埃博拉出血热相关标本采集包装运输技术指引湖南疾病预防.docx

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埃博拉出血热相关标本采集包装运输技术指引湖南疾病预防

附件1

埃博拉出血热相关标本采集、包装、运输技术指南

埃博拉出血热（Ebolahemorrhagicfever）是由埃博拉病毒（Ebolavirus）引起的一种急性出血性传染病。

人主要通过接触病人或感染动物的体液、分泌物和排泄物等而感染，临床表现主要为突起发热、出血和多脏器损害，病死率可高达50%-90%。

本病潜伏期为2～21天，通常为8～10天。

2014年，在几内亚、利比里亚和塞拉利昂等西非国家发生历史上最严重的埃博拉出血热暴发疫情。

为指导医疗机构和疾病预防控制机构工作人员对埃博拉出血热相关标本的采集、包装和运输工作，保证生物安全，特制定本指南。

一、生物安全防护

1、所有样本的采集或处理应遵守《医院感染管理规范》和《病原微生物实验室生物安全管理条例》等相关生物安全规定，在标准预防的基础上采用飞沫和接触隔离的预防措施。

2、采集样本时，应严格按照BSL-3级实验室规定做好个人防护。

应穿戴医用防护服、可遮盖口鼻的医用防护口罩（N95）、戴双层防护手套、护目镜、防护面具、鞋套或橡胶靴等。

二、标本采集

（一）采集时间

一般发病后2周内，可在患者血标本中检测到病毒核酸和抗原，发病后3～10天的标本核酸和抗原的检出率高。

在发病后数月内，可在特定分泌物中持续检出病毒。

最早可从发病后2天的患者血清中检出特异性IgM抗体，IgM抗体可维持数月。

发病后7-10天可检出IgG抗体，康复者IgG抗体可维持数年。

发病10-14天以后的标本病毒特异性抗体的检出率高。

因此，应根据不同检测目的确定采样时间，留观病例、疑似病例诊断埃博拉病毒感染应采集发病3天以后的血标本。

（二）标本采集

1.采血场所除了病人常规护理的材料外，应备有手套、防护服和防护面具等，同时备有洗手的设施和装有消毒液的桶。

2.采集埃博拉出血热患者血样会给医护人员带来风险，应由经过生物安全防护培训的人员执行，采血时应2人在场。

3.采用分离胶无菌真空促凝管采集静脉血，每管3mL，采集后用封口膜封闭管口，标记清楚后放入自封袋或50mL离心管内，并在自封袋或离心管外表面再清楚标记，4℃保存，填写标本采集登记表。

4、留观病例和疑似病例应在发病3天后，采集静脉血2管，送指定的具有埃博拉出血热检测资质的实验室进行埃博拉病毒检测。

5、确诊病例采集恢复期血标本，包括并不限于出院前标本2份，每份2管，采集时间间隔不少于48小时，送国家疾控中心病毒病所进行埃博拉病毒检测，用于指导病例管理。

四、标本包装、运输

（一）所有疑似埃博拉病毒相关感染性标本的运输应按照《病原微生物实验室生物安全管理条例》和《人间传染的病原微生物名录》等相关规定，采取A类包装，符合UN2814要求。

按照三重包装系统包装：

第一层包装为自封袋或50mL离心管；第二层包装为防水、防漏的安全壳容器；第三层为运输包装组成。

样本应用吸水纸等包裹，固定在防漏自封袋或离心管内。

然后放置在坚固、防水、防漏的第二层安全壳容器中，用吸水纸等填充物将内有标本的自封袋或离心管固定好，然后装入第三层包装。

安全壳容器和外包装须与IATA危险物品条例包装制度650相符合。

（二）填写标本说明两份，写明标本的详细情况、运送者及接收者地址，将标本说明密封在塑料袋里，用胶布分别粘在外层包装的里面和外面并留档以便追踪，方便实验室操作人员查对标本数量。

（三）样本运输之前，应按相关生物安全规定和样本接收单位生物安全管理部门联系，办理相关手续，运送日期确定后立即将运送的时间和运输方式通知接收单位。

五、样本保存和销毁

（一）埃博拉病毒阳性血标本，应根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》等相关生物安全规定保存，实行“双人双锁”和取样“审批”管理。

（二）埃博拉病毒阴性血标本，应在排除埃博拉病毒感染后，转入其他血清库保存或销毁。

（三）所有感染性血清销毁时，均应在在生物安全柜内待其自然融化，60℃1小时灭活后，在生物安全柜内，打开样本管，置于有效消毒剂内浸泡，然后高压灭活。

（四）所有销毁样本均应在相应数据库清单内标明，并记录销毁的时间和操作人，阴性样本销毁记录应保存1年以上，阳性样本的销毁记录应保存5年以上。

附件2

埃博拉病毒核酸检测方法

1目的

埃博拉病毒核酸的提取及PCR检测。

2适用范围

适用于检测血标本中埃博拉病毒核酸。

3实验前准备

核对被检样品，包括患者的姓名、编号及检测项目等。

4检测仪器设备和材料

实时定量核酸扩增检测仪，常规核酸扩增检测仪，RNA提取试剂盒，一步法RT-PCR扩增试剂盒，一步法实时定量RT-PCR扩增试剂盒等。

5实验步骤

5.1实验准备

5.1.1提取埃博拉病毒RNA要求在BSL-3级实验室内操作。

5.1.2进入实验场所之前，要事先准备好所需试剂、样品。

预约实验场所。

5.2RNA的提取

使用QIAampViralRNAMini试剂盒提取血清标本中病毒RNA（使用其他试剂盒或方法提取病毒RNA的应参照相应试剂盒说明书或实验室操作手册）。

5.2.1吸取560μl包含载体RNA的AVL缓冲液（核酸提取裂解液）至1.5ml的离心管中。

5.2.2向上述的液体中加入140μl样品，盖好盖后，轻轻的上下颠倒混匀10次，室温孵育10分钟，简单离心使离心管顶端液体落到底部。

5.2.3在样品中加入560μl96～100％的乙醇，轻轻的上下颠倒混匀10次，再简单离心。

5.2.4小心将630μl液体加入QIAamp小柱中，盖好盖，8000rpm/min离心1min,弃去收集管，将柱子置于一新的2ml收集管上。

5.2.5打开QIAamp小柱的盖子，重复步骤5.2.4，直至完成全部样品离心。

5.2.6打开盖子，向柱中加入500μlAW1缓冲液，盖好盖，8000rpm/min离心1min，弃去收集管，将柱子置于一新的2ml收集管上。

5.2.7打开盖子，加入500μlAW2缓冲液，盖好盖，14000rpm/min离心3min。

5.2.8将柱子置于一新的2ml收集管上，空离1min。

5.2.9将柱子置于一新的1.5ml离心管上，加入50μlAVE洗脱缓冲液，室温孵育1min,离心8000rpm/min1min。

离心液即为病毒RNA，立即检测或-70℃以下保存。

5.3实时荧光定量RT-PCR法检测埃博拉病毒核酸

为增加埃博拉病毒核酸检测的敏感性和特异性，在用实时荧光定量PCR方法对标本进行检测时，应采用针对埃博拉病毒2个不同的基因同时进行检测，可采用并行的单重PCR或多重PCR方法进行检测。

5.3.1单重PCR参考引物与探针

引物/探针

序列

荧光标记

检测埃博拉病毒核蛋白的引物和探针

ZEBONP-F

CGCCGAGTCTCACTGAATCTG

ZEBONP-R

AGTTGGCAAATTTCTTCAAGATTGT

ZEBONP-P

CGGCAAAGAGTCATCCCAGTGTATCAAGTA

FAM/BHQ-1

检测埃博拉病毒糖蛋白的引物和探针

ZEBOGP-F

TGGGCTGAAAAYTGCTACAATC

ZEBOGP-R

CTTTGTGMACATASCGGCAC

ZEBOGP-P

CTACCAGCAGCGCCAGACGG

FAM/BHQ-1

5.3.2实时荧光定量RT-PCR扩增

实时荧光定量RT-PCR扩增反应配置体系：

RNA模板5µl，酶（25x）1µl，缓冲液12.5µl，引物（10µM）各1µl，探针（10µM）0.5µl，加水至总体积25µl。

推荐反应条件为50℃30min，95℃10min，95℃15s、60℃45s反应40个循环。

5.3.3结果判断

以定量荧光PCR反应的前3～15个循环的荧光信号作为本底信号，以本底信号标准差的10倍作为荧光阈值，标本扩增产生的荧光信号达到荧光阈值时所对应的循环数为循环阈值（Ct值），以Ct<35荧光信号数据线性化处理后对应循环数生成的曲线图成“S”形的标本，可判断为相应的埃博拉病毒核酸检测阳性。

5.3.4意义

荧光定量PCR是一种灵敏、特异、低污染的病毒核酸检测方法，可以检测标本中的埃博拉病毒。

病例筛查时2个检测基因中，任一基因检测阳性均具有确诊意义。

首例病例确诊应按照国卫发明电[2014]48号《埃博拉出血热病例诊断程序》进行。

在病例管理时，需2个基因同时检测阴性，方可判定为阴性。

5.4一步法常规RT-PCR方法检测埃博拉病毒核酸

如果采用常规RT-PCR的方法检测埃博拉病毒核酸，建议针对病毒基因组2个不同的基因片段同时进行检测,并完成基因序列分析。

5.4.1参考引物序列

引物

序列

片段大小

检测埃博拉病毒糖蛋白的引物

ZEBOV-GPF

TGGGCTGAAAACTGCTACAATC

ZEBOV-GPR

TTTTAGTTTCCCAGAAGGCCCA

570bp

检测埃博拉病毒RNA聚合酶的引物

ZEBOV-LF1

ATCGGAATTTTTCTTTCTCATT

ZEBOV-LR1

ATGTGGTGGGTTATAATAATCACTGACATG

414bp

ZEBOV-LF2

GTCAAAGCATTTCCTAGCAACATGATGG

ZEBOV-LR2

ATAATAATCACTCACATGCATATAACA

282bp

5.4.2PCR扩增

采用参考引物对埃博拉病毒不同检测靶标进行PCR扩增。

首先根据所采用的试剂盒说明书推荐反应条件，将病毒RNA逆转录为cDNA。

PCR扩增参考反应条件为94℃预变性2min，然后94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸1min，反应40个循环，最后72℃延伸10min。

如为套式PCR则开展第二轮扩增。

第二轮分型PCR扩增体系配置采用正向引物ZEBOV-LF2与反向引物ZEBOV-LR2。

推荐反应条件为94℃预变性2min，然后94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸1min，反应30个循环，最后72℃延伸10min。

5.4.31.5%浓度琼脂糖电泳分析。

5.4.4结果判读

a阳性：

电泳显示相应大小DNA片段。

b阴性：

无特异性核酸片段扩增。

5.4.5意义

阳性结果可以初步判断埃博拉病毒感染,排除交叉污染。

获得病毒特异性基因序列具有确诊意义。

6清场与消毒

6.1操作结束后，及时清理生物安全柜内的物品，用0.5%次氯酸钠溶液和75%乙醇擦试外表面后，移出生物安全柜放入冰箱中。

6.2未使用完的感染性生物材料销毁或放入BSL-3级实验室－70℃冰箱，并如实填写操作和处理记录。

6.3实验区内的污染材料高压处理（121℃高压20min）后，再进行集中高压处理。

附件3

埃博拉病毒核蛋白抗原检测方法（双抗体夹心法ELISA）

1目的

双抗体夹心法ELISA检测血清中埃博拉病毒核蛋白抗原。

2适用范围

适用于人血清中埃博拉病毒核蛋白抗原的检测。

3实验前准备

3.1核对被检样品，包括患者的姓名、编号及检测项目等。

3.2检测前将60℃1小时灭活的待测样品置于BSL-3实验室生物安全柜内。

3.3在洗扳机废液收集桶内加入10%有效氯的消毒剂，加入量为废液桶总体积的5%。

4检测项目

本方法检测项目为检测血清中埃博拉病毒核蛋白抗原。

5检测仪器设备和材料

加样器、温箱、洗板机、含波长450nm的酶标仪、埃博拉病毒抗原检测试剂盒（双抗体夹心法ELISA）。

6操作步骤（具体请参照试剂盒说明书开展）

6.1将试剂盒在冰箱中取出，放置室温平衡30分钟，使用前将试剂轻轻震荡混匀。

6.2配液：

将新鲜配制的注入洗板机的洗液桶内。

6.3编号：

将样品对应微孔板编号，每板设阴性对照3孔，模拟阳性对照2孔和空白对照1孔。

6.4加稀释液：

每孔加稀释液20µL，空白孔除外。

6.5加样：

分别在相应孔加入待测样品或阴阳性对照各100µL，空白孔除外。

6.6温育：

用封板膜封板后，置37℃温育60分钟。

6.7加酶：

每孔加酶标试剂50µL，空白孔除外，轻轻震荡混匀。

6.8温育：

用封板膜封板后，置37℃温育30分钟。

6.9洗板：

小心揭掉封板膜，用洗板机洗涤5遍。

6.10显色：

每孔加入显色剂A、B液各50µL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色30分钟。

6.11测定：

每孔加终止液50µL，10分钟内测定结果。

设定酶标仪波长于450nm处（建议使用双波长450nm/600-650nm检测），用空白孔调零后测定各孔A值。

6.12清洗、消毒洗扳机：

按洗扳机内置程序分别采用蒸馏水、20%乙醇和75%乙醇进行清洗消毒，30分钟后，再用蒸馏水清洗。

7结果判定

7.1临界值计算：

临界值=0.10+阴性对照孔A值均值（阴性对照孔A值低于0.05者以0.05计算）。

7.2阴性对照的正常值范围：

阴性对照孔A≤0.1。

7.3阳性对照的正常值范围：

A≥0.50。

7.4阳性判定：

样品A值≥临界值者为埃博拉病毒抗原阳性。

7.5阴性判定：

样品A值＜临界值者为埃博拉病毒抗原阴性。

8意义

阳性结果可以判断为埃博拉病毒感染，但阴性结果并不排除埃博拉病毒感染的可能，应结合病例的流行病学史和临床表现进行综合判断。

9清场与消毒

9.1操作结束后，及时清理生物安全柜内的物品，用0.5%次氯酸钠溶液和75%乙醇擦试外表面后，移出生物安全柜放入冰箱中。

9.2将未使用完的感染性生物材料销毁或放入BSL-3级实验室－70℃冰箱，并如实填写操作和处理记录。

9.3将实验区内的污染材料高压处理（121℃高压20min）后，再进行集中高压处理。

附件4

埃博拉病毒IgM抗体检测（抗体捕捉法ELISA）

1目的

检测埃博拉病毒特异性IgM抗体。

2适用范围

适用于人血清中埃博拉病毒特异性IgM抗体的检测。

3样品接收和准备

3.1核对被检样品，包括患者的姓名、编号及检测项目等。

3.2检测前应将60℃1小时热灭活的待测样品置于BSL-3实验室生物安全柜内。

3.3在洗扳机废液收集桶内加入10%有效氯的消毒剂，加入量为废液桶总体积的5%。

4检测项目

本方法检测项目为检测血清中病毒特异性IgM抗体。

5检测仪器设备和材料

加样器、温箱、洗板机、含波长450nm的酶标仪、埃博拉病毒IgM抗体检测试剂盒等。

6检测步骤（具体请参照试剂盒说明书开展）：

6.1将试剂盒在冰箱中取出，放置室温平衡30分钟，使用前将试剂轻轻震荡混匀。

6.2配液：

将新鲜配制的注入洗板机的洗液桶内。

6.3加稀释液：

每孔加入样品稀释液100μl，空白及阴阳性对照孔除外。

6.4加样：

在相应孔中加入待测样品10µl，轻轻振荡混匀。

阴、阳性对照加100µl。

6.5温育：

用封板膜封板后，置37℃温育30分钟。

6.6洗板：

小心揭掉封板膜，用洗板机洗涤5遍。

6.7加酶：

每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。

6.8温育：

操作同6.5。

6.9洗板：

操作同6.6。

6.10显色：

每孔加入显色剂A、B液各50µl，轻轻振荡混匀，37℃避光显色15分钟。

6.11测定：

每孔加终止液50µl，轻轻振荡混匀，10分钟内测定结果。

设定酶标仪波长于450nm处，用空白孔调零点后测定各孔A值。

6.12清洗、消毒洗扳机：

按洗扳机内置程序分别采用蒸馏水、20%乙醇和75%乙醇进行清洗消毒，30分钟后，在用蒸馏水清洗。

7结果判定

7.1临界值计算：

临界值=0.10+阴性对照孔A值均值（阴性对照孔A值低于0.05者以0.05计算）。

7.2阴性对照的正常值范围：

阴性对照孔A≤0.1。

7.3阳性对照的正常值范围：

A≥0.50。

7.4阳性判定：

样品A值≥临界值者为埃博拉病毒IgM抗体阳性。

7.5阴性判定：

样品A值＜临界值者为埃博拉病毒IgM抗体阴性。

8意义

阳性结果可以判断为埃博拉病毒感染，但阴性结果并不排除埃博拉病毒感染的可能，应结合病例的流行病学史和临床表现进行综合判断。

9清场与消毒

9.1操作结束后，及时清理生物安全柜内的物品，用0.5%次氯酸钠溶液和75%乙醇擦试外表面后，移出生物安全柜放入冰箱中。

9.2未使用完的感染性生物材料销毁或放入BSL-3级实验室－70℃或以下冰箱，并如实填写操作和处理记录。

9.3将实验区内的污染材料高压处理（121℃高压20min）后，再集中高压处理。

附件5

埃博拉病毒IgG抗体检测方法（间接法ELISA）

1目的

检测埃博拉病毒特异性IgG抗体。

2适用范围

适用于人血清中埃博拉病毒特异性IgG抗体的检测。

3实验前准备

3.1核对被检样品，包括患者的姓名、编号及检测项目等。

3.2检测前应将60℃1小时热灭活的待测样品置于BSL-3实验室生物安全柜内。

3.3在洗扳机废液收集桶内加入10%有效氯的消毒剂，加入量为废液桶总体积的5%。

4检测项目

本方法检测项目为检测血清中埃博拉病毒特异性IgG抗体。

5检测仪器设备和材料

加样器、温箱、洗板机、含波长450nm的酶标仪、埃博拉病毒IgG抗体检测试剂盒等。

6检测步骤（具体请参照试剂盒说明书开展）

6.1将试剂盒在冰箱中取出，放置室温平衡30分钟，使用前将试剂轻轻震荡混匀。

6.2配液：

将新鲜配制的注入洗板机的洗液桶内。

6.3加稀释液：

每孔加入样品稀释液100μl，空白孔除外。

6.4加样：

在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照10µl，轻轻振荡混匀。

6.5温育：

用封板膜封板后，置37℃温育30分钟。

6.6洗板：

小心揭掉封板膜，用洗板机洗涤5遍。

6.7加酶：

每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。

6.8温育：

操作同6.5。

6.9洗板：

操作同6.6。

6.10显色：

每孔加入显色剂A、B液各50µl，轻轻振荡混匀，37℃避光显色15分钟。

6.11测定：

每孔加终止液50µl，轻轻振荡混匀，10分钟内测定结果。

设定酶标仪波长于450nm处，用空白孔调零点后测定各孔A值。

6.12清洗、消毒洗扳机：

按洗扳机内置程序分别采用蒸馏水、20%乙醇和75%乙醇进行清洗消毒，30分钟后，在用蒸馏水清洗。

7结果判定

7.1临界值计算：

临界值=0.10+阴性对照孔A值均值（阴性对照孔A值低于0.05者以0.05计算）。

7.2阴性对照的正常值范围：

阴性对照孔A≤0.1。

7.3阳性对照的正常值范围：

A≥0.50。

7.4阳性判定：

样品A值≥临界值者为埃博拉病毒IgG抗体阳性。

7.5阴性判定：

样品A值＜临界值者为埃博拉病毒IgG抗体阴性。

8意义

阳性结果，表明曾受到埃博拉病毒感染；双份标本检测，恢复期血清抗体阳转，或抗体滴度比急性期抗体滴度有4倍及以上升高可判定埃博拉病毒感染。

9清场与消毒

9.1操作结束后，及时清理生物安全柜内的物品，用0.5%次氯酸钠溶液和75%乙醇擦试外表面后，移出生物安全柜放入冰箱中。

9.2未使用完的感染性生物材料销毁或放入BSL-3级实验室－70℃及以下冰箱，并如实填写操作和处理记录。

9.3将实验区内的污染材料高压处理（121℃高压20min）后，再集中高压处理。

附件6

埃博拉出血热相关标本实验活动意外应急预案

1总则

1.1目的

为有效预防、及时发现和控制发生在实验室范围内的埃博拉病毒相关实验活动意外，最大限度的减轻意外事件对实验室人员和环境造成的危害，指导和规范生物安全工作，保障实验室工作人员身体健康和环境安全，保障埃博拉病毒实验室相关检测活动的顺利进行，特制定本预案。

本预案为发生实验室意外时的一般处置办法，各单位可根据各自生物危害评估方案确定处置措施。

1.2编制依据

《中华人民共和国传染病防治法》。

《突发公共卫生事件应急条例》。

《实验室生物安全手册》（第三版）。

1.3原则

以“安全第一、预防为主”为应急处置原则。

1.4适用范围

发生以下紧急情况时启动本预案

1.4.1埃博拉病毒的实验室污染事件。

1.4.2工作人员发生埃博拉病毒实验室暴露。

1.4.3埃博拉病毒被泄露出实验室。

1.4.4由于停电、火灾等不可预测因素所引起的实验室其他污染事件。

2应急组织体系及职责

2.1应急指挥机构

在本单位生物安全委员会或相应部门的统一领导下，各行政职能部门配合下，生物安全管理部门负责组织、协调实验室意外突发事件的应急处理工作，并制定应对意外事故的应急预案。

2.2实验室管理部门

单位实验室管理部门应制定本部门的应对意外事故处理的应急预案，并开展生物安全培训，组织实验室相关人员进行实地演练。

2.3实验室负责人

实验室负责人应对急救用品进行检查和补充，组织实验室内部人员进行生物安全培训与考核。

3预防和预警机制

3.1预防

3.1.1加强实验室生物安全规范化操作管理，按《实验室生物安全通用要求（GB19489-2008）》做出明确规定。

3.1.2建立实验室应急物资和设备的储备，配置个人防护、消毒药品和医疗救援药品，定点存放和定人定期维护保养。

3.1.3埃博拉病毒相关感染性材料需登记使用，提高警惕，加强安全保卫，防止埃博拉病毒相关感染材料失窃。

3.1.4建立实验室工作人员健康档案，定期体检。

发现与实验室生物安全有关的人员感染或伤害应立即报告。

3.1.5加强对实验操作人员的生物安全业务培训和演练。

3.2预警

3.2.1建立有效的预警机制，为埃博拉病毒相关感染性材料建立档案和使用记录，发现失窃，立即报告（见处理程序）。

3.2.2完善实验室人员健康档案，发现与实验室生物安全有关的人员感染或伤害立即报告。

3.2.3定期开展自查，及时发现各类安全隐患，发出预警通报。

4.突发事件的报告及应急响应

4.1报告人

4.1.1实验室工作人员为法定报告人。

4.1.2除实验室工作人员外，任何单位和个人如发现有实验室感染事故均可报告。

4.1.3任何单位和个人不得隐瞒、缓报、谎报、或者授意他人隐瞒、缓报、谎报。

4.2报告程序和方式

4.2.1报告程序：

发生实验室意外事故时，在妥善处理的同时，向实验室负责人口头报告，实验室负责人应立即向单位生物安全管理部门和负责人报告，并如实填写事故记录和事故处理记录。

单位生物安全管理部门核实事故后2小时内向上级卫生主管部门进行汇报，对事故做出危险程度评估，对可能暴露人员进行评估和随访。

积极配合有关专业技术部门的调查和处置。

事故处理后，生物安全管理部门应及时对事故的经过以及事故的原因和责任进行实事求是的分析，找出事故的根源，总结教训写出书面总结，吸取经验教训。

4.2.2报告方式发生实验室意外事故后，实验室所在单位负责人应填报《实验室意外和事故登记表》，并以最快的通讯方式2小时内向上级卫生行政部门报告。

4.3突发事件应急响应。

4.3.1立即停止发生意外事故实验室的实验活动，妥善处理后退出实验室。

4.3.2立即组织专家进入实验室进行调查、评估。

4.3.3对可能的污染情况进行评估。

4.3.4如发生实验室感染事故，立即将被感染人员送定点医院进行医疗观察或预防性治疗，对可能受到感染的人员进行评估和随访；暂停该实验室所有实验活动，开展调查评估，对所有实验室人员进行生物安全培训，完善生物安全体系文件，待潜在危险排除后，方可重启实验活动。

5应急处理程序

5.1由于人员活动造成的意外事故处理方法

BSL-3实验室意外事故发