸收波长。

254nm对常见的共牠结构和按基官能团都有吸收。

对他和基团也有羽的吸收。

闻对于常见的二悄.甲醇的透过率很髙。

是在不明白用什么波长时最理想的实脸波长。

（一）涡流扩散（Eddydiffusion）

流幼相碰着较大的固体颗粒，就像流水碰着石头一样产生涡流。

若是住装埴得不均匀，有的部份松散或有细沟,则流功相的速度就快；有的部位结块或装直紧密则流就慢，家条流路有快有慢，就便区带变宽。

因此，固相载体的颗粒要小耐均匀，装柱要松紧均一，如此涡流扩散小，柱效率高。

分于扩散就是物质分于由浓度高的区域向浓度低的区域运功，也称纵向分于扩散。

要减少分于扩散就要釆用小即均匀的固相颗粒装柱。

同时在操作时，芝是流速太慢，被分离物质■停留时刻长，则扩散严峻。

（三）质重捷移（Masstransfer）

被分离物质要在流功相与固定相中平衡，如此才能形成校窄的区带。

在液相色谱中，涪质分于更在阿个液相之间进行分派，或在固相上被吸附和解吸附均需要必然的时刻。

当流速快时，转務速度慢，来不及达到平衡功相就向前移，这各物质的非平衡移动，使区带变宽。

四）功相流速

当流速太低时，分于扩散严峻，寺门是在气相色诸中尤其突出。

如将理论塔柿高度对流速作图，理论塔板高度随流速增加而急速下降，当达到杲低值时，流速再加大则质重捷移起主要作用，理论塔柝高度又加大。

在高效液相色谙中，流速稍快影响不大，但在凝胶过滤色港中，因为物质要渗透到凝胶内部，所以质重转移影响大，流速咖大会降低柱效率。

五）固定相颗粒大小

定相颗粒越小柱效率越高，对流勒相流勒的阻力越大，需要加大压力才能便它流功。

一、开泵后压力即升高至最高限度，通过对色谱柱前，色谙住，色诸柱后的分段测试，肯定为检测池堵塞。

二、换检测波长后，色渣峰面积比以前做的小很条，怀疑进样环或管路漏夜，经检査，徘除，最后肯定为，检测波长的总示道和实际值不符。

由气味.景象和声音能密发觉的问題

你需要运用你所有的感宫去发觉液相色谱的问题。

你最好养成适应，天天花上几分钟运用你的思官（除味觉）来：

感觉”你的液相色谙是不是存在问题，如此能够帮忙你迅速找到问题所在。

例如：

在你看到漏液之前，你可能第一闻到它的气味。

大部份的问題是能黠通过眼睛看到。

A、溶剂的气味

原E解决方式

二、溅出二.触检萱废液枢是不是巳满b.找到溅出的部位并清洗干浄

Bx热气味

原E解决方式

一、仪器过热一、緘检亘井调节通风设施氐检査并调节退度设定

C、关掉仪器，直找维修手册

C.读敎不正常

原E解决方式

一、压力不正常一、见前

二、柱温箱问题二.釘检査并调节设定b.参照用户干册

3.检测器灯失效3、改换灯

PK灯皆吉

原E解决方式

一、压力超出极限值一、狄检查是不是阻塞b.检査并调节根限值的设定

二、其它苦示灯二.见用户干册

E、誉吉音

原E解决方式

一、溶剂泄漏/溅出一、找到并解决

二、其它普告音二.见用户干册

巴扎耳的短音或长音

原E解决方式

一、轴承失效一、见用户手册

二、润滑不够二、进行逵当的润滑

3.机械故犀3、见用户干册

进样阀可能发生的问題

Ax手勒进样阀，转勒不灵

原E解决方式

一、转于密封损坏一、改换或调整捷于密封

二、转于太紧二、调整转于的松紧度手勒进样阀，载样困谁

原E解决方式

一、进样阀安装不妥一、从头安装

二、定重环阻塞二♦清洗或改换定重环

3.进样器污染3、清洗或改换进样器

4.管路阻窒4、清洗或改换管路

C.自勒进样阀，不能转勒

原E解决方式

一.无压力（或电源）一.提供逵当的压力（电源）

二-转于太紧二-调整转于的松紧度

3.进样阀安装不妥3、从头安装

r>・自幼进样阀，其它问題

原因解决方式

一、阻窒一、清洗或改换阻窒部件

二、机械故犀二、见随机维修手册

3.控制器故障3.维修或改换控制器

HPLC柱压太高：

1・拆去保护柱，看柱压是不是还高，不然是保护柱的问题，若柱压仍高，再检査；

2.把色谙柱从仪器上取下来，若是压力仍然不降，则是管路堵窒，须清洗，若是压力下降了，将柱于的进出口反过来接再仪器上，用10倍呈性体积的流功相冲洗柱于，若是柱压仍不降，再检查

3.改换柱子入口筛板，若柱压下降，说明溶剂获样品中含有固体颗粒，若柱压还高，可在进样器与保护拄之间接一个在线过滤器

荃线不稳，上下波功或漂移

lo流功相有溶解气体；用超声波脱气15・3（）分钟

2。

单向阀堵銮，取下超声去除堵塞物

3。

專密封损坏，造成压力波幼，改换泵密封

4。

系统存在漏液点，肯定漏液位置并维修

5。

流通池内有赃物或杂质，清洗杂物

6。

住后产生气泡，流通池出液口加负压调节器

7。

检测器汝有设定在最大吸收波优势

8°柱平衡慢，专门是流功相发生转变时。

用中尊强度的溶剂进行冲洗，更改流功相时，在分析前用I0-20倍体积的心流幼相对柱于进行冲洗

1.检测信号出现倒峰，检萱检测器与主机相连接是不是有松功，能够把下从头连接。

2.夏日气温高，水客易生苞，要求HPLC所用重蒸水必需天天都要更新。

3.由甲薛换到流功相平衡时，压力先稍稍下降，然后慢慢回升，可能是混台池混合效果不奸，也可能是B專轻度堵窒。

4.色诸柱长期不用，应用甲S?

冲洗2h以上后，宁上网头螺丝保留。

乌津机械易出现的毛病是：

一、压力不稳：

单向阀堵窒，可拆下，用甲零水越再；或漏液；管途经滤器损坏；

二、基线噪音变大：

未接地线，可在遂测器的外売外接一悵铁丝连地；灯能重不足，可在funk功能中査找灯的使历时刻，或拆开机械外壳，观看紫外灯的强度；检测池污染，拆下柱于，用无体积连接器连接專和检测器，用异丙醉小流速冲洗半个小时即可；流功相污染或进气泡。

3.專头有盐析出：

应经常常利用5%异丙5?

清洗柱塞杆，不然易磨损。

进样口漏液：

可能是标准针头变形或损坏，使得进样器尊损，不好的针头应及时扔璋。

液相色谱常见问题及处負方式

液相色谱常见问题及处直方式

HPLC灵敏度不够的主要原因尺解决办法

1、样品長不足，解决办法为增加样品長

2、样品未从柱于中流出。

可根据样品的化学性质改变流动相或柱于

3、样品与检测器不匹配。

根据样品化学性质调整波长或改换检测器

4、检测器衰减太多。

调整衰减即可。

5、检测器时间常数太大。

解决办法为降低时间参数

6、检测器池窗污染。

解决办法为清洗池窗。

7、检测池中有气泡。

解决办法为排气。

8、记录仪测压范围不当。

调整电压范围即可。

9、流动相流長不台适。

调整流速即可。

10、检测器与记录仪超出校正曲线。

解决办法为检査记录仪与检测器，重作校正曲线。

为何HPLC柱柱压太高

柱压太高是HPLC柱用户最常碰着的问题。

其原因有多方面，而且常常并非是柱于本身的问题，您可按下面步骤检査问题的起因。

1、拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检査；

2、把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，壽清洗，若压力下降，再检査；

3、将柱于的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动池）。

这时，如果柱压仿不下降，再检査；

4、更換柱于入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。

若柱压还高，请与厂商联系。

一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题，SGE提供的Rhcodync7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。

液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的床因是什么？

一、筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱于，替换筛板或改換柱于。

2、存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱于，改换流动相或更换选择性好的柱于

如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化

漂移现象

一、温度控制不好，解决方式是采用恒温装賈，维持柱温恒定

2、流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等

3、柱于未平衡好，雷对柱于迸行更长时间的平衡

快速转变现象

1.流速发生转变，解决办法是从头设定流速，使之维持稳固

2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。

3、流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混台

HPLC仪器问题

一、我的HPLC泵压明显的偏高，请问可能的原因？

答：

流速设定过高；流动相或进样中有机械杂质，造成保护柱、柱前筛板或在线过滤器阻塞；流动相粘度过大；柱温过低；缓冲盐结晶；压力传感器故障。

2、基线不稳，上下波动或漂移的原因是什么，如何解决？

答：

九流动相有溶解气体；用超声波脱气15-30分钟或用充氨气脱气

b.单向阀堵塞；取下单向阀，用超育波在纯水中超20分钟左右，去处堵塞物

c.泵密封损坏，造成压力波动；更換泵密封

d.系统存在漏液点；确定漏液位晝并维修

f.柱后产生气泡；流通池出液口加负压调整器

g.检测器没有设定在最大吸收波长处；将波长调整至最大吸收波长处

h.柱平衡慢，特别是流动相发生变化时；用中等强度的溶剂迸行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱于迸行冲洗。

3、接头处为何经常漏液，如何处理？

答：

接头没有拧紧；拧松后再紧，手紧接头以手劲为限，不要使用工具，不锈钢接头先用手拧紧，再用专用扳手紧1/4/2圈，注意接头中的管站一定要通到底，否则会留下死体积。

接头被污染或磨损；建议更换接头。

接头不匹配，建议使用同一品牌的配件。

4、进样阀洞液是如何造成的？

答：

九转于密封损坏；更换转于密封

b.定長环阻塞；清洗或更换定星环

c.迸样口密封松动；调整松紧度

d.进样针头尺寸不台适，一般是过短；使用恰当的进样针（注意针头形状）

匕废液管中产生虹吸；清空废液管

谱图问题

一、问：

造成峰拖尾的原因是什么，如何消除？

答：

九筛板阻塞；反冲色谱柱、更换进口筛板

b.色谱柱塌陷；埴充:

色谱柱

c.有干扰物质的存在；使用更长的色谱柱、改变流动相或更换色谱柱

匕流动相PH值不台适；调整PH值，对于碱性化台物，低PH值更有利于得到对称

f.样品与埴料表面的溶化点发生反应；加入商于对试剂或碱性挥发性修怖剂或更改色谱柱

2、问：

造成峰分叉的原因是什么，如何消除？

答：

保护柱或分析柱污染；取下保护柱再迸行分析。

如果必要更换保护柱。

如果分析柱阻塞，拆下来清洗。

如果问题仍然存在，可能是柱于被强保留物质污染，运用适当的再生措施。

如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。

样品溶剂不溶于流动相；改变样品溶剂，如果可能采取流动相作为样品溶剂。

3、问：

K值增加时，拖尾更严重，这是为什么？

答：

反相模式，二级保留效应；

九加入三乙胺（或碱性样品）

b.加入乙酸（或酸性样品）

c.加入盐或缓冲剂（或离于化样品）

d.更换一支柱于

4、问：

保留时间的波动有几种可能的原因？

答：

温控不当；调节好柱温。

流动相组分变化；防止流动相蒸发、反应等，做梯度时尤其要注意流动相混台的均匀。

色谱柱没有平衡；在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱。

HPLC灵敏度不够的主要原因尺解决办法

1、样品長不足，解决办法为增加样品長

2、样品未从柱于中流出。

可按照样品的化学性质改变流动相或柱于

3、样品与检测器不匹配。

按照样品化学性质调整波长或改变检测器

4、检测器衰减太多。

调整衰减即可

5、检测器时刻常数太大。

解决办法为降低时刻参数

6、检测器池窗污染。

解决办法为清洗池窗

7、检测池中有气泡。

解决办法为排气泡

8、记录仪测压范围不妥。

调整电压范围即可

9、流动相流長不适台，调整流速即可

10检测器与记录仪超出校正曲线。

解决办法为检査记录仪与检测器，重做校正曲线。

为何HPLC柱柱压太高

柱压太高是HPLC柱用户臺常碰着的问题。

其原因有多方面，且常常不是柱于本身的问题，可按下面步骤检査问题的起因

1、拆去保护预柱，看柱压是不是还高，不然是保护柱的问题，若柱压还高，再检査；

2、把色谱柱从仪器上取下来，看压力是不是下降，不然是管站堵塞，霁清洗，若压力下降，再检査；

3、将柱于的迸出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱于，（现在不要连接检测器，以防固体颗粒迸入流动池）。

这时，若是柱压仿不下降，再继续检査；

4、改换柱于入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引发压力上升。

若柱压还高，请联系厂家。

一般情形下，在迸样器与保护柱之间接一个在线过滤器即可避免柱压太高的问题。

液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因理什么？

1、筛板堵塞或柱失效，禅决办法是反相冲洗柱于，替换筛板或改换柱于。

2、存在干扰峰，解决办法为利用较长的柱于，改換流动相或改换流动性奸的柱于如何解决HPLC进行分析时保留时刻发生漂移或急速转变？

漂移现象

1、温度控制不好，解决方式时采用恒温装直，维持柱温恒定

2、流动相发生捷变，解决办法是避免流动相发生蒸发、反跌等

3、柱于为平衡好，雲对柱于进行更长时刻的平衡

保留时刻快速转变

1、流速发生转变，解决办法是从头设定流速，使之维持稳固

2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出

3、流动相不适台，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内适当混合

HPLC仪器问题

1、HPLC泵压明显偏高的可能原因？

答：

流速设定太高；流动相或进样中有机械杂质，造成保护柱、柱前筛板或在线过滤器阻塞；流动相粘度过大；柱温太低；缓冲盐结晶；压力传感器故障。

2、墓线不稳，上下波动或漂移的原因是什么，如何解决？

答：

“流动相有溶解气体；用超世波脱气15-30分钟或用氮气脱气

b单向阀堵塞；取下单向阀，用超声波在纯水中超20分钟左右，去除堵塞物

c泵密封损坏，造成压力波动；改换泵密封

d系统存在漏液点；肯定漏液位直并维修

C柱后产生气泡；流通池出液口加负压调整器

f检测器没有设定在舅大吸收波优势；将波长调整至是大吸收波优势

h柱平衡慢专门是流动相发生转变时；用中尊强度的溶剂迸行冲洗，更改流动相时，用10-20倍体积新流动相对柱于进行冲洗

3、接头处为何常常漏液，如何处直？

答：

接头没有拧紧；拧松后再紧，手紧接头以手劲为限，不要利用工具，不锈钢接头先用手拧紧，再用专用扳手紧1/4-1/2圈，注意接头中的管路必然要通到底，不