各种缓冲液的配制方法大全.docx
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各种缓冲液的配制方法大全
磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液
0.2mol/L
0.1mol/L
0.2mol/L
0.1mol/L
PH
Na2HPO4
柠檬酸
pH
Na2HPO4
柠檬酸
(毫升)
(毫升)
(毫升)
(毫升)
2.2
0.40
10.60
5.2
10.72
9.28
2.4
1.24
18.76
5.4
11.15
8.85
2.6
2.18
17.82
5.6
11.60
8.40
2.8
3.17
16.83
5.8
12.09
7.91
3.0
4.11
15.89
6.0
12.63
7.37
3.2
4.94
15.06
6.2
13.22
6.78
3.4
5.70
14.30
6.4
13.85
6.15
3.6
6.44
13.56
6.6
14.55
5.45
3.8
7.10
12.90
6.8
15.45
4.55
4.0
7.71
12.29
7.0
16.47
3.53
4.2
8.28
11.72
7.2
17.39
2.61
4.4
8.82
11.18
7.4
18.17
1.83
4.6
9.35
10.65
7.6
18.73
1.27
4.8
9.86
10.14
7.8
19.15
0.85
5.0
10.30
9.70
8.0
19.45
0.55
Na2HPO4分子量=14.98,0.2mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量=178.05,0.2mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量=210.14,0.1mol/L溶液为21.01克/升
20%盐酸溶液如何配置:
取浓盐酸(质量百分比浓度为36.5%)一个体积(如100毫升),加入到96.5毫升水中就可以了。
36.5%*100*1.17=20%*mm=213.5(克)所需水的质量为;213.5-117=96.5克,也就是96.5毫升水。
磷酸盐缓冲液配制方法(PB)
磷酸盐缓冲液(PhosphateBuffer,PB
)
试剂:
NaH2PO4·2H2O
Na2HPO4·12H2O
配制方法:
配制时,常先配制
0.2mol/L
的NaH2PO4和0.2mol/L
的Na2HPO4,两者按一定比例
混合即成0.2mol/L
的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的
PB和PBS。
(1)0.2mol/L
的NaH
2PO4;称取NaH2PO4.2H2O31.2g(
或NaH2PO4·H2O27.6g)加重蒸
水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L
的Na
2HPO4:
称取Na2HPO4.12H2O
71.632g
(或Na2HPO4·7H2O53.6g
或Na2HPO4·2H2O35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(3)0.2mol/L
pH7.4
的PB的配制:
取19ml
0.2mol/L
的NaH2PO4
和81ml0.2mol/L
的
Na2HPO4·12H2O,充分混合即为
0.2mol/L
的PB(pH约为7.4
~7.5
)。
若pH
偏高或偏低,可通过改
变二者的比例来加以调整,室温保存即可。
0.2mol/L
磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)
pH
0.2mol/L
NaH2PO4(ml)
0.2mol/LNa2HPO4(ml)
5.7
93.5
6.5
5.8
92.0
8.0
5.9
90.0
10.0
6.0
87.7
12.3
6.1
85.0
15.0
6.2
81.5
18.5
6.3
77.5
22.5
6.4
73.5
26.5
6.5
68.5
31.5
6.6
62.5
37.5
6.7
56.5
43.5
6.8
51.0
49.0
6.9
45.0
55.0
7.0
39.0
61.0
7.1
33.0
67.0
7.2
28.0
72.0
7.3
23.0
67.0
7.4
19.0
81.0
7.5
16.0
84.0
7.6
13.0
87.0
7.7
10.5
89.5
7.8
8.5
91.5
7.9
7.0
93.0
8.0
5.3
94.7
0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)如何配制?
PH3-10缓冲溶液的配制方法
1.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液
pH
0.2mol/L
0.1mol/L
pH
0.2mol/L
0.1mol/L
2
HPO
4
柠檬酸
2
4
柠檬酸
Na
NaHPO
(毫升)
(毫升)
(毫升)
(毫升)
2.2
0.40
10.60
5.2
10.72
9.28
2.4
1.24
18.76
5.4
11.15
8.85
2.6
2.18
17.82
5.6
11.60
8.40
2.8
3.17
16.83
5.8
12.09
7.91
3.0
4.11
15.89
6.0
12.63
7.37
3.2
4.94
15.06
6.2
13.22
6.78
3.4
5.70
14.30
6.4
13.85
6.15
3.6
6.44
13.56
6.6
14.55
5.45
3.8
7.10
12.90
6.8
15.45
4.55
4.0
7.71
12.29
7.0
16.47
3.53
4.2
8.28
11.72
7.2
17.39
2.61
4.4
8.82
11.18
7.4
18.17
1.83
4.6
9.35
10.65
7.6
18.73
1.27
4.8
9.86
10.14
7.8
19.15
0.85
5.0
10.30
9.70
8.0
19.45
0.55
NaHPO
分子量=14.98,0.2mol/L溶液为28.40克/升。
2
4
Na2HPO4·2H2O分子量=178.05,0.2mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量=210.14,0.1mol/L溶液为21.01克/升。
2.柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液
pH
钠离子浓度
柠檬酸(克)
氢氧化钠(克)
盐酸(毫升)
最终体积
(mol/L)
C6H8O7·H2O
NaOH97%
HCl(浓)
(升)①
2.2
0.20
210
84
160
10
3.1
0.20
210
83
116
10
3.3
0.20
210
83
106
10
4.3
0.20
210
83
45
10
5.3
0.35
245
144
68
10
5.8
0.45
285
186
105
10
6.5
0.38
266
156
126
10
①
使用时可以每升中加入
1克克酚,若最后pH值有变化,再用少量
50%氢氧化钠溶
液或浓盐酸调节,冰箱保存。
3.甘氨酸–盐酸缓冲液(
0.05mol/L)
X毫升0.2mol/L甘氨酸+Y毫升0.2mol/L
HCI,再加水稀释至
200毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
2.0
50
44.0
3.0
50
11.4
2.4
50
32.4
3.2
50
8.2
2.6
50
24.2
3.4
50
6.4
2.8
50
16.8
3.6
50
5.0
甘氨酸分子量
=75.07,0.2mol/L甘氨酸溶液含
15.01克/升。
4.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(
0.05mol/L)
X毫升0.2mol/L
邻苯二甲酸氢钾+0.2mol/LHCl,再加水稀释到
20毫升
pH(20℃)
X
Y
pH(20℃)
X
Y
2.2
5
4.070
3.2
5
1.470
2.4
5
3.960
3.4
5
0.990
2.6
5
3.295
3.6
5
0.597
2.8
5
2.642
3.8
5
0.263
3.0
5
2.022
邻苯二甲酸氢钾分子量
=204.23,0.2mol/L邻苯二甲酸氢溶液含
40.85克/升
5.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液
(0.1mol/L)
pH0.1mol/L
0.1mol/L
pH
0.1mol/L
0.1mol/L
柠檬酸
(毫升)
柠檬酸钠
(毫升)
柠檬酸
(毫升)
柠檬酸钠
(毫升)
3.0
18.6
1.4
5.0
8.2
11.8
3.2
17.2
2.8
5.2
7.3
12.7
3.4
16.0
4.0
5.4
6.4
13.6
3.6
14.9
5.1
5.6
5.5
14.5
3.8
14.0
6.0
5.8
4.7
15.3
4.0
13.1
6.9
6.0
3.8
16.2
4.2
12.3
7.7
6.2
2.8
17.2
4.4
11.4
8.6
6.4
2.0
18.0
4.6
10.3
9.7
6.6
1.4
18.6
4.8
9.2
10.8
柠檬酸C6H8O7·H
2O:
分子量
210.14,0.1mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3
C6H5O7·2H2O:
分子量294.12,0.1mol/L溶液为29.41
克/升。
柠檬酸C6H8O7·H2O:
2.1g
柠檬酸钠Na3
C6H5
O7
·2H2O:
2.94g
H2O:
100ml
6.乙酸–乙酸钠缓冲液(
0.2mol/L)
0.2
mol/L
0.3
mol/L
0.2mol/L
0.3
mol/L
pH(18℃)
NaAc
HAc
pH(18℃)
NaAc
HAc
(毫升)
(毫升)
(毫升)
(毫升)
2.6
0.75
9.25
4.8
5.90
4.10
3.8
1.20
8.80
5.0
7.00
3.00
4.0
1.80
8.20
5.2
7.90
2.10
4.2
2.65
7.35
5.4
8.60
1.40
4.4
3.70
6.30
5.6
9.10
0.90
4.6
4.90
5.10
5.8
9.40
0.60
Na2Ac·3H2O分子量=136.09,0.2mol/L
溶液为27.22
克/升。
7.磷酸盐缓冲液
(1)磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液(
0.2)
0.2
mol/L
0.3
mol/L
0.2mol/L
0.3
mol/L
pH
NaHPO
4
NaHPO
4
pH
NaHPO
4
NaHPO
4
2
2
2
2
(毫升)
(毫升)
(毫升)
(毫升)
5.8
8.0
92.0
7.0
61.0
39.0
5.9
10.0
90.0
7.1
67.0
33.0
6.0
12.3
87.7
7.2
72.0
28.0
6.1
15.0
85.0
7.3
77.0
23.0
6.2
18.5
81.5
7.4
81.0
19.0
6.3
22.5
77.5
7.5
84.0
16.0
6.4
26.5
73.5
7.6
87.0
13.0
6.5
31.5
68.5
7.7
89.5
10.5
6.6
37.5
62.5
7.8
91.5
8.5
6.7
43.5
56.5
7.9
93.0
7.0
6.8
49.5
51.0
8.0
94.7
5.3
6.9
55.0
45.0
NaHPO
·2HO分子量=178.05,0.2mol/L
溶液为
85.61克/升。
2
4
2
Na2HPO4·12H2O分子量
=358.22,0.2mol/L溶液为71.64
克/升。
NaHPO
·2HO分子量=156.03,0.2mol/L
溶液为
31.21克/升。
2
4
2
(2)磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液(1/15mol/L)
pH
mol/L/15Na2HPO4
mol/L//15KH2PO4
pH
mol/L//15Na2HPO4
mol/L//15KH2PO4
(毫升)
(毫升)
(毫升)
(毫升)
4.92
0.10
9.90
7.17
7.00
3.00
5.29
0.50
9.50
7.38
8.00
2.00
5.91
1.00
9.00
7.73
9.00
1.00
6.24
2.00
8.00
8.04
9.50
0.50
6.47
3.00
7.00
8.34
9.75
0.25
6.64
4.00
6.00
8.67
9.90
0.10
6.81
5.00
5.00
8.18
10.00
0
6.98
6.00
4.00
NaHPO
·2HO分子量=178.05,1/15M溶液为11.876克/升。
2
4
2
KH2PO4分子量=136.09,1/15M溶液为9.078克/升。
8.磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液(
0.05M)
X毫升0.2MK2PO4+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至
29毫升
pH(20℃)
X(毫升)
Y(毫升)
pH(20℃)
X(毫升)
Y(毫升)
5.8
5
0.372
7.0
5
2.963
6.0
5
0.570
7.2
5
3.500
6.2
5
0.860
7.4
5
3.950
6.4
5
1.260
7.6
5
4.280
6.6
5
1.780
7.8
5
4.520
6.8
5
2.365
8.0
5
4.680
9.巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃)
pH
0.04M巴比妥
0.2V盐酸
pH
0.04M巴比
0.2N盐酸(毫
钠溶液
妥钠溶液(毫
升)
升)
6.8
100
18.4
8.4
100
5.21
7.0
100
17.8
8.6
100
3.82
7.2
100
16.7
8.8
100
2.52
7.4
100
15.3
9.0
100
1.65
7.6
100
13.4
9.2
100
1.13
7.8
100
11.47
9.4
100
0.70
8.0
100
9.39
9.6
100
0.35
8.2
100
7.21
100
巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M
溶液为8.25克/升
10.Tris–盐酸缓冲液(0.05M,25℃)
50
毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与
X毫升
0.1N
盐酸混匀后,加水稀释至
100
毫升。
pH
X(毫升)
pH
X(毫升)
7.10
45.7
8.10
26.2
7.20
44.7
8.20
22.9
7.30
43.4
8.30
19.9
7.40
42.0
8.40
17.2
7.50
40.3
8.50
14.7
7.60
38.5
8.60
12.4
7.70
36.6
8.70
10.3
7.80
34.5
8.80
8.5
7.90
32.0
8.90
7.0
8.00
29.2
三羟甲基氨基甲烷(
Tris)HOCH2
CH2OH
C
HOCH2
NH2
分子量
=121.14;
1.1M溶液为12.114克/升。
Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶盖严。
11.硼酸–硼砂缓冲液(
0.2M硼酸根)
pH
0.05M
硼砂
0.2M硼砂
pH
0.05M硼砂
0.2M
硼酸
(毫升)
(毫升)
(毫升)
(毫升)
7.4
1.0
9.0
8.2
3.5
6.5
7.6
1.5
8.5
8.4
4.5
5.5
7.8
2.0
8.0
8.7
6.0
4.0
8.0
3.0
7.0
9.0
8.0
2.0
硼砂Na2
B4
O7·H2O,分子量=381.43;0.05M溶液(=0.2M硼酸根)含19.07克/升。
硼酸H2BO
3,分子量=61.84,0.2M
溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。
11.硼酸-硼砂缓冲液(
0.2M硼酸根)
pH
0.05M
硼砂
0.2M硼酸
pH
0.05M硼砂
0.2M
硼酸
(毫升)
(毫升)
(毫升)
(毫升)
7.4
1.0
9.0
8.2
3.5
6.5
7.6
1.5
8.5
8.4
4.5
5.5
7.8
2.0
8.0
8.7
6.0
4.0
8.0
3.0
7.0
9.0
8.0
2.0
硼砂Na2
B4
O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M溶液(=0.2M硼酸根)含19.07克/升。
硼酸H2BO3,分子量=61.84,0.2M溶液为12.37克/升。
硼砂
易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。
12.甘氨酸–氢氧化钠缓冲液(
0.05M)
X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至
200
毫升
pH
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