林木病理学精品课程.docx
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林木病理学精品课程.docx
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林木病理学精品课程
安徽农业大学林学与园林学院
2012年11月
实验注意事项
林木病理学实验的目的是使学生从感性上认识林木病害的症状、病害发生规律、主要病原真菌、细菌、病毒、线虫的形态特征等相关知识,掌握林木病害诊断、病原分离、纯化、接种、鉴定等林木病理学研究的常规方法和技术,提高学生的实验能力和实际动手能力,同时,结合实验课程内容培养学生科学的思维方法通过观察不同材料,进行各项操作,以加深和巩固学生对教学内容的了解和掌握。
为了达到较好的实验效果,要求学生在实验前后应做到:
一、进入实验室必须遵守纪律,保持室内整洁安静,不得大声喧哗,不得随意拖动仪器及设备,节约实验材料,注意安全。
二、每次实验前必须仔细阅读实验指导书和有关的内容,以保证实验顺利进行。
三、学生应自备实验指导书、实验报告纸、HB和2H绘图铅笔、直尺、小刀和橡皮等绘图用具。
四、实验时树立严谨的科学态度,完全按照实验指导书所列操作步骤认真客观地进行实验和观察。
五、按时完成实验报告,要求文图清晰、工整、比例适中、布局合理,但不允许虚构或抄袭。
六、实验完毕时,请将仪器放回原处,擦净桌面,收拾整齐。
离开实验室前注意关门、窗、水、灯等,并用肥皂洗手。
七、每个学生的实验成绩由实验过程表现和实验报告成绩两部分组成,实验成绩将带入期末总成绩。
八、需要进一步培养观察的实验材料应写好标签,注明实验内容、日期和实验人员姓名,以防混淆或丢失。
前言
《林木病理学实验》是《林木病理学》的实验教学部分。
根据学校对本科生教学计划的调整,本实验的实验内容和课时也做了相应的调整。
该课程的教学目的是以植物病理学和其它关学科知识为基础,使学生从感性上植物病害的症状、病害发生规律、主要病原菌物、细菌、病毒、线虫等的形态特征等相关知识,从而追溯引起林木病害发生的原因及过程。
要求学生掌握林木病害诊断、显微绘图、制片技术、病原分离、纯化、接种、鉴定等林木病原学研究的常规方法和技术,提高学生的实验能力和实际动手能力,同时,结合实验课程内容培养学生科学的思维方法,为将来的研究工作打下一定的基础。
本实验根据教学计划、教学要求及实验条件等,共设置了10个实验,每个实验2个学时。
本实验指导是在以往教学的基础上整理修改编写的,在编写过程中,参考了以往的一些实验指导及网上的教学资源,在此一并表示感谢!
实验一林木病害症状类型的观察及临时玻片标本制作
一、实验目的
1、通过林木病害症状的观察,学习描述和记载林木病害症状的方法,掌握林木病害的症状类型、特点以及了解症状在病害诊断中的作用。
加深对林木病害的感性认识,认识林木病害的主要症状类型,为进一步诊断和研究林木病害打下坚实基础。
2、研究林木病害病原的形态、病原物分类鉴定、受病林木组织结构病变等都需要在显微镜下观察,这就要求将材料制成适当的显微玻片标本。
因此,徒手制片技术也是林木病理学研究的重要手段之一。
通过本次实验学习徒手制片技术,为以后开展相关研究奠定制片技术基础。
二、实验内容与方法
(一)病状类型
病状是植物体内发生一系列外部观察不到的生理生化的变化,继而细胞和组织开始发生病变,并出现肉眼可见到的变化这就是
1.变色:
植物受到外来有害因素的影响后,常导致色泽的改变,如褪色、条点、白化、色泽变深或变浅等,统称为变色。
主要表现有:
1)褪绿或黄化:
褪绿和黄化是由于叶绿素的减少而叶片表现为浅绿色或黄色。
如植物的缺铁、缺氮等。
2)花叶与班驳:
如苹果花叶病、月季花叶病、黄杨花叶病等。
3)变红色或紫色,如玉米植物生病后,病部细胞内的叶绿素被破坏或形成受到抑制而呈现出不正常的颜色。
变色以叶片变色为最常见,通常为全株性的,叶片颜色深浅不匀、深绿浅绿或黄绿相嵌,有时还出现红紫等颜色。
花朵变色在林木中常见的有郁金香碎锦病,缺素和病毒侵染都可以形成这种症状。
观察标本:
苹果花叶病月季花叶病大叶黄杨花叶病杨树花叶病
2、坏死和腐烂:
坏死是由于受病植物组织和细胞的死亡而引起的。
1)斑点:
根、茎、叶、花、果实的病部局部组织或细胞坏死.产生各种形状和大小颜色不同的斑点,如大叶黄杨叶斑病、月季黑斑病、山柳漆斑病、柿(黑枣)角斑病、柿园斑病。
2)枯死:
芽、叶、枝、花局部或大部分组织发生变色、焦枯.死亡。
如丁香疫病、核桃枝枯病。
3)穿孔和落叶落果:
在病斑外围的组织形成离层,使病斑从健康组织中脱落下来,形成穿孔,如桃细菌性穿孔病等;有些植物的花、叶、果等受害后,在叶柄或果梗附近产生离层而引起过早的落叶、落果等。
4)疮痂:
果实、嫩枝、块茎等的受病组织局部木栓化,表面粗糙,病部较浅,如柑桔疮痂病、梨黑星病等。
5)溃疡:
病部深入到皮层,组织坏死或腐烂,病部面积大,稍凹陷,周围的寄主细胞有时增生和木栓化,多见于木本植物的枝干上的溃疡症状。
如杨树溃疡病、杨树腐烂病、柑桔溃疡病、番茄溃疡病等。
观察标本:
苹果腐烂病、杨树腐烂病。
6)果实腐烂:
如苹果炭疽病。
观察标本:
苹果炭疽病。
3、萎蔫:
植物茎部腐烂,根部坏死都能引起萎蔫。
典型的萎蔫是指植物根部或茎部的维管束组织受到侵染而发生的萎蔫现象根据受害的部位不同,萎蔫可以是全株性的或是局部性的。
观察标本:
落叶松枯梢病,苗木立枯病;
4、畸形:
感病植物受病原物刺激,细胞和组织过度增生或发育不良,形成肿瘤.丛枝、卷叶、扭曲、矮化等
观察标本:
根癌病、泡桐丛枝病、枣疯病、桃缩叶病
(二)病征类型
病征是指在植物病部形成的、肉眼可见的病原物的结构。
识别各种不同类型的病征对诊断病害很有帮助。
细菌性病害,通常是在受伤的病部出现粘稠的液体――菌脓。
但真菌在病部产生的病征较复杂依其形态不同,可区分为多种类型:
大致分为霜状物、粉状物、霉状物、锈状物、小黑粒和线状物,块状物、伞状物等,并常以这些特征来命名这些病害。
有些类型的病征可根据其他特征进一步区分,如粉状物可根据其色泽不同,分为白粉、黑粉等。
霉状物:
瓜类腐霉病、柑桔青霉病、紫薇煤污病、夹竹桃煤污病
粉状物,山楂白粉病、黄栌白粉病、苹果白粉病、丁香白粉病、小麦黑粉病
锈状物:
牵牛花白锈病,玫瑰锈病、苹果锈病、马兰锈病
煤污状物,茶煤污、桑污叶病、油茶煤污病。
块状物:
菌核,白绢菌引起的丝核立枯病、白绢病
线状物:
果树根朽病、根状菌索、紫纹羽病
点状物:
病原真菌在病部产生的黑色、褐色小点,多为真菌的繁殖体
观察标本:
核桃枝枯病、苹果腐烂病、月季黑斑病、杨树腐烂病
伞状物、马蹄状物:
病原真菌在病部产生的大型子实体,多为担子菌亚门,如木耳、银耳、平茹、灵芝、草菇、松白腐病的子实体。
脓状物:
细菌病害特有病症
(三)徒手切片法
欲观察受病组织病变,病菌侵入和寄主体内扩展过程,以及埋生在基物内真菌子实体的形态结构等,都需将有关材料切成薄片,进行镜检,并贴上标签(如图一所示)。
徒手切片是最常用的简便易行的方法,不需要特殊的设备,而且节省时间,切成的片子不仅可作临时观察,也可进一步制成永久性玻片标本,。
徒手切片的基本用具是剃刀或刀片。
切片时先选取材料并作适当的修整,以左手的食指和姆指捏住材料,中指顶住材料下端,使材料上端突出于手指以上2—3毫米。
右手握稳刀,从左向右后方斜向切割。
注意刀口必须以材料面垂直。
否则所得切面不正。
同时双手不应紧靠身体,而是要活动自如。
用臂力均匀地沿刀口后部起拉向前方,连续切割4—5片后,用毛笔蘸水轻轻沿刀口取下,放入盛有水的浅玻皿中,在此过程中左手握着的材料不要放下,否则再切时难按原位置拿材料,此外,在切片过程中,必须常用毛笔蘸水湿润材料,以免材料干涸不便切割。
对于过于柔软或较薄的材料,可以夹在“夹持物”中,进行切片更为方便。
新鲜胡萝卜和马铃薯块都可作“夹持物”用。
实验室中通常将通草、接骨木或向日葵的茎髓,剪成适当大小,浸于70%酒精中备用。
切割一定数量的薄片后,用移置环在浅玻皿中选取合用的材料薄片,放在载玻片的水滴中,镜检合格者即酒精灯上将水烘干并摆正材料,然后加一滴乳酚油或其浮载剂;放在展片台上略加热,镜检如无气泡,即可小心加盖片,用吸水纸吸除多余的浮载剂,最后贴好标签,平放于切片板上,待干燥适宜时封固。
徒手切片的缺点是对于微小或过大,柔软、多汁、肉质及坚硬的材料不易切取,也难制成连续切片,此外切片的厚薄也难一致。
切片机切片即可克服这些缺点。
病名:
学名:
制片人:
时间:
图一切片的标签制法
三、作业
1、根据实验室标本的观察以及幻灯片、照片等观察到的不同症状类型的病害,扼要描述其症状特点,将观察结果填入下表(要求至少描述五种病害)
寄主名称
病害名称
发病部位
病状类型
病症类型
2、每人至少上交一个临时玻片标本(贴好标签)。
实验二真菌的营养体、菌丝组织体及繁殖体
一、目的要求
1、熟悉病原真菌营养体的形态特征。
2、理解真菌菌丝组织体的变形体的主要类型与作用、繁殖特点及孢子类型。
二、实验方法
1、通过显微镜观察玻片标本;
2、借助放大镜或肉眼观察盒装标本。
三、实验内容
(一)病原真菌的营养体
真菌的生长和发育先是经过一定时期的营养生长阶段,然后进入繁殖阶段,真菌营养生长阶段的菌体称为营养体。
典型的营养体为纤细和多枝的丝状体,常交织成团,称为菌丝体,每一根丝状体称为菌丝。
1、无隔菌丝:
低等真菌的菌丝通常无隔膜,是一个单细胞、多核、带分枝的丝状长管。
观察匍枝根霉或毛霉的纯培养菌丝。
方法是:
在干净的载玻片中央滴一滴蒸馏水,用解剖针挑取试管(平皿)内菌丝少许置于水滴中,然后轻轻盖上玻片置于显微镜下观察。
2、有隔菌丝:
除低等真菌外,大多数真菌的菌丝都是有隔膜的,将菌丝分成多个细胞,有的真菌在生横隔处稍显细溢。
用同样的方法,挑取试管(平皿)半知菌纯培养菌丝制成临时玻片标本镜检。
(二)病原真菌的菌丝组织体
真菌的菌丝体在一定的条件下可以形成特殊的结构,如菌核、子座和菌索等,称为菌丝体的变态。
这些结构在真菌的繁殖、传播和抵抗不良环境方面有很大的作用。
1)菌核菌核是由菌丝紧密交织而形成的休眠体,呈颗粒、块状、球形或不定形。
其大小不一,小的如菜籽、鼠粪,大的像拳头。
初为白色或浅色,成熟后呈褐色或黑色。
菌核对高温、低温和干燥的抵抗力很强,是真菌渡过不良环境的结构。
当环境条件适宜时,菌核可以萌发产生菌丝体或长出产生孢子的结构,但一般不直接产生孢子。
2)子座子座是菌丝或菌丝与部分寄主组织紧密结合形成的,不经过休眠直接产生1至多个子实体。
子座形状多样,一般为垫状,也有柱状、棒状、头状等。
子座成熟后,在其表面或内部形成产生孢子的结构,子座也有渡过不良环境的作用。
3)菌索一些高等真菌的菌丝体相互缠绕形成的绳索状物,外形与高等植物的根系相似,也称为根状菌索。
菌索在环境条件不适宜时呈休眠状态,当环境条件适宜时可以恢复生长,起蔓延和侵入的作用。
(三)病原真菌的繁殖体
绝大多数真菌经过一定的营养生长后便转入繁殖阶段,真菌的繁殖方式分无性和有性两种,分别产生无性孢子和有性孢子,孢子是基本繁殖单位。
真菌的无性孢子相当于高等植物的块茎、鳞茎、球茎等无性繁殖器官;有性孢子相当于高等植物的种子。
1、无性繁殖体
无性繁殖指不经过性细胞或性器官的结合直接从营养体上产生孢子,这种孢子称为无性孢子。
如果条件适宜,在一个生长季节中无性孢子可以重复产生多次,在较短的时间内使真菌迅速繁殖、蔓延和扩散,所以真菌的无性孢子是寄主植物生长期间的主要侵染来源。
常见的无性孢子有以下几种:
1)游动孢子产生于孢子囊中的内生孢子,球形、洋梨形或肾形,有1~2根鞭毛,能在水中游动。
鞭毛菌亚门的真菌常产生这种类型的孢子。
2)孢囊孢子产生于孢子囊中的内生孢子,没有鞭毛,不能游动。
接合菌亚门的真菌常产生这种无性孢子。
3)芽孢子细胞以出芽方式形成的孢子。
细胞首先产生小突起并逐渐膨大,继而与母细胞相连处的细胞壁缢缩,最后脱离母细胞独立成为新个体。
以这种方式形成的孢子,称为芽孢子,如芽殖酵母菌的孢子。
4)厚垣孢子菌丝中个别细胞膨大,细胞壁变厚,细胞质浓缩形成圆形或椭圆形的厚壁孢子,称为厚垣孢子。
它产生在菌丝的中间或顶端,有的表面具刺或瘤状突起。
厚坦孢子抗逆性强,能抵抗不良的环境条件,具有越冬的功能。
5)分生孢子由菌丝分化长出特殊的产孢短枝(分生孢子梗),在其顶端或侧面形成的孢子,叫分生孢子。
大多数分生孢子是外生的,成熟后脱落,由风或雨水传播;分生孢子的种类很多,它们的形态、大小、色泽、形成和着生的方式都有很大的差异。
不同真菌的分生孢子梗,有散生的、丛生的,或聚生在一定的组织结构中。
产生分生孢子梗和分生孢子的垫状、盘状或球状(或瓶状)结构,分别称为分生孢子座、分生孢子盘或分生孢子器。
分生孢子是真菌最常见的一种无性孢子。
2、有性繁殖体
真菌的有性繁殖是通过性细胞(配子)或性器官(配子囊)结合而进行的,这个过程要经历质配、核配和减数分裂三个阶段,由此产生的孢子称为有性孢子。
有性孢子可分为两大类型:
一类是两性细胞结合后产生细胞核为双倍体的厚壁休眠孢子,如卵孢子和接合孢子。
另一类是两性细胞结合产生细胞核为单倍体的薄壁非休眠孢子,如子囊孢子和担孢子。
常见的有性孢子有下列四种:
1)卵孢子是由两个异形的配子囊结合而形成的,小的配子囊称为雄器,大的配子囊称为藏卵器,两者接触后雄器的细胞质和细胞核经受精管进入藏卵器,通过质配和核配,形成细胞核为双倍体的厚壁孢子。
鞭毛菌亚门真菌产生的有性孢子为卵孢子。
2)接合孢子由两个同形的配子囊结合而形成的厚壁孢子。
接合菌亚门真菌产生的有性孢子为接合孢子。
3)子囊孢子由两个异形的配子囊雄器和产囊体结合而成。
两者交配后产囊体上长出许多丝状分枝的产囊丝,后由产囊丝发育成为子囊,子囊内的两性细胞核结合后,通过1次减数分裂和1次有丝分裂,一般在子囊内形成8个细胞核为单倍体的子囊孢子。
子囊圆筒形、棍棒形或球形,子囊孢子单细胞或多细胞,形态多样。
子囊菌亚门真菌产生的有性孢子是子囊孢子。
4)担孢子一般没有明显的两性器官的分化,直接由性别不同的菌丝相互结合形成双核菌丝,双核菌丝的顶端细胞膨大形成担子,或双核菌丝细胞壁加厚形成冬孢子。
担子或冬孢子萌发后形成的担子顶端长出4个小梗,每个小梗顶端产生1个外生的、细胞核为单倍体的担孢子。
担子大多为棍棒形,担孢子圆筒形、椭圆形或香蕉形。
担子菌亚门真菌产生的有性孢子为担孢子。
四、标本观察
(一)玻片标本
1.葡枝根霉(无隔菌丝、孢囊孢子)
2.柑橘青霉病(有隔菌丝、分生孢子)
3.酵母菌(单细胞、芽孢子)
4.镰孢(厚垣孢子)
5.葡萄霜霉病菌(孢囊梗、孢子囊、孢囊孢子)
6.曲霉(分生孢子、有隔菌丝)
7.小麦赤霉病(分生孢子座、分生孢子——镰刀状)
8.芹菜斑枯病菌(分生孢子器、分生孢子)
9.葡萄炭疽病菌(分生孢子盘、分生孢子)
10.十字花科根肿病:
合子或体眠孢子囊
11.栗白发病菌(卵孢子)
12.梨头霉属(接合孢子、无隔菌丝)
13.桃缩叶病菌:
裸生子囊及孢子
14.赤霉菌:
子囊壳及子囊孢子
15.桑里白粉病(闭囊壳及孢子)
16.盘菌(子囊盘及孢子)
17.杨树溃疡病:
子囊座(腔)及子囊孢子
18.伞蕈(菌褶及担孢子)
19.马勃(封闭担子及担孢子)
(二)盒装标本
1.菌核(苹果/油茶白绢病,油菜菌核病、茯苓)
2.菌索(茶枝线腐病,白绢病)
3.菌膜(板栗、阔叶树等膏药病)
4.子座(柳漆斑病、三角枫等、竹赤团子病)
5.散生的分生孢子梗及孢子:
(银杏叶枯病、广玉兰斑枯病)
6.分生孢子梗丛及分生孢子:
(大叶黄杨叶斑病,紫荆角斑病)
7.孢梗束及分生孢子:
(葡萄褐斑病)
8.分生孢子器及分生孢子:
(桂花叶枯病、板栗疫病)
9.分生孢子盘及分生孢子:
(苹果轮斑病、枣炭疽病)
10.闭囊壳及子囊孢子:
(臭椿、枫杨、桑白粉病)
11.子囊盘及子囊孢子:
(松落针病、杜鹃叶枯病)
12.担子果及担孢子:
(木腐菌、香菇、灵芝或木耳等)
五、作业:
1.真菌无性型由哪几种菌丝组织体,各具何种功能?
2.绘制无隔菌丝和有隔菌丝形态图。
3.绘制孢子囊和孢囊孢子,分生孢子梗及分生孢子
实验三细菌、植原体、寄生性种子植物等及所致的植物病害
一、实验目的
1.了解植物病原细菌、植原体、寄生性种子植物及线虫所致病害症状特点。
2.学习镜检细菌的基本方法。
二、实验方法
1.通过显微镜观察玻片标本。
2.借助放大镜或肉眼观察盒装标本。
三、实验内容
(一)细菌的形态及培养性状观察
1、观察细菌三型(杆菌、球菌和螺旋菌)玻片标本,注意菌体的形状、鞭毛数量及着生位置。
2、观察细菌的培养性状,注意菌落(或菌苔)的形状、颜色、边缘形状、表面是否光滑、隆起程度、透明度、粘度、是否分泌色素等。
(二)革兰氏染色反应
革兰氏染色法,是细菌学中一种重要的鉴别染色法,它可将全部细菌区别为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类。
细菌经结晶紫着染后,用媒染剂碘液处理,再用酒精脱色,最后用番红或复红复染。
若细菌保持初染时的紫色,称革兰氏阳性反应(G+);若被酒精脱色而染成复染的红色,则称革兰氏阴性反应(G-)。
革兰氏染色的方法步骤如下:
1、取幼龄的黄单胞杆菌和棒杆菌斜面培养菌种,以无菌操作法分别挑两种菌少许放入统一载玻片中央的水滴中,轻轻搅动水滴,使细菌菌体散开,然后用一载玻片的一端靠于细菌液滴左侧,再向右侧拉薄成一均匀薄层。
2、将薄片放在空气中自然干燥,或将薄片置于火焰高处微热烘干(勿直接火烧以免菌体变形)。
3、将已干的薄片有菌面朝上,迅速通过火焰2~3次,使细菌杀死固定于玻片上。
4、滴一滴结晶紫染色液染色一分钟,再用清水冲洗多余染液。
5、滴一滴碘液媒染一分钟,后用清水冲洗。
6、用95%酒精数滴脱色,并轻轻侧动玻片,倾斜载玻片,使脱色剂流掉,直至无紫色继续流出为止(大约半分钟),立即水洗,用吸水纸吸干。
7、加2~3滴番红液染色10秒或石炭酸复红液染色30~60秒,然后水洗,放置干燥处。
8、滴香柏油1~2滴,在油镜下观察,被染成紫色者为革兰氏阳性细菌,被染成红色者为革兰氏阴性细菌。
1.细菌是单细胞的原核生物,有细胞壁、细胞质和细胞器,有的细菌有鞭毛、荚膜和芽孢的结构。
细菌个体微小,往往需制成涂片并经染色后,在显微镜油浸的物镜下观察。
植物病原细菌都是杆状菌,其分属依据是鞭毛数及着生方式、格兰氏染色反应、在培养基上长成的菌落色泽、形状和生理生化反应。
一般细菌病害病斑或病部周围组织呈水渍状,在潮湿条件下可在病部溢出菌脓,干后形成菌胶。
菌脓在清晨或潮湿天气较易观察到。
将病部特别是病键交接处切片镜检时,一般可见到大量细菌从病部(特别是维管束向外涌出),像烟囱冒出的烟雾,这种菌溢现象是诊断细菌病害的简便而可靠的方法。
2.植物菌原体由原来的类菌原体(Mycoplasm-likeorganism,MLO)更名而来。
1967年日本学者土居养二研究桑萎缩病时首先发现,其形态结构与动物菌原体(支原体)相似,故曾命名为类菌原体。
目前已被报道植物菌原体可危害300多种植物。
在林木上已发现的病害有泡桐丛枝病、刺槐丛枝病、桑萎缩病、枣疯病、苦楝丛枝病、杉树黄化丛枝病。
植物菌原体是介于细菌和病毒之间的一类原核生物,难以人工培养,菌体为椭圆形或圆形,圆形的直径在100~1000nm之间,椭圆形的大小为200~300nm。
还存在其它形状的菌体。
没有细胞壁,在细胞质外具有3层结构的单位膜,厚度约为10nm。
其繁殖方式有二均分裂、出芽生殖或老细胞内新个体释放等形式。
3.在种子植物中,有少数种类由于缺乏叶绿素或因为某些器官退化而演变成寄生物。
寄生性种子植物都是双子叶植物,全世界大约有2500种以上,分属于12个科,其中寄生在林木上的主要是桑寄生科(Loranthaceae)和旋花科(Convolvulaceae)。
根据寄生程度,分为半寄生和全寄生两类。
半寄生种子植物的叶和茎都为绿色,含有叶绿素,能进行光合作用,但没有正常的根,而以吸根伸入寄主木质部,从寄主体内吸取水分和无机盐类,如桑寄生和槲寄生等。
全寄生种子植物的叶退化成鳞片状或没有叶片,不含叶绿素,不能进行光合作用,依靠吸根从寄主植物体内吸收无机和有机养分,如菟丝子等。
危害林木的有下列几类;
桑寄生属(Loranthus):
常绿小灌木,丛生。
高一般为50~100cm左右。
叶对生、互生或轮生,雌雄同花,子房一室。
我国有30多种。
常见的两个种为桑寄生和樟寄生。
桑寄生(L.parasiticus):
嫩枝和幼叶长有黄褐色星状绒毛,老叶光滑无毛,果呈球状,红色。
危害桃、李、杏、柑桔、梨、栆、油茶和油桐等植物。
樟寄生(L.yadoriki):
与桑寄生不同之处是老叶背面有星状绒毛。
果椭圆形,成熟后黄色。
主要危害樟、油茶、枫、板栗和麻栎等。
槲寄生属(Viscum):
常绿小灌木,高约40cm左右。
呈二叉状分枝;叶对生,常退化成鳞片状。
雌雄异株,花淡黄色。
浆果球形,黄色或橙红色。
危害杨、柳、梨、油桐和榆树等。
4.植物寄生线虫是又一类重要病原物。
除直接致病外,有的线虫可以传带病毒,或造成植物伤口以利于其它病原微生物侵染。
植物线虫主要在寄主的根际或根内、茎、叶和种子内生存,有的形成虫瘿(如根结线虫)。
引起植物病害的症状主要是营养不良、生长衰弱或畸形,从而降低产量或品质。
植物寄生线虫是病原物中个体较大的,但是多数仍不能用肉眼看到或看清楚,需用低倍显微镜观察。
线虫虫体分头、颈、腹、尾4部分。
头部有唇、口腔、吻针和侧器;颈部包括食道、神经环和排泄孔;腹部有肠管和生殖器官,后端有肛门;尾部有侧尾腺和尾腺。
分辨科、属、种的主要依据是体形、食道、头和尾部的主要形态特征。
5.病毒颗粒很小,必须用电子显微镜才能观察到。
植物病毒颗粒可以分为圆球状(或等边多面体)、炮弹状、长杆状和线条状4种。
这些在课堂和本次实验课上只能通过观看电镜照片或幻灯片来了解。
植物病毒病的主要症状类型有花叶、变色、条纹、枯斑或环斑坏死、畸形。
应该注意:
一方面这些症状类型的分辨在病毒病鉴定上具有比起它病害更重要的意义,另一方面在实际观察中,也会发现同一种病毒病在发病过程中或在不同环境条件下会有不同的表现(不同病状甚至隐症)。
病毒病多为系统性侵染,没有病征,易与非侵染性病害相混淆,往往需要通过一定方式的传染试验证实其传染性。
三、实验材料及用具
植物病原细菌、病毒和寄生线虫所致病害症状标本、显微镜、玻片、酒精灯、培养皿、化学试剂(碱性品红、苯酚、亚甲蓝、氢氧化钾、酒精)。
四、实验步骤
观察下列病害标本,区分各类症状。
(一)玻片标本
1.细菌三型2.根癌土壤杆菌3.枯草芽孢杆菌4.苏云金杆菌5.褐球固氮菌6.美洲板口线虫7.地衣子囊盘切片
(二)盒装标本
1、细菌病害:
(女贞细菌性叶斑病,桃叶穿孔病,核桃黑斑病,桃根癌病,猕猴桃细菌性溃疡病)
2、植原体:
(桑萎缩型萎缩病,枣疯病,泡桐丛枝病)
3、寄生性种子植物:
a、桑寄生科:
阔叶树桑寄生害,油茶樟寄生害,南方铁杉华中桑寄生害;b、菟丝子科:
林木日本菟丝子害,大豆中国菟丝子害
4、线虫:
泡桐根结线虫
5、藻类:
油茶藻斑病,
6、螨类:
葡萄毛毡病,枫杨毛毡病
7、地衣:
茶树地衣害
(三)制作细菌病害标本并观察,(取细菌性病害的标本,最好是新鲜的,在病斑边缘或病健交接处切开,或将较小的叶段移到玻片上的水滴里,加盖玻片,稍停片刻在显微镜下观察菌溢现象。
)
3.涂片——固定——染色观察细菌形态
1)涂片取一干净的载玻片,在中央偏左处滴一滴无菌水,然后用接
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