薄层板G的制备.docx
- 文档编号:25848513
- 上传时间:2023-06-16
- 格式:DOCX
- 页数:34
- 大小:44.27KB
薄层板G的制备.docx
《薄层板G的制备.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《薄层板G的制备.docx(34页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
薄层板G的制备
薄层板的制备及应用
实验方法与步骤
薄层层析用硅胶在吸附剂名称之后加几个字标明的意思是:
硅胶G(G是Gypsum石膏的缩写,表示加了石膏)、硅胶H(H表示不加石膏)、硅胶GF254(F254表示加石膏和波长254显绿色荧光的硅酸锌锰)、硅胶GF365(表示加石膏和波长365nm显黄色荧光的硫化锌镉)。
1.薄层板的制备
(1)硅胶(G)薄层板的制备
【调浆】取硅胶G或硅胶GF(吸附剂)1份,置烧杯中加水约5份混合成均匀的膏状.
【涂布】用药匙取一定量,分别倒在一定大小、洁净、干燥的玻璃板上(或倒入涂布器中,调节涂布器的高度,推动涂布),均匀涂布成0.25-0.5mm厚度,轻轻振动玻璃板,使薄层面平整均匀。
【干燥】室温下在水平位置放置,待薄层发白近干。
【活化】将凉干的薄层板置于烘箱中105℃活化0.5-1h,冷后贮于干燥器内备用。
活化温度和时间可依需要调整,一般检识水溶性成分或一些极性大的成分时,所用薄层板只在空气中自然干燥,不经活化即可贮存备用。
本实验采用下述简易操作涂布薄层:
取表面光滑,直径统一的玻璃一支,依据所制备薄层的宽度、厚度要求,在玻璃棒两端套上厚度为0.3-1mm的塑料圈或金属环,并在玻璃棒一端一定距离处套上较厚的塑料圈或金属环,以使玻璃棒向前推动时能保持平行方向,操作时,将吸附剂均均地铺在玻璃板上,匀速向前推动。
铺板的加水量及活化时间
薄层板类型
吸附剂:
水的量
活化温度(℃)
活化时间(h)
活度
氧化铝G
氧化铝-淀粉
硅胶G
硅胶-CMC-Na
硅胶-淀粉
硅藻土
1:
2
1:
2
1:
2或1:
3
1:
2(0.7%CMC-Na液)
1:
2
1:
2
250
150
105
110
110
105
4
4
0.5
0.5
0.5
0.5
Ⅱ
Ⅲ-Ⅴ
(2)硅胶(H)羧甲基纤维钠(CMC-Na)薄层板的制备
取羧甲基纤维素(粘结剂)0.2g,溶于25ml水中,在水浴上加热搅拌使完全溶解,倒入烧杯中,加薄层层析用硅胶(颗粒度10-40μm的约6-8g)混合成均匀的稀糊,按照硅胶G薄层涂布法制备薄层,或取0.8%(羧甲基纤维钠10ml,倒入广口瓶(高约10-12cm)中,然后逐步加入薄层层析用硅胶3.3g,不断振摇成均匀的稀糊,把两块载玻片面对面结合在一起,这样每片只有一面与硅胶糊接触,使薄片浸入硅胶稀糊中,然后慢慢取出,分开二块薄片,将未粘附硅胶糊的那一面水平放在一张清洁的纸上,让其自然阴干,105℃下活化30min。
冷后置于干燥器内备用。
未消耗的硅胶稀糊可贮存在广口瓶内,以供再用。
先将称好的CMC-Na加入所需水量的8/10,让其充分溶涨后,再加热煮沸,然后将剩余水慢慢加入.这样在煮沸过程中不易形成颗粒,煮沸时间短.溶液的浓度0.3-0.7%比较合适,实际操作中0.4%~0.5%最为实用,浓度高了将来显色时如果有加热过程稍不小心板子容易发黑,浓度低了铺出来的板子不结实,轻轻一碰就掉渣,不好保存,而且点样时会很紧张,容易出洞.0.5%CMC-Na与水溶涨至充分,搅拌溶涨,如果不好溶涨,可在溶涨前加几滴乙醇,比较好溶,但是尽量不加,因为加入乙醇后使CMC-Na的粘合性降低。
需注意:
1)CMC-Na溶液煮了以后不能再用冷水兑,否则,几天以后就会变绿,起霉。
注意放置时间太长的CMC-Na溶液可能会发黄,而且可能有霉菌出现,绝对不能再使用。
2)如果有抽滤装置可以直接把CMC-Na溶液滤过,就可以不必等它沉淀再取上清液了(还有两个好处一是节省CMC-Na溶液,二是抽滤过的CMC-Na溶液的时候不必担心会把下层的不溶物倒出来了!
)。
有个办法过滤CMC-Na溶液,就是在布氏漏斗上平铺薄薄的一层脱脂棉,用蒸馏水润湿脱脂棉,启动真空泵,抽紧后就可以放心大胆的倒CMC-Na溶液了,保证滤过的溶液澄清透明,而且长时间放置不沉淀。
3)CMC-Na是一种高分子材料,而高分子材料的溶解必然都会有一个溶涨、溶解的过程,所以配制的时候,应该将称好的CMC-Na少量的撒在水的表面,让其自然沉降,注意要散开平铺,这样能够充分浸润,使其溶胀,之后可以置于水浴锅内加热溶解,当然如果不是很急着用的话也完全可以,直接用水泡着放那,估计十天半月的也可以用了.
在CMC-Na的溶解过程中,也可以使用可进行加热操作的磁力搅拌器,大概搅拌5小时,应该可得到满意的效果。
而且这样就可以使CMC-Na溶解,并且溶液更澄清。
CMC-Na的处理也可进行离心,5000rpm离心20min。
倒出上清液,(非常清,也同时消除了过滤过程中可能发生的污染。
)更难能可贵的是,可以收集下面没有充分溶解的CMC-Na。
继续加到水中,还可以继续配制。
关于薄层板的要求:
1.载板要求平滑清洁,没有划痕,在使用前可用洗涤液或肥皂水洗涤,再用水冲洗干净。
2.怎么样的玻璃算是干净:
用洗洁精浸泡也好,用酸浸泡也好,当你觉得洗干净的时候,拿在手上立起来,如果发现水不是呈股流下,而是呈瀑布状态流下,那么说明你的玻璃板已经洗干净了。
其实真正洗干净的玻璃,很快就可以晾干的。
3.怎样清洗用过后的薄层板:
试着用了洗衣粉、洗洁精,反复洗了数遍,仍然挂水珠。
铺制薄层板要求玻璃板干净、整洁、不挂水珠的。
建议用洗液泡,如果还解决不了那就只好放弃这块玻璃板了,有说可以用盐酸的。
关于研磨及铺板要求:
1.硅胶的研磨,当然是一个方向了,可以适量的加入一定量的无水乙醇或丙酮来消泡,也可以适当搅拌后在干净容器内超声,效果都是不错的。
手工铺硅胶的用量一般10*20的约3~4克,硅胶和CMC-Na的用量一般是1:
2.8~3,具体根据要铺板子的厚度和CMC-Na的浓度决定。
2.依据薄层板使用需要,将适量研好的吸附剂倒到薄层板上,先用小锤将吸附剂荡匀,倾斜薄层板,使吸附剂流至薄层板一侧,待吸附剂蓄积一定量后,再反向倾斜薄层板,使吸附剂回流然后是另外两个方向,重复操作,后轻颠几下薄层板即可。
3.将载玻片置于平台上,用药匙舀取糊状硅胶,均匀地铺在载玻片表面。
铺板时,可以顺着板中间倒,也可以顺着某个边缘倒,也可以用玻璃棒引着溶液平铺在玻璃板上,倒时也要注意不要引入小气泡。
如有需要,可以双手10个指头托住玻璃板,有节奏的颠簸,使得糊状硅胶分布匀称。
尤其是载板的四个角,容易高出玻璃板其他部位,所以要格外注意。
颠好的板,表面看上去要光滑平整,没有气孔。
薄层板铺好后一定要放置在平的台面上,否则难保证板面硅胶的厚度均匀。
4.铺制好的薄层板先让其稍干后,即看不出有明显的水印,放入烘箱内用50度以下的温度鼓风干燥30分钟,再升温干燥至干,注意升温过快在使用的过程中有可能发生起层的现象不利于分离。
关于裂板:
板子会裂口,一则可能是因为硅胶的比例太大,二则可能是板子要在常温下晾干后,才能在烘箱中活化。
如果铺完不久就在较高温度下,裂口的几率就比较高的。
关于活化出现裂板、爆板的问题,我从没有遇上过。
活化我是这样处理的,不要等到温度达到100度,而是设好温度后就将板子放在干燥箱,然后再通电加热,达到最高温度后停留5分钟左右即可。
这样水分是慢慢由内而外散发,而不是由外向内散发,避免了表面成膜,里面还在散发水气,岂有不裂、不爆的道理!
关于展开剂:
分离的样品酸性比较大,一般在展开剂中加酸。
加甲酸是因为该样品是酸性的,加酸的量和该物质的酸性成正比关系,加水可能是因为样品是苷类的用酸水做一下缓冲,目的就是让斑点圆滑,不脱尾,展距良好。
饱和非常重要,边缘效应很严重的不妨用下端浸在展开剂中的滤纸上,贴在展开缸的内壁,这样饱和效果会好一些。
1)在层析缸口涂适量凡士林,增加密封性;
2)以展开剂边缘效应的大小,确定展开剂平衡时间的长短,一般平衡时间在30分钟即可。
3)展开剂比如氯仿:
甲醇:
氨水(10:
1:
0.6),有机溶剂的极性,甲醇>氯仿,因此在这个展开剂中,如果极性略大,可适当降低甲醇比例;如极性太小,可适当增大甲醇比例。
氯仿:
甲醇:
氨水10:
1:
0.6和20:
2:
1.2极性肯定是相同的。
另外还有一个问题,这个展开剂中,甲醇用量较小,而甲醇又易挥发,容易产生边缘效应,要特别注意展开剂的平衡和层析缸的密封。
不同的展开系统意思是其中至少应该有一种溶剂不同(最好是不同类组的溶剂),而不是比例不同。
或者使用不同的固定相。
关于点样:
点样管点样时食指放在其上端,当点样管的下端与硅胶板接触的瞬间轻轻松动上端的食指,溶液自然从点样管出来,迅速提起点样管,就这样反复操作点出的斑点既小又均匀。
但要提出样品溶液不能太浓,浓度太大,点下的样品不能被硅胶很好的吸收,不利于分离。
便宜的进样器(大约10几块钱吧,10μl即可),可将针尖打磨圆滑,用锉一点一点锉,这样点样的时候样品溶液不容易沿针尖上行(甲醇溶液都这样),并且针尖不会刺破已经铺好的薄层板。
当然,点样的时候手不能抖动。
动作要轻,这些要领在于意会,逐渐锻炼。
要磨平微量进样器的针尖,简单的方法就是,在展开缸的盖子上轻磨(当然是靠近中间部分),就很快能解决问题,且很平滑。
关于展开:
TLC中样品拖尾现象是什么原因,该如何解决?
TLC中样品跑成几乎为一条线,斑点没有清晰的分离,这是什么原因造成的,一般情况下该如何解决?
造成问题的原因基本相同:
a、对于一些具有酸碱性的化学成分,在溶液中部分电离,事实上展开时存在分子、离子两种状态,以中性的有机试剂展开必然会出现两种层析行为,造成脱尾甚至是一条线。
b、展开剂选择不当 c、点样量过大。
样品超载解决办法:
a、在展开剂中加几滴甲酸或冰醋酸; b、展开时以氨水饱和 c、减少点样量d、参考文献,调整展开剂种类比例 。
二次展开是依据样品定的,但肯定要在第一次展开后,将板晾干或吹干,再放入另一种展开剂中展开,有的样品二次展开还要换展开方向,和原方向垂直。
所以要以实际分离样品需要而定。
一般是因为样品成分多,极性差别大。
关于显色:
在工作中研究过用硫酸乙醇显色作定量分析的品种,但凡加了CMC-Na的板都易糊,尤其是温度高于100度时,要严格控制加热显色的时间。
后改用不加CMC-Na辅的水板来作,就不会有烘糊现象,故也可推论CMC-Na易于与硫酸起糊化反应。
感觉辅水板关键是硅胶G与水的比例要达1:
3.5左右,而且研磨后要尽快涂布,不然易于凝固而难于涂布。
但不加CMC-Na辅的板又太软,点样时容易点出洞,有个好办法是将CMC-Na的浓度调至0.1%,这样就不易烘黑的。
附:
1.吸附层析的基本原理是什么?
吸附层析是将吸附剂涂布于玻璃板或金属板上成为一薄层(0.25~1mm),待分离的试液点在薄层的一端,离边缘一定距离处,然后在层析缸中用适宜的展开剂展开。
由于吸附剂对不同物质具有不同的吸附能力,因此当展开剂流过时,不同物质就在吸附剂和展开剂之间发生连续不断的吸附,解吸,再吸附,再解吸。
吸附力强的物质相对地移动得慢些,吸附力较弱的物质则相对地移动得快些,这样经适当时间后,试样组分就彼此相互分离了。
2.薄层板的涂布要求是什么,为什么要这样做?
首先制备薄层板所用的玻璃板必须表面光滑,洁净不带油腻,并晾干。
然后在硅胶G中加入适量的蒸馏水研磨成均匀无气泡的薄浆状溶液,迅速倒在玻璃板上,随即轻轻摇动玻板,把硅胶涂布均匀,使它无气泡,并保持在水平位置上阴干,若涂布不均匀或有气泡,待干燥后,就会产生高低不平,或在活化时气泡破裂,形成小空洞,这样都影响展开和分离。
3.薄层板为何要进行“活化”?
吸附剂的活性和含水量有密切关系,含水较多,吸附能力就大为减弱,因此通常总把吸附剂在一定温度下烘一定时间,以驱除水分,增强吸附能力,改善薄层板的分离效果,即所谓的“活化”。
4.点样的要求是什么,为什么要这样做?
点样时用玻璃毛细管吸取试液适量,垂直地轻微接触薄层板表面(注意防止损坏硅胶层)。
样品溶液扩展开来的斑点直径应小于5mm,二相邻斑点中心间距应大于15mm。
若斑点易扩散,则可先点上少许试液,待斑点干后,再点第二次,因为点样斑点大,会引起分离后的斑点扩散,影响展开后的分离度。
若二斑点中心间距太小,展开中可能产生相邻斑点的相互重叠。
点样点的起始线应在距玻璃板底边2cm处,防止因点样太低而原点直接浸入展开剂中。
点样斑点离板边距离应大于1.5cm,否则会因边缘溶剂的挥发,使斑点随之偏离而产生边缘效应。
5.层析缸为何要先用展开剂饱和?
若层析缸未先为展开剂饱和,则由于展开剂中各种溶剂的挥发度不同,在层析过程中,随着展开剂的不断挥发,会使缸内展开剂组成不断改变,而使展开剂的极性发生改变,从而使各种组分的Rf值发生改变,分离受到影响。
铺薄层板的经验总结
薄层板的制备总结经验总结
1.CMC-Na配置也比较重要,不能太稀了,不然硅胶的黏附性不好,铺好的硅胶容易脱落.太稠了也不行,不容易和硅胶混匀
2.CMC-Na与硅胶混合时注意比例,一般为30克硅胶加入100克0.3-0.5%的CMC-Na水溶液.如果铺多了的话可以凭经验就能感觉到适合的程度.混合时最好朝一个方向研,这样也不容易有气泡
3.铺板的均匀.这也是关系到板好坏的重要方面.为了使薄层板硅胶均匀,铺好后将玻璃板放在桌边小心上下颠动,保证薄层板所以地方都一样均匀.
4.铺板的厚度,个人所好有所不同.有的铺得较厚,这种情况CMC-Na不能太稀,不然硅胶哗哗的掉.厚的板展开的时候慢些,但是点样量可以多一些不容易扩散.薄的板展开比较快,容易扩散点样量宜少
5.薄层板的活化.活化一定要铺好板干了以后放到烘箱活化.干了是指看不到有水痕在上面.一般可以选择晚上铺板,早上的时候正好薄层板已干,可放进烘箱活化.为什么要完全干了才能活化?
如果未完全干会导致活化的时候薄层板硅胶开裂.
一、手工铺板是非常考验你的耐力的事情,最好是找实验室的GGJJMMDD们一起,一来速度快,二来大家仪器交流心得。
我认为,第一个关键的地方,你的CMC-Na溶液必须配制的好,放置的也要很好,完全分层之后只能取上清液。
上清液要澄清透明,时间太长的CMC-Na可能会发黄,如果有霉菌出现的话,绝对不能使用。
第二就是硅胶和CMC-Na溶液的比例可以适当的调节,根据你所需要薄层板的软硬来微调。
可以一个人研磨,一个人缓慢的倒CMC-Na溶液。
研磨时最能考验你的定力,我觉得你该找女生来磨,但是那种太文弱的不行。
研磨时要顺着一个方向,速度不宜快,要顺着研钵的边缘,观察仔细,一定要把气泡赶尽杀绝。
研磨好的因改是均匀的,没有气泡,没有固体的粉末类异物,溶液有一定的粘性。
最后,铺板,我觉得是各人各喜欢,可以顺着板中间倒,也可以顺着某个边缘倒,倒时也要注意不能引入小气泡。
可以用玻璃棒引着溶液平铺在玻璃板上(顺便说一句,玻璃板应该很干净,没有划痕,没有缺口,4个角要“健全”),如有需要,可以双手10个指头拖住玻璃板,有节奏的颠,使得硅胶分摊匀称。
尤其是4个角,容易高出玻璃板其他部位,所以要格外注意。
颠好的板,表面看上去要光滑平整,没有气孔。
铺好的板,要找个干净的地方放置晾干,这个过程也是耐心的等着它,请勿打扰!
自然晾干后,活化一下(105摄氏度40分钟左右),置于密封的干燥器保存。
最后想说一下,如果你铺板目的是座分析用的话,肯定得很仔细用心。
如果仅是天然药化那种粗略检查过柱子得到的馏分纯度,那就没有必要这么复杂了,也就是说速度可以快点,板的要求也没有必要这么高!
自己多看看人家怎么铺的,练练手,肯定就成高手了!
二、楼上的讲得很好,我再补充两点切身体会:
(1)CMC-Na溶液煮了以后不能再用冷水兑,否则,几天以后就会变绿,起霉。
(2)如果有抽滤装置你可以直接把CMC-Na溶液滤过,就可以不必等它沉淀再取上清液了(嘿嘿,我是急性子),还有两个好处一是节省CMC-Na溶液,二是倒滤过的CMC-Na溶液的时候不必担心会把下层的不溶物倒出来了!
)
三、本人的工作经验:
薄层层析制板
1. 配制4%~5%的羧甲基纤维素(CMC):
称取CMC,溶于冷水中,边加热边搅拌,直至成为清澈、透明的溶液。
2. 40%硅胶:
按CMC溶液的量、按40%的比例称取薄板层析硅胶,倒入大研钵中,与CMC溶液混合,充分研磨成均匀糊状。
3. 加入几滴乙醇或丁醇,可起到消泡的作用。
4. 将载玻片置于平台上,用药匙舀取糊状硅胶,均匀地铺在载玻片表面。
5. 自然干燥后,放入烘干箱烘12小时以上。
再在105~110℃活化,活化时间为0.5~1小时,冷却后即可使用。
我也来谈一下自己的一点经验吧。
CMC-Na:
硅胶为2.5:
1较好,楼上师兄说的3:
1应该也可以,但是硅胶配的过稀时后果很严重,板子在晾干时会出现许多裂缝,象万寿菊样的开花状,完全不能用。
此乃本人的惨痛经历,当时不知道是硅胶过稀的原因,还以为冬天太冷板子给冻裂了,又作了一批放在暖气房,还是照裂不务。
浪费了整整一瓶GF254啊(做的是制备板用量较大)。
有个问题至今不明白,请教各位大虾,晾干的板子放在烘箱里怎么全炸裂了,有什么方法可以避免板子炸裂。
楼上的兄弟,我也有过同样的遭遇。
当时板子铺得太厚,后来加长研磨的时间就好了。
首先我想说的是手工铺制的板子,只适宜于定性分析,不宜于分离定量。
手工铺板的要点我认为有如下几点:
1.手工铺制的板子常用的有:
硅胶G板和硅胶CMC板。
前者是煅石膏(石膏经140℃烘烤3—4小时)与硅胶按1—1.3:
10混合均匀。
每份硅胶G加水2—3份调成糊状,即可使用。
后者的操作各位大虾已有论述。
2.载板要求平滑清洁。
在使用前一定要处理干净,用洗涤液或肥皂水洗涤,再用水冲洗干净,烘干;
3.CMC-Na要用蒸馏水为溶剂,加热溶解后,放冷,最好滤过使用;消泡剂可直接与CMC-Na溶液混合使用;
4.我在做时,先在研钵中加CMC溶液,再加硅胶,按同一方向研磨,这样更容易调匀不易包埋硅胶颗粒;稠度以用研棒粘取,成连珠状不成线状下滴为好;配制时遵循现配现用、少量多次的原则,因其易干影响铺制效果。
薄层色谱法实践技巧
目的:
1. 药典:
薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上,在展开容器内用展开剂展开,使供试品所含成分分离,所得色谱图与事宜的对照物按同法所得的色谱图对比,并可用薄层扫描仪进行扫描,用于鉴别、检查或含量测定。
2. 如果你是做鉴别的话,薄层的系统适用性主要是做检测限和分离度;
3. 如果你是做含量测定,比如说用薄层扫描法,薄层的系统适用性应该做线性范围、同板精密度、异板精密度、回收率;
4. 手工铺制的板子,只适宜于定性分析,不宜于分离定量;
5. 化学药一般是作有关物质,需要一定的载药量,所以要适当增加厚度;
6. 中药一般较难分离,需要薄板,以增加分离度;
7. 手工铺制的板子常用的有:
硅胶G板和硅胶CMC-Na板。
前者是煅石膏(石膏经140℃烘烤3—4小时)与硅胶按1—1.3:
10混合均匀。
每份硅胶G加水2—3份调成糊状,即可使用。
后者的操作各位大虾已有论述。
8. 如果你铺板目的是做分析用的话,肯定得很仔细用心;如果仅是天然药化那种粗略检查过柱子得到的馏分纯度,那就没有必要这么复杂了,也就是说速度可以快点,板的要求也没有必要这么高;
9. 单纯的手铺板,技巧要求很高的,如果有铺板器(也是完全手动的那种),铺出的板子基本上可以保证均一的。
10. 要喷硫酸乙醇并定量的最好铺水板;铺水板是最考技术的,主要是碾磨技术,大家可以探讨一下;
11. 硫酸乙醇显色作定量分析的品种,但凡加了CMC-Na的板都易烘糊,尤其是温度高于100度时,后改用不加CMC辅的水板来作,就不会有烘糊现象,故也可推论CMC易于与硫酸起糊化反应。
感觉辅水板关键是硅胶G与水的比例要达1:
3.5左右,而且研磨后要尽快涂布,不能易于凝固而难于涂布。
展开:
12. 药典:
展开容器 应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层色谱展开缸,并有严密的盖子,底部应平整光滑,或有双槽。
上行展开一般可用适合薄层板大小的专用平底或双槽展开缸,展开时须能密闭。
水平展开用专用的水平展开缸。
13. 药典:
将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中,浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜(切勿将样点侵入展开剂中),密封顶盖,待展开至规定距离,除另有规定外,一般为8~15 cm,溶剂前沿达到规定的展距,取出薄层板,晾干,按正文项下的规定检测。
14. 展开剂的选择(分离单体):
(1)粗分,也就是当你的样品极性范围比较大的时候,可以直接采用极性较小的流动相。
然后将前沿、原点以及前沿及原点间的硅胶分别刮下,提取。
这样,样品就被分为几个部分,而各个部分的极性相差也比较小了。
然后再将这几部分分别进行下面的细分TLC。
(2)细分。
经过粗分之后,我们一般对各个部分的极性都能够做到心中有数了。
比如,被冲到前沿的样品,要采用更小极性强度的流动相,而死吸附部分,则需要较大强度的流动相。
我们在初步确定了流动相的极性强度之后,可以自己设计几个溶剂系统。
在选择流动相的组成的时候,可以参考snyder的溶剂分类,从质子受体,质子给体和偶极作用的溶剂中各选择一种,然后再选择一个强度调节剂。
当然,也可以参考文献中采用的流动相。
选好了要用的流动相,就可以根据我们初步确定的极性强度得到流动相的配比了(如果是二元流动相的话)。
如果是三元及以上的流动相,可以采用Glajch和Youngstrom的七种溶剂系统的方案进行选择流动相的配比。
然后从中选择分离效果比较好的组合。
最开始可以采用微量圆环法(将样品点在中间,然后将流动相用毛细管从原点向圆周扩散)和小板实验法来摸索,然后再应用于大的制备TLC。
我也曾直接采用圆环法,也称为环形展开,来进行制备的。
本来是应该有专门的U形展开室来展开,但是因为我们这里没有这个设备,所以我一般采用简易的方法:
即将样品点在中央,然后用尖头的滴管源源不断的向圆心滴加流动相的。
样品会分出不同的同心圆而得到分离。
这样的好处有三:
(1)只要操作小心,各个同心圆真的就非常圆,即不会出现线性层析中的边缘效应等。
(2)分离效果更好,拖尾现象小于线性层析。
(3)由于圆心式展开的Rfc是线性展开的Rf的平方根,要大于线性展开的Rf,所以分的更开。
弊端在于将各个组分从板上刮下的时候需更小心才不会使之混杂。
15. 当展开剂极性差别很大时,特别是极性大的成分所占比例很小时,往往会出现溶剂脱混现象。
在这种情况下,展开槽 饱和与不饱和差别没有显著性差异,薄层板上往往会出现类似分层的现象,所以只有换展开系统来调整。
16. 甲醇用量较小,而甲醇又易挥发,容易产生边缘效应,要特别注意展开剂的平衡和层析缸的密封。
17. 如果经过一次展开后,展开槽内仍剩下足够的展开剂,可以展开第二块板子吗?
个人认为最好不要。
一般来说为得到较好的分离效果,应先饱和一下,第二次使用如果还要饱和就会造成另一侧残留的展开剂附着在板子上,造成影响。
而且有机溶剂一般较易挥发。
18. 自己手铺的薄层板怎么都没有买来的高效板好用,用过之后也可以用极性大些的展开剂将展开的点,二次展开跑过,这样就可以重复利用了。
显色:
19. 药典:
显色装置 喷雾显色要求用压缩气体使显色剂呈均匀细雾状喷出;浸渍显色可用专用的玻璃器皿或用适宜的玻璃缸代替;蒸气熏蒸显色可用双槽玻璃缸或适宜大小的干燥器代替。
20. 说关于薄层板加热变黑的问题,其实很容易解决:
当喷完显色剂后不用在放烘箱里烘了,可以用电吹风在板子背面吹吹就能显色了。
我们实验室里一般都采用此法,简便、快洁.如果一非想使用烘箱烘的话,一定要用带玻璃窗的,当看到显色了就取出,不然不好控制显色时间,时间过长,CMC容易碳化变黑。
2
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 薄层 制备