叶绿素A测定复习试题.doc
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叶绿素a测定复习试题
一、填空题
1.叶绿素a的测定方法有和,环境监测(生物)技术规范中规定用。
答:
分光光度法;荧光光度法;分光光度法;
2.地表水环境质量标准(GHZB1-1999)中,对控制湖泊水库富营养化的特定项目之一叶绿素a作了明确规定:
Ⅰ类水质的标准值为,Ⅱ类水质的标准值为,Ⅲ类水质的标准值为,Ⅳ类水质的标准值为,Ⅴ类水质的标准值为。
答:
≤0.001mg/L;≤0.004mg/L;≤0.01mg/L;≤0.03mg/L;≤0.065mg/L。
3.进行生物样品污染物测定的样品处理可概括为二个过程:
第一步是将样品
、、;第二步是将前一步处理过的样品
以消除干扰,提高被测组分的浓度。
答:
分离;纯化;浓缩;分解消化或提取。
4.经丙酮浸取含有叶绿素a的溶液,以溶液为参比,在波长、
、、下测定吸光度。
在波长测定丙酮溶液的空白值。
丙酮溶液空白值应不大于。
答:
丙酮;663nm;645nm;630nm;750nm;0.05。
5.经离心后的样品上清液,在750nm处测定吸光度,用以校正提取液的,
当测定用1cm比色皿,吸光度超过时,提取液应。
答:
浊度;0.005;重新离心。
二、问答题
1.控制叶绿素a指标值的意义是什么?
答:
叶绿素a是反映水体富营养化的一个重要指标。
控制叶绿素a就在于控制富营养化和藻类生物量,从而揭示湖库富营养化发生的内在实质。
2.叶绿素a的涵义是什么?
答:
指水中藻类具有光合色素的叶绿素。
3.什么叫富营养化?
答:
营养物质特别是含氮和磷的化合物,在淡水或盐水中的富集。
富营养化加速了藻类和较高等植物的生长。
4.评定水质富营养化的几种类型标准是什么?
答:
参照国际经济合作与发展组织(OECD)规定和关于评定湖泊富营养化状态的叶绿素a划分标准:
以≥78μg/L为重富营养型;11—78μg/L为富营养型;3.0—11μg/L为中营养型;<3.0μg/L为贫营养型。
5.用于叶绿素a测定的水样应如何保存?
答:
每升水样加1%碳酸镁悬浊液1ml,以防止酸化引起色素溶解。
如不能
立即测定,则应在低温(0—4℃)避光保存。
6.叶绿素a测定方法的原理是什么?
答:
原理是:
以丙酮溶液提取浮游植物色素,浸取液经过滤离心后,依次在663、645、630nm波长下测定吸光度,按Jettrey—Humphrey方程式计算,可得出叶绿素a的含量。
7.一般用于测定叶绿素a的样品采集多少量较合适?
答:
通常采样体积可根据水中叶绿素a含量的高低来确定,一般可采取1.5—2升。
按浮游植物采样方法,湖泊、水库采样500毫升,池塘300毫升,按海洋监测方法规定,海水采取2—5升。
8.什么叫中营养水?
答:
天然发生的,或由于营养累积形成的中等营养状态的水,及介于贫营养和富营养之间的水。
9.什么叫贫营养水?
答:
贫营养物且含高浓度腐殖质的水。
10.简述叶绿素a测定操作步骤?
答:
⑴.样品制备:
在每升水样中加入1mL1%碳酸镁悬浮液,混匀,用滤膜过滤。
过滤负压不得超过50kPa。
⑵.样品提取:
用10mL90%丙酮溶液浸泡滤膜,置于冰箱冷藏12—24h,提取叶绿素a。
⑶.样品离心:
以3000—4000转/分,离心十分钟。
⑷.样品测定:
用分光光度计,以90%丙酮溶液为参比,分别在750nm、663nm、645nm、630nm波长下测定吸光度。
11.如果样品过滤后不能马上测定,应该怎么做?
答:
若滤得样品不能及时提取,应该将滤膜抽干,对折后再套上一张滤纸,置于含硅胶的干燥器内,贮存在低于1℃的冰箱中。
12.试写出测定叶绿素a的计算公式,并指出各符号的意义?
答:
叶绿素a(μg/L)=[11.64(663-E750)-2.16(E645-E750)+0.10(E645-E750)]×ν/V.δ
E——吸光度值
v——样品提取液体积ml
V——样品体积L
δ——比色皿厚度cm
三、计算题
1.采集某一水库的样品500毫升,进行叶绿素a的检测,测得的结果是:
750nm处吸光度值0.002;663nm处吸光度值0.849;645nm处吸光度值0.486;630nm处吸光度值0.209;请计算该样品叶绿素a的含量。
用地表水质量标准评价该水质为几类标准?
答:
叶绿素a(mg/L)=(11.64×0.847-2.16×0.484+0.10×0.207)×10/500
=0.177
根据与地表水质量标准比较,此水质为超Ⅴ类标准。
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