质谱基础知识-飞行时间质谱仪原理及应用_精品文档.pptx
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飞行时间质谱仪,庞钧文12210300012,质谱仪是按照离子的质荷比(m/z)不同,来分离不同分子量的分子.测定分子量进行成分和结构分析.离子的生成方式有失去或捕获电荷(如:
电子发射,质子化或去质子化),质谱仪简介,离子源,质量过滤/分析器,检测器,进样部分样品板LC或GC,EI源FAB源MALDI源ESI源,QuadruopoleIontrapTime-of-flight,电子倍增器闪烁计数器,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,1906年J.JThomson在实验中发现带电荷离子在电磁场中的运动轨迹与它的质荷比(m/z)有关,并于1912年制造出第一台质谱仪.1946年发明飞行时间质量分析器(Time-of-flightAnalyzer)1953-1958年出现四极杆质量分析器(Quadrupole)1956年GC-MS开始联用1959年质谱首次用于peptidesequencing1965年离子共振质谱出现1968年电喷雾离子源ElectrosprayIonization1973年LC-MS1974年FouriertransformioncyclotorresonanceMS1987-1988年Matrise_assistedlaserdesorptionionization1996年电喷雾离子源开始用于生物大分子的研究,质谱的发展历史,利用动能相同的离子(E),飞行相同的距离(L),所用的时间的不同(T)来将它们区分开来。
通过测量离子的飞行时间T,来计算离子的质荷比(m/z)。
22=L=m:
离子质量;v:
离子速度;ne:
离子总电荷;V:
离子所在地点的电势;L:
飞行距离;T:
飞行时间,基本原理,基本原理公式推导,当飞行距离L和工作电压V一定时,离子飞行时间T和离子质荷比一一对应。
22=L=,质量分辨(Massresolution,m/m):
质谱仪器分辨不同成分物质的能力;10000质量精度(massaccuracy):
衡量质谱仪器测量物质成分的准确度;ppm质量范围(massrange):
质谱仪器测量物质成分的质量大小范围;1灵敏度(sensitivity):
质谱仪器所能测量物质成分的最低含量;单分子检测,飞行时间质谱仪性能指标,离子源:
电喷雾电离源(ESI)主要用于极性、难气化的成分在液相状态下的电离。
大气压化学电离源(APCI)主要用于中等极性、易挥发的小分子化合物在气相状态下的电离基质辅助激光解吸电离源(MALDI)主要用于多肽、核苷酸、蛋白质和高分子聚合物等生物大分子的电离大气压光电离源(APPI)主要用于芳烃、甾体等不宜用以上三种离子化的样品。
飞行时间质谱仪TOF-MS的构成,质量分析器TOF-MS分辨率低的原因时间分散空间分散能量分散改进方法脉冲电离离子延迟引出反射器技术,飞行时间质谱仪TOF-MS的构成,目前,TOF-MS大都装有反射器,使离子经过多电极组成的反射器后沿V型或W型路线飞行到达检测器,使得分辨率可达20000以上,最高检测质量可超过300000Da,且具有很高的灵敏度。
检测器TOF-MS一般选用微通道板(MCP)离子检测器MCP由平行的圆筒型微通道组成,当离子进入微通道时产生二次电子,反射通过这些通道时,不断产生更多的电子,每一通道的放大倍数约105。
MCP具有响应速度快、灵敏度高和信噪比高以及检测面积大等特点。
高真空系统(107Pa)前级:
旋叶式机械泵后级:
涡轮分子泵,直线型飞行时间质谱仪的主要缺点:
分辨率低。
离子初始能量不同,使得具有相同质荷比的离子达到检测器的时间有一定分布,造成分辨能力下降。
改进的方法在线性检测器前面的加上一组静电场反射镜,将自由飞行中的离子反推回去,初始能量大的离子由于初始速度快,进入静电场反射镜的距离长,返回时的路程也就长,初始能量小的离子返回时的路程短,这样就会在返回路程的一定位置聚焦,从而改善了仪器的分辨能力。
这种带有静电场反射镜的飞行时间质谱仪被称为反射式飞行时间质谱仪,直线式VS反射式,反射式飞行时间质谱仪,质量分析器;可以单独使用,也可以和其他仪器串联使用与四级杆质谱串联与离子阱质谱串联与粒子淌度质谱串联广泛用于化学、生物学、环境科学等领域。
中药分析蛋白质组学,飞行时间质谱仪的应用,Thanks!
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