荧光定量PCR检测乙肝病毒-DNA的临床意义_精品文档.ppt
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定量PCR检测乙肝病毒-DNA的临床意义,金域医学检验中心,一、流行病学,HBV感染呈世界性流行,但不同地区HBV感染的流行强度差异很大。
据世界卫生组织报道,全球约20亿人曾感染过HBV,其中3.5亿人为慢性HBV感染者,每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌(HCC),二、病原学,乙型肝炎病毒(HBV)属嗜肝DNA病毒科(hepadnaviridae),基因组长约3.2kb,为部分双链环状DNA。
HBV含个部分重叠的开放读码框(ORF),即前SS区、前CC区、P区和X区。
前S/S区编码大(前S1、前S2及S)、中(前S2及S)、小(S)3种包膜蛋白;前C/C区编码HBeAg及HBcAg;P区编码聚合酶;X区编码X蛋白。
HBV由于基因序列的不同又可以分为A-H八种基因型.,三乙型肝炎的发病机制,HBV是通过刺激宿主的免疫系统攻击受感染肝细胞来间接地引起肝损伤。
受HBV感染的肝细胞在其表面表达病毒蛋白质,成为CTL攻击的目标。
针对受染细胞的免疫反应引起炎症和坏死。
坏死-炎症活动持续存在导致肝纤维化。
四实验室检测方法,一传统实验室检测方法1.血清学检测(两对半检测)HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc2.肝功能检测(ALT,AST)二新型实验室检测方法1.乙肝病毒定量2.赖药性基因检测3.乙肝病毒基因分型,五为什么要做乙肝病毒DNA定量,1.传统检测乙肝的方法为“乙肝两对半”和“肝功能”检测范围有限.(不能测定乙肝病毒复制情况、传染程度)2.乙肝病毒定量是直接检测乙肝病毒的核心成分乙肝病毒DNA.(能够直接了解病毒的载量,了解乙肝病毒复制情况、传染程度)例如:
1小三阳的病情判断2.HBsAg阳性或单一的抗HBc阳性病情判断3.二对半5项全部阴性病情判断4.抗一HBs阳性病情判断,六乙肝定量测定意义,1.定量方法使全程动态观察病毒含量成为可能2.选择治疗时机3.估计治疗反应5.治疗后随访和检测复发6.确定耐药株及选择合适的治疗方案7.抗病毒药物疗效的评价和监测8.抗病毒新药的研制9.研究基因的表达情况,探讨某些疾病的致病机理10.围产期保健,七HBV-DNA在什么水平需要治疗,
(1)HBVDNA定量(乙肝病毒DNA定量)105拷贝/ml(HBeAg阴性者为HBVDNA定量104拷贝/ml);
(2)ALT(谷氨酸氨基转移酶)2ULN(ULN正常值上限);如用干扰素治疗,ALT应10ULN,血总胆红素水平应2ULN;(3)如ALT2ULN,但肝组织学显示KnodellHAI4,或G2炎症坏死。
具有
(1)并有
(2)或(3)的患者应进行抗病毒治疗;对达不到上述治疗标准者,应监测病情变化,如持续HBVDNA定量阳性,且ALT异常,也应考虑抗病毒治疗。
八治疗方案,治疗的总体目标慢性乙型肝炎治疗的总体目标是:
最大限度地长期抑制或消除HBV,减轻肝细胞炎症坏死及肝纤维化,延缓和阻止疾病进展,减少和防止肝脏失代偿、肝硬化、HCC及其并发症的发生,从而改善生活质量和延长存活时间。
慢性乙型肝炎治疗主要包括抗病毒、免疫调节、抗炎保肝、抗纤维化和对症治疗,其中抗病毒治疗是关键,只要有适应证,且条件允许,就应进行规范的抗病毒治疗。
九具体治疗,1.抗病毒治疗干扰素治疗核苷(酸)类似物治疗(拉米夫定等)免疫调节治疗其他抗病毒药物及中药治疗2其他对症治疗抗炎保肝治疗抗纤维化治疗,谢谢大家!
谢谢大家!
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