36种常用微生物培养基配制汇总.docx

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36种常用微生物培养基配制汇总

36种微生物常用培养基配制

1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）

牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCI5g,水1000mLpH7.4〜7.6。

2.高氏1号培养基（用于放线菌培养）

可溶性淀粉20g，KNO31g，NaCI0.5g，K2HPO4?

3H2O0.5g，

MgS04?

7H200.5gFeS04?

7H200.01,水1000mLpH7.4〜7.6。

配制时注意：

可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。

3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）

K2HPO41gMgSO4?

7H2O0.5g蛋白胨5g,葡萄糖10g,1/3000孟加拉红水溶液100mL水900mL自然pH,121C湿热灭菌30min。

待培养基融化后冷却55〜60C时加入链霉素（链霉素含量为30卩g/mL）。

4.马铃薯培养基（PDA）（用于霉菌或酵母菌培养）

马铃薯（去皮）200g，蔗糖（或葡萄糖）20g，水1000mL配制方法如下：

将马铃署去皮，切成约2cm2的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至1000mL自然pH,霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。

5.察氏培养基（蔗糖硝酸钠培养基）（用于霉菌培养）

蔗糖30g,NaNO32g,K2HPO41g,MgSO4?

7H2O0.5,gKCl0.5g,

FeSO4?

7H2O0.1,水1000mLpH7.0〜7.2。

6.Hayflik培养基（用于支原体培养）

牛心消化液（或浸出液）1000mL,蛋白胨10g,NaCI5g,琼脂15g,pH7.8〜8.0，分装每瓶70mL121C湿热灭菌15min,待冷却至80C左右，每70mL中加入马血清20mL25%羊酵母浸出液10mL15醋酸铊水溶液2.5mL,青霉素G钾盐水溶液（20万单位以上）0.5mL,以上混合后倾注平板。

*注意：

醋酸铊是极毒的药品，需特别注意安全操作。

7.麦氏（McCLary）培养基（醋酸钠培养基）

葡萄糖0.1g,KCl0.18g，酵母膏0.25g，醋酸钠0.82g，琼脂

l.5g，蒸馏水l00mL。

溶解后分装试管，1l5C湿热灭菌15min

8.葡萄糖蛋白胨水培养基（用于V.P.反应和甲基红试验）

蛋白胨0.5g，葡萄糖0.5g,K2HPO40.2g,水100mLpH7.2,

115C湿热灭菌20min。

9.蛋白胨水培养基（用于吲哚试验）

蛋白胨10g,NaCI5g,水1000mLpH7.2〜7.4,121C湿热灭菌20min。

10.糖发酵培养基（用于细菌糖发酵试验）

蛋白胨0.2g,NaCI0.5g,K2HPO40.02g,水100mL溴麝香草

酚蓝（1%水溶液）0.3mL，糖类lg。

分别称取蛋白胨和NaCI溶于热水中，调pH至7.4，再加入溴麝香草酚蓝（先用少量95%乙醇溶解后，再加水配成1%水溶液），加入糖类，分装试管，装量4〜5cm高，并倒放入一杜氏小管（管口向下，管内充满培养液）。

115C湿热灭菌20min。

灭菌时注意适当延长煮沸时间，尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡。

常用的糖类，如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等（后两种糖的用量常加大为1.5%）。

11.RCM培养基（强化梭菌培养基）、（用于厌氧菌培养）

酵母膏3g,牛肉膏IOg，蛋白胨10g,可溶性淀粉lg，葡萄糖5g,半胱氨酸盐酸盐0.5g,NaCI3g,NaAc3g,水lOOOmL,pH8.5,刃天青3mg/L,121C湿热灭菌30min。

12.TYA培养基（用于厌氧菌培养）

葡萄糖40g,牛肉膏2g,酵母膏2g,胰蛋白胨（bacto-typetone）6g,醋酸铵3g,KH2PO40.5gMgS04?

7H200.2gFeS04?

7H200.01,水1000mLpH6.5,121C湿热灭菌30min。

13.玉米醪培养基（用于厌氧菌培养）

玉米粉65g,自来水1000mL混匀，煮10min成糊状，自然pH,121C湿热灭菌30min。

14.中性红培养基（用于厌氧菌培养）

葡萄糖40g,胰蛋白胨6g,酵母膏2g,牛肉膏2g，醋酸铵3g,KH2PO45g中性红0.2g,MgS04?

7H200.2gFeS04?

7H200.01g,水1000mLpH6.2,121C湿热灭菌30min。

15.CaCO3明胶麦芽汁培养基（用于厌氧菌培养）

麦芽汁（6波美）1000mL,水1000mLCaCO310g明胶10g,pH6.8,12「C湿热灭菌30min。

16.BCG牛乳培养基（用于乳酸发酵）

（A）溶液：

脱脂乳粉100g,水500mL，加入1.6%溴甲酚绿（B.C.G）乙醇溶液ImL,80C灭菌20min。

（B）溶液：

酵母膏10g,水500mL琼脂20g,pH6.8,12「C湿热灭菌20min。

以无菌操作趁热将（A）、（B）溶液混合均匀后倒平板。

17.乳酸菌培养基（用于乳酸发酵）

牛肉膏5g，酵母膏5g,蛋白胨10g,葡萄糖10g,乳糖5g,NaCl

5g,水lOOOmL,pH6.8,121C湿热灭菌20min。

18.酒精发酵培养基（用于酒精发酵）

蔗糖10g,MgS04?

7H2O5g,NH4N030.5g,20%豆芽汁2mL,KH2PO40.5g，水100mL自然pHo

19.柯索夫培养基（用于钩端螺旋体培养）

优质蛋白胨0.4g,NaCl0.7g,KCl0.02g,NaHCO30.01g，CaCl

0.02g,KH2P040.09gNaH2P040.48g蒸馏水500mL无菌兔血清40mL

制法：

除兔血清外的其余各成分混合，加热溶解，调pH至7.2,121C湿热灭菌20min,待冷却后，加入无菌兔血清，制成8%血清溶液，然后分装试管（5~10mL/管），56C水浴灭活lh后备用。

20.豆芽汁培养基

黄豆芽500g,加水1OOOmL煮沸lh，过滤后补足水分，121C湿热灭菌后存放备用，此即为50%的豆芽汁；

用于细菌培养：

10%豆芽汁200mL葡萄糖（或蔗糖）50g,水800mLpH7.2〜7.4。

用于霉菌或酵母菌培养：

10%豆芽汁200mL糖50g,水800mL自然pH。

霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。

21.LB（Luria—Bertani）培养基（细菌培养，常在分子生物学中应用）

双蒸馏水950mL胰蛋白胨IOg,NaCIIOg，酵母提取物（bacto-yeastextract）5g，用Imol/LNaOH（纟勺ImL）调节pH值至7.0,加双蒸馏水至总体积为1L,121C湿热灭菌30min。

含氨苄青霉素LB培养基：

待LB培养基灭菌后冷至50C左右加入抗生素，至终浓度为80-100mg/L。

22.复红亚硫酸钠培养基（远藤氏培养基）、（用于水体中大肠菌群测定）蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,酵母浸膏5g,琼脂20g,乳糖10g,K2HPO40.5g无水亚硫酸钠5g,5%碱性复红乙醇溶液20mL蒸馏水1000mL。

制作过程：

先将蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏和琼脂加入到900mL水中，加

热溶解，再加入K2PO4溶解后补充水至lOOOmL,调pH至7.2〜7.4。

随后加入乳糖，混匀溶解后，于115C湿热灭菌20min。

再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中，用少许无菌水使其溶解，在水浴中煮沸10min后，立即滴加于20mL5%碱性复红乙醇溶液中，直至深红色转变为淡

粉红色为止。

将此混合液全部加入到上述已灭菌的并仍保持融化状态

的培养基中，混匀后立即倒平板，待凝固后存放冰箱备用，若颜色由淡红变为深红，则不能再用。

23.乳糖蛋白胨半固体培养基（用于水体中大肠菌群测定）

蛋白胨10g,牛肉浸膏5g，酵母膏5g,孚L糖10g,琼脂5g,蒸

馏水1000mLpH7.2〜7.4，分装试管（IOmL/管），115C湿热灭菌20min

24.孚糖蛋白胨培养液（用于多管发酵法检测水体中大肠菌群）

蛋白胨10g，牛肉膏3g,乳糖5g，NaCI5g，蒸馏水lOOOmL,1.6%

溴甲酚紫乙醇溶液ImL。

调pH至7.2，分装试管（IOmL/管），并放入倒置杜氏小管，l15C湿热灭菌20min。

25.三倍浓孚糖蛋白胨培养液（用于水体中大肠菌群测定）

将乳糖蛋白胨培养液中各营养成分以扩大3倍加入到l000mL水中，制法同上，分装于放有倒置杜氏小管的试管中，每管5mL1l5°C湿热灭菌2Omin。

26.伊红美蓝培养基（EMB培养基）（用于水体中大肠菌群测定和细菌转导）

蛋白胨IOg，乳糖10g,K2HPO2g，琼脂25g,2%/f尹红Y（曙红）水溶液20mL,0.5%美蓝（亚甲蓝）水溶液l3mL,pH7.4。

制作过程：

先将蛋白胨、乳糖、K2HPO和琼脂混匀，加热溶解后，调pH至7.4,115C湿热灭菌20min,然后加入已分别灭菌的伊红液和美蓝液，充分混匀，防止产生气泡。

待培养基冷却到50C左右倒平皿。

如培

养基太热会产生过多的凝集水,可在平板凝固后倒置存于冰箱备用。

在细菌转导实验中用半乳糖代替乳糖,其余成分不变。

27.加倍肉汤培养基（用于细菌转导）

牛肉膏6g，蛋白胨20g,NaCI10g，水1000mLpH7.4〜7.6。

28.半固体素琼脂（用于细菌转导）琼脂1g,水100mL121C湿热灭菌30min。

29.豆饼斜面培养基（用于产蛋白酶霉菌菌株筛选）

豆饼100g加水5〜6倍，煮出滤汁100mL汁内加入KH2PO0.1%,MgSO0.O5%,（NH4）2SO40.05%，可溶性淀粉2%pH6,琼脂2%〜2.5%。

30.酪素培养基（用于蛋白酶菌株筛选）

分别配制A液和B液。

A液：

称取Na2HPO4?

7H2O1.07g干酪素4g,加适量蒸馏水，并加热

溶解。

B液：

称取KH2PO40.36g,加水溶解。

A、B液混合后，加入酪素水解

液0.3mL，加琼脂20g，最后用蒸馏水定容至1000mL酪素水解液的配制：

ig酪蛋白溶于碱性缓冲液中，加入1%的枯草芽孢杆菌蛋白酶

25mL加水至100mL30C水解Ih。

用于配制培养基时，其用量为

1000mL培养基中加入100mL以上水解液。

31.细菌基本培养基（用于筛选营养缺陷型）

Na2HPO4?

7H2Q）,MgSO4?

7H2O0.2葡萄糖5g,NaCl5g,K2HPO4lg

水l000mL,pH7.0,1l5C湿热灭菌30min。

32.YEPD培养基（用于酵母原生质体融合）

酵母粉10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g，蒸馏水1000mLpH6.0,

115C湿热灭菌20min。

33.YEPD高渗培养基（用于酵母原生质体融合）

在YEPD培养基中加入0.6mol/L的NaCL3%琼脂。

34.YNB基本培养基（用于酵母原生质体融合）

0.67%酵母氮碱基（YNB,不含氨基酸，Difco）,2%葡萄糖，3%琼脂,pH6.2。

另一配方为：

葡萄糖10g（NH4）2SO41g，K2HPO40.125g，KHPO40.875g，KI

0.0001g，MgS04?

7H200.5gCaCI2?

2H200.lg,NaCl0.1g，维量元素母液lmL,维生素母液lmL（母液均按常规配制），水1000mLpH5.8〜6.0。

35.YNB高渗基本培养基（用于原生质体融合）

在YNB基本培养基中加入0.6mol/LNaCI。

36.酚红半固体柱状培养基（用于检查氧与菌生长的关系）

蛋白胨1g,葡萄糖10g,玉米浆10g,琼脂7g,水1000mLpH7.2。

在调好pH后，加入1.6%酚红溶液数滴，至培养基变为深红色，分装于大试管中，装量约为试管高度的1/2，115C灭菌20min。

细菌在此培养基中利用葡萄糖生长产酸，使酚红从红色变成黄色，在不同部位生长的细菌，可使培养基的相应部位颜色改变,但注意培养时间太长，酸可扩散以致不能正确判断结果。

以上各种培养基均可配制成固体或半固体状态，只需改变琼脂用

量即可，前者为1.5%〜2.0%，后者为0.3%〜0.8%。