第九章肠杆菌科.ppt
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第九章第九章GG-兼性厌氧杆菌兼性厌氧杆菌本章细菌含有本章细菌含有33个科及个科及22个关系未确定的属个关系未确定的属肠杆菌科肠杆菌科弧菌科弧菌科巴氏杆菌科巴氏杆菌科第一节第一节肠杆菌科(有肠杆菌科(有2828个属)个属)共同特征:
共同特征:
11GG中中等等大大小小杆杆菌菌,运运动动者者周周身身鞭鞭毛毛,无无芽芽胞胞,无荚膜(个别有),非抗酸染色。
无荚膜(个别有),非抗酸染色。
22需氧兼性厌氧,普通培养基上生长好。
需氧兼性厌氧,普通培养基上生长好。
33糖发酵产酸(糖发酵产酸(+)或产酸产气。
)或产酸产气。
44接触酶阳性(志贺氏菌除外)。
接触酶阳性(志贺氏菌除外)。
55硝酸盐还原试验阳性(欧文氏菌除外)硝酸盐还原试验阳性(欧文氏菌除外)66在含在含0.5%0.5%胆盐的培养基上生长。
胆盐的培养基上生长。
一、埃希氏菌属一、埃希氏菌属本属有本属有55个种:
大肠埃希氏菌,蟑螂菌,个种:
大肠埃希氏菌,蟑螂菌,费格森菌,赫曼氏菌,伤口菌。
费格森菌,赫曼氏菌,伤口菌。
其中最重要的是大肠菌,俗称大肠杆菌。
其中最重要的是大肠菌,俗称大肠杆菌。
(一)形态及染色特征
(一)形态及染色特征GG中等大小杆菌,八根鞭毛,能运动,中等大小杆菌,八根鞭毛,能运动,无芽胞,无荚膜但常有微荚膜。
无芽胞,无荚膜但常有微荚膜。
(二)培养特性
(二)培养特性11普普通通培培养养基基上上:
生生长长良良好好,37372424hh形形成成圆圆形形,光滑,隆起,湿润,半透明灰白色菌落。
光滑,隆起,湿润,半透明灰白色菌落。
22普普通通肉肉汤汤:
均均匀匀浑浑浊浊,管管底底有有粘粘性性沉沉淀淀,管管壁壁有有菌环。
菌环。
33麦康凯琼脂:
红色菌落(沙门氏菌无色)麦康凯琼脂:
红色菌落(沙门氏菌无色)原原理理,麦麦康康凯凯平平板板含含有有乳乳糖糖有有胆胆盐盐,分分解解乳乳糖糖的的细细菌菌产产酸酸使使指指示示剂剂变变红红,胆胆盐盐有有利利于于肠肠杆杆菌菌科科细细菌菌生生长,对其它菌有抑制作用。
长,对其它菌有抑制作用。
大肠杆菌微菌落照片大肠杆菌微菌落照片大肠杆菌革兰氏染色照片大肠杆菌革兰氏染色照片大肠杆菌平板菌落照片大肠杆菌平板菌落照片44伊伊红红美美蓝蓝琼琼脂脂:
黑黑色色带带金金属属闪闪光光的的菌菌落落(沙沙门门氏氏菌无色)。
菌无色)。
原原理理:
伊伊红红,美美兰兰均均为为指指示示剂剂,又又能能抑抑G+G+生生长长,含含有有乳乳糖糖。
大大肠肠杆杆菌菌分分解解乳乳糖糖产产酸酸时时细细菌菌带带正正电电荷荷,染染上上红红色色,再再与与美美兰兰结结合合形形成成紫紫黑黑色色菌菌落落,不不分分解解乳糖不着色,伊红美蓝不结合,故沙门氏菌无色。
乳糖不着色,伊红美蓝不结合,故沙门氏菌无色。
55远藤氏琼脂:
带金属光泽的红色菌落。
远藤氏琼脂:
带金属光泽的红色菌落。
66SSSS琼脂(沙门氏菌琼脂(沙门氏菌志贺氏菌分离培养基):
红志贺氏菌分离培养基):
红色小菌落。
色小菌落。
77三糖铁(三糖铁(TSITSI):
):
斜面黄色,底部黄色,不产生斜面黄色,底部黄色,不产生HH22SS。
原理:
三糖铁含葡萄糖、乳糖,蔗糖。
其中乳糖、原理:
三糖铁含葡萄糖、乳糖,蔗糖。
其中乳糖、蔗糖含量为蔗糖含量为GG的的1010倍,大肠杆菌三种糖均发酵产酸,倍,大肠杆菌三种糖均发酵产酸,足以使底部和斜面变黄。
沙门氏菌不发酵乳糖和足以使底部和斜面变黄。
沙门氏菌不发酵乳糖和蔗糖,只发酵蔗糖,只发酵GG产酸,斜面部分先变黄,但产酸量产酸,斜面部分先变黄,但产酸量少且接触空气又受到氧化,另外分解含氮物质产少且接触空气又受到氧化,另外分解含氮物质产碱,所以斜面又变为红色,而下端的酸不被氧化,碱,所以斜面又变为红色,而下端的酸不被氧化,一直呈黄色。
一直呈黄色。
(三)生化特征(三)生化特征GG乳乳麦麦蔗蔗靛基质实验:
靛基质实验:
+(II);MRMR(甲基红试验)甲基红试验)+(MM)VPVP(乙酰甲基醇)(乙酰甲基醇)(ViVi););柠檬酸基利用试验(柠檬酸基利用试验(CC)IMViC+IMViC+硝酸盐还原试验硝酸盐还原试验+、HH22SS、尿素分解尿素分解三糖铁:
斜面黄色三糖铁:
斜面黄色/底部黄色,不产生底部黄色,不产生HH22SS。
(四)抗原构造及血清型:
四)抗原构造及血清型:
大肠杆菌抗原主要有大肠杆菌抗原主要有OO抗原(菌体抗原,有抗原(菌体抗原,有173173种),种),KK抗原(被膜或荚膜抗原,有抗原(被膜或荚膜抗原,有8080种),种),HH抗抗原(鞭毛抗原,有原(鞭毛抗原,有5656种)。
种)。
11OO抗原:
存在于细胞壁中,由脂多糖(抗原:
存在于细胞壁中,由脂多糖(LPSLPS)中的中的特异性多糖侧链组成,特异性多糖侧链组成,OO抗原是抗原是SS型菌的一种耐热型菌的一种耐热菌体抗原,菌体抗原,12121212hh不破坏其抗原性,当不破坏其抗原性,当SS型菌丢型菌丢失特异性多糖侧链时,即变为失特异性多糖侧链时,即变为RR型菌,型菌,OO抗原也随抗原也随之丢失。
之丢失。
22KK抗抗原原:
位位于于菌菌体体表表面面的的荚荚膜膜或或被被膜膜中中,在在8080种种KK抗抗原原中中,除除K88K88,K99K99是是两两种种蛋蛋白白质质抗抗原原外外,其其余余均均为为多多糖糖。
具具有有KK抗抗原原的的菌菌株株不不能能被被其其相相应应的的抗抗OO血血清清所所凝凝集集叫叫“OO不不凝凝集集性性”。
因因为为KK抗抗原原可可抑抑制制活活细细菌菌在在相相应应抗抗OO血血清清中中的的凝凝集集反反应应,这这样样可可作作为为判判定定大大肠肠杆菌是否具有杆菌是否具有KK抗原的一个标准。
抗原的一个标准。
据耐热性不同,据耐热性不同,KK抗原又分为:
抗原又分为:
LL、AA、BB三型。
三型。
LL型型KK抗抗原原:
对对热热敏敏感感10010011hh破破坏坏其其抗抗原原性性,并并失失去去与与相相应应抗抗体体的的结结合合力力和和凝凝集集性性,位位于于被被膜膜中中,偶偶见见于于荚膜中。
荚膜中。
AA型型KK抗抗原原:
耐耐10010011hh,但但1211212.52.5hh破破坏坏其其抗抗原原性性和和OO不不凝凝集集性性,但但保保留留与与相相应应抗抗体体结结合合能能力力。
位位于于荚荚膜膜中中,抗抗AA血血清清可可使使具具有有相相应应AA抗抗原原的的菌菌体体出出现现荚荚膜膜肿胀现象。
肿胀现象。
BB型型KK抗抗原原:
10010011hh破破坏坏其其抗抗原原性性与与相相应应抗抗体体的的凝凝集性,但保留其与相应抗体结合力。
集性,但保留其与相应抗体结合力。
33HH抗原:
不耐热,是一种蛋白质,抗原性抗原:
不耐热,是一种蛋白质,抗原性好,好,8080破坏其抗破坏其抗原原性,每一个有动力的细菌仅含一种性,每一个有动力的细菌仅含一种HH抗原,抗原,且无两相变异,无鞭毛细菌无且无两相变异,无鞭毛细菌无HH抗原。
根据抗原。
根据大肠杆菌抗原的鉴定,可用大肠杆菌抗原的鉴定,可用OKHOKH排列表排列表示其血清型即大肠杆菌抗原结构式:
示其血清型即大肠杆菌抗原结构式:
O8K23O8K23(LL)H19H19表示该菌具有表示该菌具有OO抗原抗原88,LL型型KK抗原抗原2323,HH抗原为抗原为1919。
(五)致病性(五)致病性大大多多数数是是在在正正常常条条件件下下不不致致病病的的共共栖栖菌菌,但但特特定定条条件件下下,如如移移位位侵侵入入肠肠外外组组织织或或器器官官可可致致肠肠杆杆菌病;但也有极少数是病原性大肠杆菌。
菌病;但也有极少数是病原性大肠杆菌。
据毒力因子与发病机制不同可分五类:
据毒力因子与发病机制不同可分五类:
(11)产肠毒素大肠杆菌()产肠毒素大肠杆菌(ETECETEC):
):
引起人和引起人和幼畜腹泻(黄痢)。
幼畜腹泻(黄痢)。
(22)产类志贺毒素大肠杆菌()产类志贺毒素大肠杆菌(SLTECSLTEC):
):
引引起猪水肿病,犊牛出血性肠炎。
起猪水肿病,犊牛出血性肠炎。
(33)肠致病性大肠杆菌()肠致病性大肠杆菌(EPECEPEC):
):
兔腹泻,兔腹泻,猪腹泻。
猪腹泻。
(44)败血性大肠杆菌()败血性大肠杆菌(SEPECSEPEC):
):
猪,犊牛猪,犊牛败血症,鸡的大肠杆菌败血症,气肠炎,败血症,鸡的大肠杆菌败血症,气肠炎,脑膜炎,肠炎,肉芽肿。
脑膜炎,肠炎,肉芽肿。
(55)尿道致病性大肠杆菌()尿道致病性大肠杆菌(UPECUPEC):
):
犬、猪犬、猪的尿道感染。
的尿道感染。
(一一)产产肠肠毒毒素素大大肠肠杆杆菌菌:
由由粘粘附附表表性性菌菌毛毛和和肠肠毒毒素素两两类类毒毒力力因子构成,具致病力与二者密切相关,缺一不可。
因子构成,具致病力与二者密切相关,缺一不可。
11粘粘附附素素性性菌菌毛毛:
又又叫叫粘粘附附素素或或定定居居因因子子,其其对对应应的的抗抗原原叫叫粘粘附素抗原或定居因子抗原。
已发现的粘附素有附素抗原或定居因子抗原。
已发现的粘附素有F4F4(KK8888)、)、FF55(KK9999)、)、F6F6(987P987P),),FF4141,FF4242,FF1717。
它不是导致宿主腹泻的它不是导致宿主腹泻的直接致病因子,但是构成直接致病因子,但是构成ETECETEC感染的重要毒力因子。
感染的重要毒力因子。
ETECETEC必必须须首首先先粘粘附附于于宿宿主主的的小小肠肠上上皮皮细细胞胞,才才能能避避免免肠肠蠕蠕动动和和肠肠液液分分泌的清除作用,并得以在肠内定居和繁殖,进而发挥致病作用。
泌的清除作用,并得以在肠内定居和繁殖,进而发挥致病作用。
22在在体体内内或或体体外外生生长长时时产产生生并并分分泌泌到到细细胞胞外外的的一一种种蛋蛋白白质质毒毒素,根据对热的耐受性不同分为:
素,根据对热的耐受性不同分为:
不耐热肠毒素(不耐热肠毒素(LTLT):
):
6530min6530min灭活,有抗原性。
作用于小灭活,有抗原性。
作用于小肠和兔回肠引起肠液积蓄,引起水样腹泻。
肠和兔回肠引起肠液积蓄,引起水样腹泻。
耐热肠毒素(耐热肠毒素(STST):
):
10030min10030min不灭活,无抗原性。
又可分为:
不灭活,无抗原性。
又可分为:
STaSTa:
来源猪,牛来源猪,牛STST:
对人和猪、牛、羊均有肠毒性。
对人和猪、牛、羊均有肠毒性。
STbSTb:
来源于人来源于人STST:
仅在猪源仅在猪源ETECETEC中产生。
中产生。
ETECETEC的致病机理:
通过口腔进入宿主的小肠,以其菌毛粘附素黏的致病机理:
通过口腔进入宿主的小肠,以其菌毛粘附素黏附于肠粘膜上,以抵御肠蠕动和流动肠液的冲刷作用,从而定居附于肠粘膜上,以抵御肠蠕动和流动肠液的冲刷作用,从而定居于肠内,大量繁殖。
此时大量产生并释放肠毒素,对其靶细胞产于肠内,大量繁殖。
此时大量产生并释放肠毒素,对其靶细胞产生毒性作用。
导致肠绒毛细胞吸收功能降低,造成在肠管内水和生毒性作用。
导致肠绒毛细胞吸收功能降低,造成在肠管内水和电解质大量积蓄,引起水样腹泻和迅速脱水。
电解质大量积蓄,引起水样腹泻和迅速脱水。
(二)产类志贺毒素大肠杆菌
(二)产类志贺毒素大肠杆菌(SLTECSLTEC)又又称称产产VeroVero细细胞胞毒毒素素大大肠肠杆杆菌菌,系系一一类类在在体体内内或或体体外外生生长长可可产产生生类类志志贺贺毒毒素素的的病病原原性性大大肠肠杆杆菌菌。
可可致致猪猪的的水水肿肿,以以头头部部,肠肠素素膜膜和和胃胃壁壁浆浆液液性性水水肿肿为为特特征征,常常伴伴有有共共济济失失调调,麻麻痹痹或或惊惊厥厥等等神神经经症症状状,发发病率低但致死率高,有两类毒力因子:
病率低但致死率高,有两类毒力因子:
11粘粘附附性性菌菌毛毛:
F18F18,它它有有助助于于细细菌菌在在猪猪肠肠粘粘膜膜上上皮细胞定居和繁殖。
皮细胞定居和繁殖。
22致水肿病致水肿病22型类志贺毒素(型类志贺毒素(SLT-2eSLT
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- 第九 杆菌