实验三 从土壤中分离纯培养微生物并做初步观察鉴定.docx
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实验三从土壤中分离纯培养微生物并做初步观察鉴定
实验三从土壤中分离纯培养微生物并做初步观察鉴定
摘要:
利用分离纯培养微生物的基本操作方法对土壤中微生物进行分离纯培养,并根据菌落特征、染色鉴定等一系列操作对土壤中的微生物进行认识和分类。
关键词:
前言
微生物
实验材料和用具
实验步骤
1实验前准备
1)12支试管(15*20毫米)和12个试管塞平均分为两份,6支用塞子塞住的空试管包扎成一份,另一份分别用移液枪加入4.5ml蒸馏水,然后用试管塞塞住包扎成一份。
2)12副培养皿,按照6副一包分别用报纸巴扎好。
3)7个三角瓶,拿出其中一个加入49.5ml蒸馏水和3颗玻璃珠,用报纸巴扎好。
4)12个移液枪头用报纸巴扎好。
5)1个试管架、1个烧杯、1个量筒、1根玻璃棒
2干热灭菌
1)将1中的2副培养皿放入干热消毒箱
2)将温度调至160时间设置为2小时
3)设定时间结束,数据显示“end”,关闭电源
4)待温度降至70以下后,才能打开箱门,取出灭菌物品
3培养基的配置
3.1牛肉膏蛋白胨培养基的配制
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,它的配制如下:
牛肉膏0.45g、蛋白胨1.5g、nacl0.75g、琼脂分成1.2g和1.8g
1)准确称量牛肉膏牛肉膏0.45g、蛋白胨1.5g、nacl0.75g倒入烧杯内,用量筒量取蒸馏水溶解后定容到150ml
2)用1mol/lNaoh调pH值
3)按60ML和90ML分装到2个三角瓶中
4)将1.2g、1.8g琼脂分别倒入60ml、90ml三角瓶
5)塞棉塞用普通棉花制作一个棉塞,使其3/5部分在瓶口处
6)在棉塞外外包一层双层报纸,并用活结扎成一捆,用记号笔标注
3.2高氏1号的配制
高氏1号培养基是用于分离和培养放线菌的合成培养基,它的配制如下:
高氏1号药品分成2.118和3.117g
1)准确称量高氏1号药品2.118和3.117g分装入两个三角瓶中,用量筒量取蒸馏水溶解并分别定容为60ml、90ml
2)加入琼脂
3)塞棉塞用普通棉花制作一个棉塞,使其3/5部分在瓶口处
4)在棉塞外外包一层双层报纸,并用活结扎成一捆,用记号笔标注
3.3孟加拉红培养基的配制
孟加拉红培养基是用于分离真菌的的选择培养基,它的配制如下:
孟加拉红药品分成2.196g和3.294g
1)准确称量孟加拉红药品分成2.196g和3.294g
分装入两个三角瓶中,用量筒量取蒸馏水溶解并分别定容为60ml、90ml
2)塞棉塞用普通棉花制作一个棉塞,使其3/5部分在瓶口处
3)在棉塞外外包一层双层报纸,并用活结扎成一捆,用记号笔标注
3.4将7瓶三角瓶和12支已包装好的移液管放入高压蒸汽锅中进行灭菌处理
4高压蒸汽灭菌
高压蒸汽灭菌法适用于培养基的灭菌
1)观察锅内是否有到达三个支点的水量,若不够需要加入水至三个支点处
2)装料
开盖手需要稍稍往上提安全阀朝向外放气阀置于开关之间
开机
调节温度为121度
定时20分钟
密封以上操作完成后,将压板完全推入固定柱内,将手轮向右旋紧至不能旋动
当时间结束后,待其冷却,直至压力表指针至0位,才能将盖打开。
5超净工作台
进入超净工作台实验室后:
1)打开紫外灯后计时20min并立即走开
2)20min后关掉紫外灯,打开风机计时5min并立即走开
3)打开日光灯
4)进入超净工作台必须用75%乙醇消毒
6土壤稀释液
1)将前面处理的试管、三角瓶、移液管放入超净工作台
2)将称量0.5g土壤后进入超净工作台
3)点亮酒精灯并将酒精灯置于身体正前方,半径15cm范围为最佳无菌区域
4)制备土壤悬液
5)稀释
6)
7平板划线
倒平板圆周运动。
8斜面划线
结果与分析
1实验图片
2计算与方法
计算
总结与讨论
参考文献:
- 配套讲稿:
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