高三生物实验重点.docx
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高三生物实验重点
实验一观察DNA和RNA在细胞中的分布 P26
实验原理:
DNA 绿色,RNA 红色
实验步骤:
步骤
器材与试剂
作用与原理
(1)制片
①将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上0.9%的NaCl溶液滴
②载玻片烘干
1 0.9%的NaCl溶液防止细胞破裂
2 维持细胞形态
3 烘干使细胞固定在载玻片上
(2)水解
8%HCl中30℃保温5分钟
盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质分离。
(3)冲洗
用蒸馏水缓流冲洗10分钟
(4)染色
2滴吡罗红甲基绿染色5分钟
甲基绿使DNA染上绿色
吡罗红使RNA染上红色
(5)观察
显微镜下观察
实验结果:
细胞核呈绿色,细胞质呈红色.
实验结果:
细胞核呈绿色,细胞质呈红色.
分布:
真核生物的DNA主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;RNA主要分布在细胞质中。
实验二检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质 P18
实验原理:
还原糖 砖红色
脂肪 红色
蛋白质 紫色
1、还原糖的检测
什么是还原性糖:
还原性糖:
有还原性基团——游离醛基或酮基的糖;如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖。
非还原性糖:
淀粉、纤维素、蔗糖、糖元。
(1)材料的选取:
还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜。
(2)试剂:
斐林试剂(甲液:
0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:
0.05g/mL的CuSO4溶液),现配现用。
(3)步骤:
取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(浅蓝色→棕色→砖红色)
2、脂肪的检测
(1)材料的选取:
含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶。
(2)步骤:
制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央
↓
染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
↓
制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)
↓
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)
3、蛋白质的检测
(1)试剂:
双缩脲试剂(A液:
0.1g/mL的NaOH溶液,B液:
0.01g/mL的CuSO4溶液)
(2)步骤:
试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察颜色变化(紫色)
实验三用显微镜观察多种多样的细胞 P7
1、 显微镜的使用:
取镜→安放→对光→压片→观察→收放。
(1)低倍镜使用:
(观察任何标本都必须先用低倍镜,且标本应透明)
(2)高倍镜使用:
先使用低倍镜确定目标→移动装片,使目标位于视野中央→转动转换器,换用高倍镜→调焦(转动细准焦螺旋)(视野较暗,可调反光镜或光圈)
2、显微镜使用注意事项:
(1)成像特点:
放大倒立的虚像。
(2)放大倍数计算:
物镜的放大倍数×目镱的放大倍数。
放大倍数指的是物体的长或宽。
(3)物像的移动方向与装片的移动方向相反。
(4)低倍镜下成像特点:
物像小、细胞数目多、视野亮。
高倍镜下成像特点:
物像大、细胞数目少、视野暗。
(5)物镜和目镜的判断方法:
物镜有螺纹,目镜无螺纹。
(6)放大倍数的判断方法:
目镜:
镜头长放大倍数小,镜头短放大倍数大。
物镜:
镜头长放大倍数大,镜头短放大倍数小。
物镜与装片之间的距离:
距离近放大倍数大,距离远放大倍数小。
(7)显微镜的有关性能参数。
最重要的性能参数是分辨率,而不是放大倍数。
1.高倍镜的使用时注意
(1)低倍镜使用过程中,下降镜筒时必须双眼侧视镜筒,防止镜头撞到玻片。
(2)低倍镜找到物像后,换上高倍镜时,观察过程中只能使用细准焦螺旋。
实验四用高倍镜观察线粒体和叶绿体 P47
1、材料:
新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶,口腔上皮细胞临时装片
2、原理:
叶绿体在显微镜下观察,绿色,球形或椭球形。
用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。
步骤
操作方法
目的与作用
(1)取材
①新鲜的藓类的叶
②菠菜叶下表皮略带一些叶肉
①藓类叶为单层细胞
②下表皮容易撕取,要略带些叶肉
(2)制片
注意叶片不能太干了,保持有水的状态
以免影响细胞活性
(3)观察
叶绿体呈椭圆形,可随细胞质的流动而流动。
叶绿体在弱光下以最大面积(长轴)转向光源,在强光下以最小面积(短轴)转向光源。
(1)取材
漱口,口腔内侧壁上轻刮几下
(2)染色
将口腔细胞放在健那绿液滴上
(3)观察
盖上盖玻片,显微镜下观察,线粒体被染成蓝绿色
问题
1、为什么不用植物细胞来观察线粒体?
植物线粒体相对较少,叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色。
2、如果观察发现染色不足,如何补色?
在盖玻片一侧滴加健那绿液,另一侧用吸水纸吸
步骤
项目
试管1
试管2
试管3
1
加入可溶性淀粉溶液
2mL
2mL
2mL
2
放置在不同温度环境下5分钟
0℃
100℃
60℃
3
加入新配置的淀粉酶溶液
1mL
1mL
1mL
4
滴入碘液
2滴
2滴
2滴
5
观察结果
变蓝
变蓝
不变蓝
实验五通过模拟实验探究膜的透性
用带有一个小孔的隔板把水槽分成左右两室,把磷脂分子引入隔板小孔,使之成为一层薄膜,水槽左室加人钾离子浓度较低的溶液,右室加入钾离子浓度较高的溶液。
(1)在左、右两室分别插入正、负电极,结果发现钾离子不能由左室进入右室,原因是 。
(2)若此时在左室加入少量缬氨霉素(多肽),结果发现钾离子可以由左室进入右室,原因是 。
(3)若此时再将电极取出,结果钾离子又不能由左室进入右室,原因是 。
(4)上述实验证明 。
答案
(1)磷脂膜上没有载体,钾离子不能通过主动运输由左室进入右室
⑵钾离子利用缬氨霉素载体,并由电极板提供能量,通过主动运输由左室进入右室
⑶缺少能量,不能进行主动运输
⑷主动运输的特点是需要载体,消耗能量,物质从低浓度到达高浓度
实验六观察植物细胞的质壁分离和复原P61
原理:
①细胞液浓度>细胞外溶液浓度时,细胞吸水;细胞液浓度<细胞外溶液浓度时,细胞失水
②细胞壁与原生质层的伸缩能力不同。
1、条件:
细胞内外溶液浓度差,活细胞,大液泡
2、材料:
紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡),质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。
3、步骤:
制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一側滴蔗糖溶液,另一側用吸水纸吸引→观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→盖玻片一側滴清水, 另一側用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原)
4、结论:
细胞外溶液浓度 > 细胞内溶液浓度,细胞失水 质壁分离
细胞外溶液浓度 < 细胞内溶液浓度,细胞吸水 质壁分离复原
植物细胞质壁分离和复原
1.原理:
成熟(有明显液泡)的植物细胞能够与外界溶液组成一个渗透系统,通过渗透作用的方式吸水或失水。
2.方法步骤:
应用:
1、可以用于测定细胞液的浓度 2、可以用于判断细胞的死活
注意问题:
1、细胞发生质壁分离后,细胞壁与细胞膜之间的空隙充满的是0.3mg/mL蔗糖溶液。
例题:
下面是一组用新鲜洋葱表皮进行的实验处理和结果,请分析回答:
实验分组 处理方法 实验结果
第1组 ①将材料置于30%蔗糖溶液中 ①发生质壁分离
②然后将材料移至蒸馏水中 ②发生质壁分离复原
第2组 ③将材料置于60%蔗糖溶液中 ③迅速发生质壁分离
④然后将材料移至蒸馏水中 ④质壁分离不能复原
第3组 ⑤将材料置于7%的尿素溶液中 ⑤开始发生质壁分离,
然后逐渐复原
第4组 ⑥将材料放入100℃热水中3min
后取出,重复第1组实验 ⑥不发生质壁分离
(1)洋葱表皮细胞在第1、2、3组实验中均发生了质壁分离现象,其内部结构基础和外在条件分别是 。
(2)比较第1和第2组实验结果的差异,说明
(3)比较第1和第3组实验结果,出现实验结果差异性的原因是。
(4)比较第1和第4组实验结果,出现实验结果差异性的原因是。
答案:
(1)内部结构基础是有原生质层和原生质层内外两个溶液体系的存在;外在条件是原生质层内外两个溶液体系存在浓度差
(2)高浓度溶液加快质壁分离现象的出现,但由于引起细胞过度失水,导致细胞死亡,使质壁分离复原不能发生
(3)尿素是可能被细胞主动吸收的小分子物质,随着尿素分子不断的进入细胞内部,当细胞内外浓度趋于一致时,质壁分离就会自动复原
(4)高温致使细胞死亡,死亡的细胞原生质层失去选择透过性,不能发生质壁分离
注意问题 :
1、细胞发生质壁分离后,细胞壁与细胞膜之间的空隙充满的是0.3mg/mL蔗糖溶液。
2、动物细胞能发生渗透作用但不会发生质壁分离。
例题:
下面是一组用新鲜洋葱表皮进行的实验处理和结果,请分析回答:
实验分组 处理方法 实验结果
第1组 ①将材料置于30%蔗糖溶液中 ①发生质壁分离
②然后将材料移至蒸馏水中 ②发生质壁分离复原
第2组 ③将材料置于60%蔗糖溶液中 ③迅速发生质壁分离
④然后将材料移至蒸馏水中 ④质壁分离不能复原
第3组 ⑤将材料置于7%的尿素溶液中 ⑤开始发生质壁分离,然后逐渐自动复原
第4组 ⑥将材料放入100℃热水中3min后取出,重复第1组实验 ⑥不发生质壁分离
(1)洋葱表皮细胞在第1、2、3组实验中均发生了质壁分离现象,其内部结构基础和外在条件分别是 。
(2)比较第1和第2组实验结果的差异,说明 。
(3)比较第1和第3组实验结果,出现实验结果差异性的原因是 。
(4)比较第1和第4组实验结果,出现实验结果差异性的原因是 。
答案:
(1)内部结构基础是有原生质层和原生质层内外两个溶液体系的存在;外在条件是原生质层内外两个溶液体系存在浓度差
(2)高浓度溶液加快质壁分离现象的出现,但由于引起细胞过度失水,导致细胞死亡,使质壁分离复原不能发生
(3)尿素是可能被细胞主动吸收的小分子物质,随着尿素分子不断的进入细胞内部,当细胞内外浓度趋于一致时,质壁分离就会自动复原
(4)高温致使细胞死亡,死亡的细胞原生质层失去选择透过性,不能发生质壁分离
注意问题
1、选材:
选取紫色洋葱鳞片叶外表皮。
其细胞液为紫色,在显微镜下与无色透明的细胞壁容易区分,观察到的质壁分离和复原效果明显。
另外,取新鲜水绵、黑藻叶、南瓜表皮也可以做这个实验。
2、试剂:
选用0.3g/ml 蔗糖糖溶液。
浓度过高,细胞质壁分离速度虽然很快,但不久就会将细胞杀死,细胞不能进行质壁分离复原;若浓度过低,则不能引起细胞质壁分离或速度太慢。
另外,8% 食盐溶液、5%的硝酸钾溶液、一定浓度的尿素、甘油……也可使用,但后面三者在引起质壁分离后可自动复原。
3、时间的控制:
做好质壁分离的实验后,不久就要做质壁分离复原实验。
避免使质壁分离的细胞长时间处于较高浓度的外界溶液中,细胞过度失水而导致死亡。
从而观察不到质壁分离复原的现象
实验七探究影响酶活性的因素
原理:
淀粉遇碘后,形成蓝色的复合物。
淀粉酶可以可以使淀粉水解成麦芽糖,麦芽糖遇碘后,不形成蓝色的复合物。
1、材料:
新配置的淀粉酶溶液,新鲜肝脏研磨液,可溶性淀粉溶液,过氧化氢溶液等。
2、步骤:
(1)探究温度对酶活性的影响
温度对酶活性的影响
在温度对酶活性的影响的实验中,三支试管的条件,除温度外均相同。
3号试管处在60℃的温度条件下,酶活性最大,试管中的淀粉被分解,滴入碘液后不会变蓝。
2号试管的温度条件是100℃,这样高温度条件下,淀粉酶已失去活性,1号试管的温度条件是O℃,低温抑制淀粉酶的活性。
所以2号和1号试管中的淀粉都没有被分解,滴上碘液后都会变蓝,此实验可以证明;酶的催化作用需要适宜的温度条件,温度过高和过低都将影响酶的活性。
(2)探究pH对酶活性的影响
实验1 过氧化氢(H2O2)在过氧化氢酶的催化作用下,可以分解成水和氧气,可以放入带火星的木条,看能否复燃来检测是否有氧气产生。
步骤
项目
试管1
试管2
试管3
1
加入过氧化氢溶液
2mL
2mL
2mL
2
加入蒸馏水
1mL
—
—
3
加入盐酸溶液
—
1mL
—
4
加入NaOH溶液
—
—
1mL
5
滴加肝脏研磨液
2滴
2滴
2滴
6
37℃水浴
5min
5min
5min
7
检
验
放入带火星的木条
复燃
不复燃
不复燃
试管内气泡产生量
有气泡产生
没有气泡产生
没有气泡产生
2号试管内加入了盐酸,溶液的pH较低,3号试管内加入了氢氧化钠,溶液的pH较高,在过低或过高pH环境中,过氧化氢酶失去活性,不能使过氧化氢分解,没有氧气产生而1号试管没有加入酸或碱,溶液近似中性,过氧化氢酶将过氧化氢分解成水和氧气,使木条复燃。
实验八 探究酵母菌的呼吸方式P91
1 ,原理:
酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水:
C6H12O6 + 6O2 + 6H2O 6CO2 + 12H2O + 能量
在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化碳:
C6H12O6 2C2H5OH + 2CO2 + 少量能量
2、装置:
(见课本)下图为“探究酵母菌细胞呼吸的方式”的实验装置图,请据图分析
3, A瓶加入的试剂是NaOH,其目的是:
使进入B瓶的空气先经过NaOH处理,排除空气中CO2对实验结果的干扰。
4, C瓶和E瓶加入的试剂是澄清石灰水(或溴麝香草酚蓝水溶液),其作用是 :
检测CO2的产生
D瓶应封口放置一段时间后,再连通E瓶,其原因是:
D瓶应封口放置一段时间后,酵母菌会将瓶中的氧气消耗完。
再连通E瓶,就可以确保通入澄清石灰水(或溴麝香草酚蓝水溶液)的CO2是酵母菌的无氧呼吸所产生的
5、检测:
(1)检测CO2的产生:
使澄清石灰水变浑浊,或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
(2)检测酒精的产生:
橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与酒精发生反应,变成灰绿色。
实验九叶绿体色素的提取和分离
1、原理:
( 1 )叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇(或丙酮)中,所以用无水乙醇可提取叶绿体中的色素。
( 2 )不同的色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得快,溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得慢,因而可用层析液将不同色素分离。
2、材料用具
取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。
3、结果分析:
①从色素带的宽度可知色素含量的多少依次为:
叶绿素a >叶绿素b >叶黄素>胡萝卜素; ②从色素带的位置可知色素在层析夜中溶解度大小依次是:
胡萝卜素>叶黄素>叶绿素 a >叶绿素 b ; ③在滤纸上距离最近的两条色素带是叶绿素a 与叶绿素b ,距离最远的两条色素带是胡萝卜素与叶黄素。
四、实验过程(见书P54)
1.提取色素:
2.制备滤纸条:
3.色素分离,纸层析法。
(不要让滤液细线触及层析液)4.观察:
层析后,取出滤纸,在通风处吹干。
观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。
结果是:
4条色素带从上而下依次是:
胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。
4、注意事项:
(1)裁取定性滤纸时,注意双手尽量不要接触纸面,以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。
(2)根据烧杯的高度制备滤纸条,让滤纸条长度高出烧杯1cm ,高出的部分做直角弯折。
(3)画滤液细线时,用力要均匀,速度要适中。
(4)研磨要迅速、充分。
a.因为丙酮容易挥发; b.为了使叶绿体完全破裂.从而能提取较多的色素;
c.叶绿素极不稳定,能被活细胞中的叶绿素酶水解而被破坏。
(5)制备滤纸条时,要将滤纸条的一端剪去两角,这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀,便于观察实验结果。
5、实验创新:
在本实验中在圆形滤纸中央点上叶绿体色素的提取液进行层析,会得到近似同心的四个色素环,由内到外依次是黄绿色、蓝绿色、黄色、橙黄色。
实验十 模拟探究细胞表面积与体积的关系P110
原理:
NaOH和酚酞相遇呈紫红色
当与琼脂相遇时,其中酚酞变成紫红色,因此,从颜色上的变化就知道NaOH 扩散得有多远。
在一定时间内,NaOH在琼脂块的每一侧扩散的距离大致相同。
步骤:
将含酚酞琼脂块切成三块边长分别为3cm、2cm、1cm的正方体, 放入烧杯内,加入 NaOH溶液,10min后取出,用纸巾吸干,用塑料刀将琼脂块切成两半.观察切面,测量每一块上NaOH扩散的深度.
分析:
琼脂块的表面积与体积之比(相对表面积)随着琼脂块的增大而减小, NaOH扩散的体积与整个琼脂块的体积之比也随着琼脂块的增大而减小.
结论:
细胞体积越大,其相对表面积越小,细胞的物质运输的效率就越低。
细胞表面积限制了细胞的长大。
1.细胞为什么要分裂?
或细胞为什么这么小?
(1)增大细胞膜表面积与体积比,有利于物质的运输(营养吸收与废物排出)以保证细胞正常生命代谢需要。
(2)保证适宜的核质关系,使细胞质能在细胞核的控制范围内。
2.卵细胞是一种特殊的细胞,因为它含有许多供胚胎发育的营养物质——卵黄,而使细胞体积增大了许多倍。
但卵细胞一般与外界交换物质少,故表面积与体积的比例特殊。
实验十一 观察植物细胞的有丝分裂
教学目的
观察植物细胞有丝分裂的过程,识别有丝分裂的不同时期。
初步掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片的技术。
初步掌握绘制生物图的方法。
实验程序
洋葱根尖细胞培养:
实验课前3-4d培养(温暖、常换水),待根长到5cm
取材:
取根尖2-3mm
解离液:
质量分数为15%的HCl溶液和95%的酒精溶液按1∶1体积比的比例混合
解离 解离时间:
3-5min
解离目的:
使组织中的细胞互相分离开
解离程度:
根尖酥软
漂洗液:
清水
装片的制作漂洗 漂洗时间:
10min
漂洗目的:
洗去组织中的解离液,有利于染色
染色液:
0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫(醋酸洋红)溶液
染色 染色时间:
3-5min
染色目的:
使染色体(或染色质)着色
制片:
镊子尖把根尖弄碎,盖上盖玻片,复加一块载玻片用拇指轻压(使细胞分散开)
观察
先低倍镜:
据细胞特点找到分生区(细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂)
后高倍镜:
先找中期细胞,后找前、后、末期细胞(绝在多数细胞处于间
期,少数处于分裂期。
因为间期时长远大于分裂期。
)
【例析】
.在观察植物细胞有丝分裂实验中,为利于观察,常采用哪些方法使根尖分生区细胞分散开?
(解离、弄碎、压片)
实验十二观察细胞的减数分裂
一.实验目的:
通过观察蝗虫精母细细胞减数分裂固定装片,识别减数分裂不同的阶段染色体的形态、位置和数目,加深对减数分裂过程的理解。
二.实验原理:
蝗虫的精母细胞进行减数分裂形成精细胞,再形成精子。
此过程要经过两次连续的细胞分裂:
减数第一次分裂和减数第二次分裂。
在此过程中,细胞中的染色体形态、位置和数目都在不断地发生变化,因而可据此识别减数分裂的各个时期。
三、方法步骤:
1、低倍镜观察:
在低倍镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片识别初级精母细胞、次级精母细胞和精细胞。
2、高倍镜观察:
先在低倍镜下依次找到减数第一次分裂中期、后期和减数第二次分裂中期、后期的细胞,再在高倍镜下仔细观察染色体的形态、位置和数目。
3、绘图:
根据观察结果,尽可能多地绘制减数分裂不同时期的细胞简图。
实验十三低温诱导染色体加倍P88
1、原理:
用低温处理植物分生组织细胞,能够抑制纺锤体的形成,以致影响染色体被拉向两极,细胞也不能分裂成两个子细胞,于是,植物细胞染色体数目发生变化。
2、方法步骤:
(1)洋葱长出约1cm左右的不定根时,放入冰箱的低温室内(4℃),诱导培养36h。
(2)剪取诱导处理的根尖约0.5~1cm,放入卡诺氏液中浸泡0.5~1h,以固定细胞的形态,然后用体积分数为95%的酒精冲洗2次。
(3)制作装片:
解离→漂洗→染色→制片(过程同观察细胞的有丝分裂的制片方法一样)
(4)观察,比较:
视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞.
实验十四调查常见的人类遗传病(必修二P91)
一.实验目的:
1.初步学会调查和统计人类遗传病的方法
2.通过对几种人类遗传病的调查,了解这几种遗传病的发病情况
3.通过实际调查,培养接触社会,并从社会中直接获取资料或数据的能力
二.实验原理:
显性遗传病具有世代相传的特点,隐性遗传病隔代出现。
伴X染色体隐性遗传病的遗传特点是交叉遗传,隔代出现,患者男性多于女性。
伴X染色体显性遗传病的遗传特点是世代相传,患者女性多于男性。
三.方法步骤:
可以以小组为单位开展调查工作。
其程序是:
组织问题调查小组→确定课题→分头调查研究→撰写调查报告→汇报交流调查结果(如右流程图)
注意事项:
1.调查时,最好选取群体中发病率较高的单基因遗传病,如红绿色盲、白化病、高度近视(600度以上)等
2.为保证调查的群体足够大,小组调查的数据,应在班级和年级中
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- 生物 实验 重点