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n人类基因组计划人类基因组计划n基因工程及其应用基因工程及其应用第七讲第七讲生命的秘密生命的秘密DNA(DNA
(二)二)HGP简介简介人类基因组计划是由美国科学家于人类基因组计划是由美国科学家于1985年率先年率先提出、于提出、于1990年正式启动的。
美国、英国、法年正式启动的。
美国、英国、法国、德国、日本和我国科学家共同参与了这一国、德国、日本和我国科学家共同参与了这一价值达价值达30亿美元的人类基因组计划。
这一计划亿美元的人类基因组计划。
这一计划旨在为旨在为30多亿个碱基对构成的人类基因组精确多亿个碱基对构成的人类基因组精确测序,发现所有人类基因并搞清其在染色体上测序,发现所有人类基因并搞清其在染色体上的位置,破译人类全部遗传信息的位置,破译人类全部遗传信息。
n人类基因组计划主要内容是完成人体23对染色体的全部基因的遗传作图和物理作图,完成23对染色体上30亿个碱基的序列测定我我国国承承担担11的的测测序序任任务。
务。
人类基因组草图已经完成2000年6月26日,参与人类基因组计划的美国、英国、日本、法国、德国和中国等六国科学家,向全世界公布了人类基因组的草图“工作框架图”。
2001年年2月月12日日,由由美美国国、日日本本、德德国国、法法国国、英英国国和和中中国国组组成成的的研研究究机机构构及及美美国国塞塞莱莱拉拉公公司司联联合合宣宣布对人类基因组的初步分析结果:
布对人类基因组的初步分析结果:
人类基因组有人类基因组有31.6亿个核苷酸,亿个核苷酸,33.5万个基因。
万个基因。
基基因因在在染染色色体体上上不不是是均均匀匀分分布布的的,有有些些区区域域有有很多的基因,有些区域(约很多的基因,有些区域(约1/4)则象)则象“荒漠荒漠”。
不不同同种种族族有有99.99%的的相相同同基基因因,并并不不比比同同一一种种族不同个体之间的差异大。
族不同个体之间的差异大。
nn2003200320032003年月日,国际人类基因组测序组织年月日,国际人类基因组测序组织年月日,国际人类基因组测序组织年月日,国际人类基因组测序组织(TheTheTheTheInternationalHumanGenomeSequencingInternationalHumanGenomeSequencingInternationalHumanGenomeSequencingInternationalHumanGenomeSequencingConsortiumConsortiumConsortiumConsortium)正式对外宣布:
美、英、日、法、正式对外宣布:
美、英、日、法、正式对外宣布:
美、英、日、法、正式对外宣布:
美、英、日、法、德和中国科学家经过德和中国科学家经过德和中国科学家经过德和中国科学家经过1111年努力共同绘制完成了人年努力共同绘制完成了人年努力共同绘制完成了人年努力共同绘制完成了人类基因组序列图,人类基因组计划的所有目标均类基因组序列图,人类基因组计划的所有目标均类基因组序列图,人类基因组计划的所有目标均类基因组序列图,人类基因组计划的所有目标均已实现!
人类基因组测序工作的完成时间比预定已实现!
人类基因组测序工作的完成时间比预定已实现!
人类基因组测序工作的完成时间比预定已实现!
人类基因组测序工作的完成时间比预定时间提前了两年。
在人类揭示生命奥秘、认识自时间提前了两年。
在人类揭示生命奥秘、认识自时间提前了两年。
在人类揭示生命奥秘、认识自时间提前了两年。
在人类揭示生命奥秘、认识自我的漫漫长路上迈出了重要的一步。
我的漫漫长路上迈出了重要的一步。
我的漫漫长路上迈出了重要的一步。
我的漫漫长路上迈出了重要的一步。
nn现在,包括难以测序的部分在内,人类基现在,包括难以测序的部分在内,人类基因组中因组中9999的序列都已经被测出,碱基序的序列都已经被测出,碱基序列已经实现在现有技术条件下的尽可能的列已经实现在现有技术条件下的尽可能的精确。
这一新的人类基因组序列的价值远精确。
这一新的人类基因组序列的价值远远大于远大于22年前公布的人类基因组草图。
在新年前公布的人类基因组草图。
在新的序列图中,研究人员不但可以找到基因,的序列图中,研究人员不但可以找到基因,而且还可以找到那些辅助调节基因活性的而且还可以找到那些辅助调节基因活性的DNADNA片段序列。
新版的人类基因组序列图被片段序列。
新版的人类基因组序列图被公布在公布在44月月2424日出版的日出版的NatureNature杂志上。
杂志上。
nn科学家将对人类基因组进行更加深入的科学家将对人类基因组进行更加深入的研究,一方面寻找不同人群之间的基因研究,一方面寻找不同人群之间的基因差异,一方面破译不同基因的功能,以差异,一方面破译不同基因的功能,以取得更多的数据,为人类战胜疾病、提取得更多的数据,为人类战胜疾病、提高生命质量提供更多的参考。
高生命质量提供更多的参考。
HGPHGP对人类的重要意义对人类的重要意义人类信息对人类社会的潜在利益巨大。
在人类健康领域,将有助于对遗传疾病的诊断、治疗和预防发现新的致病基因发现新的致病基因发展一些复杂疾病的早期基因诊断方法,如发展一些复杂疾病的早期基因诊断方法,如“肿瘤基因组解剖计划肿瘤基因组解剖计划”通过基因治疗解决传统方法无法解决的疑难通过基因治疗解决传统方法无法解决的疑难杂症杂症疾病易感基因的识别及对风险人群进行生活疾病易感基因的识别及对风险人群进行生活方式、环境因子的干预方式、环境因子的干预人类基因组多样性与个体化医学人类基因组多样性与个体化医学在基础科学研究领域,将促进人们对关于基因的结构、基因表达的调控、细胞生长和分化等一系列重大问题的深入认识。
HGP带来的负面作用带来的负面作用nn侏罗纪公园不只是科幻故事侏罗纪公园不只是科幻故事nn种族选择性灭绝性生物武器种族选择性灭绝性生物武器nn基因专利战基因专利战nn基因资源的掠夺战基因资源的掠夺战nn基因与个人隐私基因与个人隐私个个人人隐隐私私!
基基因因注注定定论论?
我这辈子没戏了!
DNAReportnnHGP伦理、法律和社会影响研究伦理、法律和社会影响研究nn
(1)利用和解释遗传信息时如何保护隐)利用和解释遗传信息时如何保护隐私和达到公正?
私和达到公正?
nn
(2)如何处理)如何处理“知情同意知情同意”等问题?
等问题?
nn(3)如何保护隐私?
)如何保护隐私?
nn原则原则nn防止防止“遗传歧视遗传歧视”nn保护个人和家庭基因隐私保护个人和家庭基因隐私nn基因专利问题基因专利问题基因专利问题基因专利问题nn人类基因组人类基因组人类基因组人类基因组DNADNA序列数据的自由共享序列数据的自由共享序列数据的自由共享序列数据的自由共享nn人类基因组人类基因组人类基因组人类基因组DNADNA序列是全人类的共同遗产,应该由全人序列是全人类的共同遗产,应该由全人序列是全人类的共同遗产,应该由全人序列是全人类的共同遗产,应该由全人类所共享;类所共享;类所共享;类所共享;nn对基因组基础数据的垄断,将给人类利益和科学发展带对基因组基础数据的垄断,将给人类利益和科学发展带对基因组基础数据的垄断,将给人类利益和科学发展带对基因组基础数据的垄断,将给人类利益和科学发展带来不良后果;公共领域测序计划的贡献(来不良后果;公共领域测序计划的贡献(来不良后果;公共领域测序计划的贡献(来不良后果;公共领域测序计划的贡献(2424小时内释放小时内释放小时内释放小时内释放序列数据)序列数据)序列数据)序列数据)nn基因专利基因专利基因专利基因专利nn新发现的基因是否可以申请专利?
新发现的基因是否可以申请专利?
新发现的基因是否可以申请专利?
新发现的基因是否可以申请专利?
被发现的基因序列,一旦经过分离或者纯化后就成为一种新产被发现的基因序列,一旦经过分离或者纯化后就成为一种新产被发现的基因序列,一旦经过分离或者纯化后就成为一种新产被发现的基因序列,一旦经过分离或者纯化后就成为一种新产品品品品各国政府和主流科学界观点各国政府和主流科学界观点各国政府和主流科学界观点各国政府和主流科学界观点nn基因专利热潮已兴起基因专利热潮已兴起基因专利热潮已兴起基因专利热潮已兴起n基因工程及其应用一、基因工程的概念一、基因工程的概念geneticengineeringll定义:
定义:
定义:
定义:
又称为重组又称为重组又称为重组又称为重组DNADNA技术,指将某些特定的基因技术,指将某些特定的基因技术,指将某些特定的基因技术,指将某些特定的基因或或或或DNADNA片断,通过载体或其它手段送入受体片断,通过载体或其它手段送入受体片断,通过载体或其它手段送入受体片断,通过载体或其它手段送入受体细胞,使它们在受体细胞中增殖并表达的一种细胞,使它们在受体细胞中增殖并表达的一种细胞,使它们在受体细胞中增殖并表达的一种细胞,使它们在受体细胞中增殖并表达的一种遗传学操作。
遗传学操作。
遗传学操作。
遗传学操作。
ll目的目的目的目的:
是生产出符合人类需要的产品或创造出生物是生产出符合人类需要的产品或创造出生物是生产出符合人类需要的产品或创造出生物是生产出符合人类需要的产品或创造出生物的新性状,并能稳定遗传。
的新性状,并能稳定遗传。
的新性状,并能稳定遗传。
的新性状,并能稳定遗传。
基因工程的概念基因工程的概念ll重要特征:
重要特征:
重要特征:
重要特征:
11、可把来自任何生物的基因转移到与其毫无关系、可把来自任何生物的基因转移到与其毫无关系、可把来自任何生物的基因转移到与其毫无关系、可把来自任何生物的基因转移到与其毫无关系的任何其他受体细胞中,可以任意改造生物的的任何其他受体细胞中,可以任意改造生物的的任何其他受体细胞中,可以任意改造生物的的任何其他受体细胞中,可以任意改造生物的遗传特性,创造出生物的新性状遗传特性,创造出生物的新性状遗传特性,创造出生物的新性状遗传特性,创造出生物的新性状22、某一段、某一段、某一段、某一段DNADNA可在受体细胞内进行复制,为制可在受体细胞内进行复制,为制可在受体细胞内进行复制,为制可在受体细胞内进行复制,为制备大量纯化的备大量纯化的备大量纯化的备大量纯化的DNADNA片段提供了可能片段提供了可能片段提供了可能片段提供了可能二、基因工程技术路线二、基因工程技术路线
(1)获得目的基因和载体
(2)切割、连接形成新的重组DNA分子(3)重组DNA分子导入受体细胞,并能在受体细胞中复制和遗传(4)对转化子筛选和鉴定(5)对获得外源基因的细胞或生物体通过培养,获得所需的遗传性状或表达出所需要的产物基因工程的操作流程获得需要的目的基因常用的方法:
(11)直直接接从从生生物物体体中中提提取取总总DNADNA,构构建建基基因因文文库库(genelibrary)(genelibrary),从中调用目的基因从中调用目的基因(22)以)以mRNAmRNA为模板,反转录合成互补的为模板,反转录合成互补的DNADNA片段片段(33)利利用用聚聚合合酶酶链链式式反反应应(PCRPCR)特特异异性性地地扩扩增增所所需要的目的基因片段,等等需要的目的基因片段,等等聚合酶链式反应(PCR)lPCR技术就是在体外中通过酶促反应有选择地大量扩增(包括分离)一段目的基因的技术PCRPCR反应过程:
反应过程:
第一步:
变性(解链)第一步:
变性(解链)9595第二步:
退火第二步:
退火5555第三步:
延伸第三步:
延伸7272聚合酶链式反应(PCR)聚合酶链式反应(PCR)变性:
双链DNA解链成为单链DNA退火:
部分引物与模板的单链DNA的特定互补部位相配对和结合延伸:
以目的基因为模板,合成互补的新DNA链聚合酶链式反应(PCR)l每一轮聚合酶链式反应可使目的基因片段增加一倍30轮循环可获得230(1.07109)个基因片段PCR技术的发明PCR的发明是DNA操作技术的革命美国Mullis教授开汽车时的联想逶迤崎岖的山路DNA双螺旋行驶的汽车一小段DNA引物
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