ABO血型鉴定(0).ppt
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ABO血型鉴定血型鉴定玻片法玻片法【目的要求目的要求】1观察红细胞凝集现象。
观察红细胞凝集现象。
2掌握掌握ABO血型鉴定的原理。
血型鉴定的原理。
3.学习辨别血型的方法。
学习辨别血型的方法。
【基本原理基本原理】一、血型一、血型BloodGroup/typeBloodGroup/typenn血型:
是对血液分类的方法,血血型:
是对血液分类的方法,血细胞(红细胞)膜上存在的细胞(红细胞)膜上存在的特异特异抗原性物质的类型抗原性物质的类型。
nn血型分类的依据是血型分类的依据是红细胞表面是否存红细胞表面是否存在某些可遗传的抗原物质在某些可遗传的抗原物质。
nn红细胞凝集红细胞凝集Agglutination:
血型不相容:
血型不相容的血液混合后,其中的红细胞聚集成的血液混合后,其中的红细胞聚集成簇并溶血。
簇并溶血。
uu造成凝集的机制是造成凝集的机制是抗原抗原-抗体反应抗体反应uu红细胞表面上含有的特异性糖蛋白抗红细胞表面上含有的特异性糖蛋白抗原物质统称为原物质统称为凝集原凝集原Agglutinogen。
uu在血浆中则含有与之相应的特异性抗在血浆中则含有与之相应的特异性抗体,称为体,称为凝集素凝集素Agglutinin。
nn已经发现并为已经发现并为国际输血协会国际输血协会承认的血型承认的血型系统有系统有30种,包括超过种,包括超过600种抗原,其种抗原,其中大部分都非常罕见,最重要的两种为中大部分都非常罕见,最重要的两种为“ABO血型系统血型系统”和和“Rh血型系统血型系统”。
nn血型系统对输血具有重要意义,以不相血型系统对输血具有重要意义,以不相容的血型输血容的血型输血可能可能导致导致溶血反应溶血反应的发生,的发生,造成造成溶血性贫血溶血性贫血、肾衰竭、休克以至死、肾衰竭、休克以至死亡。
亡。
二、二、ABO血型系统血型系统nn1901年年Landsteiner首先发现首先发现nn分类依据:
分类依据:
血型血型凝集原凝集原凝集素凝集素A型型A抗抗BB型型B抗抗AAB型型AB无无O型型无无A、无、无B抗抗A抗抗B血型与遗传血型与遗传nnIA基因产物基因产物为为N-乙酰乙酰-D-半乳糖胺转移半乳糖胺转移酶酶,IB基因产物基因产物为为D-半乳糖转移酶半乳糖转移酶nnA、B抗原的前体物质是抗原的前体物质是H抗原,受抗原,受H基因控制,基因控制,H基因产物基因产物为为L-岩藻糖转岩藻糖转移酶移酶-1前驱物质H抗原A抗原B抗原半乳糖N-乙酰葡萄糖胺半乳糖葡萄糖nn隐性隐性纯合体纯合体hh个体,特殊的个体,特殊的O型型孟买孟买型。
型。
nn按一般血型遗传规律,按一般血型遗传规律,O型和型和AB型双型双亲只能生下亲只能生下A型或型或B型子女。
而在深圳,型子女。
而在深圳,一对一对O型和型和AB型夫妇生下了罕见的型夫妇生下了罕见的O型和型和AB型的孩子。
型的孩子。
ABAAABOOOABOB(A)血型与性格血型与性格nnA型人小时候比较任性,年轻时性格果型人小时候比较任性,年轻时性格果断刚毅,时时处处要强。
走向社会后,断刚毅,时时处处要强。
走向社会后,随着年龄的增长和社会经验的积累,随着年龄的增长和社会经验的积累,他们开始克制自己的情绪,表现出稳他们开始克制自己的情绪,表现出稳重谦虚的态度,容易成为不愿过份表重谦虚的态度,容易成为不愿过份表现自己的谨慎派。
现自己的谨慎派。
A型人在老年时,则型人在老年时,则显得很固执。
显得很固执。
nnB型人大都有一个天真浪漫的幼年期,型人大都有一个天真浪漫的幼年期,随着年龄的增长,逐渐分成心直口快随着年龄的增长,逐渐分成心直口快和不擅交际应酬型两种倾向。
和不擅交际应酬型两种倾向。
B型人由型人由于性格自幼到老变化不大,相对来说于性格自幼到老变化不大,相对来说会让人感到他们越活越年轻。
会让人感到他们越活越年轻。
nO型人年少时比较温顺,但随着年型人年少时比较温顺,但随着年龄的增长,他们会积极地呈现出强龄的增长,他们会积极地呈现出强烈的自我主张和自我表现,甚至成烈的自我主张和自我表现,甚至成为非常有魄力的人。
为非常有魄力的人。
O型人从小至型人从小至老的变化是最大的,往往是少年温老的变化是最大的,往往是少年温顺,老来强硬。
顺,老来强硬。
nnAB型人大多小时候怕陌生人,很闭塞,但长型人大多小时候怕陌生人,很闭塞,但长大以后善交朋友,交际广泛。
大以后善交朋友,交际广泛。
AB型人因过于型人因过于自信,容易自满,老年时给人感觉很傲慢。
自信,容易自满,老年时给人感觉很傲慢。
不过他们兼具不过他们兼具A型与型与B型的特质,做事有计划,型的特质,做事有计划,但没有耐性,容易冲动,直觉敏锐,不喜欢但没有耐性,容易冲动,直觉敏锐,不喜欢墨守成规,性情多变,有时表现极端的个性。
墨守成规,性情多变,有时表现极端的个性。
善于待人接物,很注意合情合理性,讨厌口善于待人接物,很注意合情合理性,讨厌口是心非的人,具有强烈的批评精神。
是心非的人,具有强烈的批评精神。
AB型型是不讲人情,不谈爱情的,男女关系在是不讲人情,不谈爱情的,男女关系在AB型型看来是件极具单纯的事情,不会像其他血型看来是件极具单纯的事情,不会像其他血型的人弄得那样复杂的人弄得那样复杂。
血型的成因血型的成因nn人类的血型是由人类的血型是由饮食饮食和和进化进化决定的。
决定的。
nnO狩猎血型狩猎血型nnA农耕血型农耕血型nnB游牧血型游牧血型nnAB混合血型混合血型血型鉴定(正定型法)血型鉴定(正定型法)nn用已知的用已知的IgM类特异抗体(类特异抗体(标准血标准血清清)与被检红细胞在室温条件下、)与被检红细胞在室温条件下、盐水介质中反应,根据红细胞是否盐水介质中反应,根据红细胞是否出现凝集现象来测定被检红细胞膜出现凝集现象来测定被检红细胞膜上有无与血型抗体相对应的抗原,上有无与血型抗体相对应的抗原,从而判断和鉴定被检者的血型。
从而判断和鉴定被检者的血型。
三、三、Rh血型系统血型系统nn人类红细胞含有一种与恒河猴人类红细胞含有一种与恒河猴Rhesusmacacus的红细胞相同的凝集原称为的红细胞相同的凝集原称为Rh因子因子nn含含Rh因子因子(8种,主要是种,主要是D抗原抗原)Rh阳性阳性nn不含不含Rh因子因子Rh阴性阴性Rh血型的临床意义血型的临床意义n输血溶血输血溶血n新生儿溶血新生儿溶血分娩后分娩后72h72h内内进行进行RhRh抗体被抗体被动免疫动免疫胎儿红细胎儿红细胞进入母胞进入母体即被破体即被破坏坏(不能(不能诱导母亲诱导母亲抗抗Rh免疫免疫反应反应)Rh+Rh初孕健康新生儿健康新生儿Rh再孕Rh+新生儿溶血的预防【器材与试剂器材与试剂】nn载玻片、记号笔、刺血针、消毒牙签、载玻片、记号笔、刺血针、消毒牙签、酒精棉球、干棉球酒精棉球、干棉球nnA型和型和B型标准血清型标准血清nn离心机、离心机、显微镜显微镜【方法与步骤方法与步骤】nn
(1)标记玻片:
取洁净的载玻片或白)标记玻片:
取洁净的载玻片或白瓷板瓷板1块,用蜡笔画出小格,标明抗块,用蜡笔画出小格,标明抗A、抗抗B。
nn
(2)加标准抗血清:
在玻片已标记的)加标准抗血清:
在玻片已标记的区域内分别滴加抗区域内分别滴加抗A、抗、抗B标准抗血清标准抗血清各各l滴。
滴。
nn(3)加被检红细胞:
在滴加抗)加被检红细胞:
在滴加抗A、抗、抗B标准抗血清的小格中分别加被检者血标准抗血清的小格中分别加被检者血液各液各1滴,不断轻轻转动玻片或用牙签滴,不断轻轻转动玻片或用牙签使血清与红细胞充分混匀,连续约使血清与红细胞充分混匀,连续约15min,室温放置,室温放置1530min。
nn(4)观察结果:
肉眼观察有无凝集)观察结果:
肉眼观察有无凝集(或溶血或溶血)反应,再用低倍镜观察,判反应,再用低倍镜观察,判定阴性、阳性和阳性强度。
定阴性、阳性和阳性强度。
nn凝集判断标准:
如红细胞呈均匀分凝集判断标准:
如红细胞呈均匀分布,无凝集颗粒,显微镜下红细胞布,无凝集颗粒,显微镜下红细胞分散存在,无凝集靠拢现象为阴性;分散存在,无凝集靠拢现象为阴性;红细胞出现凝集为阳性。
红细胞出现凝集为阳性。
【注意事项注意事项】nn1所用器材必须干燥清洁、防止溶血;为所用器材必须干燥清洁、防止溶血;为避免交叉污染,各器皿均一次性使用为佳。
避免交叉污染,各器皿均一次性使用为佳。
nn2被检血液标本新鲜,无细菌污染。
被检血液标本新鲜,无细菌污染。
nn3玻片等均应严格标记。
玻片等均应严格标记。
nn4分型血清质量性能合格,从冰箱取出待分型血清质量性能合格,从冰箱取出待其平衡至室温后再用,用毕后应尽快放回其平衡至室温后再用,用毕后应尽快放回冰箱保存,减少细菌污染;一般先加血清,冰箱保存,减少细菌污染;一般先加血清,然后再加红细胞。
然后再加红细胞。
nn5.玻片法定型时,转动玻片动作要轻。
注玻片法定型时,转动玻片动作要轻。
注意防止悬液干涸,以免将玻片边缘干涸引意防止悬液干涸,以免将玻片边缘干涸引起的红细胞凝集误认为抗原抗体反应凝集。
起的红细胞凝集误认为抗原抗体反应凝集。
玻片法反应时间不能少于玻片法反应时间不能少于10min,否则较弱,否则较弱凝集不能出现,造成假阴性。
凝集不能出现,造成假阴性。
nn6.理论上理论上IgM抗抗A和抗和抗B与相应红细胞的反与相应红细胞的反应温度以应温度以4最强,但为了防止冷凝集现象最强,但为了防止冷凝集现象的干扰,一般仍在室温的干扰,一般仍在室温(20C24C)内进内进行试验,行试验,37C可使反应减弱。
可使反应减弱。
nn7.观察结果时应注意红细胞呈特异性凝集、观察结果时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝集以及缗钱状形成的区别。
继发性凝集以及缗钱状形成的区别。
思考思考nn根据自己的血型,说明你能接受和输血给根据自己的血型,说明你能接受和输血给何种血型的人,为什么?
何种血型的人,为什么?
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