如何正确选择毛细管柱剖析.docx
- 文档编号:24707334
- 上传时间:2023-05-31
- 格式:DOCX
- 页数:20
- 大小:31.50KB
如何正确选择毛细管柱剖析.docx
《如何正确选择毛细管柱剖析.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《如何正确选择毛细管柱剖析.docx(20页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
如何正确选择毛细管柱剖析
如何正确选择毛细管柱
(1)柱长度的选择
分辨率与柱长的平方根成正比。
在其他条件不变的情况下,为取得加倍的分辨率需有4倍的柱长。
较短的柱子适于较简单的样品,尤其是由那些在结构、极性和挥发性上相差较大的组分组成的样品。
一般来说,
15m的短柱用于快速分离较简单的样品,也适于扫描分析;
30m的色谱柱是最常用的柱长,大多数分析在此长度的柱子上完成;
50m、60m或更长的色谱柱用于分离比较复杂的样品。
应该注意,柱长增加分析时间也增加。
(2)柱内径的选择
柱径直接影响柱子的效率、保留特性和样品容量。
小口径柱比大口径柱有更高柱效,但柱容量更小。
0.25mm:
具有较高的柱效,柱容量较低。
分离复杂样品较好。
0.32mm:
柱效稍低于0.25mm的色谱柱,但柱容量约高60%。
0.53mm:
具有类似于填充柱的柱容量,可用于分流进样,也可用于不分流进样,当柱容量是主要考虑因素时(如痕量分析),选择大口径毛细管柱较为合适。
(3)液膜厚度的选择
液膜厚度影响柱子的保留特性和柱容量。
厚度增加,保留也增加。
0.1~0.2(m:
薄液膜厚度的毛细管柱比厚液膜的毛细管柱洗脱组分快,所需柱温度低,且高温下柱流失较小,适用高沸点的化合物的分析。
0.25~0.5(m:
常用的液膜厚度。
厚液膜:
对分析低沸点的化合物较为有利。
(4)固定相的选择
固定相
组成
极性
类似品牌
应用
SE-30、OV-1、OV-101
二甲基硅氧烷
非极性
DB-1、HP-1、CP-Sil5CB、SPB-1、007-1、Rtx-1、BP-1……
烃类、胺类、酚类、农药、PCBs、挥发油、硫化物等
SE-54、
SE-52
5%苯基,1%乙烯基甲基硅氧烷
非极性
DB-5、HP-5、CPSil8CB、SPB-5、、Rtx-5、BP-5……
药物、芳烃类、酚、酯、生物碱、卤代烃
OV-1701
7%氰甲基,7%苯基甲基硅氧烷
中等极性
DB-1701、HP-1701、BP-10、CPSil19CB、Rtx-1701、SPB-1701……
药物、农药、除草剂、TMS糖
OV-17
50%苯基甲基硅氧烷
中等极
DB-17、HP-50、SP2250、CP-Sil19、Rtx-50、SPB-50……
药物、农药、甾类等
PEG-20M
聚乙二醇20M
极性
DB-WAX、HP-Wax、CarbowaxSUPELCOWAX10、CPWAX52CB……
醇类、酯、醛类、溶剂、单芳、精油等
FFAP
聚乙二醇20M对苯二甲酸的反应产物
极性
DB-FFAP.HP-FFAP.Nukol、SP-1000……
醇、酸、酯、醛、腈
XE-60
25%氰乙基甲基硅氧烷
中极性
酯、硝基化合物
OV-225
25%氰乙基,25%苯基甲基硅氧烷
中极性
DB-225、HP-225、SP-2330、SPB-225、CP-SIL43CB
脂肪酸酯、PUFA、Alditol
OV-210
50%三氟丙基硅氧烷
极性
DB210、Rtx200……
极性化合物、有机氯化合物
OV-275
0%三氟丙基硅氧烷
强极性
DB210、SP2401、Rtx200……
极性化合物
气相色谱如何安装调试
一、色谱仪的安装
1.对色谱仪操作室的要求
(1)操作室周围不得有磁场,易燃及强腐蚀性气体。
(2)室内环境温度应在5~35度范围内,湿度小于等于85%(相对湿度),且室内应保持空气流通。
有条件的厂最好安装空调。
(3)准备好能承受整套仪器,宽高适中,便于操作的工作平台。
一般工厂以水泥平台较佳(高0.6~0.8米),平台不能紧靠墙,应离墙0.5~1.0米,便于接线及检修用。
(4)供仪器使用的动力线路容量应在10KVA左右,而且仪器使用电源应尽可能不与大功率耗电量设备或经常大幅度变化的用电设备公用一条线。
电源必须接地良好,一般在潮湿地面(或食盐溶液灌注)钉入长约0.5~1.0米的铁棒(丝),然后将电源接地点与之相连,总之要求接地电阻小于1欧姆即可。
(注:
建议电源和外壳都接地,这样效果更好)。
2.气源准备及净化
(1)气源准备事先准备好需用气体的高压钢瓶(一般大中城市均可购到),庄某一种气体的钢瓶只能装这种气体,每个钢瓶的颜色代表一种气体,不能互换。
一般用氮气,氢气,空气这三种气体,每种气体最好准备两个钢瓶,以备用。
有的厂使用氢气发生器和空气压缩机也可,但空压机必须无油。
凡钢瓶气压下降到1~2Mpa时,应更换气瓶。
一般厂家使用使用以上气体99.99%即可,电子捕获检测器必须使用高纯气源99.999%以上。
(2)气源净化为了出去各种气体中可能含有的水分,灰分和有机气体成分,在气体进入仪器之前应先经过严格净化处理。
若全部使用钢瓶气体,有的色谱仪附有净化器,且内已填有5A分子筛,活性炭,硅胶,基本可满足要求。
若使用一般氢气发生器,则必须加强对水分的净化处理,故应增大干燥管面积(体积在450立方厘米以上为好,填料用5A分子筛为佳),并在发生器后接容积较大的储器桶,以减少或克服气源压力波动时对仪器基线的影响。
若使用空压机作空气来源,空压机进气口应加强空气过滤,加大净化管体积,在干燥管内应填充一半5A分子筛,一半活性炭。
一般国产无油气体压缩机(天津产)可满足需要。
3.色谱仪成套性检查及安放
仪器开箱后,按资料袋内附件清单,进行逐项清点,并将易损零件的备件予以妥善保存。
然后按照仪器的使用说明书上要求,将其放置于工作平台上,并对着接线图和各插头,插座将仪器各部分连接起来,最后连接记录仪和数据处理机。
注意各接头不要接错。
4.外气路的连接
(1)减压阀的安装有的仪器随机带有减压阀,若没有的则要购买。
所用的是2只氧气,1只氢气减压阀。
将2只氧气减压阀,1只氢气减压阀分别装到氮气,空气和氢气钢瓶上(注意氢气减压阀螺纹是反向的,并在接口处加上所附的O形塑料垫圈,以便密封),旋紧螺帽后,关闭减压阀调节手柄(即旋松),打开钢瓶高压阀,此时减压阀高压表应有指示,关闭高压阀后,其指示压力不应下降,否则有漏,应及时排除(用垫圈或生料带密封),有时高压阀也会漏,要注意。
然后旋动调节手柄将余气排掉。
(2)外气路连接法把钢瓶中的气体引入色谱仪中,有的采用不锈钢管(φ2×0.5mm),有的采用耐压塑料管(φ3×0.5mm)。
采用塑料管容易操作,所以一般采用塑料管。
若用塑料管,在接头处就要有不锈钢衬管(φ2×20mm)和一些密封用的塑料等材料。
从钢瓶到仪器的塑料管的长度视需要而定,不宜过长,然后用塑料管把气源和仪器(气体进口)连接起来。
(3)外气路的检漏把主机气路面板上载气,氢气,空气的阀旋钮关闭,然后开启各路钢瓶的高压阀,调节减压阀上低压表输出压力,使载气,空气压力为0.35~0.6Mpa(约3.5~6.0kg/cm3),氢气压力为0.2~0.35Mpa。
然后关闭高压阀,此时减压阀上低压表指示值不应下降,如下降,则说明连接气路中有漏,应予排除。
5.色谱仪气路气密性检查
气密性检查是一项十分重要的工作,若气路有漏,不仅直接导致仪器工作不稳定或灵敏度下降,而且还有发生爆炸的危险,故在操作使用前必须进行这项工作(气密检查一般是检查载气流路,氢气和空气流路若未拆动过,可不检查)。
方法是,打开色谱柱箱盖,把柱子从检测器上拆下,将柱口堵死,然后开启载气流路,调低压输出压力为0.35~0.6Mpa,打开主机面板上的载气旋钮,此时压力表应有指示。
最后将载气旋钮关闭,半小时内其柱前压力指示值不应有下降,若有下降则有漏,应予排除。
若是主机内气路有漏,则拆下主机有关侧板,用肥皂水(最好是十二烷基磺酸钠溶液)逐个接头检漏(氢,空气也可如此检漏),最后将肥皂水擦干。
二、仪器的调试
把气路,仪器等按上述接好,安置好后,便可进行下面检查和调试工作。
1.色谱仪电路各部件检查
仪器启动前应首先接通载气流路,调节主机面板上的载气旋钮(即:
载气稳流阀),使载气流量为20~30ml/min。
(1)启动主机开启主机总电源开关,色谱柱箱内马达开始工作,并检查是否有异样声响,若有,立即切断电源,并进一步检查排除。
有的色谱仪启动时自诊断,显示仪器运转情况:
正常或不正常,不正常显示包括哪一部分有问题,接线错误等等。
(2)各路温控检查按照说明书,逐个对柱温(包括程序升温),进样器温度,检测器温度进行恒温检查,是否能在高,中,低温度下保持恒定,特别是要求柱温温控精度达到0.01度。
气相色谱固定液的选择
(1)固定相SE-30、OV-1、OV-101
组成二甲基硅氧烷
极性非极性
类似品牌DB-1、HP-1、CP-Sil5CB、SPB-1、007-1、Rtx-1、BP-1……
应用烃类、胺类、酚类、农药、PCBs、挥发油、硫化物等
(2)固定相SE-54、SE-52
组成5%苯基,1%乙烯基甲基硅氧烷
极性非极性
类似品牌DB-5、HP-5、CPSil8CB、SPB-5、、Rtx-5、BP-5……
应用药物、芳烃类、酚、酯、生物碱、卤代烃
(3)固定相OV-1701
组成7%氰甲基,7%苯基甲基硅氧烷
极性中等极性
类似品牌DB-1701、HP-1701、BP-10、CPSil19CB、Rtx-1701、SPB-1701…
应用药物、农药、除草剂、TMS糖
(4)固定相OV-17
组成50%苯基甲基硅氧烷
极性中等极
类似品牌DB-17、HP-50、SP2250、CP-Sil19、Rtx-50、SPB-50……
应用药物、农药、甾类等
(5)固定相PEG-20M
组成聚乙二醇20M
极性极性
类似品牌DB-WAX、HP-Wax、CarbowaxSUPELCOWAX10、CPWAX52CB……
应用醇类、酯、醛类、溶剂、单芳、精油等
(6)固定相FFAP
组成聚乙二醇20M对苯二甲酸的反应产物
极性极性
类似品牌DB-FFAP.HP-FFAP.Nukol、SP-1000……
应用醇、酸、酯、醛、腈
(7)固定相XE-60
组成25%氰乙基甲基硅氧烷
极性中极性
类似品牌
应用酯、硝基化合物
(8)固定相OV-225
组成25%氰乙基,25%苯基甲基硅氧烷
极性中极性
类似品牌DB-225、HP-225、SP-2330、SPB-225、CP-SIL43CB
应用脂肪酸酯、PUFA、Alditol
(9)固定相OV-210
组成50%三氟丙基硅氧烷
极性极性
类似品牌DB210、Rtx200……
应用极性化合物、有机氯化合物
(10)固定相OV-275
组成0%三氟丙基硅氧烷
极性强极性
类似品牌DB210、SP2401、Rtx200……
应用极性化合物
气相色谱法简介
一、色谱和色谱分析
本世纪初,俄国植物学家茨维特在研究植物叶色素成分时,将植物色素的石油醚浸取液,倒入装有粉末状CaCO3吸附剂的竖立玻璃管内,然后加入纯的石油醚任其自由流下,结果管柱中被CaCO3吸附的各种植物色素,分成不同颜色的谱带,由此得名“色谱”。
后来的这种方法逐步就用于无色物质的分离、分析,但“色谱”这个名称一直沿用至今。
二、色谱分析的分类
色谱分析的分类方法很多,总的来说可分为气相色谱和液相色谱两大类。
结合实际的应用情况,将气相色谱分类归纳如下。
这种气相色谱的分类法,基本上是按气相色谱仪所具有的各种不同功能来分的。
因此对于具有不同色谱柱,检测器和其他组保件的同一台气相色谱仪,往往具有多种功能的用途。
对于主要用于定性、定量分析的所谓分析色谱仪,当它的填充色谱柱中装入固体吸附剂为固定相时,就可作气固色谱分析;而当它的填充色谱柱中装入固定液为固定相时,则可作气液色谱分析;如将填充色谱柱换上毛细管色谱柱并改换相应的进样装置时,就可作毛细管色谱分析;如在色谱仪的进样器前接入裂解装置,即可对一些高聚物进行裂聚物进行裂解色谱分析;如在色谱柱与检测之间装入一个馏分收集器即可作小型制备色谱等等。
三、气相色谱分析的流程及色谱图
图13—1是气相色谱分析的流程及色谱图。
N2或H2等载气(用来载送试样而不与待测组分作用的惰性气体)由高压载气瓶供给,经减压阀(表头a指示瓶压,表头b指示输出压力)减压后进入净化干燥器,以除去载气中杂质和水分,再由针形阀控制载气流量(由流量计指示)和压力(由压力表指示),然后通过汽化室进入色谱柱。
待载气流量,汽化室、色谱柱、检测器的温度以及记录仪的基线稳定后,试样可由进样器进入汽化室,则液体试样立即汽化为气体并被载气带入色谱柱。
因色谱柱中的固定相对试样中不同组分的吸附能力或溶解能力也不同,从而使试样中各种组分彼此分离而先后流出色谱柱。
并进入检测器,检测器得到不同组分的浓度(或质量)变化转变为电信号,并经放大器放大后,通过记录仪即可得到其色谱图。
由组分及其浓度即检测器输出的样品信号(电压或电流)随时间变化的曲线,称为色谱流出曲线或色谱图,如图13—2所示。
由工业二甲苯色谱图可知,工业二甲是对位、间位和邻位二甲苯三种异构体的混合物,其中间位二甲苯的色谱峰最大,故是主要成分,此外还含有乙苯等杂质峰。
因此色谱图对气相色谱分析有重要的实际意义。
色谱图中一些突出的部分称色谱峰。
如果分离完全,则每个色谱峰代表一种组分。
并且根据色谱峰的位置(通常以保留时间表示),可进行定性分析;根据色谱峰的面积或高度,可进行定量分析;根据色谱峰的峰宽和峰间距可评价色谱柱的分离效能和考察操作条件是否恰当等因素。
总之,色谱图中谱峰的峰位峰面积或峰高及峰宽和与其他峰的峰距是描述色谱峰的三项基本指标。
一、气相色谱仪
目前国内已生产出多种型号的气相色谱仪。
按其用途不同,大致用途不同,大致分为以下几种。
应用最广泛的是实验室分析用的多性能相色谱仪。
例如上海分析仪器厂生产的103型气相色谱仪,北京分析仪器三生产SP—2305型气相色谱仪和山东腾县无线电厂生产的SP—501型气相色谱仪等;工厂控制生产用的工业色谱仪。
例如上海分析仪器厂的102GD型色谱仪(供电力工业专用),北京分析仪器厂的SP—2307型色谱仪(供氮肥、电力工业专用)等;此外还有专供制备纯物质用的制备色谱仪。
例如大连第二电子仪器厂生产的SP—05型制备色谱仪(制备有机物的纯度达99.99%,并且同时收集7个组分)。
各种气相色谱都由气路系统、进样系统、分离系统、检测系统、放大和记录系统组成。
色谱法能解决那些物理常数相近、化学性质相似的同系物、异构体等复杂组分混合物的分离、分析问题。
它既能鉴定化合物又能测定其含量,而装置并不复杂、操作也较方便。
因此目前它已成为有机合成、天然产物、生物化学、石油化工、医药、卫生以及环境保护等各个领域中不可缺少一种重要分析手段。
其主要特点如下。
一、分离能力强
一般填充柱约为每米2000理论塔板数,而毛细管理柱可达每米105~107理论塔板数。
因此可分离、分析沸点十分接近的多组分混合物。
例如用毛细管色谱一次可分析轻油中150个组分。
所以它已成为石油成分分析的重要工具。
采用高选择性固定液(或吸附剂),使混合物中各组分间的的分配系数有较大的差别,从而能使固定相对同位素、烃类异构体等性质极为相似组分彼此分离。
二、灵敏度高
采用高灵敏度的检测器时,可测定ppm、ppo、ppt级甚至ppt级的杂质,绝对灵敏度可达10-11~10-13g。
例如,可测超纯气体、高纯试剂、高分子单体中1ppm~0.1ppb级杂质;可测农产品、食品、水中ppm、ppb级卤素、硫、磷化合物等农药残留成分;可测大气污染事物中ppb级,浓集后可测ppb级微量毒物。
1分析快速
一般不需要对样品进行复杂的预处理,通常分析一个多组分试样只需几分钟至几十分钟时间,尤其仪器配有色谱数据处理机工作时,试样出峰完毕,随即可以获得分析结果的数据。
2应用范围广
气相色谱法不仅可以分析气体样品,而且可以分析易挥发或可以转化为易挥发的液体和固体样品。
采用程序升温色谱时可测液体、固体样品中各馏分。
不但可用来分析有机物,而且可分析无机物,例如有些挥发无机物转化为挥发性的卤化物或金属络合物后进行分析。
对于硫酸、磷酸等无机酸与硅酯化试剂反应,生成硅酯衍生物后进行分析。
不但可分析易挥发、低沸点的物质,而且能分析某些易分解或不挥发、高沸点的物质。
例如采用所谓反应色谱法,将难挥发易分解的物质采用适当的化学反应,转化为易挥发稳定的衍生物后再分析。
目前已能分析沸点高达500~600℃的物质。
对于有些高分子或生物大分子物质,可采用裂解色谱分析;利用制备色谱可制备99.99%的超纯试剂;利用工业色谱可指示和控制生产过程自动化;利用小型自动色谱进行空间遥测遥控及环保监测。
色谱法与质谱、红外等分析方法比较,具有设备简单,操作方便等特点。
而色谱与质谱、红外待仪器联用时,能取长补短,达到更好的分析效果。
色谱基本理论
色谱法,又称层析法。
根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。
吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同,用溶剂或气体洗脱,以使组分分离。
常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。
分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同,以使组分分离。
其中一相为液体,涂布或使之键合在固体载体上,称固定相;另一相为液体或气体,称流动相。
常用的载体有硅胶、硅藻土、硅镁型吸附剂与纤维素粉等。
离子交换色谱是利用被分离物质在离子交换树脂上的离子交换势不同而使组分分离。
常用的有不同强度的阳、阴离子交换树脂,流动相一般为水或含有有机溶剂的缓冲液。
排阻色谱又称凝胶色谱或凝胶渗透色谱,是利用被分离物质分子量大小的不同和在填料上渗透程度的不同,以使组分分离。
常用的填料有分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等,可根据载体和试样的性质,选用水或有机溶剂为流动相。
色谱法的分离方法,有柱色谱法、纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。
色谱所用溶剂应与试样不起化学反应,并应用纯度较高的溶剂。
色谱时的温度,除气相色谱法或另有规定外,系指在室温下操作。
分离后各成分的检出,应采用各单体中规定的方法。
通常用柱色谱、纸色谱或薄层色谱分离有色物质时,可根据其色带进行区分,对有些无色物质,可在245-365nm的紫外灯下检视。
纸色谱或薄层色谱也可喷显色剂使之显色。
薄层色谱还可用加有荧光物质的薄层硅胶,采用荧光熄灭法检视。
用纸色谱进行定量测定时,可将色谱斑点部分剪下或挖取,用溶剂溶出该成分,再用分光光度法或比色法测定,也可用色谱扫描仪直接在纸或薄层板上测出,也可用色谱扫描仪直接以纸或薄层板上测出。
柱色谱、气相色谱和高效液相色谱可用接于色谱柱出口处的各种检测器检测。
柱色谱还可分部收集流出液后用适宜方法测定。
柱色谱法
所用色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装有吸附剂。
色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱时的流速,均按各单体中的规定。
吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果,除另有规定外通常多采用直径为0.07-0.15mm的颗粒。
吸附剂的活性或吸附力对分离效果有影响,应予注意。
吸附剂的填装干法:
将吸附剂一次加入色谱管,振动管壁使其均匀下沉,然后沿管壁缓缓加入开始层析时使用的流动相,或将色谱管下端出口加活塞,加入适量的流动相,旋开活使流动相缓缓滴出,然后自管顶缓缓加入吸附剂,使其均匀地润湿下沉,在管内形成松紧适度的吸附层。
操作过程中应保持有充分的流动相留在吸附层的上面。
湿法:
将吸附剂与流动相混合,搅拌以除去空气泡,徐徐倾入色谱管中,然后再加入流动相,将附着于管壁的吸附剂洗下,使色谱柱表面平整。
俟填装吸附剂所用流动相从色谱柱自然流下,液面将柱表面相平时,即加试样溶液。
试样的加入除另有规定外,将试样溶于层析时使用的流动相中,再沿色谱管壁缓缓加入。
注意勿使吸附剂翻起。
或将试样溶于适当的溶剂中。
与少量吸附剂混匀,再使溶剂挥发去尽后使呈松散状;将混有试样的吸附剂加在已制备好的色谱柱上面。
如试样在常用溶剂中不溶解,可将试样与适量的吸附剂在乳钵中研磨混匀后加入。
洗脱除另有规定外,通常按流动相洗脱能力大小,递增变换流动相的品种和比例,分别分部收集流出液,至流出液中所含成分显著减少或不再含有时,再改变流动相的品种和比例。
操作过程中应保持有充分的流动相留在吸附层的上面。
纸色谱法
以纸为载体,用单一溶剂或混合溶剂进行分配。
亦即以纸上所含水分或其他物质为固定相,用流动相进行展开的分配色谱法。
所用滤纸应质地均匀平整,具有一定机械强度,必须不含会影响色谱效果的杂质,也不应与所用显色剂起作用,以免影响分离和鉴别效果,必要时可作特殊处理后再用。
试样经层析后可用比移值(Rf)表示各组成成分的位置(比移值=原点中心至色谱斑点中心的距离与原点中心至流动相前沿的距离之比),由于影响比移值的因素较多,因此一般采用在相同实验条件下对照物质对比以确定其异同。
作为单体鉴别时,试样所显主色谱斑点的颜色(或荧光)与供置,应与对照(标准)样所显主色的谱斑点或供试品-对照品(1∶1)混合所显的主色谱斑点相同。
作为质量指标(纯度)检查时,可取一定量的试样,经展开后,按各单体的规定,检视其所显杂质色谱斑点的个数或呈色(或荧光)的强度。
作为含量测定时,可将色谱斑点剪下洗脱后,再用适宜的方法测定,也可用色谱扫描仪测定。
1、下行法所用色谱缸一般为圆形或长方形玻璃缸,缸上有磨口玻璃盖,应能密闭,盖上有孔,可插入分液漏斗,以加入流动相。
在近缸顶端有一用支架架起的玻璃槽作为流动相的容器,槽内有一玻璃棒,用以支持色谱滤纸使其自然下垂,避免流动相沿滤纸与溶剂槽之间发生虹吸现象。
取适当的色谱滤纸按纤维长丝方向切成适当大小的纸条,离纸条上端适当的距离(使色谱纸上端能足够浸入溶剂槽内的流动相中,并使点样基线能在溶剂槽侧的玻璃支持棒下数厘米处)用铅笔划一点样基线,必要时色谱纸下端可切成锯齿形,以便于流动相滴下。
将试样溶于适当的溶剂中,制成一定浓度的溶剂。
用微量吸管或微量注射器吸取溶剂,点于点样基线上,溶液宜分次点加,每次点加后,俟其自然干燥、低温烘干或经温热气流吹干。
样点直径一般不超过0.5cm,样点通常应为圆形。
将点样后的色谱滤纸上端放在溶剂槽内,并用玻璃棒压住,使色谱纸通过槽侧玻璃支持棒自然下垂,点样基线在支持棒下数厘米处。
色谱开始前,色谱缸内用各单体中所规定的溶剂的蒸气饱和,一般可在色谱缸底部放一装有流动相的平皿,或将浸有流动相的滤纸条附着在色谱缸的内壁上,放置一定时间,俟溶剂挥发使缸内充满饱和蒸气。
然后添加流动相,使浸没溶剂槽内滤纸,流动相即经毛细管作用沿滤纸移动进行展开至规定距离后,取出滤纸,标明流动相前沿位置,俟流动相挥散后按规定方法检出色谱斑点。
2、上行法色谱缸基本和下行法相似,唯除去溶剂槽和支架,并在色谱缸盖上的孔中加塞,塞中插入玻璃悬钩,以便将点样后的色谱滤纸挂在钩上。
色谱滤纸一般长约25cm,宽度则视需要而定。
必要时可将色谱滤纸卷成筒形。
点样基线距底边约2.5cm,点样方法与下行法相同。
色谱缸内加入适量流动相,放置,俟流动相蒸气饱和后,再下降悬钩,使色谱滤纸浸入流动相约0.5cm,流动相即经毛细管作用沿色谱滤纸上升,除另有规定外,一般展开至15cm后,取出晾干,按规定方
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 如何 正确 选择 毛细管 剖析