组织化学及免疫组织化学.docx
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组织化学及免疫组织化学
临床病理学特殊技术
第1节组织与细胞化学
(histochemistryandcytochemistry)
【概念】运用物理和化学的技术方法显示组织细胞结构中的各种化学成分,并对这些化学物质进行定性、定位、定量,从而分析研究生物在生理或病理状态下细胞组织的代谢、机能及形态变化规律。
细胞化学是研究细胞的化学成分及其在细胞活动中的变化和定位的学科。
对细胞中的不同组分进行区别着色是细胞化学中最基础的工作。
组织化学是指利用细胞或组织中的某些化学成分生成有色沉淀物,对细胞组织中的这些化学成分进行定性、定位和定量分析的特殊技术方法。
细胞化学和组织化学的发展是分不开的,都是建立在细胞学、组织学以及生物化学的基础上。
【基本原理】用于组织与细胞化学研究的染料可以是碱性的也可以是酸性的。
酸性染料的生色基团是硝基和醌基;碱性染料的生色基团,包括着偶氮基吲胺基。
染色的原理是基于在酸性染料中具有染色作用的阴离子和细胞内的碱性物质相结合,而碱性染料中的阳离子和细胞内的酸性物质相结合,所以酸性的细胞成分被碱性染料所染色,而碱性的细胞组分则被酸性染料染色。
组织与细胞中的化学成分和其相应的底物呈一系列的化学反应,形成于显微镜下可见到的反应产物呈色。
常见的细胞化学物质成分染色方法见表2-1,组织化学物质成分染色方法见表2-2。
表2-1细胞化学物质成分的鉴定
显示物质
染色方法
染色结果
用途
DNA和/或RNA
孚尔根反应法
DNA呈紫红色
显示DNA及染色体倍体数分析
甲绿-派郎宁法
DNA呈绿色,RNA呈红色
显示DNA与RNA
吖啶橙荧光染色法
红色荧光为DNA,绿色荧光为RNA或单链DNA
用于鉴别肿瘤细胞与凋亡细胞
糖元
过碘酸雪夫反应(PAS)
糖元和其它多糖物质呈红色,细胞核呈蓝色
鉴别细胞内空泡的性质(糖原贮积病、糖尿病、骨髓瘤浆细胞胞浆内的Russell小体与核内的Dutcher小体;某些透明细胞肿瘤(横纹肌、平滑肌、软骨肉瘤、肝癌、汗腺瘤、化感器瘤)
黏多糖(黏液物质)*
高铁双胺(HID)染色
显示硫酸化黏液物质。
显示黏液物质与性质。
中性黏液常见于胃粘膜、十二指肠腺、颌下和前列腺上皮;酸性黏液常见于皮肤、动脉、软骨、角膜、肥大细胞、结肠与气管的杯状细胞。
胃Ⅱb型不完全化生的柱状细胞分泌硫酸黏液
AB/PAS染色法
酸性黏液呈蓝色、中性黏液呈红色、混合黏液呈紫色
脂类(用新鲜组织,冰冻切片)
苏丹Ⅲ染色
脂肪呈桔红色
显示脂滴和所有含脂细胞,用于鉴定脂肪变性、脂肪栓子、泡沫细胞以及肿瘤的诊断与鉴别诊断
苏丹Ⅳ染色
脂肪呈鲜红色
油红O染色
中性脂肪呈深橙红色
锇酸染色
脂肪呈黑色
神经细胞尼氏小体
甲苯胺蓝法
细胞核淡蓝色,尼氏小体深蓝色,背景无色
显示神经元尼氏小体的改变提示神经元变性与损伤
酶类(用新鲜组织,冰冻切片)
碱性磷酸酶(钙钴法、α-萘酯磷酸法)
该酶分布广泛,多见于有活跃转运功能的细胞膜内。
钙钴法:
碱性磷酸酶活性处呈黑色或棕黑色
成熟中性粒细胞呈阳性反应。
酶活性增高可见于:
严重化脓性感染、急性淋巴细胞白血病、再生障碍性贫血、类白血病反应、多发性骨髓瘤、尤文肉瘤、恶性淋巴瘤、成骨肉瘤、滑膜肉瘤等。
酶活性减低可见于:
病毒感染、急性粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病、粒细胞缺乏症、恶性组织细胞增生症、传染性单核细胞增多症、恶性贫血及阵发性睡眠性血红蛋白尿症等
α-萘酯磷酸法:
酶活性处呈暗蓝色
酸性磷酸酶(硝酸铅法、Leder-Stutt改良偶氮法)
多用于组织印片
分布广泛,主要位于溶酶体内。
以前列腺、吞噬细胞最丰富;亦存在于肝、肾、肾上腺及肠管上皮刷状缘。
在单核细胞、组织细胞及中性粒细胞的胞浆中弥漫分布,而在T细胞及其前体中呈局限性点状阳性反应
前列腺癌、霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、乳腺癌、表皮样癌强阳性。
有助于急性单核细胞白血病、组织细胞性淋巴瘤和恶性组织细胞病的诊断;毛细胞白血病呈阳性反应,且不被酒石酸盐所破坏;高雪病细胞酸性磷酸酶染色(ACP)染色为阳性,尼曼一匹克病细胞ACP染色为阴性
琥珀酸脱氢酶(硝基蓝四唑法)
定位于线粒体内膜,心肌、肾小管、肝细胞含量最丰富。
利用琥珀酸脱氢酶使琥珀酸钠脱去H+而使硝基四氮唑蓝还原为蓝色的二硝基甲替沉淀于酶活性之处
检查线粒体功能标志酶。
淋巴细胞、单核细胞、巨核细胞、血小板、该酶染色活性高。
淋巴细胞白血病酶活性显著减低,而淋巴瘤时酶活性显著升高
NADH脱氢酶
位于线粒体内膜及胞浆中
检查线粒体功能,中心核病
乙酰胆碱酯(Karnovsky-Roots亚铁氰化铜法、Lewis硫酸亚铜法)
主要分布在神经元胞质和运动终板
确定先天性巨结肠病的诊断与范围
ATP酶
ATP合成酶存在线粒体的内膜。
不同pH染色可以识别Ⅰ型与Ⅱ型肌纤维
Ⅰ型与Ⅱ型肌纤维分布方式与数量的变化可帮助诊断Duchenne型与Becker型进行性肌营养不良及强直性肌营养不良
氯乙酸盐酯酶
可识别除嗜酸性细胞外的髓系前体细胞及肥大细胞
可明确髓系及肥大细胞的反应性或瘤性增生,尤其在髓外浸润时
神经内分泌颗粒
亲银染色(Fontana-Masson法)
不需外加还原剂,在黑暗中即有还原银盐的能力
协助诊断类癌及黑色素细胞起源的肿瘤
嗜银染色(Grimelius法)
需加外源性还原剂或在光线存在时才有还原能力
用于诊断神经内分泌肿瘤,如嗜铬细胞瘤、副节瘤、Merkel细胞瘤、甲状腺髓样癌及小细胞肺癌
*黏多糖类是蛋白多糖分子中的糖链部分,是黏液(人体的粘膜上皮分泌出来的湿滑液体)的主要化学成分。
由于含酸基的不同,而又分为中性黏多糖(中性黏液)、酸性黏多糖(酸性黏液)和混合性黏多糖(混合性黏液)。
多糖是由多个单糖分子缩合、失水而成,是一类分子机构复杂且庞大的糖类物质。
表2-2组织化学物质成分的鉴定
显示物质
染色方法
染色结果
用途
胶原纤维及肌纤维
VanGieson染色
酸性品红用于染胶原纤维,而苦味酸能使肌纤维黄染
胶原纤维在疏松结缔组织中排列成束,彼此交织吻合,纤维束常有分支
胶原纤维是结缔组织的一个主要组成成分,也是临床上许多病理变化的特征如瘢痕、肺纤维化、动脉粥样硬化、胶原病等
肌纤维和纤维蛋白
早期病变心肌染色(复红染色、PAS染色)
碱性复红:
正常心肌呈黄色或黄棕色,缺氧心肌、红细胞呈红色,胞核呈蓝色
酸性复红:
缺氧心肌呈红色,胞核呈紫色,其它组织呈绿色
PAS法:
心肌中糖原呈红色,但量少
缺氧心肌对酸性或碱性复红有特别亲和力
PAS可检测缺氧心肌中糖原减少
横纹肌染色
磷钨酸苏木素染色PTAH
显示横纹肌细胞及胶质细胞胞浆内的微丝;将纤维蛋白染成蓝色细丝
用于低分化间叶性肿瘤的诊断与鉴别诊断、明确其横纹肌来源的肿瘤以及微血栓
弹性纤维
WEIGERT’S间苯二酚-碱性品红染色
弹性纤维广泛分布于纤维结缔组织,尤其集中分布于椎弓间黄韧带、声带、肺泡壁、动脉壁及弹性软骨等处。
弹力纤维呈暗蓝色,胶原纤维呈红色,肌纤维呈黄色。
单条分布,有分支,并交织成网
用于证明肺气肿弹性组织萎缩、动脉粥样硬化时的弹性纤维变薄和缺失及其他血管疾病
网状纤维
银染(有Comori法,Wilder及Gordon和Sweet法等)
网状纤维(染成黑色)主要分布于疏松结缔组织于其它组织的交界处,如上皮组织的基膜中、脂肪组织和毛细血管周围。
纤维较细,有分支,它们常聚集成粗细不等的束,彼此交织成网状
鉴别上皮与非上皮肿瘤、原位癌与浸润癌、某些双向分化的间叶组织肿瘤(滑膜肉瘤、间皮瘤、透明细胞肉瘤、间变性大细胞淋巴瘤)
结缔组织复合染色
Masson三色染色法(丽春红、酸性复红、橘黄、亮绿、醋酸)
胶原纤维蓝色,肌纤维红色、红细胞橘红色
可判断器官组织纤维化程度与动脉硬化程度;肾脏临床病理活检染色;糖尿病器官病变检查;间叶组织肿瘤鉴别诊断与肿瘤浸润范围
Mallory三色染色法(重铬酸钾、苯胺蓝、橘黄、酸性复红)
胶原纤维、网状纤维呈蓝色;神经胶质纤维、肌纤维呈红色;髓鞘、红细胞呈橘红色;软骨、黏液、淀粉样物呈淡蓝色
胶原、网状和弹性纤维的三联染色(高锰酸钾、硫酸、维多利亚蓝、丽春红、氨性银改良染色液)
胶原纤维呈红色,网状纤维呈黑色,弹性纤维呈绿色,肌肉和红细胞呈淡黄色
基底膜
PAS法、六胺银法AFOG法(苯胺蓝、桔黄、酸性品红)
基底膜是上皮基底面与深部结缔组织间的薄膜,PAS呈红色,六胺银法呈黑色,AFOG法:
基底膜、胶原纤维显示不同程度的蓝色,红白血球细胞及背景呈桔黄色,管型蛋白呈鲜红色
可以观察疾病尤其是肿瘤的进展和突破基底膜的程度、可显示肾炎尤其是膜性肾病基底膜的变化
神经纤维
镀银染色法
镀银染色可将神经纤维染成黑色
可以清晰显示神经纤维的形态与交错成网的细丝与异常改变。
可显示石蜡切片大脑皮质神经元
神经髓鞘
Weil法
髓鞘呈蓝黑色
协助诊断脱髓鞘疾病如:
CNS白质疾病、多发性硬化、中毒(一氧化碳、汞、酒精中毒)、苯丙酮尿症、损伤和缺氧等
Lμxol固蓝染色法
髓鞘呈蓝色
变性髓鞘染色March法、Swank与Devenport法等
正常髓鞘不着色,变性髓鞘才着色
淀粉样物
碱性刚果红法
淀粉样物粉红到橙红色,在偏光镜下苹果绿色双折光。
荧光显微镜下见桔黄到红色荧光
原发性淀粉样物沉积常见于多发性骨髓瘤、B细胞肿瘤,继发性则常见于慢性炎症、类风湿、霍奇金淋巴瘤;局部沉积见于甲状腺髓样癌和Ⅱ型糖尿病等
甲紫法
类淀粉物呈紫红色,其它结构呈紫或蓝色
色素分为人为色素和自生性色素。
人为色素是由于固定剂与组织中某些成分相作用而产生,例如福尔马林色素等。
在某些病理情况下,细胞代谢所产生的沉着的色素,如脂褐素、黑色素、含铁血黄素、嗜银颗粒及组织内的微量金属离子等,需要一些特殊染色加以证明(表2-3)。
表2-3色素的鉴定
显示物质
染色方法
染色结果
用途
黑色素
Masson-Fontana氨银法
硫酸亚铁法
多巴(Dopa)反应
黑色素具有还原硝酸银的能力
全身性见于Addison病、大量雌激素治疗、慢性肝病病人、孕妇和口服含雌激素避孕药的妇女、尿黑酸尿症。
局限性黑色素增多常见于色素痣及恶性黑色素瘤等
胆色素
Hall’s胆红素染色法
胆红素显翠绿色
胆色素是铁卟啉化合物各种分解代谢产物的总称,主要为胆红素,还有胆绿素、胆素原和胆素。
胆色素主要随胆汁排出体外。
局部胆色素淤积和全身黄疸常见于肝炎、肝内胆汁淤积综合征、血色病、肝胆管的肿瘤和结石等
含铁血黄素
普鲁士蓝反应
盐酸使结合于铁的蛋白质分离,以便铁氰化钾特异地与三价铁结合形成亚铁氰化物
局限性或全身性出血性疾病、成高铁红细胞贫血及其它慢性病所致贫血和全身性铁超载如慢性溶血、多次输血及血色病与损伤
脂褐素
Schmord法
PAS法
早期能被苏丹染料染色,晚期因具有还原能力,可用Schmord法或者PAS显示,Schmorl法呈蓝绿色。
PAS法呈大小不一的粉红至红色颗粒,细胞核呈蓝色
细胞器的残留小体,也可以说脂褐素是类脂的氧化产物
钙化
McGee-Russell核固红染色
VonKossa法
组织中钙盐沉积处呈红色,硝酸银与钙盐的复分解反应形成可还原的银盐。
在强光或紫外光的照射下生成金属银
营养不良性钙化常发生于损伤或坏死组织,如动脉粥样硬化、结核、寄生虫病、心瓣膜病及肿瘤等,转移性钙化后者常发生于高血钙患者的正常组织
在组织切片上,显示细菌最常用的染色法是革兰染色法。
而分枝杆菌有脂性被膜,革兰染色不易着色,石碳酸复红是最常用的经典染色方法。
大部分霉菌虽可在HE染色切片中显示出来,但有些则需要特殊染色法,如PAS显示假丝酵母(旧称白色念珠)菌等,常见病原微生物染色方法见表2-4。
表2-4病原微生物的鉴定
病原
染色方法
染色结果
用途
真菌染色
Grocott六胺银染色法
真菌均被着色,菌丝和孢子呈黑褐色,细胞核呈红色,背景呈淡绿色
新型隐球菌菌壁深黑色,中间为空白区;曲霉的孢子和菌丝均被染为深黑色、菌丝呈多结节分布,呈45度角分枝
高碘酸复红染色法
真菌呈紫红色,红细胞呈浅黄色
PAS染色
可显示真菌、阿米巴及毛滴虫属
卡氏肺孢子菌(旧称卡氏肺囊虫)
乌洛托品硝酸银染色(染原虫)甲苯胺蓝染色及环六亚甲胺银染色(染囊虫)
HE染色组织切片肺泡内泡沫状嗜伊红物质的团块富含原虫;乌洛托品硝酸银染可查见直径6~8μm的黑褐色圆形或椭圆形的囊体
常见于免疫缺陷病、艾滋病、恶性肿瘤、接受免疫抑制剂治疗的患儿、早产儿和新生儿。
卡氏肺孢子菌肺炎支气管肺泡灌洗术和支气管肺活检标本染色卡氏肺孢子菌发现率很高
细菌染色
革兰染色(草酸铵结晶紫,碘液,酒精,石炭酸复红)
保留紫色者为革兰阳性菌(G+)。
被酒精脱色复染成红色者为革兰阴性菌(Gˉ)
G+菌:
金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎链球菌、白喉棒状杆菌、炭疽芽胞杆菌等
Gˉ菌:
百日咳鲍特菌(旧称百日咳杆菌)、大肠埃希菌(旧称大肠杆菌)、伤寒沙门菌(旧称伤寒杆菌)、痢疾志贺杆菌、霍乱弧菌、脑膜炎奈瑟菌(旧称脑膜炎双球菌)、淋病奈瑟菌(旧称淋病双球菌)等
Gram碱性复红结晶紫染色法
革兰阳性细菌呈蓝色,阴性细菌呈红色,细胞核呈红色
抗酸杆菌染色法(石炭酸复红,盐酸酒精脱色,美蓝复染)
抗酸杆菌呈红色
结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌阳性
幽门螺杆菌(Hp)
甲苯胺蓝染色法、Warthin-Starry银染色法、
Giemsa染色法
Hp呈弯曲状,S状,短弧状及杆状,位于胃小凹或胃小凹分泌物中,亦可见于上皮胞浆中
螺旋体染色
Giemsa染色法
螺旋体及细菌呈蓝到淡紫色,细胞浆呈蓝色,红细胞呈橘黄色
梅毒螺旋体折光性低与透明液体相似,在高倍显微镜下才能查见
Ryu碳酸钠碱性复红法
螺旋体呈红色
病毒包涵体染色
Giemsa法
pH5.0时SARS病毒包涵体(胞浆内)成鲜红色
pH9.5时合胞病毒、巨细胞病毒包涵体(核内)呈深紫色至蓝色
Macchiavello改良法
SARS病毒包涵体于肺组织细胞浆内,呈鲜红色,细胞核呈蓝色
伊红和甲基蓝改良法
合胞病毒和巨细胞病毒包涵体着染深蓝色或绿色
乙型肝炎表面抗原染色
地衣红染色法
HBsAg阳性呈棕色,以此可判定肝细胞内HBV感染
维多利亚蓝一核固红染色法
HBsAg阳性呈蓝绿色,细胞核呈红色
效果优于地衣红染色法
第2节免疫组织化学(immunohistochemistry)
一、概念与原理
二、
【概念】应用免疫学抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织或细胞内抗原,对其进行定位、定性及定量的研究方法。
【原理】通过抗原抗体反应,用化学反应使标记抗体的显色剂如荧光素、酶、金属离子、同位素等显色来确定组织细胞内抗原物质如多肽、蛋白质与酶。
三、临床常用诊断抗体
四、
免疫组化和免疫细胞化学在病理学外检工作中可用于对不同来源,常规HE以及组织细胞化学方法难以诊断的疾病特别是肿瘤进行确诊和鉴别诊断。
以下主要介绍淋巴造血系统疾病、软组织肿瘤和骨肿瘤、乳腺疾病、上皮来源肿瘤、器官特异性或器官相关临床常用诊断抗体标记(转移性肿瘤起源判断以及其他临床常用诊断抗体(见表2-5~表2-10)。
表2-5淋巴造血系统疾病常用抗体
抗体
名称
来源与阳性
产物定位
正常表达及分布
病理应用
CD2
绵羊红细胞受体。
定位于细胞膜/细胞高尔基器
成熟T细胞及胸腺细胞膜表面
主要应用于T淋巴细胞淋巴瘤的诊断
CD3
T细胞抗原受体(TCR)
定位于细胞浆
正常T淋巴细胞阳性,部分活化的NK细胞阳性
T淋巴细胞瘤、NK细胞瘤阳性,是比较可靠的特异的标记物
CD4
辅助T淋巴细胞抗原
定位于细胞膜
辅助/诱导T淋巴细胞、髓细胞及组织细胞染色阳性
绝大部分蕈样霉菌病、成人T淋巴细胞白血病/淋巴瘤阳性;大部分外周T细胞淋巴瘤阳性
用于真性组织细胞性淋巴瘤的辅助诊断,但不能作为肿瘤性和反应性T细胞的鉴别指标
CD5
T细胞上的一种表面标志
定位于细胞膜
正常及胸腺T淋巴细胞以及未成熟阶段的B淋巴细胞阳性
T淋巴细胞性淋巴瘤/白血病的辅助诊断标记物。
在慢性B淋巴细胞白血病和套细胞淋巴瘤中其染色结果为特征阳性,约10%的弥漫大B细胞性淋巴瘤也可阳性
CD7
T淋巴细胞抗原
定位于细胞膜
主要表达于绝大多数T细胞、胸腺细胞和NK细胞
用于T淋巴细胞淋巴瘤的诊断,尤其对T淋巴细胞系中前T淋巴母细胞性淋巴瘤的诊断有特定的诊断价值
CD8
细胞毒性T淋巴细胞抗原
定位于细胞膜
在细胞毒性T淋巴细胞、脾脏窦组织及部分NK细胞染色阳性
用于外周T淋巴细胞淋巴瘤和脾脏的各种血管性疾病
CD10
共同急性淋巴母细胞白血病抗原
定位于细胞膜
在粒细胞、未成熟的淋巴细胞生发中心细胞阳性
滤泡性淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、一些弥漫大B细胞性淋巴瘤、前驱B淋巴母细胞性淋巴瘤/白血病、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤、滤泡性T细胞淋巴瘤呈阳性
CD15
X-半抗原
定位于细胞膜/细胞高尔基器
粒细胞染色、巨细胞病毒感染的细胞染色阳性
几乎所有的慢性髓性白血病阳性;经典型霍奇金淋巴瘤的R-S细胞、少部分T/B淋巴细胞淋巴瘤中的大细胞、部分组织细胞及组织细胞肿瘤阳性
CD20
B淋巴细胞分化抗原定位于细胞膜
正常B淋巴细胞阳性,包括B淋巴细胞的不同分化阶段;原始前B淋巴细胞阴性
B淋巴细胞淋巴瘤、结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤阳性。
少数T淋巴细胞性淋巴瘤阳性
CD23
细胞膜表面糖蛋白
定位于细胞膜
表达于外周血细胞的某些亚群、B淋巴细胞和EBV转染的B淋巴瘤细胞系
绝大多数低分化B细胞淋巴瘤,包括慢性淋巴细胞白血病CD23染色阳性。
标记单核细胞和树突状细胞
CD30
活化淋巴细胞抗原
定位于细胞膜/细胞高尔基器
表达于活化的T/B细胞、R-S细胞、部分淋巴滤泡周围的细胞
淋巴滤泡周围大的淋巴细胞、活化的淋巴细胞(免疫母细胞),霍奇金淋巴瘤的R-S细胞,间变性大细胞淋巴瘤阳性,如感染的吞噬细胞、弓形虫淋巴结炎、Kikuchi淋巴结炎。
浆细胞也会出现阳性
CD43
T细胞膜表面的跨膜糖蛋白
定位于细胞膜(有时细胞高尔基器阳性)
正常T淋巴细胞、髓细胞、组织细胞、EBV感染的B淋巴细胞阳性
T淋巴细胞及其肿瘤的标记物。
阳性表达于T淋巴细胞淋巴瘤、低分化的B细胞淋巴瘤、急性B淋巴细胞性白血病、急性T淋巴细胞性白血病、间变性大细胞淋巴瘤和部分骨髓瘤/粒细胞肉瘤
CD45RO
CD45的一种异构体
定位于细胞膜/浆
48%外周血T细胞淋巴细胞,34%CD4+细胞
可作为反应性与肿瘤性T细胞标记;一些T细胞淋巴瘤可以是CD3阴性,但CD45RO阳性
CD56
神经细胞粘附分子
定位于细胞膜
在NK细胞、NK样T淋巴细胞以及神经外胚层起源的细胞
NK细胞淋巴瘤比较好的标记物
CD57(Leu7)
NK细胞标记物
定位于细胞膜/细胞浆
NK细胞、NK样T淋巴细胞以及生发中心T淋巴细胞
滤泡中心细胞性淋巴瘤常有NK细胞表达,亦可用于神经内分泌细胞和肿瘤的诊断
CD79a
BCR-CD79复合物,介导BCR途径的信号转导
定位于细胞浆
不同分化阶段的B淋巴细胞和浆细胞染色阳性。
生发中心B细胞弱阳性
B淋巴细胞淋巴瘤、结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤、淋巴母细胞性淋巴瘤、白血病、浆细胞瘤阳性
CD99
MIC基因的产物
定位于细胞膜
未成熟的T淋巴细胞、胰岛细胞、睾丸支持细胞以及卵巢颗粒细胞
T淋巴细胞性淋巴瘤、急性淋巴母细胞性白血病尤文肉瘤和原始神经外胚层肿瘤呈阳性表达
CD138
跨膜肝素硫酸脂蛋白聚糖
定位于细胞膜
前B淋巴细胞、浆细胞、正常的上皮细胞、血管平滑肌细胞以及内皮细胞
在B淋巴母细胞性淋巴瘤、浆细胞淋巴细胞性淋巴瘤、浆细胞瘤以及浆母细胞淋巴瘤,尤其间变性浆细胞瘤的诊断有较大的帮助
GranzymeB
CD8+细胞毒性T细胞分泌物质,促进细胞凋亡定位于细胞浆
在NK细胞、CD8+的T淋巴细胞中阳性
用于NK与NK细胞样淋巴瘤辅助诊断。
间变性大细胞性淋巴瘤常阳性,在肠病型、脂膜炎样、肝脾γδ型T淋巴细胞性淋巴瘤中阳性表达。
而霍奇金淋巴瘤常阴性
MPO
髓过氧化物酶
定位于细胞浆
在正常组织中和各种髓样细胞增生症中,均匀较强表达
鉴别髓样细胞肿瘤和淋巴瘤;急性早幼粒细胞白血病(FAB型M3)通常与该染色体易位相关
Pax-5
PAX基因家族中核转录因子,B淋巴细胞系中特异性活化蛋白
定位于细胞核
在前体B淋巴细胞、成熟B淋巴细胞中阳性表达,但浆细胞是阴性细胞
诊断及鉴别诊断B淋巴细胞性白血病和B淋巴细胞性淋巴瘤。
T淋巴细胞性淋巴瘤及白血病阴性表达。
淋巴浆细胞样淋巴瘤中阳性表达,而浆细胞瘤和骨髓瘤中阴性表达
Perforin
称穿孔素或溶细胞素,可插入靶细胞内构成大量的小孔,导致靶细胞裂解/凋亡
定位于细胞浆(颗粒状)
是一种分子量为67kD,存在于细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和NK细胞胞质的细胞毒颗粒中的糖蛋白
应用在NK细胞淋巴瘤、NK细胞样T淋巴细胞性淋巴瘤的辅助诊断
在肠病型、脂膜炎样、肝脾γδ型T淋巴细胞性淋巴瘤、间变性大细胞性淋巴瘤阳性表达
TdT
DNA聚合酶
定位于细胞核
表达于未成熟的淋巴细胞,包括T和B淋巴细胞系,骨髓中原始血细胞也阳性表达
在淋巴母细胞性淋巴瘤/白血病呈特异性阳性。
在富含未成熟的T细胞的胸腺瘤中诊断和研究有帮助。
在其他小圆细胞肿瘤如胚胎性横纹肌肉瘤中TdT染色阴性
EBV、LMP-1
EBV潜伏膜蛋白定位于细胞膜/浆
用于多种组织病变、肿瘤中的EB病毒感染的检测。
在霍奇金淋巴瘤中阳性表达,在T淋巴细胞性淋巴瘤中为阴性
表2-6软组织肿瘤和骨肿瘤抗体标记
抗体名称
来源与阳性
产物定位
分布
病理应用
中间丝
标记
结蛋白(desmin)
相对分子质量为53KD的中间丝(骨骼蛋白)
定位于细胞浆
在平滑肌和横纹肌可检测到结蛋白
特征性的表达于肌细胞及肌细胞相关的肿瘤,并可见于原始神经外胚叶瘤、促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤、上皮样肉瘤、恶性外周神经鞘膜瘤
波形蛋白(vimentin)
波形蛋白是中间丝的其中一种蛋白质。
维持细胞的形状、细胞质的完整性及稳定细胞骨架内的作用。
定位于细胞浆
主要存在于成纤维细胞和来自胚胎间充质的细胞
是间叶来源肿瘤的良好标记物,波形蛋白不具备细胞种类的特异性
非中间丝蛋白的肌性标记物
肌动蛋白
(actin)
广谱肌动蛋白,除结蛋白外第二个最有用的区分肌源分化的蛋白成分
定位于细胞浆
可识别骨骼肌、心肌和平滑肌;也能在外皮细胞、肌上皮细胞和肌纤维母细胞中表达
Actin(HHF35)主要用于检测平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、肌上皮瘤等。
还能识别肉芽组织、瘢痕组织、结节性筋膜炎和纤维瘤病中的肌纤维母细胞
肌红蛋白
(myoglobin)
存在于骨骼肌和心肌肌浆中的可溶性蛋白。
定位于细胞浆
存在于正常骨骼肌和心肌、横纹肌
在横纹肌肉瘤以及含有横纹肌成分的肿瘤(蝾螈瘤、Wilms瘤、恶性中胚层混合瘤和畸胎瘤)中表达;肌
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