实验2 线粒体和液泡系的超活染色与观察学习资料.docx
- 文档编号:25148218
- 上传时间:2023-06-05
- 格式:DOCX
- 页数:11
- 大小:632.90KB
实验2 线粒体和液泡系的超活染色与观察学习资料.docx
《实验2 线粒体和液泡系的超活染色与观察学习资料.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《实验2 线粒体和液泡系的超活染色与观察学习资料.docx(11页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
实验2线粒体和液泡系的超活染色与观察学习资料
实验2线粒体和液泡系的超活染色与观察
中国海洋大学实验报告
姓名:
常天易系年级:
海洋生命学院2012级专业:
生物科学
科目:
分子细胞生物学实验学号:
12050011006
线粒体与液泡系的超活染色与观察
一、实验目的
1、观察动、植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布;
2、学习一些细胞器的超活染色技术。
3、观察豆芽根部细胞的液泡分布
2、实验原理
1、詹纳斯绿B染液被线粒体中的细胞色素氧化酶氧化而呈现蓝绿色,在细胞的其他部位因保持还原状态而呈现无色。
2、中性红染液为一种碱性染液,易随外周染液进入液泡,因液泡内环境偏酸性,所以使液泡被染上红色。
三、实验材料
黄豆幼根根尖、人口腔上皮细胞,Ringer试剂,詹纳斯绿B染色液,中性红染液
4、实验方法
黄豆幼根根尖的超活染色
(1)、使用中性红染液
将黄豆幼根根尖小心地纵切一薄片
将纵切片浸入到载玻片上的中性红染液中染色10分钟
用吸水纸轻轻地把染液吸掉,再向标本中滴加Ringer试液
盖上盖玻片,用镊子轻压玻片后,在显微镜下观察
(2)、使用詹纳斯绿B染液
将黄豆幼根根尖小心地纵切一薄片
将纵切片浸入到载玻片上的詹纳斯绿B染液中染色10分钟
盖上盖玻片,用镊子轻压玻片后,在显微镜下观察
(3)、使用詹纳斯绿B和中性红染液混合染色
①先加詹纳斯绿B,后加中性红染液
将黄豆幼根根尖小心地纵切一薄片
将纵切片浸入到载玻片上的詹纳斯绿B染液中染色10分钟
向载玻片上的标本滴加中性红染液再染色10分钟
用吸水纸轻轻地把染液吸掉,再向标本中滴加Ringer试液
盖上盖玻片,用镊子轻压玻片后,在显微镜下观察
②、使用詹纳斯绿B和中性红染液同时染色
将黄豆幼根根尖小心地纵切一薄片
将纵切片浸入到载玻片上的詹纳斯绿B染液和中性红染液的混合物中染色10分钟
用吸水纸轻轻地把染液吸掉,再向标本中滴加Ringer试液
盖上盖玻片,用镊子轻压玻片后,在显微镜下观察
人口腔上皮细胞的超活染色
(1)、使用詹纳斯绿B染色
用消毒牙签的钝端在口腔上皮轻轻地挂取部分上皮细胞
在载玻片上滴加詹纳斯绿B染液,将牙签上的内容物在染液中混匀
染色10分钟后,在显微镜下观察
(2)、使用中性红染色
用消毒牙签的钝端在口腔上皮轻轻地挂取部分上皮细胞
在载玻片上滴加中性红染液,将牙签上的内容物在染液中混匀,染色10分钟
用吸水纸轻轻地把染液吸掉,再向标本中滴加Ringer试液
盖上盖玻片,在显微镜下观察
五、实验结果
1、观察根尖的染色情况
图1、根部伸长区的切片及其在中性红染色下显示的液泡。
图2、根部成熟区的切片及其在中性红染色下显示的液泡。
图3、根部成熟区用詹纳斯绿B染色,蓝色部位为线粒体,图中液泡因染色较浅而呈现。
图4、根部用詹纳斯绿和中性红染液染色,两种试剂同时加入。
图5、根部先用詹纳斯绿B染色,后用中性红染色,所示液泡。
2、观察口腔上皮细胞的染色情况
图6、口腔上皮细胞用詹纳斯绿B染色,蓝色部位为线粒体。
图7、口腔上皮细胞用中性红染色,图中褶皱(箭头所指)为高尔基体。
六、思考题
1.用一种活体染色剂对细胞进行超活染色,为什么不能同时观察到线粒体、液泡系等多种细胞器?
2.因为詹纳斯绿B染液是通过被细胞色素氧化酶氧化而显蓝色的;中性红染液时通过植物的活细胞大量吸收中性红并向液泡中排泌,由于液泡在一般情况下呈酸性反应,因此,进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现红色,而进行染色的;染色机制不同,所以无法同时染色。
但是实验发现,在詹纳斯绿B染液染色时,在适当的染液浓度范围内,适当的染色时间里,在合适的细胞(代谢较为旺盛,线粒体较多)里,詹纳斯绿B染液可以把线粒体染色,而液泡由于染色程度较浅而显现。
2、黄豆根尖经中性红超活染色,为什么看到生长点的细胞中液泡多,而且染色深,延长区细胞中液泡数量变少,染色浅?
在生长点的细胞,由于分裂很快,所以细胞小、细胞质浓、细胞核大、代谢旺、液泡多、液泡小,细胞的代谢较快,所以液泡内酸性较强,所以染色液较深;而在延长区的细胞,由于分裂较慢,以延长为主,所以细胞的液泡个数较少、而液泡较大,细胞的代谢较为缓慢,所以液泡内的酸性较弱,所以染色较浅。
七、总结与讨论
1、通过对图1至图2的对比,通过对根不同部位在光镜下的观察,发现:
液泡在分生区较小,数目较少,染色较浅,再向成熟区的过渡中,液泡数目变多,并逐渐有融合之势,染色液逐渐加深。
2、在通过詹纳斯绿B对根部的染色发现,仅十分钟,詹纳斯绿B只能将表皮附近的细胞染上颜色,这可能是由于植物细胞的细胞壁的阻拦。
对被染上色的细胞进行观察后发现,细胞质中线粒体被染成了蓝色,液泡亦被染上颜色,但颜色相对较浅(图3),所以可以看见液泡。
3、中性红和詹纳斯绿B染液都对黄豆根部细胞染色时,詹纳斯绿B会覆盖中性红染液的颜色,而导致观察结果模糊。
4、用中性红染液对口腔上皮细胞进行染色时发现,可以较为清晰的看到细胞内的高尔基体结构。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 实验2 线粒体和液泡系的超活染色与观察学习资料 实验 线粒体 液泡 染色 观察 学习 资料
![提示](https://static.bdocx.com/images/bang_tan.gif)