液相色谱仪操作规程样本.docx
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液相色谱仪操作规程样本
1目
规范Waterse2695液相色谱仪操作规程,对的使用本仪器,保证检测工作顺利进行以及操作人员、设备、周边环境安全。
2合用范畴
本指引书合用于Waterse2695液相色谱仪、2489紫外检测器及随机工作站。
3职责
3.1操作人员按本规程操作仪器,对仪器进行寻常维护,作使用登记。
3.2保管人员负责监督仪器操作与否符合规程,对仪器进行定期维护,保养。
3.3科室负责人负责对仪器综合管理。
4仪器性能指标
4.1.Alliancee2695系统
4.1.1泵/溶剂管理系统:
互相独立控制线性双柱塞驱动装置,双压力传感器反馈回路,无脉动,无需混合器和阻尼器。
4.1.1.1溶剂数:
4
4.1.1.2流速范畴:
0.001--10.000ml/min,以0.001ml为增量
4.1.1.3流速精度:
±0.075%RSD
4.1.1.4流速精确度:
±1.0%RSD
4.1.1.5操作压力:
0-6000psi(0-410bar),可设上,下限
4.1.1.6混合范畴:
0.0~100.0%,以1%增量
4.1.1.7梯度精确度:
±0.5%,不随反压变化
4.1.1.8梯度精度:
±0.15%,不随反压变化
4.1.1.9压缩补偿:
自动,持续
4.1.1.10梯度曲线:
各种梯度曲线:
线性,凸线和凹线等11种
4.1.1.11系统体积:
<650μL,不随反压变化
4.1.2自动进样器/样品管理系统:
4.1.2.1样品盘数:
120位,分5个样品盘,每个样品盘可放置24个2ml样品瓶
4.1.2.2进样次数:
每个样品可进样1到99次
4.1.2.3进样精度:
<0.5%RSD
4.1.2.4样品污染度:
<0.1%
4.1.2.5进样精确度:
±1uL
4.1.2.6进样体积:
0.1to100uL
4.1.2.7进样线性度:
>0.999coefficientofdeviation
4.1.3在线柱塞清洗装置:
可在线清洗柱塞杆,可防止因缓冲盐溶液结晶而导致堵塞,延长密封圈使用寿命。
4.1.4在线脱气装置:
4.1.5柱温箱:
4.1.5.1温度设定范畴:
室温至65℃
4.1.5.2温度稳定性:
±0.15℃
4.1.5.3柱容量:
4根7.8X300柱
4.2检测器:
4.2.12489双波长紫外检测器
双通道紫外检测器,可进行双波长同步测定;最新专利梯形狭缝池设计,保证低噪音,高敏捷度,宽线性范畴;Maxplot,Ratioplot优化敏捷度,检测共流出物杂质,可作简朴峰纯度鉴定。
4.2.1.1波长范畴:
190-700nm
4.2.1.2灯:
氘灯,具备灯优化软件,可以延长灯使用寿命,可编程控制灯开关
4.2.1.3波长精确度:
±1.0nm
4.2.1.4波长重现性:
±0.1nm
4.2.1.5光谱带宽:
5nm
4.2.1.6噪音:
5X10-6AU
4.2.1.7漂移:
≤1X10-4AU/hr
4.2.1.8线性范畴:
<5%at2.5AU
4.2.1.9流通池:
池长10mm,池体积10ul
4.2.1.10采集速率:
80Hz
5操作规程
5.1操作前准备
5.1.1色谱柱检查与安装一方面打开柱温箱门看与否是所需用色谱柱,若不是则旋下色谱柱螺母,卸下色谱柱,立即用死堵堵上。
取出所需色谱柱,两端用螺母旋紧,固定在卡槽上,注意色谱柱方向,不能装反。
5.1.2溶剂准备。
5.1.2.1甲醇或乙腈必要用HPLC纯,其她无机试剂也最佳用HPLC纯,且需通过0.45µm滤膜溶剂过滤装置过滤。
试剂纯净非常重要。
必要要采用超纯水,可以用哇哈哈纯净水代替。
5.2主机操作
5.2.1灌装及清洗系统
5.2.1.1当真空脱气机第一次使用或当真空管是空,或当变化溶剂,且当前溶剂与真空管中溶剂不相溶时,应当灌装清洗系统。
5.2.1.2如果使用易挥发混合溶剂或变化溶剂时,若系统长时间关机(例如,隔夜)灌装系统推荐将泵流速控制在高水平(3-5ml/min)。
5.2.1.3使用注射器灌装系统(干灌装):
点击仪器面板上“Menu/status”按钮,选取“DirectFunction”,然后点击“dryprime”选取欲灌装通道并逆时针方向旋开灌装/排放阀,将专用注射器插入灌装/排放阀入口内,拉动注射器活塞吸入大概10毫升灌装液或直到管路中不在有气泡为止。
灌装完毕后顺时针方向拧紧灌装/排放阀。
5.2.1.4初次灌装系统时,使用干灌装并使用异丙醇、甲醇、乙醇作为灌装溶剂。
5.2.1.5置换管路中流动相,使用湿灌装:
点击仪器面板“Menu/status”按钮,选取“DirectFunction”,然后点击“wetprime”选取欲灌装通道。
5.2.1.6如果当前管路中溶剂是有机或水而当前流动相也为有机溶剂或为水,在能互相溶解状况下,用流动相作为灌装溶剂。
5.2.1.7如果当前管路中溶剂是有机或水而当前流动相也为有机溶剂或为水,但不能互相溶解状况下,使用异丙醇灌装系统。
5.2.1.8如果管路中溶剂为有机而当前流动相为缓冲盐或管路中为缓冲盐而流动相为有机溶剂时,使用10%异丙醇、甲醇、乙醇灌装系统。
5.3优化泵性能
5.3.1总是把存储溶剂瓶溶剂瓶架放在泵顶部(或在相对于泵较高位置)。
5.3.2当使用盐溶液时候,常需要用水冲洗所有流路。
这样就可以将阀门端口沉淀盐冲洗掉。
在运营泵之前,用至少两倍体积(30ml)水冲洗真空脱气机,特别是当泵关闭较长时间时或者通道中使用易挥发混合溶剂时。
5.3.3当基线长时间不能处在稳定状态时,普通状况下应考虑溶剂进口过滤器与否堵塞。
当溶剂过滤器堵塞时,应将其从溶剂瓶中取出并将其放入30%硝酸溶液中超声清洗30min。
在将其重新装入溶剂瓶之前,必要用MillQ水对其进行彻底清洗。
长期处在水或缓冲液中过滤器常由于溶剂中藻类等微生物生长,导致过滤器堵塞。
因而建议在使用完此类流动相后,用50%乙腈清洗溶剂过滤器。
5.3.4当使用缓冲溶液时,在关闭系统前必要将通道中溶剂置换成50%乙腈,以防止藻类等微生物生长。
5.4使用Empower色谱工作站
5.4.1双击电脑桌面上Empower快捷图标,浮现Empower登陆窗口。
输入顾客名与密码,默认账号为“system”,密码为“manager”,点击“OK”进入Empower工作站。
单击高档键,选取顾客类型和QuickStart界面。
5.4.2.选取QuickStart界面,点击“拟定”,然后选取待选定操作项目以及色谱系统
(仅查看数据可选取色谱系统中"没有系统"),单击“拟定”。
5.4.3编辑仪器办法和办法组
5.4.3.1监视区单击办法组编辑向导
5.4.3.2选取新建按钮,弹出仪器办法编辑器。
5.4.3.3单击2690/5,弹出2695编辑界面。
5.4.3.4Alliance系统(涉及2695、2795和2695D)通用编辑页面中,可选取单次输送体积。
查看脱气选项,确认设立对的。
流量选项中设立泵模式、总流量以及流动相配比。
选取等度或者梯度。
5.4.3.5单击2489,弹出2489编辑界面。
在波长模式中选取相应波长模式。
单波长或者双波长,输入所需波长,选取相应采样速率,普通为2点/秒。
TUV检测器滤波常数"迅速"选项仅合用于单波长模式;采样速率以一种色谱峰上采样点不少于15个点为准。
5.4.3.6点击"文献",选取"另存为",输入仪器办法名称,点击"保存";点击"文献",选取"退出"。
5.4.3.7在被选项中选取所需仪器办法名称,点击“下一步”。
5.4.3.8在下拉菜单中选取所需解决办法和报告办法(如果没有适当办法选取"无解决"、"无报告"),点击“下一步”。
5.4.3.9输入办法组名称,单击"完毕"。
5.4.4进样
单击平衡系统按钮进入平衡系统/监视基线界面,选取相应仪器办法,点击平衡/监视器,在监视窗口监视基线至系统平衡,停止系统监视状态,点击停止按钮。
单击样,点击参数编辑快捷方式进入定义单进样参数编辑界面,输入样品名、功能、办法组等参数。
点击“进样”。
5.4.5使用向导建立样品组和样品组办法
5.4.5.1选取“运营样品”任务栏,然后单击“样品队列”,进入样品列表。
单击新建样品组向导,建立样品组。
选取创立样品组办法类型为"LC或PDA/MS",然后点击“定义样品板”,在"选取原则进样在那里开始"中选取适当选项。
检查开始加载样品瓶位置与否对的,点击“下一步”。
5.4.5.2在描述标样中需要设立一下内容:
样品组中标样数:
x;每瓶标样进样次数:
x;进样体积:
x;行时间:
xx;办法组xxx;点击"选项":
输入下一进样延迟时间x;点击“下一步”。
样品数:
x;每瓶样品进样次数:
x;进样体积:
x;行时间:
x办法组x;点击“选项”。
输入下一进样延迟时间x;点击“下一步”。
5.4.5.3在辨认原则样界面中,输入标样名称,增量后缀使用1。
在辨认样品界面中,输入样品名称,增量后缀使用a。
点击“下一步”。
运营模式选项中选取"只测试"。
查看摘要,点击“下一步”。
[注:
弹出组分编辑器,输入标样中每个组分名称(内标不需要输入含)。
可以直接关闭该窗口,在解决数据时候再添加。
点击“完毕”,5.4.5.4在菜单栏中选取文献。
为办法组命名并保存样品组办法。
单击“样品队列”,打开运营样品窗口,点击运营当前样品组办法键,选取“运营”。
选取需运营样品组名称,点击“运营”。
样品组运营过程中,在"正在运营"栏中正在运营以及运营完毕样品以红色显示。
注:
以向导建立样品组首行功能普通为清除校正,普通在运营样品前删除该行或改为"平衡"。
5.4.6建立数据解决办法。
5.4.6.1单击“浏览项目”键,在“样品组”中选取目的样品组。
在样品组上点击鼠标右键选取查看有关通道,样品组在单个通道中显示。
5.4.6.2选取定最低浓度标样,点击鼠标右键,选取下拉菜单中查看,会显示未解决色谱图形。
5.4.6.3点击解决办法向导快捷键,选取创立新解决办法,点击”拟定”。
确认解决类型为LC,积分方式可选取为老式,再点击使用解决办法向导,选取“拟定”。
积分-峰检测1:
要设定峰宽,用鼠标左键拖拽放大选定区域,放大感兴趣最窄峰。
注:
在色谱图区域方可以放大某个需要监测峰。
点击鼠标右键选取全视图可以还原色谱图。
积分-峰检测2:
在色谱图积分界面选取一段典型基线作为积分阈值,点击“下一步”。
积分-几分区域:
用鼠标左键拖拽放大选定区域,在基线上选用积分起始时间点。
积分-剔除峰:
建议选取最小峰高,选取所要积分高度最小峰(或键入相应数值)。
不大于此峰高90%峰将不被积分。
点击“下一步”。
5.4.6.4在定量办法中选取"面积",组分信息中选取"含量",校正曲线你和类型选取"线性"。
点击“下一步”。
QuickStart:
跨通道内标样界面点击否。
校正-名称和保存时间:
由于选取是标样,点击峰1可以看到一种下拉菜单选取相应组分名称或者键入运营样品个组分相应名称。
添加于组分名称相匹配原则含量,然后点击“下一步”。
注:
如果需要输入多水平标样浓度或含量,请忽视此含量缺省值设立环节,点击“下一步”。
(如果使用单一水平标样,可以在缺省含量中输入相应数值)。
5.4.6.5校正:
选取外标法,校正:
选取单一内标样,需要在下拉菜单中选取或键入内标相应得名称,然后点“下一步”。
校正:
选取多重内标需要输入所有内标名称。
解决办法名:
为解决办法命名,点击完毕。
色谱图界面会显示该解决办法应用后
色谱成果,涉及积分。
如需为积分办法添加积分事件,鼠标右键点击色谱图窗口,选取添加积分事件。
积分事件所示功能会立即应用于解决办法中。
编辑解决办法高档功能需要选取快捷键。
有任何更改均需再次保存解决办法。
点击峰表底部可预览2D通道和峰。
点击“浏览项目”键,选取“通道”或“样品组”标签栏。
右键点击目的样品组或通道并选取解决。
在解决界面,选取使用指定解决办法,选取相应解决办法名称,点击清除校正,选取校正并定量。
点击”拟定”,数据解决,产生成果。
可在成果栏中查看。
5.4.7查当作果和视图筛选
选取“成果”标签栏,使用视图筛选器从下拉菜单中选取"今天"。
选取需查当作果,右键点击选取"查看"查当作果点击“曲线”快捷键,查看每个组分校正曲线。
切换至主窗口点击“峰型”按钮。
5.4.8预览成果并创立一种综合报告办法
5.4.8.1点击“浏览项目”切换回成果表预览状态。
5.4.8.2选中一种或各种成果,点击鼠标右键选取预览。
5.4.8.3打开报告办法:
若选用一种成果,在预览窗口选取使用如下办法:
使用缺省单个报告,单击“拟定”。
5.4.8.4预览报告并查看数据。
点击“修改办法”键修改报告。
5.4.8.5双击色谱图或峰成果表编辑报告属性。
5.4.8.6点击文献,选取保存,为新建报告办法命名。
点击“预览”键预览报告。
5.4.8.7如需将报告保存为PDF格式,点击“另存为”标签栏。
5.4.9办法组建立
5.4.9.1在建立了恰当仪器办法、解决办法与报告办法后,可以将其组合得到一种办法组
5.4.9.2采集区单击办法组编辑向导。
5.4.9.3弹出"新办法组:
选取仪器办法"界面。
选取相应仪器办法,点击“下一步”。
5.4.9.4选取缺省办法界面:
选取相应得解决办法和报告办法,导出办法缺省。
点击“下一步”。
5.4.9.5命名办法组:
为办法组命名,点击完毕。
5.4.9.6在运营样品时,办法组/报告办法中调用该办法组,可以自动完毕采集、解决、报告数据流程。
5.4.10数据管理
5.4.10.1、项目备份
1)在QuickStart界面,选取菜单"管理-备份当前项目"。
2)浮现"项目备份向导",单击“下一步”。
3)浮现"项目备份向导-选取目地"。
通过浏览选取目地。
建议选取在非操作系统安装硬盘分区内。
一旦选取完毕,单击"“拟定”"关闭后,回到项目备份窗口,单击“下一步”。
4)浮现"项目备份向导-备份显示"。
确认数据复制已经成功,再单击“下一步”。
5.4.10.2.项目还原
1)在QuickStart界面,选取菜单"管理",下拉菜单中选取"还原项目"。
2)浮现"还原项目向导"。
3)通过"浏览"选取被还原项目所在途径,单击“拟定”。
4)单击“下一步”。
5)如浮现类似如下内容对话框,则需为还原项目另起一种名字。
6)在"输入磁盘空间配额"页中,输入项目名,并注意此处"表空间配额"应不得不大于欲还原项目原有配额(数据文献大小),然后单击“下一步”。
7)如果需要,可以在此页面中,选取该项目与否属于某个父项目。
8)在"还原显示"中,如果浮现如下对话框,单击"拟定"。
9)在"还原显示"中,等待数据还原结束后,单击"完毕"。
5.4.11项目管理
5.4.11.1新建项目
1)进入到Emopwer3QuickStart界面。
在菜单中选取"管理-创立新项目"。
2)浮现"新项目向导"对话框,选取新建项目父项目:
3)单击"下一步",,弹出"新建项目向导-表空间",表空间50MB为默认设立,可依照需要增减。
4)浮现"新建项目向导-选项"页。
选取用于本项目选项,如果无法拟定恰当设立,请接受默认选项。
单击"下一步"。
5)新建项目向导-访问控制:
依照需要选取设立对您所创立项目具备访问权限顾客和顾客组,或者接受缺省选项,然后单击"下一步"。
6)新建项目向导-复制所选项:
需要选取复制项目,普通选取Defaults项目。
7)新建项目向导-输入名:
为新项目命名。
5.4.11.2查看及更改项目属性
在建立了新项目后来,可以依照需要在不同项目之间进行切换。
1)进入Empower2QuickStart界面,选取菜单"管理-变化系统/项目"
2)变化项目/系统:
依照需要进行选取项目或者选取系统(如果存在二个或者二个以上系统)。
选取完毕后,单击拟定。
如果选取了"在该窗口切换项目/系统",当前项目/系统会被新选中项目/系统
所代替,如果选取了"为项目/系统打开新窗口",则会为选中项目重新打开此外一种QuickStart界面。
3)在新项目/系统QuickStart界面内即可进行下一步操作。
3.系统配备
1)在QuickStart界面,选取菜单"视图-系统",查看系统。
2)浮现系统信息窗口。
在该窗口中,可以在地址栏中可以查看显示地址与否与仪器设立相似。
此外,可从"仪器"选项卡里"正常?
"一栏中查看仪器状态,在正常状况下,应显示"是"字样。
如有仪器在"正常?
"一栏浮现"否",可单击"扫描仪器"进行检查。
如检查后显示"是",
即恢复正常。
3)创立或连接到新色谱系统
a.在QuickStart界面,选菜单"管理-新建系统"。
b.浮现"新建色谱系统向导-输入类型"页面,选取系统类型为"新建系统"。
然后单击"下一步"。
c、浮现"新建色谱系统向导-选取系统"页面,在"可用仪器"组中,选中新系统
组件,然后用鼠标拖拽至右侧"新系统仪器"组中。
选取完毕,单击"下一步"。
如有
误选,则如法,将误选新系统仪器,用鼠标拖拽回"可用仪器"组中。
d.浮现"新建色谱系统向导-访问控制"页面。
4)删除色谱系统
a.在"配备"目录区,单击"系统"。
b.在"系统"表中,右键单击要删除系统行号,然后在菜单中选取"编辑-删除"
c.浮现"确认删除"提示框,单击"是"。
d.再次浮现"删除色谱系统"提示框,此时需要选取"删除所有"。
删除所有-从Empower数据库、Empower节点和Empower数据库上所有顾客帐号中删除选定色谱系统。
当不再配备实际系统时,请使用此选项。
删除-从此数据库上所有顾客帐号中删除选定色谱系统,但保存采集服务器上配
置系统。
Empower节点继续运营该系统,可于稍后重新与其连接。
当您不再需要该系统但其她顾客仍需要它时,请使用此选项。
e、如果浮现如下对话框,请单击"拟定"。
待仪器空闲后,即可通过前述环节,将系统删除。
规则:
不能删除MS系统。
虽然该系统不再出当前列表中,它仍会出当前"仪器"选项卡中。
物理连接到Empower节点所有仪器将出当前该节点仪器列表中。
6支持性文献
《Waterse2695液相色谱仪操作指南》
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