结直肠癌Tiam1高表达与其启动子低甲基化相关.ppt
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结直肠癌Tiam1高表达与其启动子低甲基化相关.ppt
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SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系结直肠癌结直肠癌Tiam1高表达与其启高表达与其启动子低甲基化相关动子低甲基化相关林洁南方医科大学基础医学院病理学系南方医科大学南方医院病理科SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系背景背景Tiam1:
T淋巴瘤侵袭转移诱导因子淋巴瘤侵袭转移诱导因子11Tiam1与肿瘤与肿瘤的增殖、侵袭和转移的增殖、侵袭和转移Tiam1的表达调控机制尚未完全阐明的表达调控机制尚未完全阐明表观遗传学:
表观遗传学:
DNA异常甲基化异常甲基化SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系蓝色区域为蓝色区域为CpG岛,该岛,该CpG岛长岛长2183bp,跨越启动子和,跨越启动子和第一外显子,存在第一外显子,存在256个个CpG位点位点Tiam1基因基因5端端CpG岛预测岛预测SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系去甲基化药物处理去甲基化药物处理HT29细胞前后细胞前后Tiam1mRNA表达表达1.SW6202.HT29(5-aza-dC)3.HT29(对照对照)C.空白对照空白对照GAPDH(580bp)GAPDH(580bp)Tiam1(252bp)Tiam1(252bp)marker123cSouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系.116例配对结直肠癌组织中例配对结直肠癌组织中Tiam1蛋白的表达蛋白的表达SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系Tiam1蛋白在结直肠癌配对组织中的表达分布蛋白在结直肠癌配对组织中的表达分布*Z=-4.608,P0.000#Z-3.115,P0.002SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系Z-2.584,P0.01Tiam1蛋白表达与结直肠癌转移的关系蛋白表达与结直肠癌转移的关系SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系Tiam1蛋白在癌组织中的表达与临床病理资料之间的关系蛋白在癌组织中的表达与临床病理资料之间的关系SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系.结直肠癌组织中结直肠癌组织中Tiam1基因异常甲基化的研究基因异常甲基化的研究SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系MSP原理原理SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系CMU2n2t12n12t31n31t48n48t83n83t116n116tmu212314883116nt部分配对组织中部分配对组织中Tiam1DNA甲基化及其蛋白表达情况甲基化及其蛋白表达情况SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系MSP扩增产物测序部分结果扩增产物测序部分结果umoo.未转化的原始序列未转化的原始序列mm.甲基化引物扩增产物甲基化引物扩增产物uu.未甲基化引物扩增产物未甲基化引物扩增产物SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系Z=-2.244,P=0.025r=-0.494,P0.001116例配对组织中例配对组织中Tiam1基因的甲基化状况基因的甲基化状况232例组织中例组织中Tiam1蛋白表达与甲基化之间的相关性蛋白表达与甲基化之间的相关性SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系肿瘤组织肿瘤组织Tiam1甲基化状态与临床病理资料之间的关系甲基化状态与临床病理资料之间的关系SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系.结直肠癌细胞株中结直肠癌细胞株中Tiam1基因异常甲基化的研究基因异常甲基化的研究SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系Tiam1高高表达结直肠癌细胞株:
表达结直肠癌细胞株:
LoVo细胞、细胞、SW620细胞细胞Tiam1低低表达结直肠癌细胞株:
表达结直肠癌细胞株:
LS174T细胞细胞Tiam1不不表达结直肠癌细胞株:
表达结直肠癌细胞株:
HT29细胞细胞SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系5-aza-dC处理对处理对Tiam1mRNA在在HT29及及LS174T中表达的影响中表达的影响GAPDH(580bp)GAPDH(580bp)Tiam1(252bp)Tiam1(252bp)1234cmarkerLS174T(+)LS174T(-)HT29(+)HT29(-)5-aza-dCSouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系5-aza-dC(+)X2005-aza-dC(-)X200免疫细胞化学检测免疫细胞化学检测5-aza-dC处理对处理对HT29细胞细胞中中Tiam1蛋白表达的影响蛋白表达的影响SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系免疫细胞化学检测免疫细胞化学检测5-aza-dC处理对处理对LS174T细细胞中胞中Tiam1蛋白表达的影响蛋白表达的影响5-aza-dC(-)X2005-aza-dC(+)X200SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系1.SW6202.HT293.HT29(5-aza-dC)4.SW6205.LS174T6.LS174T(5-aza-dC)123456GAPDHTiam1Westernblot法检测法检测5-aza-dC处理对处理对HT29、LS174T细胞中细胞中Tiam1蛋白表达的影响蛋白表达的影响SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系结论结论1.Tiam1是一种促进结直肠癌增殖及转移的重是一种促进结直肠癌增殖及转移的重要基因要基因2.DNA异常甲基化可能是结直肠癌异常甲基化可能是结直肠癌Tiam1基因基因表达改变的重要调控机制之一表达改变的重要调控机制之一SouthernMedicalUniversity南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系致谢:
致谢:
丁彦青教授丁彦青教授李建明教授李建明教授金贺博士金贺博士张香梅博士张香梅博士李婷婷硕士李婷婷硕士
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