风湿病常用血清学检查.ppt.ppt
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风湿病常用血清学检查总总论论风湿病的常用血清学检查是风湿病诊断、鉴别诊断的重要辅助手段之一,部分检测项目可以作为病情和预后判断、疗效考察的参考指标。
临床实践中应综合临床和实验室资料对疾病作出正确的诊断和评估。
一.狼疮细胞1.定义:
狼疮细胞即LE细胞,是指胞浆中有一个苏木精染色呈紫红色的很大的椭圆形小体,而细胞核却被推挤在一边的吞噬细胞(多为多形核白细胞)。
2.正常值:
正常人阴性。
3.意义:
LE细胞检查是五、六十年代检测ANA的主要方法,对于SLE具有一定的特异性。
由于LE细胞检查费时、费力,而且受吞噬细胞功能等因素的影响,目前临床上基本已不再开展。
尽管如此,LE细胞的发现推动了继后的SLE等自身免疫病中多种抗核抗体的研究,具有重要历史意义。
二.抗核抗体(ANA)1.1.定义:
定义:
抗核抗体(抗核抗体(ANAANA)泛指作用于细胞核)泛指作用于细胞核(浆浆)内蛋白质、内蛋白质、(脱氧脱氧)核酸或由其组成的大分子复合核酸或由其组成的大分子复合物等多种抗原成份的自身抗体,迄今为止已发现几十物等多种抗原成份的自身抗体,迄今为止已发现几十种以上。
种以上。
2.2.意义:
意义:
许多自身免疫性风湿病的患者血清中存许多自身免疫性风湿病的患者血清中存在多种在多种ANAANA,ANAANA的检测和识别可以为风湿性疾病的的检测和识别可以为风湿性疾病的诊断、鉴别诊断乃至病情判断提供重要的实验室依据。
诊断、鉴别诊断乃至病情判断提供重要的实验室依据。
二二.抗核抗体抗核抗体(ANA)3.ANA筛选实验的方法:
间接免疫荧光抗核抗体检测(IFANA)。
目前以HEp-2细胞(人喉癌上皮细胞)为抗原基质的IFANA是国际公认的高敏感性标准ANA筛选实验。
4.ANA4.ANA筛选实验基本原理筛选实验基本原理:
患者血清中存在的患者血清中存在的ANA(ANA(第一抗体第一抗体)能与相应细胞核(浆)抗原成能与相应细胞核(浆)抗原成分结合,再用荧光标记的抗人球蛋白抗体分结合,再用荧光标记的抗人球蛋白抗体(第第二抗体二抗体)复染,经过荧光显微镜观察即能反映复染,经过荧光显微镜观察即能反映ANAANA的存在的存在,而且通过对患者血清做一定稀释而且通过对患者血清做一定稀释后的检测还可以对抗体含量作半定量(滴度)后的检测还可以对抗体含量作半定量(滴度)测定。
测定。
二.抗核抗体(ANA)二二.抗核抗体抗核抗体(ANA)5.ANA5.ANA阳性的定义阳性的定义阳性的定义阳性的定义:
一般将超过一般将超过一般将超过一般将超过9595正常人群正常人群正常人群正常人群ANAANA水平的水平的水平的水平的数值定义为数值定义为数值定义为数值定义为ANAANA阳性,对大多数实验室而言,通常认为阳性,对大多数实验室而言,通常认为阳性,对大多数实验室而言,通常认为阳性,对大多数实验室而言,通常认为IFANAIFANA滴度滴度滴度滴度11:
8080为阳性。
为阳性。
为阳性。
为阳性。
6.ANA6.ANA阳性的临床意义阳性的临床意义阳性的临床意义阳性的临床意义:
可见于多种临床情况,除了自身可见于多种临床情况,除了自身免疫性风湿病免疫性风湿病(表表1)1)外,还可见于各种原因引起的肝硬化、外,还可见于各种原因引起的肝硬化、自身免疫性肝病、肿瘤以及少数正常人尤其是老年人,但自身免疫性肝病、肿瘤以及少数正常人尤其是老年人,但在正常人中通常在正常人中通常IFANAIFANA滴度较低。
滴度较低。
二二.抗核抗体抗核抗体(ANA)表表表表1.1.不同风湿病的不同风湿病的不同风湿病的不同风湿病的IFANAIFANA阳性率阳性率阳性率阳性率(HEp-2(HEp-2细胞为抗原基质细胞为抗原基质细胞为抗原基质细胞为抗原基质)参考文献:
参考文献:
PengPengSL,HardinJA,CraftJ.AntinuclearAntibodies.InKelleyWN,HarrisED,RuddyS,SledgeSL,HardinJA,CraftJ.AntinuclearAntibodies.InKelleyWN,HarrisED,RuddyS,SledgeCB(edCB(ed):
):
TextbookofRheumatologyfiftheditionW.B.SaundersCompany1997.TextbookofRheumatologyfiftheditionW.B.SaundersCompany1997.疾病疾病疾病疾病ANAANAANAANA阳性率阳性率阳性率阳性率(%)(%)(%)(%)SLESLE9999药物性狼疮药物性狼疮100100SScSSc9797MCTDMCTD9393SSSS9090PM/DMPM/DM7878二二.抗核抗体抗核抗体(ANA)7.ANA荧光核型是指在荧光显微镜下观察到的核荧光染色的类型。
8.常见荧光核型有(以HEp-2细胞株为基质的IFANA):
周边型、均质型、颗粒型、核仁型、着丝点型及增殖细胞核抗原(PCNA)型等。
9.意义:
核型的不同反映了标本血清中存在针对不同核抗原的自身抗体.如:
核仁型多见于PSS,周边型多见于SLE.参考文献:
中华风湿病学第21章基本荧光核型荧光核型荧光核型荧光核型荧光核型荧光染色特点荧光染色特点荧光染色特点荧光染色特点相关抗体相关抗体相关抗体相关抗体相关疾病相关疾病相关疾病相关疾病(核)均质型(核)均质型(核)均质型(核)均质型HHomogeneousomogeneous细胞核均匀染色,分裂期细胞染色体细胞核均匀染色,分裂期细胞染色体细胞核均匀染色,分裂期细胞染色体细胞核均匀染色,分裂期细胞染色体区域着染。
区域着染。
区域着染。
区域着染。
抗组蛋白抗体,抗组蛋白抗体,抗组蛋白抗体,抗组蛋白抗体,抗抗抗抗dsDNAdsDNAdsDNAdsDNA抗体抗体抗体抗体SLESLESLESLE,药物性狼疮,药物性狼疮,药物性狼疮,药物性狼疮,其它其它其它其它(核)周边型(核)周边型(核)周边型(核)周边型PPPPerinuclearerinuclearerinuclearerinuclear细胞核均匀染色,核周染色更强;细胞核均匀染色,核周染色更强;细胞核均匀染色,核周染色更强;细胞核均匀染色,核周染色更强;分裂期细胞染色体区域强着染。
分裂期细胞染色体区域强着染。
分裂期细胞染色体区域强着染。
分裂期细胞染色体区域强着染。
抗层粘素抗层粘素抗层粘素抗层粘素抗核膜抗核膜抗核膜抗核膜-核孔复合物,核孔复合物,核孔复合物,核孔复合物,抗抗抗抗DNADNADNADNA慢性活动性肝慢性活动性肝慢性活动性肝慢性活动性肝炎,炎,炎,炎,SLESLESLESLE(核)斑块型(核)斑块型(核)斑块型(核)斑块型SSSSpecklepecklepecklepeckle细胞核颗粒状、块状着染;核仁通常细胞核颗粒状、块状着染;核仁通常细胞核颗粒状、块状着染;核仁通常细胞核颗粒状、块状着染;核仁通常不着染;分裂期细胞染色体区域不着不着染;分裂期细胞染色体区域不着不着染;分裂期细胞染色体区域不着不着染;分裂期细胞染色体区域不着染。
染。
染。
染。
抗盐水可抽提核抗原抗盐水可抽提核抗原抗盐水可抽提核抗原抗盐水可抽提核抗原(ENAENAENAENA)抗体)抗体)抗体)抗体SLESLESLESLE,MCTDMCTDMCTDMCTD,SSSSSSSS,SScSScSScSSc,其它,其它,其它,其它核仁型核仁型核仁型核仁型NNNNucleolarucleolarucleolarucleolar核仁着染,表现为核内几个大的块状核仁着染,表现为核内几个大的块状核仁着染,表现为核内几个大的块状核仁着染,表现为核内几个大的块状或颗粒状染色或颗粒状染色或颗粒状染色或颗粒状染色(通常不超过通常不超过通常不超过通常不超过6666个个个个)。
抗核仁抗体抗核仁抗体抗核仁抗体抗核仁抗体SScSScSScSSc着丝点型着丝点型着丝点型着丝点型CentromereCentromereCentromereCentromere间期细胞核内均匀分布细颗粒染色;间期细胞核内均匀分布细颗粒染色;间期细胞核内均匀分布细颗粒染色;间期细胞核内均匀分布细颗粒染色;分裂中期细胞中细颗粒沿染色体中板分裂中期细胞中细颗粒沿染色体中板分裂中期细胞中细颗粒沿染色体中板分裂中期细胞中细颗粒沿染色体中板呈线性分布。
呈线性分布。
呈线性分布。
呈线性分布。
抗着丝粒抗着丝粒抗着丝粒抗着丝粒/动粒抗体动粒抗体动粒抗体动粒抗体CRESTCRESTCRESTCREST综合征综合征综合征综合征PCNAPCNAPCNAPCNA型型型型同一视野阴性、阳性染色细胞共存;同一视野阴性、阳性染色细胞共存;同一视野阴性、阳性染色细胞共存;同一视野阴性、阳性染色细胞共存;不同细胞周期的细胞染色类型不同。
不同细胞周期的细胞染色类型不同。
不同细胞周期的细胞染色类型不同。
不同细胞周期的细胞染色类型不同。
抗抗抗抗PCNAPCNAPCNAPCNA抗体抗体抗体抗体SLESLESLESLE10.10.10.10.药物性狼疮药物性狼疮药物性狼疮药物性狼疮:
普鲁卡因酰胺、肼苯达嗪、苯妥英钠、普鲁卡因酰胺、肼苯达嗪、苯妥英钠、异烟肼、奎尼丁等一些药物可诱导出现异烟肼、奎尼丁等一些药物可诱导出现ANAANA阳性,其中阳性,其中部分病人有发热、关节痛、肌痛、浆膜炎、面部皮疹、部分病人有发热、关节痛、肌痛、浆膜炎、面部皮疹、口腔溃疡、狼疮发等临床表现而肾脏、血液、神经系口腔溃疡、狼疮发等临床表现而肾脏、血液、神经系统较少受累称为药物性狼疮。
统较少受累称为药物性狼疮。
在这种情况下,停用相应药物后数月至数年内在这种情况下,停用相应药物后数月至数年内ANAANA仍仍可阳性,其可阳性,其ANAANA主要作用于组蛋白主要作用于组蛋白,抗组蛋白抗体是诊抗组蛋白抗体是诊断药物性狼疮的必要实验室条件。
断药物性狼疮的必要实验室条件。
二.抗核抗体(ANA)二二.抗核抗体抗核抗体(ANA)11.11.何谓何谓何谓何谓ANAANA谱谱谱谱:
ANA:
ANA谱是由针对一组重要的核抗原谱是由针对一组重要的核抗原谱是由针对一组重要的核抗原谱是由针对一组重要的核抗原(包括部包括部包括部包括部分胞浆抗原分胞浆抗原分胞浆抗原分胞浆抗原)的各种特异性自身抗体组成的,这些自身抗的各种特异性自身抗体组成的,这些自身抗的各种特异性自身抗体组成的,这些自身抗的各种特异性自身抗体组成的,这些自身抗体的检测与识别对于自身免疫性风湿病的诊断和鉴别诊断体的检测与识别对于自身免疫性风湿病的诊断和鉴别诊断体的检测与识别对于自身免疫性风湿病的诊断和鉴别诊断体的检测与识别对于自身免疫性风湿病的诊断和鉴别诊断具有重要意义。
具有重要意义。
具有重要意义。
具有重要意义。
标准的标准的标准的标准的ANAANA谱包括:
抗谱包括:
抗谱包括:
抗谱包括:
抗dsDNAdsDNA、抗、抗、抗、抗SmSm、抗、抗、抗、抗U1RNPU1RNP、抗、抗、抗、抗SS-A/RoSS-A/Ro、SS-B/LaSS-B/La、抗核糖体、抗核糖体、抗核糖体、抗核糖体PP蛋白、抗组蛋白、抗蛋白、抗组蛋白、抗蛋白、抗组蛋白、抗蛋白、抗组蛋白、抗Scl-Scl-7070、抗着丝点蛋白、抗、抗着丝点蛋白、抗、抗着丝点蛋白、抗、抗着丝点蛋白、抗Jo-1Jo-1抗体等。
抗体等。
抗体等。
抗体等。
各种自身抗体的临床意义见表各种自身抗体的临床意义见表各种自身抗体的临床意义见表各种自身抗体的临床意义见表22。
表表表表2:
2:
自身免疫性风湿病的抗核抗体谱(阳性率自身免疫性风湿病的抗核抗体谱(阳性率%)抗抗抗抗dsDNAdsDNAdsDNAdsDNA抗抗抗抗SmSmSmSm抗抗抗抗RNPRNPRNPRNP抗抗抗抗SS-A/RoSS-A/RoSS-A/RoSS-A/Ro抗抗抗抗SS-B/LaSS-B/LaSS-B/LaSS-B/La抗核抗核抗核抗核糖体糖体糖体糖体PPPP蛋白蛋白蛋白蛋白抗抗抗抗SclSclSclScl-70707070抗
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