微生物生化和血清学试验标准操作规程.docx
- 文档编号:26537285
- 上传时间:2023-06-20
- 格式:DOCX
- 页数:21
- 大小:25.73KB
微生物生化和血清学试验标准操作规程.docx
《微生物生化和血清学试验标准操作规程.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《微生物生化和血清学试验标准操作规程.docx(21页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
微生物生化和血清学试验标准操作规程
触酶试验标准操作规程
1.目的
规范触酶试验标准操作规程。
2.原理
具有触酶(过氧化氢酶)的细菌,能催化过氧化氢,放出新生态氧,继而形成分子氧,出现
气泡。
3.试剂
3%过氧化氢溶液。
4.质控
金黄色葡萄球菌ATCC25923阳性,肺炎链球菌ATCC49619阴性。
5.操作步骤
取3%过氧化氢溶液0.5ml,滴加于不含血液的细菌琼脂培养物上,或取1~3ml滴加入盐水菌悬液中。
6.结果判断
培养物出现气泡者为阳性。
7.注意事项
7.1细菌要求新鲜。
7.2不宜用血琼脂平板上的菌落作触酶试验,因红细胞内含有触酶,可能出现假阳性。
7.3需用已知阳性菌和阴性菌作对照。
8.临床意义
在革兰阳性球菌中,链球菌触酶试验阴性,葡萄球菌及微球菌均阳性,因此可用于革兰阳性
球菌的初步分群。
氧化酶试验标准操作规程
1.目的l
规范氧化酶试验标准操作规程。
{
2.原理
氧化酶(细胞色素氧化酶)是细胞色素呼吸酶系统的酶。
具有氧化酶的细菌,首先使细胞色素C氧化,再由氧化型细胞色素C使对苯二胺氧化,生成有色的醌类化合物。
3.试剂
盐酸二甲基对苯二胺(或四甲基对苯二胺)0.1g,加蒸锱水10ml,置于棕色瓶内可用一周。
冰箱保存,或分装于棕色瓶内密封。
4.质控
铜绿假单胞菌ATCC27853阳性,大肠埃希菌ATcc25922阴性。
5.操作步骤
去洁净的滤纸一小块,蘸取菌苔少许,加1滴10g/L盐酸二甲基对苯二胺溶液于菌落上,观察颜色变化。
6.结果判断
立即呈粉红色并迅速转为紫红色者为阳性。
7.注意事项
7.1试剂在空气中易氧化,故应经常更换新试剂,或配置时试剂内加入0.1%维生素c以减少自身氧化。
7.2不宜采用含葡萄糖培养基上的菌落(葡萄糖发酵可抑制氧化酶活性)。
7.3实验时应避开含铁的培养基等含铁物质,因本实验过程中,遇铁时会出现假阳性。
8.临床意义
8.1用于奈瑟菌属﹑非发酵等细菌的鉴定。
如果肠杆菌科不进行本试验,则可能将氧化
8.2所有的革兰阴性菌均应进行氧化酶试验,如果肠杆菌科不进行本试验,则可能将氧化酶阳性的嗜水气单胞菌错误地鉴定为大肠埃希杆菌或沙雷菌。
凝固酶试验标准操作规程
1.目的
规范凝固酶试验标准操作规程。
2.原理
金黄色葡萄球菌可产生两种凝固酶。
一种是结合凝固酶,结合在细胞壁上,使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白而附着于细菌表面,发生凝集,可用玻片法测出。
另一种是菌体生成后释放于培养基中的游离凝固酶,能使凝血酶原变成凝血酶类物质,从而使血浆凝固。
3.试剂
新鲜人或兔血浆,生理盐水。
4.质控
金黄色葡萄球菌ATCC25923阳性,表皮葡萄球菌ATCC57625阴性。
5.操作步骤
5.1玻片法取兔或混合人血浆和盐水各1滴分别置清洁载玻片上,挑取待检菌菌落分别与血浆及盐水混合。
如血浆中有明显的颗粒出现而盐水中无自凝现象为阳性。
5.2试管法取试管2支,分别加入0.5ml的血浆(经生理盐水1:
4稀释),挑取菌落数个加入测定管充分研磨混匀,用已知阳性菌株加入对照管,37℃水浴3~4小时。
血浆凝固为阳性。
6.结果判断
玻片法:
如血浆中有明显的颗粒出现而盐水中无自凝现象为阳性。
试管法:
血浆凝固为阳性。
7.注意事项
若被检菌为陈旧的肉汤培养物(>18~24小时)或生长不良、凝固酶活性低的菌株往往出现假阴性。
8.临床意义
金黄色葡萄球菌凝固酶试验为阳性,而表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌凝固酶试验为阴性,故此试验对鉴别葡萄球菌有重要价值。
DNA酶试验标准操作规程
1.目的
规范DNA酶试验标准操作规程。
2.原理
某些细菌可产生细胞外DNA酶。
DNA酶可水解DNA长链,形成数个单核苷酸组成的寡核苷酸链。
长链DNA可被酸沉淀,而水解后形成的寡核苷酸则可溶于酸,当在菌落平板上加入酸后,若在菌落周围出现透明环,表示该菌具有DNA酶。
-
3.试剂
3.1DNA琼脂成分
DNA(脱氧核糖核酸)2.0g胰蛋白胨15g
大豆胨5.0g氯化钠5.0g
琼脂20g蒸馏水1000ml
pH7.2~7.4
3.2制备将上述成分混合于蒸馏水中,加热溶解,校正pH,分装三角烧瓶,经115C灭菌l5分钟,倾注于灭菌平皿,冷藏备用。
4.质控
黏质沙雷菌ATCC1404l为阳性,大肠埃希菌ATCC25922为阴性。
|
5.操作步骤
将待检菌点状接种于DNA琼脂平板上,35℃培养18~24小时,在细菌生长物上加一层lmol/L盐酸(使菌落浸没)。
}
6.结果判断
菌落周围出现透明环为阳性,无透明环为阴性。
7.注意事项|
培养基表面凝固水需烘干,以免细菌呈蔓延状生长。
也可在营养琼脂的基础上增加0.2%DNA
8.临床意义
肠杆菌科中的沙雷菌和变形杆菌可产生DNA酶,革兰阳性球菌中只有金黄色葡萄球菌产生DNA酶,因此可用于鉴别。
CAMP试验标准操作规程
1.目的
规范CAMP试验标准操作规程。
2.原理
B群链球菌具有“CAMP"因子,能促进葡萄球菌p溶血素的活性,使两种细菌在划线处呈现箭头形透明溶血区。
3.试剂
金黄色葡萄球菌ATCC25923,血琼脂平板。
4.质控
无乳链球菌ATCC13813阳性,化脓链球菌ATCC19615阴性。
5.操作步骤
先用产溶血素的金黄葡萄球菌在血琼脂平板上划一横线,再取待检的链球菌与前一划线作垂直划线接种,两者相距().5~1cm。
置35℃孵育18~24小时,观察结果。
6.结果判断
在两种细菌划线的交界处,出现箭头形透明溶血区为阳性。
7.注意事项
被检菌与金黄色葡萄球菌划线之间留出0.5~1cm距离,不得相接。
8.临床意义
主要用于鉴定B群链球菌(阳性),其他链球菌本试验阴性。
Optochin敏感试验标准
操作规程
1.目的
规范Optochin敏感试验标准操作规程。
2.原理
0ptochin(ethylhydrocupreine,乙基氢化去甲奎宁的商品名)可干扰肺炎链球菌叶酸的生物合成,抑制该菌的生长,故肺炎链球菌对其敏感,而其他链球菌对其耐药。
3.试剂
血琼脂平板,Optochin纸片(含药5ug)。
4.质控
肺炎链球菌ATCC49619阳性,粪链球菌ATCC979{)阴性。
5.操作步骤
将待检的旺溶血的链球菌均匀地涂布在血琼脂平板上,贴放Optochin纸片(含药5ug),35℃孵育18~24小时。
观察抑菌圈的大小。
6.结果判断
抑菌圈>10mm为肺炎链球菌。
7.注意事项
7.1做Optochin敏感试验的平板不能在C02环境下培养,因其可使抑菌圈缩小。
7.2同一血琼脂乎板可同时测定几株菌株,但不要超过4株被测菌。
7.3Optochin纸片町保存于冰箱中,一般可保存9个月。
但如用已知敏感的肺炎链球菌检测为耐药时,纸片应废弃。
8.临床意义
用于肺炎链球菌与其他链球菌之鉴别。
肺炎链球菌对Optochin敏感,而其他链球菌则耐药.
七叶苷试验标准操作规程
1.目的
规范七叶苷分解试验标准操作规程。
2.原理
粪肠球菌能分解七叶苷,其代谢产物与铁离子结合产生黑色沉淀,使培养基变黑。
3.试剂
3.1七叶苷琼脂成分
蛋白胨5g磷酸氢二钾1g
牛肉膏3g七叶苷1g
枸橼酸铁0.5g蒸馏水1000m1
pH7.2
3.2制备上述各成分混合溶解后,调pH至7.2,分装试管,高压灭菌,冷藏备用。
4.质控
粪肠球菌ATCC29219阳性,肺炎链球菌ATCC49619阴性。
5.操作步骤
将试验菌接种于七叶苷琼脂斜面上,经35℃孵育18~24小时后取出,观察结果。
6.结果判断
培养基变黑色,为阳性。
7.注意事项
7·1若接种七叶苷液体培养基,阳性者经35℃孵育3~6小时,培养基即可变黑。
7·2其他链球菌亦能在此培养基上生长,但不变黑;肺炎链球菌不生长。
8.临床意义
主要用于鉴别D群链球菌与其他非D群链球菌。
卫星试验标准操作规程
1.目的
规范卫星试验标准操作规程。
2.原理
金黄色葡萄球菌会产生一种扩散性蛋白CAMP因子(合成脱氢酶),并渗入培养基中,刺激流杆嗜血杆菌生长。
3.试剂
血琼脂平板,金黄色葡萄球菌。
4.质控
流感嗜血杆菌ATCC10211阳性,卡他莫拉菌ATCC49226阴性。
5.操作步骤
挑取可疑菌落,接种于血琼脂平板上,作浓密连续划线后,再将金黄色葡萄球菌点种其上(2~4处),于37℃培养24小时后观察结果。
6.结果判断
如见葡萄球菌菌落邻近处的菌落较大,而远离金黄色葡萄球菌菌落处的菌落小,即为“卫星见象”阳性。
可初步鉴定为流感嗜血杆菌。
7.注意事项
若产生大的新月形或箭头形溶血,则为CAMP阳性,即B型链球菌,而小区溶血及不溶血为阴性反应。
8.临床意义
用于流感嗜血杆菌与其他细菌的鉴别。
糖(醇、苷)类发酵试验
标准操作规程
1.目的
规范糖(醇、苷)类发酵试验标准操作规程。
2.原理
不同细菌含有发酵不同糖类的酶,分解糖的能力各不相同,产生的代谢产物也随细菌种类而异。
观察细菌能否分解各类单糖(葡萄糖等)、双糖(乳糖等)、多糖(淀粉等)和醇类(甘露醇)、糖苷(水杨苷等),是否产酸或产气。
3.试剂
3.1成分
蛋白胨10g牛肉膏3g
氯化钠5g溴甲酚紫指示剂10ml蒸馏水1000ml
3.2制备将上述成分混合后,加热使其溶解。
校正pH至7.1~7.2,用滤纸过滤;根据需要,分别加需要的糖和醇;分装于试管,每管内3ml,置高压灭菌器内,经115。
C10分钟灭菌。
置4℃左右冰箱备用。
4.质控
大肠埃希菌ATCC25922阳性(加葡萄糖、乳糖、甘露醇、蔗糖),奥斯陆莫拉菌ATCC25829阴性。
5.操作步骤
将纯培养的细菌接种至各种糖培养管中,置一定条件下孵育后取出,观察结果。
6.结果判断
若细菌能分解此种糖类产酸,则指示剂呈酸性变化;不分解此种糖类,则培养基无变化。
产气可使液体培养基中倒置的小管内出现气泡,或在半固体培养基内出现气泡或裂隙。
7.注意事项
糖发酵的基础培养基内必须不含有任何糖类和硝酸盐,以免出现假阳性反应。
因有些细菌可使硝酸盐还原产生气体,而影响发酵糖类产气结果的观察。
8.临床意义
糖发酵试验是鉴定细菌的生化反应试验中最主要的试验,不同细菌可发酵不同的糖类。
葡萄糖O/F试验标准操作规程
1.目的
规范O/F试验标准操作规程。
2.原理
又称氧化/发酵(o/F)试验,观察细菌对葡萄糖分解过程中是利用分子氧(氧化型),还是无氧降解(发酵型),或不分解葡萄糖(产碱型)。
3.试剂
3.1O/F基础培养基成分
蛋白胨2g氯化钠5g
磷酸氢二钾0.2g琼脂3g
溴甲酚紫(1.6%水溶液)1.0ml蒸馏水1000ml
葡萄糖1g
3.2制备上述成分除指示剂外加热溶解后校正pH至7.1,加人指示剂并分装13×100mm的试管,每管2~3ml,置高压灭菌器内,经115℃15分钟的灭菌,即为O/F基础培养基。
最终糖浓度为1%。
4.质控
铜绿假单胞菌ATCC27853开放管为黄色,封闭管为紫色;大肠埃希菌ATCC25922开放管、封闭管均为黄色。
5.操作步骤
从平板上或斜面培养基上挑取少量细菌,同时穿刺接种于2支O/F试验管,其中1支用滴加熔化的无菌凡士林(或液体石蜡)覆盖培养基液面0.3~0.5cm高度。
经37。
C培养48小时后,观察结果。
6.结果判断
仅开放管产酸为氧化反应,两管都产酸为发酵反应,两管均不变为产碱型。
7.注意事项
有些细菌不能在O/F培养基上生长,若出现此类情况,应在培养基中加入2%血清或0.1%酵母浸膏,重做O/F试验。
l
8.临床意义
葡萄糖O/F试验可用于葡萄球菌与微球菌的鉴别,前者为发酵型细菌,后者为氧化型细菌。
更重要的是用于革兰阴性杆菌的鉴别,肠杆菌科的所有细菌均为发酵型细菌,而绝大多数的非发酵菌则为氧化型或产碱型细菌。
三糖铁试验标准操作规程
1.目的
规范三糖铁试验标准操作规程。
2.原理
能发酵葡萄糖和乳糖的细菌产酸产气,使三糖铁的斜面和底层均呈黄色,并有气泡产生;只能发酵葡萄糖,不发酵乳糖的细菌,使斜面呈红色,而底层呈黄色;有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸,生成硫化氢(H2S),H:
S遇铅或铁离子形成黑色的硫化铅或硫化铁沉淀物;分解尿素,呈红色。
3.试剂
3.1三糖铁琼脂成分
上层:
乳糖10g蔗糖10g
葡萄糖1g硫酸亚铁0.2g
蛋白胨20g琼脂20g
硫代硫酸钠0.2g氯化钠5g
0.2%酚红12.5ml蒸馏水1000ml
下层:
牛肉膏1.8g酸性磷酸钾1.2g
0.2%酚红1.8ml蛋白胨6g
琼脂3g氯化钠3g
尿素12g蒸馏水600ml
3.2制备
上层制备:
成分混合后,加热溶解,校正pH至7.6,分装三角烧瓶内,115℃灭菌15分钟。
下层制备:
下层成分(除尿素以外)混合后,加热溶解,校正pH至7.2,然后加入尿素分装每管约1.5ml,115℃灭菌15~20分钟。
再取葡萄糖0.5g、().1%酚红溶液10ml混入已溶解的琼脂中。
充分摇匀,使其溶解,分装于试管中,每管约1.5ml,置高压灭菌器内,经115。
C灭菌10分钟。
取出后,待其直立凝固。
下层凝固后,用无菌手续,将上层培养基趁热装于下层培养基上面。
凝固后将其置于37。
C培养箱中,培养18~24小时,如无杂菌污染,可存于冰箱中备用。
l
4.质控
大肠埃希菌ATCC25922,三糖铁琼脂上、下层均为黄色,福氏志贺菌CMCC51573,三糖铁琼脂上层不变,下层为黄色。
l
5.操作步骤
挑取纯菌落接种于三糖铁琼脂上,35℃孵育18~24小时。
6.结果判断
出现黑色沉淀物为H2S阳性。
7.注意事项
三糖铁琼脂上下层配制时,高压灭菌时掌握好温度和时间,以免培养基中的糖被分解。
8.临床意义
三糖铁琼脂用于观察细菌对糖的发酵能力,以及是否产生H2S,可初步鉴定细菌的种属.
甲基红试验标准操作规程
1.目的
规范甲基红试验标准操作规程。
2.原理
某些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸进一步代谢分解为乳酸、甲酸、乙酸,使培养基的pH下降到4.5以下,加入甲基红指示剂即显红色(甲基红变红的范围为pH4.4~6.0),某些细菌
虽能分解葡萄糖,但产酸量少,培养基的pH在6.2以上,加甲基红指示剂呈黄色。
3.试剂
3-1葡萄糖蛋白胨水培养基成分
多价蛋白胨7g葡萄糖5g
磷酸氢二钾5g蒸馏水1000ml
pH7.2
3.2制备将上述成分混合溶解后,分装小试管,高压121℃灭菌15分钟。
3.3式刑
甲基红0.1g95%乙醇300m1
蒸馏水200ml
4.质控
大肠埃希菌ACTT25922为红色,阴沟肠杆菌ACTT13047为黄色。
5.操作步骤
将待检菌接种至葡萄糖蛋白胨水培养基中,35℃孵育1~2日,加人甲基红试剂2滴,立即观察结果。
6.结果判断
红色者为阳性,黄色者为阴性。
7.注意事项
7.1培养基中的蛋白胨可影响甲基红试验结果,在使用每批蛋白胨之前要用已知甲基红阳性菌和阴性菌做质量检测。
7·2甲基红反应并不因增加葡萄糖的浓度而加快。
7·3孵育时间不得少于48小时,若过早地判断结果,往往可造成假阴性。
8.临床意义
主要应用于鉴别大肠杆菌和产气杆菌。
VP试验标准操作规程
1.目的
规范VP试验标准操作规程。
2.原理
某些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸,并进一步将丙酮酸脱羧成为乙酰甲基甲醇,后者在碱性环境中被空气中的氧氧化成为二乙酰,进而与培养基中的精氨酸等所含的胍基结合,形成红色的化合物,即VP试验阳性。
3.试剂
3.1葡萄糖蛋白胨水培养基成分
多价蛋白胨7g葡萄糖5g
磷酸氢二钾5g蒸馏水1000ml
pH7.2
3.2制备将上述成分混合溶解后,分装小试管,高压115℃灭菌15分钟。
3.3试剂
甲液:
6%α萘酚酒精溶液;
乙液:
.40%.KOH溶液。
4.质控
大肠埃希菌ATCC25922为无红色出现,肺炎克雷伯菌ATCC13883为红色。
5.操作步骤
5.1将待检菌接种至葡萄糖蛋白胨水培养基中,35℃孵育1~2日。
5.2观察方法贝氏(Barritt)法观察时按每2ml培养物加甲液1ml、乙液0.4ml混合,置35℃,15~30分钟出现红色为阳性。
若无红色,应置37℃,4小时后再判定,本法较奥氏法敏感。
6.结果判断
呈红色者为阳性。
,
7.注意事项
7.1许多实验室工作人员有一个错误的印象,即VP试验阳性菌甲基红试验自然是阴性,或反之亦然。
实际上,肠杆菌科的大多数细菌产生相反的反应(由于乙酰甲基甲醇形成碱性,导致甲基红试验阴性和VP试验阳性)。
某些细菌如蜂房哈夫尼菌和奇异变形杆菌,35℃培养可产生甲基红试验和VP试验同时阳性反应,后者常延迟出现。
7.2α萘酚酒精溶液易失效,试剂放室温暗处可保存1个月。
KOH溶液可长期保存。
国内多采用贝氏法。
8.临筒床葸义
本试验常与甲基红试验一起使用,因为前者阳性的细菌,后者通常为阴性,反之亦如此。
如大肠埃希菌、沙门菌等甲基红呈阳性反应,而VP试验则为阴性;相反,如沙雷菌、阴沟杆菌等,VP试验阳性,而甲基红反应为阴性
吲哚试验标准操作规程
1.目的
规范吲哚试验标准操作规程。
2.原理
有些细菌具有色氨酸酶,能分解培养基中的色氨酸,生成吲哚,吲哚与试剂对二甲氨基苯甲醛作用,形成玫瑰吲哚而呈红色。
3.试剂l
3.1蛋白胨水培养基成分
蛋白胨(或胰蛋白胨)10g氯化钠5g
蒸馏水1000mlpH7.2
3.2制备将上述成分溶于水中.校正pH至7.2,分装试管,每管2~3ml,置121℃灭菌15分钟备用。
4.质控
大肠埃希菌ACTT25922为红色,肺炎克雷伯菌ATCC13883为无色。
5.操作步骤
将待检菌接种至蛋白胨水培养基中,35℃孵育1~2日,沿管壁慢慢加入柯凡克(Kovacs)试剂0.5ml即刻观察结果。
6.结果判断
两液面交界处呈红色者为阳性,无红色者为阴性。
7.注意事项
蛋白胨中应含有丰富的色氨酸,否则不能应用。
8.临床意义
主要应用于肠杆菌的鉴别。
硝酸盐还原试验标准操作规程
1.目的
规范硝酸盐还原试验标准操作规程。
2.原理
硝酸盐培养基中的硝酸盐可被某些细菌还原为亚硝酸盐,后者与乙酸作用生成亚硝酸。
亚硝酸与对氨基苯磺酸作用,形成偶氮苯磺酸,再与Q萘胺结合成红色的N—a茶胺偶氮苯磺酸。
3.试剂
3.1硝酸盐培养基成分
蛋白胨10g硝酸钾(AR)2g
蒸馏水1000mlpH7.4
3.2制备上述成分混合后,加热溶解,调pH至7.4。
分装试管,每管约4ml,121℃15分钟高压灭菌后备用。
3.3试剂配制;
甲液:
对氨基苯磺酸0.8g5mol/L乙酸100ml
乙液:
α萘胺0.5g5mol/L乙酸100ml4.质控
大肠埃希菌ATCC25923为阳性,鲍曼不动杆菌ATCC19606为阴性。
5.操作步骤
将待检菌株接种于硝酸盐培养基,35℃孵育I~2日,加入试剂甲液和乙液各2滴,立即观察结果。
若加入硝酸盐试剂不出现红色,需检查硝酸盐是否被还原。
可于原试管内再加入少许锌粉,如出现红色,证明产生芳基肼,表示硝酸盐仍然存在;若仍不产生红色,表示硝酸盐已被还原为氨和氮。
也可在培养基内加1支小倒管,若有气泡产生,表示有氮气生成,以排除假阴性。
6.结果判断l
呈红色者为阳性。
若不呈红色,再加入少许锌粉,如仍不变为红色者为阳性,表示培养基中的硝酸盐已被细菌还原为亚硝酸盐,进而分解成氨和氮。
加锌粉后变为红色者为阴性,表示硝酸|盐未被细菌还原,红色反应是由于锌粉的还原所致。
7.注意事项
本试验在判定结果时,必须在加试剂之后立即判定结果,否则因颜色迅速褪色而造成判定困难,如铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌等。
8.临床意义
本试验在细菌鉴定中广泛应用,肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐,部分假单胞菌产生氮气。
脲酶试验标准操作规程
1.目的
规范脲酶试验标准操作规程。
2.原理
某些细菌能产生脲酶,分解尿素形成氨,使培养基变碱,酚红指示剂随之变红色。
3.试剂
3.1尿素培养基成分
蛋白胨1.0g氯化钠2.0g
葡萄糖1.0g磷酸二氢钾2.0g
0.4%酚红溶液3.0ml琼脂18~20g
20%尿素溶液100ml蒸馏水1000ml
pH7.0
3.2制备将上述成分(除酚红、尿素外)混合于蒸馏水中,加热溶解,校正pH,然后加入酚红溶液,分装每瓶100ml,经12l℃灭菌15分钟备用。
临用时,加热溶解,冷却至55C左右,加入无菌的尿素溶液1()ml,摇匀,无菌分装于灭菌试管,每支2ml,并置成斜面,备用。
4.质控
奇异变形杆菌ATCC49005为阳性,大肠埃希菌ATCC25922为阴性。
5.操作步骤
将待检菌接种于含尿素的培养基中,3S。
C孵育1~4日。
6.结果判断
呈红色者为脲酶试验阳性。
7.注意事项
所有尿素培养基均依靠出现碱性来证实,故对脲酶不是特异的。
某些细菌如铜绿假单胞菌利用培养基的蛋白胨可分解为多量氨基酸,使pH升高而呈碱性,造成假阳性。
因此必须用无尿素的相同培养基作为对照。
8.临床意义
主要应用于肠杆菌科中的变形杆菌属细菌的鉴别。
奇异变形杆菌和普通变形杆菌脲酶阳性。
赖氨酸脱羧酶试验标准操作规程
1.目的
规范赖氨酸脱羧酶试验标准操作规程。
2.原理
有些细菌能产生某种氨基酸脱羧酶,使该种氨基酸脱去羧基,生成胺(如赖氨酸一尸胺,鸟氨酸一腐胺,精氨酸一精胺),从而使培养基变碱性,指示剂变色。
3.试剂
3.1基础液成分
蛋白胨5g牛肉浸膏5g
溴甲酚紫0.1g甲酚红0.005gl
吡多醛(VB12)0.005g葡萄糖0.5g{
蒸馏水1000ml
3.2
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 微生物 生化 血清学 试验 标准 操作规程