中药黄芪的含量测定及药理作用综述.docx
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中药黄芪的含量测定及药理作用综述
中药黄芪的含量测定及药理作用综述
谢加力
(药学系,药学0601班,200309010007)
摘要:
本文通过对黄芪的概述,包括植物来源、形态、形状、有效成分、鉴别等方面,重点分析通过薄层色谱法和质量分析方法对黄芪进行含量测定。
此外,黄芪可提高和促进免疫功能,有保肾利尿、抗菌抗病毒、提高机体应激能力等药理作用。
随着医药学界不断的深入研究,现代医学发现其药理作用甚广,除能增强机体免疫功能、增强细胞代谢、调节DNA复制及RNA和蛋白质的合成外,还有固肾降压、保肝抗炎的功能。
黄芪对免疫功能低下不仅有增强作用,还有双向调节作用。
本文对黄芪的免疫调节作用进行了重点分析.
关键词:
黄芪甲甙、质量分析、免疫调节、黄芪多糖。
TheChinesenativemedicineRadixAstragalicontentdeterminationandthe pharmacologicalactionsummarize
XieJiali
(Pharmacyofdepartment,pharmacy0601classes,200309010007)
Abstract:
ThisarticlethroughtotheRadixAstragalioutline,includestheplant originates,aspectandsoonshape,shape,effectivecomponent, distinction,thekeyanalysistoRadixAstragalicarriesonthecontent throughthethinlayerchromatographyandthequalityanalysismethod determines.Inaddition, RadixAstragalimayenhanceandpromotetheimmunityfunction,hasguaranteesthekidneydiuresis,theantibacterialanti-virus, enhancespharmacologicalactionandsoonorganism strength.Alongwiththemedicineeducationalworldunceasingthoroughresearch,themodernmedicinediscoversitspharmacologicalactionisreally broad,exceptcanstrengthentheorganismimmunityfunction,the enhancementcellmetabolism,adjuststheDNAduplicationandRNAand outsidetheproteinarcherytargetsynthesis,butalsohasthesolid kidneyfallspresses,guaranteestheliveranti-inflammationthe function.
RadixAstragaliislowtotheimmunityfunctionnotonlyhastheenhancement function,butalsohasthebidirectionalcontrolaction. ThisarticlecarriedonthekeyanalysistotheRadixAstragaliimmunitycontrolaction.
Keyword:
RadixAstragaliarmorglucoside,qualityanalysis,immunity adjustment,RadixAstragalipolysaccharide.
黄芪,为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。
拼音名:
Huangqi.英文名Radix
Astragali.黄耆(或芪)始载于《神农本草经》,列为上品。
李时珍释其名曰:
“耆长也,黄耆色黄,列为补药之长,故名。
今俗称作黄芪。
”
春、秋二季采挖,除去须根及根头,晒至六、七成干,分别大小,理直扎捆后晒至全干。
一、植物形态
1.蒙古黄芪
多年生草本,高40~150厘米或稍过之,主根直长,圆柱状,长25~75厘米,稍带木质,根头部径直1.5~3厘米,表皮淡棕黄色或深棕色。
茎直立,多分枝,被长柔毛。
奇数羽状复叶,互生;叶柄基部有披针形托叶,长6毫米左右;小叶25~37片,小叶宽椭圆形,长4~9毫米,先端稍钝,有短尖,基部楔形,全缘,两面有白色长柔毛。
总状花序腋生,有花10~25朵,排列疏松;小花梗短,生黑色硬毛;苞片线状披针形;花萼筒状,长约5毫米,萼齿5个,有长柔毛;花冠黄色,蝶形,长不足2厘米,旗瓣三角状倒卵形,无爪,先端微凹,翼瓣和尤骨瓣均有长爪;雄蕊10个,二体;子房有柄,光滑无毛,花柱无毛。
荚果膜质,膨鼓充气,卵状长园,宽11~15毫米,先端有喙,有明显网纹。
种子5~6粒,肾形,黑色。
花期6~7月,果期8~9月。
2.膜荚黄芪
形态和蒙古黄芪相似,主要区别是小叶13~31片,较上者少,小叶片卵状披针形或椭圆形,长7~30毫米,宽4~10毫米;花冠淡黄色;子房被疏柔毛;荚果长2~2.5厘米,被黑色短毛。
3.地方代用品
除上述两种黄芪外,还有一些黄芪属植物的根可作为黄芪的代用品,主要有四种,其形态特征为:
①金翼黄芪。
根呈圆柱形,长20~100厘米,直径1~2.5厘米,上部有细密纵皱纹和环纹,表面淡黄白色至深褐色,有纵皱纹;小叶5~9对,叶片椭圆形;花黄色,3~13朵呈稀疏总状花序排列;荚果倒卵形、扁平,种子1粒。
②多花黄芪。
根呈圆柱形,有分枝,皱纹多,长40~100厘米,直径1~3.5厘米,表面淡棕色或棕褐色;茎直立,高1米,被黑色或灰白色柔毛;小叶7~21对,长椭圆形;花黄白色,14~40朵,总状花序,荚果纺锤形,长15毫米。
③梭形黄芪。
根呈圆柱形,不扭曲,少分枝长30~70厘米,直径1~4厘米,表面土黄色或棕褐色;小叶3~7对,椭圆形,总状花序,有花10朵;花冠黄白色;旗瓣倒卵形,长12毫米;荚果梭形,膨鼓充气,密被黑色绒毛。
④多序岩黄芪。
根呈圆柱形,长30~70厘米;直径2~3.5厘米,表面红棕色,纵皱纹明显;奇数羽状复叶互生;小叶3~12对,叶片长圆形;总状花序腋生;花萼斜针形;花冠淡黄色;荚果。
二.性状
本品呈圆柱形,有的有分枝,上端较粗,长30~90cm,直径1~3.5cm。
表面淡棕黄色或淡棕褐色,有不整齐的纵皱纹或纵沟。
质硬而韧,不易折断,断面纤维性强,并显粉性,皮部黄白色,木部淡黄色有放射状纹理及裂隙,老根中心偶有枯朽状,黑褐色或呈空洞。
气微,味微甜,嚼之微有豆腥味。
三.有效成分
黄芪甲甙(totalAstragloside),三萜葡萄糖甙(triterpeneglycosides),黄芪多糖(polysaccharides).药材蒙古黄芪喊有大量的有用化学成分,包括生物类黄酮(flavonoids),黄芪多糖(polysaccharides),三萜葡萄糖甙triterpeneglycosides.
四.理化鉴别
1.取本品粉末3g,加水30ml,浸渍过夜,滤过,取滤液1ml,加0.2%茚三酮溶液2滴,在沸水中加热5分钟,冷后呈紫红色。
(检查氨基酸、多肽)
2.取上项水溶液1ml,于60℃水浴中加热10分钟,加5%α-萘酚乙醇溶液5滴,摇匀,沿管壁缓缓加入浓硫酸0.5ml,在试液与硫酸交界处出现紫红色环。
(检查糖、多糖)
3.取本品粉末2g,加甲醇10ml,放置过夜,滤过。
取滤液1ml,在水浴上蒸干,用少量冰醋酸溶解残渣。
加醋酸酐-浓硫酸试剂(19:
1)0.5ml,颜色由黄转变为红色→青色→污绿色。
(检查甾醇)
4.取本品粉末2g,加酸性乙醇10ml,温浸2小时,滤过。
滤液调至中性,蒸干,加3%盐酸1ml溶解残渣。
各取滤液0.5ml,分别滴碘化铋钾及碘化汞钾试剂各1滴,前者产生橙红色沉淀。
后者产生灰白色沉淀。
(检查生物碱)
五.含量测定
1.取本品粗粉约1.5g,精密称定,置索氏提取器中,加甲醇40ml冷浸过液,再加甲醇适量回流4小时,提取液回收甲醇并浓缩至干,残渣加水10ml微热使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取3次(20,20,20ml),合并正丁醇提取液,用氨试液提取2次(20,20ml),弃去氨液,正丁醇液蒸干,残渣加水3~5ml使溶解,放冷,通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm,长12cm),以水50ml洗脱,弃去水液。
再用40%乙醇30ml洗脱,弃去40%乙醇洗脱液,继续用70%乙醇50ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
另取黄芪甲甙对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。
照薄层色谱法(附录ⅥB)试验,吸取供试品溶液2μl与6μl、对照品溶液2μl与4μl,分别交叉点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇-水(13:
6:
2)(10℃以下放置过液)的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在100℃烘约5~7分钟,至斑点显色清晰,取出,在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板,周围用胶布固定,照薄层色谱法(附录ⅥB薄层扫描法)进行扫描,波长:
λs=530nm,λR=700nm,测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值,计算,即得。
本品以干燥品计算,含黄芪甲甙(C44H68O4),不得少于0.04%。
浸出物照水溶性浸出物测定法项下的冷浸法(附录ⅩA)测定,不得少于17.0%。
2.质量分析方法:
精密称取各样品粗末1.5g,加甲醇适量冷浸过夜,回流提取4h,提取液回收至干,残渣加水10ml微热溶解。
用饱和正丁醇提取3次(20ml、20ml、20ml),合并正丁醇提取液,用氨试液提取2次(20ml、20ml)弃去氨液。
正丁醇液蒸干,残渣用甲醇溶解并定容于20ml量瓶内,摇匀。
为供试品溶液。
对照品为黄芪甲甙(每1ml含1mg甲醇溶液)。
展开剂为氯仿-甲醇-水(13:
7:
2)。
取上述供试品及对照品溶液各2ml,分别点于同一硅胶G薄层板上,展开,取出、晾干,喷10%硫酸乙醇溶液。
105℃烘5min。
供试品色谱中应有与对照品色谱相应位置上,日光下显相同的棕褐色斑点,在365nm紫外灯下观察显相同的橙黄色荧光斑点。
六.药理作用
<一>1.增强免疫功能
黄芪能增强网关内皮系统的吞噬功能,使血白细胞及多核白细胞数量显著增加,使巨噬细胞吞噬百分率及吞噬百分率及吞噬指数显著上升,对体液免疫、细胞免疫均有促进作用,正常人服用后,血浆IgM,IgE显著增加,以全草效果最好。
黄芪能促进血清溶血素形成,提高空斑形成细胞的溶血能力,具明显的碳粒廊清作用和增加脾重的作用。
以上作用在正常的生理状态下存在,在免疫工能低下时同样有明显作用。
黄芪对免疫功能低下不仅有增强作用,还有双向调节作用。
黄芪的有效成分F3在体外试验中显示对癌症患者淋巴细胞功能有完全的恢复作用,在体内动物模型试验中显示出可全部逆转环磷酰胺造成的免疫抑制现象,提示黄芪成分在免疫治疗中可能是一种很有希望的生物反应调节剂。
黄芪可以提高淋巴因子(白介素-2)激活的自然杀伤细胞(LAK)的活性。
2.对干扰素的作用
黄芪具有增强病毒诱生干扰素的能力。
易感冒者在感冒流行季节服用黄芪,不仅可使感冒次数明显减少,而且可使感冒症状较轻,病程较短。
3.增强机体耐缺氧及应激能力
黄芪多糖有明显的抗疲劳作用,能显著延长氢化可的松耗小鼠的游泳时间和增加肾上腺素重量,对小鼠多种缺氧模型均具有显著的耐受能力,可明显减少全身性耗氧以及增加组织耐氧能力。
黄芪多糖有明显的耐低温作用,能使正常以及虚损小鼠的抗生存时间明显延长。
4.促进机体代谢
黄芪可使细胞的生理代谢增强,这可能是通过细胞内cAMP, cGMP的调节作用来完成的。
黄芪还能促进血清和肝脏的蛋白质更新,对蛋白质代谢有促进作用,这可能是黄芪扶正作用的另一个重要方面。
5.改善心功能
黄芪对正常心脏有加强收缩作用,对因中毒或疲劳而衰竭的心脏,强心作用更显著,表现为可使心脏收缩振幅增大,排出血量增多。
100%黄芪注射液可使离体心脏收缩加强、加快。
黄芪能改善病毒性心肌炎患者的左心室功能,还有一定抗心律失常作用,可能是延长有效不应期所致。
6.降压作用
以黄芪煎计水浸剂、醇浸剂皮下或静脉注射于麻醉动物(犬、猫、兔),均可使血压下降,且作用迅速,持续时间短暂。
降压作用是直接扩张外周血管的结果。
将黄芪注射液注入实验犬的冠状、椎动脉、肠系膜上动脉、脑血管、肠血管等内脏管,可使血管阻力指数下降,但注入肾动脉,肾血管阻力指数反而增高,提示黄芪对肾血管的作用与对其他部位血管不同。
7.保肝作用
黄芪能防止肝糖原减少,对小白鼠四氯化碳性肝炎有保护作用。
黄芪对乙型肝炎病毒表面抗原阳性转阴也有一定作用,与对照组比较,差异显著(P<0.05).治疗慢性肝炎的临床有效率,肝郁脾虚型和肝肾阴虚型分别为92.1%和88.5%,均比对照组为优(P<0.05);但临床显著改善与对照组相比,无明显差异(P>0.05),说明单用一味黄芪治疗慢性肝炎,显效率不理想。
8.调节血糖
黄芪多糖具有双向调节血糖的作用,可使葡萄糖负荷后小鼠的血糖水平显著下降,并能明显对抗肾素引起的小鼠血糖水平升高,而对胰岛素低血糖无明显影响。
9.抗茵及抑制病毒作用
黄芪对痢疾杆菌、肺炎双球菌、容血性链球菌A,B,C及金黄色、柠檬色、白色葡萄球菌等均有抑制作用。
黄芪对口腔病毒及流感仙台BBI病毒的治病作用也有一定的抑制作用,但无直接灭活作用。
10.激素样作用
黄芪具有类似激素样作用,可延长小鼠的动情期,对小鼠的发育有良好的影响。
11.其他
黄芪能显著降低家兔血液流变学指标,其性质与强度和丹参注射液相同。
100%黄芪注射液对大鼠离体子宫有兴奋、收缩作用。
黄芪注射液在试管内对鸡胚股骨又促进生长作用。
黄芪还有促进再生障碍性贫血患者血红蛋白、血清蛋白与白蛋白升高的作用。
<二>黄芪的免疫调节作用研究
1.黄芪对巨噬细胞的调节作用黄芙注射液能增强荷瘤小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数,使荷瘤小鼠脾脏红、白髓质分明,与正常组相比无明显差异,并减轻脾及胸腺碱性磷酸酶活性下降程度。
血清溶菌醇是由巨噬细胞分泌的一种物质,也是非特异性免疫因素之一,实驶证实黄芪可提高辐射小鼠血清溶菌酶含量,使单核一巨噬细胞系统功能增强。
曲卫敏等报道,适量黄芪不但能增加正常小鼠腹腔巨噬细胞活性,还能增加小鼠受体和M@一Fc受体的活性。
黄芪注射液还可以活化中性粒细胞,从而增强非特异免疫。
对T淋巴细胞的调节作用黄芪对T淋巴细胞的作用是多方面的,如黄芪往射液可明显增加荷瘤小鼠的T细胞总数(TLC)与辅助细胞数(Th)同时外周血a-醋酸萘酯酶(ANAE+)细胞阳田性反应增加。
体内注射可以促进Con.A诱导的T淋巴细胞增殖与转化。
体外实验表明,低浓度黄芪可促进淋巴细胞转化能力,而高浓度反而使之活力受抑,说明黄芪具有免疫增强和免疫抑制的双向调节作用。
黄芪的蒸馏提取液使荷瘤小鼠的T细胞增殖能力显著增加,也说明黄芪可以通过提高免疫能力增加机体抗瘤活力。
单味黄芪水煎剂不但可以促进正常大、小鼠T淋巴细胞转化,增加小鼠YAC花环与EA花环形成率,还使环磷酰胺(CY)造成的免疫低下大、小鼠的淋巴细胞转化能力增加,虽未达正常值,但与CY对照组比有显著差异。
对60Co造成的免疫抑制小鼠脚垫DTH有升高作用。
对B淋巴细胞的调节作用 有研究表明,无论体内注射还是体外实验,均发现黄芪对脾细胞增殖无明显影响,但可提高PFC值,促进循环免疫复合物(CIC)的清除。
单味黄芪能减轻60Co照射对小鼠脾脏B细胞的破坏;而对于氢化可的松(HC)所致免疫低下小鼠的PFC和溶血亲有显著提高之功效。
CY造模的免疫抑制小鼠,在给予黄芪后,血清IgG水平也显著增加。
对细胞因子的诱生作用体内实验表明,黄茂能诱生IL-2水平,但高浓度黄芪在体外实验中却抑制了!
IL-2诱生。
这也证实了黄芪具有免疫调节的双相性。
黄芪还能显著提高免疫抑制小鼠的IL-2、TNF-。
、IFN-y的诱生水平。
其他调节作用 经口给予黄芪,可使免疫低下小鼠补体C3水平与补体介导的免疫复合物溶解能力(CMSC)上升,虽未达正常本平,但与免疫低下组比较有显著性差异.黄芪还可显著增加正常小鼠RBC-C3b花环和IC花环形成率,使红细胞免疫粘附促进因子(RFER)提高62.18%(P<0.01),抑制因子(RFIR)降低24.79%(P<0.01),从而增加红细胞免疫力。
对60Co辅射造成的免疫低下小鼠之RBC-C3b受体花环率及RBC-IC花环形成率有明显的促进恢复作用(p<0.001);对HC造模的小鼠有显著提高总补体(TLC)和增加CMSC的作用。
CY造模的免疫抑制小鼠,在给予黄芪后NK活性显著增加。
后来的研究还发现黄芪有降低蛋清所致小鼠足肿胀、降低巴豆油致小鼠耳肿胀的效应,可以提高免疫功能低下小鼠的白细胞数、胸腺指数和耐缺氧能力。
2.黄芪多糖黄芪多糖(AsragulusPolysacharin,APS)是黄芪中含量最多、免疫活性较强的一类物质。
近年来对它的药理学作用研究甚多。
它能增强人淋巴细胞、小鼠腹腔巨噬细胞和中性粒细胞的活化,反转免疫抑制剂CY对免疫器官和免疫功能的影响。
对经眼镜蛇毒因子处理后补体下降、吞噬率下降的豚鼠有促进补体修复、促进中性白细胞吞噬率提高和恢复的功能。
近年来研究较多的是应用APS对创伤后免疫功能低下的恢复作用。
体内外应用APS不仅可使烧伤小鼠的脾脏指数和胸腺指数恢复正常,还可纠正烧伤小鼠T淋巴细胞转化,抑制性T细胞(TS)的抑制活性,IL-2产生及IL-2R表达的受抑状态,使巨噬细胞分泌的IL-1增加,抑制PGE2合成。
梁华平等人的进一步研究表明,APS可升高创伤小鼠的IL-2mRNA和IL-2RmRNA水平,提示APS是通过促进创伤小鼠淋巴细胞IL-2及IL-2R的基因转录表达而逆转IL-2、IL-2R的抑制状态的,这为研究APS对创伤后细胞免疫功能调节的作用的机理提供了线索。
卓安山等人给予烫伤大鼠以APS后,发现大鼠脾T、B淋巴细胞转化能力、克隆形成率及抗体形成细胞数均明显增加。
将APS应用于创伤感染可明显改善巨噬细胞吞噬活性,降低PGE2释放,但TNF仍高于正常组。
用ASP拮抗CY的毒副作用,使PFC指数明显增加,但脾指数与对照组相比无显著增加。
3.黄芪皂甙黄芪皂甙是从黄茂中提取的有效成分,对其免疫功能实验的研究不多,主要集中于对它的提取、分离、定性定量的分析方法方面。
孙成文等人报道,低剂量AS(2mg)可加重心衰,中、高剂量(4mg、8mg)有抗心衰作用。
AS能抑制Na-K-ATP酶,为其心衰的调节作用机理提供可靠依据。
重症肌无力(MG)为突触后膜烟碱型乙酰胆碱受体(nAchR)自身免疫性疾病,患者血清中存在nAchR-Ab,周围血单个核细胞(PBMNC)能合成分泌此抗体,而体外细胞免疫实验证实,AS能抑制PBMNC体外分泌山nAchR-Ab,提示了AS对MG患者治疗作用的机理。
宋相同等人的研究报道证实,AS对非特异性免疫力和特异性免疫功能均有作用。
且具抗肿瘤、抗病毒作用。
黄芪皂甙甲黄芪茂甲甙,自1985年由曹正中等人首次从山东荚膜黄芪根中提取出以来,人们对其主要功效研究的尚不太多。
经药理实验表明,该化合物具降压、抗炎、镇群、镇痛等作用,并能升高血浆中CAMp含量和促进小鼠再生肝DNA含量。
AS1能兴奋M@,使细胞内次级溶酶体和残余体增多、初级溶酶体增加、体积增大、酶含量增高。
体内给予AS1后,电镜下观察到M@检活化,细胞直径普遍增大,胞体丰富、伪足宽大,表面有较多凹陷、皱褶,细胞形态不定。
M@吞噬率、吞噬指数增加,溶酶体酸性磷酸酶活性增强。
4.黄芪在复方、合剂中的应用 由于黄芪是最常用的益寿中药之一,也是最常用的补气类中药之一,它与其它的中药组成复方,用途十分广泛。
但黄芪是一种具有双向调节作用的中药,它在每一方剂中均有适当的含量组成,提高它在组方中的剂量并不一定能提高机体的免疫功能。
在黄勇等人研究的不同剂量黄芪在防已黄芪汤中对正常小鼠免疫功能影响的差别与量效关系时发现,18%黄芪含量的防已黄芪汤对T细胞转化的增强作用最明显,黄芪含量无论增减均使此作用减弱,当黄芪含量达54%时甚至出现抑制作用。
黄芪可以和多种中药组成方剂,从而提高机体的免疫功能。
例如,当归是历代医家视为补血活血的佳品,黄芪与之合用其增强免疫作用非常可观。
李志骏等人研究了以此二味药为主要成分的归芪口服液,发现此液对实验小鼠的体重、胸腺指数、肝指数、细胞免疫(DTH)和体液免疫(PFC、血清溶血素HA)及小儿免疫功能低下有较明显的提升作用,特别是对小儿免疫球蛋白减低有较为肯定的作用。
吴椅等人认为,由当归与黄芪为主要成分的当归补血汤对60Co照射小鼠的PFC、HA、ANAE+细胞比率、DTH及血清溶菌酶都有显著促进恢复作用。
复方参芪冲剂为人参、苋芪等中药组成,可以增加吞噬百分率、吞噬指数,提高白细胞数、促进T细胞转化,从而提高机体免疫能力发挥抗瘤活性。
常规用黄芪(剂量占总生药量的18%)与防风、白术合用组成益卫固表的玉屏风散,可以提高腹腔巨噬细胞活力,增加小鼠M@C3b、M@-Fc受体和RBC-FC、C3、RBC-C3b受体的活性和RBC-IC花环形成率并证实黄芪在此组方中与其它组分之间有协同作用。
黄芪与银杏配伍使用可以增强小鼠腺细胞增殖和特异性抗鸡红细胞抗体的产生,增强体液免疫和细胞免疫,二者还有协同作用。
可与黄芪配伍使用的中药很多,且黄芪用量也各不相同。
相信在不久的将来,中药的前景将更加广阔。
以上就是我此次论文的主要内容。
感谢学校各位老师的仔细阅读和辛勤审批。
谢谢。
参考文献:
1.钱正清主编,《中药大辞典》.中国中医药出版社,2005
2.刘寿山编著.《中药研究文献摘要》(共四册).科学出版社。
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