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新种子病理学复习资料
第1章种子病理学与种子健康测定
一.种子病理学:
是研究农作物种子传播病害的发生发展规律及其防治方法,从而提高农作物产量和品质的一门科学。
二.种子健康状况:
是指种子是否携带有病原菌(如真菌、细菌及病毒),以及有害动物(如线虫及害虫),并且如缺乏微量元素等生理状况也可包括在内。
三.种传病害:
是指病原物附着或寄生或存在于种子外部、内部或种子之间,以种子作为载体或媒介进行传播,并能引起新生植物体局部或整体发病的病害。
四.种子病害(狭义):
是指在种子发育阶段直接侵染、为害种子的植物病害。
种子病害(广义):
是一类能为害种子、其病原物在种子上越冬越夏、并通过种子传播的植物病害。
五.种子带菌的必然性和种子病害防治的重要性
从病理学上看:
种子病害是植物病害的初侵染来源。
从农业生产上看:
国际间或国内不同地区间日益频繁的种质交流,危险性病害的传播蔓延可能性增大。
病害防治上:
种子携带病原菌多处于休眠状态,薄弱环节,适时关键的阶段。
种子加工上:
防治对象集中,易掌握处理,种子产前处理,实施种子带菌消毒。
加强种子苗木带菌检测与消毒处理,进行无病种苗的繁育与推广,杜绝和减少种子病害的发生和危害及新病区的扩大。
第2章种子带病的严重性与为害性
一.种子带病有哪些为害性?
1、造成农作物减产
2、种子品质变劣,降低经济价值
3、传播植物病害
4、引起田间发病
5、诱发种子贮藏期病害
6、影响人、蓄健康
二.种传病害对农业的危害性有直接和间接2个方面:
1、直接危害性:
是指种传病害直接造成新生植物体发病,如新生幼苗、新生成株发病。
2、间接危害性:
是指种传病害为田间植物病害的流行提供侵染来源。
第3章种传病害
种子传病的效应有植物病原扩散效应、植物病原致病效应和植物病害流行效应等三种类型。
一.如何理解种子病害和种传病害的关系/区别?
种子病害有广义和狭义之分。
广义的种子病害包括狭义的种子病害和种传病害。
狭义的种子病害是指病原物能在种子上营寄生生活并进行繁殖,从而引起种子发病,如种子表面有病斑。
种子感病后成为病原体栖居场所,病原体随种子成熟转入休眠或休止活动,此时种子病害便告终止。
下一过程是种子上的病原物侵染新生植物体,转入种传病害。
种传病害的病原物只是机械地附着在种子表面,或混杂于种子之间,通常处于休眠状态,并不在其上营寄生生活;也可进入种子内部或颖下,但并不在其中繁殖,也不产生症状。
病原物并不直接侵害种子,只是通过种子传播,当环境条件适宜时才直接侵染幼苗。
二.种传病害的病原物包括真菌、细菌、病毒、线虫和寄生性种子植物等。
三.病原物侵染和污染种子的部位有哪些?
/种子带病的部位有哪些?
1.胚珠受侵。
/胚珠带病
2.胚受侵。
/种胚带病(子叶、禾本科的盾片;胚芽;胚轴;胚根)
3.胚乳受侵。
/胚乳带病
4.种皮受侵。
/种皮带病
5.果皮受侵。
/果皮带病
6.种皮和果皮的污染。
/种皮和果皮带病
7.苞片受侵。
/苞片带病
8.种子中混杂物的污染。
四.细菌性种子病害的侵染来源有哪些?
1,种子和无性繁殖器官;如水稻白叶枯病、马铃薯环腐病和甘薯瘟病。
2,土壤;多在残余组织中存活,残余组织腐烂分解后,细菌大都死去。
3,病株残余。
4,杂草和其他作物;如桑萎缩病菌原体可侵染律草。
5,昆虫介体;如玉米叶甲是玉米细菌性萎蔫病菌的越冬场所;蜜蜂是梨火疫病的传播介体。
五.种子中混杂物的污染中,混杂物的种类包括小块的病株残体、子实体(分生孢子器、子囊壳、厚壁孢子、冬孢子、卵孢子)、菌核、虫瘿、病土和杂草种子等。
第4章种子病害的侵染源
一.种子遭受病原物侵染的途径与病原物来源有关,按来源可分为株体外病原物侵染和株体内病原物侵染。
1、株体外病原物侵染是指侵染种子的病原物来自植株本身以外的病原物,是外来病原物的侵染。
其特点是病原物需经过气流或媒介才能与种子发生接触,进而侵入种子造成种子发病。
可通过花和果柄和种子柄,或直接由种子表面而来。
按照农作物种子的特点,其类型有:
1)直接侵染种子:
外来病原物直接侵染裸露于植物体外的种子(果实),被害种子表面产生病斑,或病菌深入到种子内部;
2)子房壁侵染:
是指病菌从已授粉或未授粉的雌蕊子房或幼嫩的果皮侵入到寄主的花器内,病原体在子房内生长发育破坏种子结构,或不破坏种子结构,病菌在被侵染种子内越冬或越夏,带病种子成为种传病害初侵染来源。
如小麦粒线虫、稻粒黑粉病和稻曲病;
3)柱头侵染;如麦角病
4)花粉侵染:
如辣椒花叶病、菜豆普通花叶病。
2、株体内病原物侵染。
其特点是:
内生型种子与病原物的接触是间接的,外来病原物先侵染种子外面的保护组织,而后再侵染种子;病原物来自母株,母株体内的病原物危害种子。
按照种子的特点,其类型有:
外皮穿透侵染;果肉穿透侵染;疏导系统侵染;幼苗侵染;转移侵染。
二.果肉穿透侵染与外皮穿透侵染的区别
果肉穿透侵染的病原物要经过果肉才能与种子接触,而外皮穿透侵染的种子紧贴种荚内表皮,病菌穿透种皮立即与种子发生接触。
三.外来病原菌侵染种子的通道有哪些?
1.柱头作为侵染通道
有两种结果或类型,1)通过柱头的胚内侵染:
通过柱头和花柱,造成胚受侵,如小麦散黑穗病。
2)通过柱头的胚外侵染:
可侵染花柱并到达子房和胚珠,但不侵害胚,侵染只限于种子的其他部分,如燕麦散黑穗病和大麦条纹病菌。
2.蜜腺作为侵染通道
如果树火疫病、棉花铃腐病
棉花去除蜜腺可培育抗铃腐品种。
3.子房壁、果皮和种皮的珠被(如小麦散黑穗病)
4.花和果柄(如亚麻炭疽病)
花菱草顶孢菌侵染花菱草的花瓣,通过接触点进入荚,菌丝还可再侵入果柄、荚和种皮。
四.大麦系统侵染的三种主要种传病害中,大麦散黑穗病的病菌以休眠菌丝体存在于胚中;大麦条纹病的病菌以休眠菌丝体存在于种皮内;大麦坚黑穗病的病菌主要限于种皮表面,完全为机械污染。
第5章种传病害的类型(侵染和传播)
一.种子病害的侵染:
是指不同病原物侵入不同种子的方式及其在种子内外潜存的情况。
二.种子病害的传播:
是指不同病原物如何伴随种子进行近距离或远距离的传播。
三.种子病害与种子的结合方式有三种:
1、种子粘附:
种子污染粘附是指真菌的营养体、繁殖体,细菌个体以及病毒粒子等粘附于种子表面。
病原菌与寄主不存在营养与寄生关系。
2、种子感染:
是指病原物直接侵入种子组织中。
病原菌与寄主存在营养与寄生关系。
3、种子伴随性污染:
是指种子中夹杂着病株残体,混有病菌的组织体,粘附病毒病的植物果肉组织。
病原菌与寄主不存在营养与寄生关系,病原物与种子的接触不紧密,播种时容易脱离接触。
四.尼尔高根据种子带病的方式与病原物在作物生长过程中扩展情况,将种子病害划分为:
(1)胚内感染系统侵染:
胚被侵染后,种子萌发时病菌变为活跃状态进入植株茎部或紧随生长点;
(2)胚内感染局部侵染:
胚被感染,分生孢子自初侵染传到子叶、叶柄和茎部,孢子萌发,菌丝进入寄主产生局部病斑;
(3)胚外感染系统侵染:
种子在胚外(胚乳、种皮、果皮)受感染,种子发芽时病菌进入幼株,并在植物生长期间进一步扩展;
(4)胚外感染局部侵染:
种子在胚外受感染,种子发芽时,病菌被动地传到子叶上,或在种皮里以及被气流、雨滴飞溅、昆虫等传递到幼株上,很快侵入寄主体内;
(5)种子污染系统侵染:
病菌污染的种子发芽时病菌侵入幼苗并且跟随植物向上生长;
(6)种子污染、体外腐生或休眠后局部侵染:
病菌污染种子后与种子在一起作腐生生存一个时期、或在土壤、残株上行一段休眠生活后,再作局部侵染;
(7)种子污染、先体外腐生后系统侵染:
种子污染后,病菌作一段或长或短的腐生,然后侵入寄主作系统侵染;
(8)种子污染、器官专化性侵染:
种子被器官专化性侵染的病菌污染后,病菌行一段体外非寄生生活,然后再作直接器官专化性侵染。
五.真菌性种子病害的侵染和传播的基本类型包括:
(1)病原物混于种子间(形态有:
菌核、麦角和种子);基本特征:
属种子伴随性污染。
指种子间混有病原物或夹杂病株残体。
病原菌和种子一起经过休眠,萌发作局部侵染或器官专化性侵染。
(2)病原物附着于种子表面(形态类型有:
冬孢子、分生孢子、卵孢子和菌核;侵染过程有幼苗侵入系统侵染和幼苗侵入局部侵染);基本特征:
以真菌的无性或有性孢子附着于种子表面。
(3)病原物潜伏于颖或种皮内(侵染过程有直接侵入生长点系统侵染和不侵入生长点局部侵染);基本特征:
菌丝体潜存于颖、种皮内或颖与种皮之间。
(4)病原物潜伏于种皮组织中;基本特征:
菌丝体深入种皮以内组织。
(5)病原物潜伏于种胚内。
基本特征:
休眠菌丝体潜存于种胚内。
六.种传真菌病害对种子的直接影响包括:
(1)种子不育。
(2)种子萎缩和变小。
(3)种子腐烂。
(4)种子变成菌核或子座。
(5)种子坏死。
(6)种子变色。
(7)种子萌发能力降低或消失。
(8)种子内的生理变化。
七.种子受病原细菌侵染造成的影响有三种类型:
(1)种子发育不良。
(2)种子腐烂。
(3)种子变色。
八.种子携带病原细菌的类型/病原细菌对种子的侵染和传播类型/病原细菌在种子上的存在部位包括:
(1)病原细菌粘附于种子表面(类型:
种子表面、种子的短绒上、块茎表面);基本特征:
菌体粘附在种子外表。
(2)病原细菌潜伏于种子内部(类型:
胚和胚乳、种皮内、颖壳、维管束)。
基本特征:
细菌潜存于颖壳内、胚乳或胚的内外。
九.病原细菌对种子的直接影响包括:
(1)种子发育不良。
(2)种子腐烂。
(3)种子变色。
(4)粘液病。
十.病原细菌进入种子的途径包括直接通过发病的母株侵染和由外界传播2个途径。
直接由母株发生的侵染可能通过花或果柄(花梗、花序梗)和种子柄(珠柄),或直接由种子表面(珠被)而来。
直接由母株侵染是指细菌通过植株的维管束系统进入种子。
十一.种子携带病毒的类型(植物病毒在种子上的带毒部位有三种类型:
1、种子外部传带病毒;基本特征:
病毒颗粒污染种子外表。
2、种胚外部传带病毒;基本特征:
存在于种子的种皮或胚乳中。
3、种胚内部传带病毒。
基本特征:
病毒存在于种子的胚中。
途径:
花粉传染;胚珠传染(受精时传入胚中);亲本植株的病毒直接转移而侵染发育的胚。
即种子胚部感染病毒的毒源有2种,外来花粉和母株自身。
十二.种传病毒对种子的直接影响
(1)种子不育。
(2)种子皱缩和变小。
豇豆花叶病。
(3)种子变色。
(4)种子萌发能力降低。
(5)种子坏死。
十三.影响种子传播病毒的因素有哪些?
病毒的类型
1、种传病毒大多可通过汁液传于其它寄主,即感染薄壁细胞组织,造成斑驳,局部坏死,如大麦条纹花叶病毒。
(2)侵染维管束系统的,多不能侵染种子,丛矮病毒、丛枝病毒。
(3)叶蝉不能传播的病毒,种子能传播。
线虫传播的病毒,大多能通过种子传播。
2、外界条件最突出的是温度大麦条纹花叶病:
16℃时发病率(种子传毒率)0-3%;20℃时9-27%;24℃时7-28%。
南方菜豆花叶病:
16~20℃时胚感染率95%;28~30℃时胚感染率55%。
3、寄主及其生育期:
番茄黑环病毒(线虫传播):
番茄种子传毒19%;甜菜56%;豇豆23%;荠菜90%。
(4)病毒在种子中的寿命:
大麦条纹花叶病毒6.5年;菜豆普通花叶病毒3年;烟草普通花叶病毒在番茄中9年
(5)其它因子
十四.为什么有的种子能传播病毒有的不能?
大体有以下原因:
1、与病毒不能或不易侵入茎尖原始分生组织有关;
2、与感染维管束系统病毒不能由种子传播有关;
3、与胚中高能磷酸化合物浓度过低,不能增殖有关;
4、与贮存条件干燥而遭到钝化物质的作用有关;
5、与病毒引起的雄性不育或雌性不育有关。
十五.种子传播植物病原线虫的方式有
(1)以幼虫潜伏于颖壳内外(禾本科、牧草)或种子的微小凹陷处;
(2)幼虫在种子(薯)内(腐烂型);
(3)以虫瘿混于种子间或带有线虫胞囊的土壤混于种子间。
十六.种苗传带病害的类型包括
1)病原体潜存于苗木的包装材料和根部附带的泥土中
2)病原体粘附于苗木的外部表面
3)病原体潜存于苗木的组织内部
十二.由种子携带的黑穗病菌、麦角病菌核和种子线虫瘿,都是专化的子房寄生物。
第6章种传病原物的寿命
一.种传病原物的寿命:
是指在一定环境条件下,种子内外病原物保存生活力的时间。
二.霜霉菌类群由于壁薄,寿命短,播种前晒种可杀死无性孢子或菌丝体。
霜霉菌一般存活期较短,但大豆种子上的大豆霜霉病的卵孢子贮藏8年后还能萌发。
黑粉菌类群由于是休眠菌丝体深深潜入种子组织,并形成深色的厚垣孢子(冬孢子),寿命长。
腔孢纲的真菌,孢子受子实体保护,多年贮藏仍能产生新鲜孢子。
念珠状的丝孢纲菌体近乎无色,分生孢子薄壁,寿命短。
暗色孢的丝孢纲菌体有色,分生孢子厚壁,寿命较长。
三.影响种传真菌寿命的内在因素有
1、真菌的类型真菌的生命力(寿命)可分为三类:
生命力弱小(最长存活期3年以内);生命力中等(最长存活期3~15年);生命力强大(最长存活期15~100年以上)。
(1)丝孢纲丛梗孢科:
特征:
菌体近乎无色,分生孢子(无色孢子)薄壁,寿命短。
(2)丝孢纲暗色孢科:
特征:
菌体有色,分生孢子厚壁(深色孢子),寿命较长。
(3)腔孢纲:
球壳孢目和黑盘孢目中大多数长命。
可能与孢子受到子实体保护,子实体贮藏多年仍能产生新的分生孢子有关。
(4)黑粉菌目:
以深深埋入种子组织内的休眠菌丝以及在种子表面的深色孢子存活的黑粉菌长命。
(5)休眠的菌丝,特别是厚壁的受种子组织(种皮)保护的休眠菌丝,比附着在种子表面没有保护的孢子存活的可能性要大得多。
2、真菌的形态休眠菌丝体的寿命比分生孢子长。
3、真菌的侵染程度和孢子成熟度侵染程度越重病菌的寿命越长,完全成熟的孢子较未成熟的孢子存活期长。
(4)生理小种
四.影响种传真菌寿命的外在因素有
(1)种围生物的颉颃作用
(2)贮藏条件与种子含水量通常情况下温度高湿度大可缩短病原物的寿命;含水量高的种子为真菌的扩展和定殖提供有利条件。
(3)寄主情况稻恶苗病菌在棉花上因系统侵染而寿命13年,玉米种子上8年,水稻种子上2~3年。
Gloeotiniatemulenta引起黑麦草的盲种病,其菌丝体在种子内存活2年,大分生孢子在种子内外只能存活一个很短的时间(大约4个月)。
小麦粒线虫的幼虫在虫瘿内存活14年还能侵染麦苗,能存活28年。
12℃,潮湿环境,幼虫7-10天死亡。
第7章种传病害发生条件(种子染病的条件)
影响种子染病的条件包括病原条件、寄主条件和环境条件。
一、病原条件
1、病原来源:
玉米丝黑穗病的传染源是带菌种子和带菌土壤。
带菌种子与带菌土壤相比,土壤菌源侵染幼苗机率大。
2、病原数量:
相同条件下和一定的病原体数量限度内,接种量/接种体密度越大,病害发生越重,两者呈正相关关系。
3、菌源距离:
感病体与病原体来源的空间距离大,对病原体的稀释作用也大,植物接受病原体的数量少,病害发生程度也轻。
4、传播介体:
通过传播媒介传播的病害如病毒,传播介体数量直接影响病害的发生量。
大豆花叶病由蚜虫传播,有翅蚜出现早、多的年份花叶病重。
小麦蜜穗病病原细菌由小麦粒线虫传播,有传播介体存在的条件下才能侵染小麦,否则不发生病害。
水稻恶苗病与黑尾叶蝉数量有关。
开花期虫口密度大的种子带菌率高。
5、病原体的生活力:
有生活力的病原物才能对寄主有致病力。
6、生理小种:
种传病害新一代个体感病与否及感病程度与致病菌生理小种有关。
二、寄主条件
1、寄主抗性:
种子的抗性与植物其它部位的抗性不一定完全相同。
1)在玉米对丝黑穗病的抗性遗传中,通常认为下列父母本杂交组合中抗性最好的是母本、父本均抗病;其次是母抗、父感;再次是母感、父抗;最差的是母本、父本均感病。
2)大麦抗腥黑穗病:
抗病品种种子内的病菌菌丝体分布在合点上以及邻近维管束的薄壁组织内。
感病品种种子内的病菌菌丝体分布在珠被、糊粉层(蛋白层)、胚乳(内胚乳)和胚内。
菌丝体在抗病品种中生长发育受阻,最后菌丝体被消融。
3)小麦对腥黑穗病的抗性不是机械的抗侵入,而是通过分解菌丝体内的蛋白质来限制侵入到植物体内的菌丝的生长发育。
4)原有机械屏障、诱发机械屏障属形态学上的抗病性、原有化学屏障和诱发化学屏障属生理学上的抗病性。
2、开花习性:
开花习性影响植物感病部位接纳病原体数量。
涉及颖片开放程度、柱头外露率、花药残留时间和花期。
1)小麦开花时颖片开张的品种抗散黑穗病能力弱。
小麦开花时颖片不开张的品种抗散黑穗病能力强。
雄性不育的小麦,散黑穗病和麦角病较重(颖壳开度和开花时间较长)。
2)封闭式花(闭颖授粉习性强)的大麦品种对黑穗病的抗性强于开放式花的品种(散黑穗病属花器侵入,孢子必须落到花器内部才能侵入)。
3)小麦对赤霉病的抗性与花药残留时间有关,花药很快脱落的品种比残留时间久的品种病害轻。
原因:
A、花粉为病菌孢子萌发提供营养;B、残留花丝为病菌侵入花器提供桥梁。
4)麦角病:
小麦很少发病,黑麦很严重。
黑麦开花时柱头外露,柱头接纳病菌的数量和机率大大超过小麦。
5)水稻感染恶苗病的时期是开花期,花期长的品种病害严重。
3、花器构造
1)波兰小麦的颖片长,阻碍散黑穗病菌冬孢子进入花器内,发病少或不发病。
2)玉米抗黑粉病:
苞叶紧密完整的品种抗性强于苞叶松散不完整的品种。
3)棉花抗黑果病:
具苞片棉铃的品种抗性弱于无苞片棉铃的品种,苞片可提高种子周围的RH。
4、生育阶段
1)刚冒芽的马铃薯对马铃薯晚疫病的抗性最弱,但随幼芽的不断变长,其抗性会变强。
马铃薯株形直立的品种比匍匐型品种晚疫病轻。
马铃薯对晚疫病有三个时期,过敏期:
薯块发芽后大约1个月期间,受侵染后迅速严重发病,甚至幼芽烂死。
芽长1.2mm最不抗病。
生理抵抗期:
上期末至开花前,受侵染后发病轻。
芽长40~50mm抗性最强。
感病期:
开花期以后。
5、种子的萌发方式:
子叶出土型比子叶留土型更有利于种传细菌传播并侵染植物地上部分,但限制病原细菌侵染地下部器官。
2)人工接种病毒或蚜虫传毒时,莴苣花叶病,莴苣株龄越小,种子带毒率越高。
5、植株形态
1)小麦叶片上举与茎秆间的角度小的品种比叶片近于平伸的锈病轻(孢子着落于叶面的机会少且小气候的湿度低)。
2)叶片表面的蜡质层具减轻和延缓发病的作用。
3)柑桔溃疡病与柑桔气孔形态有关。
桔类气孔狭窄、开口较小,孔道内外难形成连续水道,病原细菌较难侵入。
橙类和柚气孔开口较宽,易被侵入。
十六.低糖病害有马铃薯和番茄的早疫病、各种萎焉病;高糖病害有各种锈病、霜霉病。
二十二、影响种传病害的环境因素有哪些?
(1)温度(土温、气温):
小麦腥黑穗病菌,土温较低有利于病菌侵染,而麦苗出土较慢,又增加了病菌侵染的机会。
棉花播种期土壤温度高角斑病严重。
原因是细菌的繁殖和侵染要求较高温度的土壤环境。
(2)湿度(土壤湿度、空气湿度)
小麦腥黑穗病:
土壤湿度过高过低都不利于病害发生。
燕麦散黑穗病:
土壤湿度过高引起缺氧,妨碍孢子萌发。
小麦腥黑穗病病害侵染需低温条件,冬麦迟播和春麦早播病害重;土壤湿度过高过低不利于小麦腥黑穗病病害发生;长日照利于病害发生;光照能增加孢子萌发率。
土壤含水量(%)
发病率(%)
土壤含水量(%)
发病率(%)
小麦腥黑穗病
20
22.3
燕麦散黑穗病
30
最严重
40
53.5
60
次之
80
10.7
80
发病最少
小麦幼苗根腐病
20
50.0
大麦坚黑穗病
40
轻
40-60
19.3~38.8
50
重
80
40.3
66
最重
小麦幼苗根腐病:
过干过湿对出苗都不利,加重病害发生。
大麦坚黑穗病:
喜湿。
高粱坚黑穗病:
土壤低温、潮湿、微酸环境有利于病害侵染。
高粱丝黑穗病:
喜低湿。
土壤湿度过高引起缺氧是影响燕麦散黑穗病的孢子萌发的重要原因。
土壤水分30%时最严重。
(3)土壤PH值
燕麦坚黑穗病:
中性土壤适宜病害发生。
PH
发病率(%)
品种1
品种2
4.6
4
12
7.4
64
92
8.6
8
18
种传真菌中,酸性土壤对禾本科镰刀菌较适合;中性土壤对立枯菌和秆黑粉菌适宜;碱性土壤对小麦全蚀病较适宜。
(4)光照强度
低光照下,番茄对灰霉病和烟草花叶病更加感病。
减少光照会增加植物对病毒病害的感染率。
低光照下,大麦对条纹病菌更加抗病。
小麦腥黑穗病:
光照能增加孢子萌发率;
小麦散黑穗病:
光照能抑制冬孢子萌发率;
(5)光质
(6)光周期
小麦腥黑穗病:
长日照利于病害发生。
日照(h)
侵染率(%)
品种1
品种2
8
1
2
10-11
18
18
24
64
33
第8章种子病害的检测
一.种子病害检验(种子带病检验):
是指在室内外采用植物病理学专用手段或其他手段,检查种子(包括苗木、块根、块茎、插条等)内外携带致病菌的情况,并根据检查结果提出处理意见。
二.种子病害检验与种子质量检验的不同之处:
种子病害检验时,每次取新的平均样品前,对所用过的扦样器、分样器及其它器具等,须经火焰消毒或充分洗涤、烘干等其他无菌手续,以防一批样品污染另一批样品,保证结果的正确性。
三.直接肉眼检验的适用范围:
混杂在种子间的病原体;污染病菌孢子量多的种子;感染后有明显症状的病粒。
四.洗涤检验:
用于检查种子表面带有各种孢子(厚垣孢子、冬孢子、卵孢子、分生孢子)和颖壳带线虫。
五、漏斗分离检验主要用于检验种子所携带的线虫。
六、噬菌体检测法是为检验细菌病害而设计的。
测定种子样品中有无病原细菌存活,应将沉淀液经抗血清处理,再测定其噬菌体数量,或进一步做噬菌体的增殖试验。
血清学反应检验是利用抗原和抗体的反应,用以检测种传细菌和病毒的方法。
七、酶联标记免疫吸附测定法(ELISA法):
该方法的基本原理是把抗原、抗体的特异性免疫反应和酶的高效灵敏的催化反应有机地结合起来,即通过化学的方法将酶标记的抗体起反应,形成酶标记的免疫复合物。
结合在免疫复合物上的酶,在遇到相应的底物时,就催化无色的底物生成有色的产物。
这样就可根据颜色的深浅和有无,进行定性、定量分析。
具体为:
①使抗原或抗体结合到某种固相载体(如聚苯乙烯微量反应板)表面,并保持其免疫活性。
②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。
在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。
加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。
ELISA法以双抗体夹心法在植物病毒抗原测定上应用最广泛。
其方法原理是先把抗体吸附于载体表面,然后把具有特异性抗原的样品加入,使之与抗体结合,又加入用酶标记的特异性抗体,使之再结合在抗原上,最后,再加入该种酶的作用底物,因底物受酶的作用而分解,所以,从溶液的色泽变化可用肉眼或比色计(405nm)来判断,因而可作定量分析。
八、水稻白叶枯病的病菌检测方法有:
(1)隔离种植观察;
(2)保湿培养观察;(3)直接分离病原细菌;(4)免疫学检测技术;(5)噬菌体检测技术。
九、吸水纸检测法可检测种子表面带菌和种子内部带菌,检验种子内部带菌时种子先进行表面
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