组织培养试题.docx
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组织培养试题
《组织培养》模拟试卷A卷(理论部分)
一、填空题:
(每空1.5分,共33分)
1、植物组织培养根据培养方式不同可以分为________和_________。
2、愈伤组织的器官发生顺序有四种情况,分别为无芽的根或无根的芽________、________、________、________。
3、对植物组织培养的培养基灭菌时,一般情况采用的条件是________温度,保持时间是________。
4、在培养基中,蔗糖的主要作用是________、________和________。
5、原生质体融合中,________的原理是利用交变电场,脉冲电压来促进细胞融合的。
6、________是指用一块活跃生长的愈伤组织块来看护单个细胞,并使其生长和增殖的方法。
7、动物细胞体外培养主要包括________、________和________三大类。
8、动物细胞培养时生长曲线分为、________、________、________和________四个时期。
9、植物花粉培养时,处于________时期的花粉比较容易成功。
10、细胞同步化的方法主要有________和________。
二、名词解释:
(每题4分,共20分)
1、细胞全能性:
2、原生质体:
3、callus:
4、人工种子:
5、褐变:
三、判断题:
(判断改正,请把错误的改正过来;本题共6小题,每题2分,共12分;只判断不改正,本小题得0.5分)
1、玻璃化现象的产生主要是细胞生长过程中环境因素的变化引起的。
2、植物生长素主要促进侧芽萌发生长,细胞分裂素则重要促进生根,有保鲜效果。
3、组织培养植株再生途径有两条:
一是体细胞胚胎发生,另一个是愈伤组织发生。
4、动物细胞体外培养的基本过程是:
从有机体取得材料——切碎或酶解——原代培养——传代培养。
5、植物脱毒技术就是把植物体内所有病毒都杀死,形成不含任何病毒的植株的技术。
6、冷冻保存种质资源时,慢速冷冻法适用于含水量较高,细胞中含有大液泡的材料。
四、简答题:
(本题共3小题,共20分)
1、简述细胞融合的基本过程。
(5分)
2、概述无菌操作基本过程。
(7分)
3、简述人工种皮的特点和使用人工种子的意义。
(8分)
五、分析题:
(15分)
举例试述杂交瘤技术生产单克隆抗体的原理和技术过程(必要时,可以附带图示)。
《组织培养》模拟试卷B卷(实验操作部分)
一、填空题:
1、培养基母液配制时,植物激素一般配制成浓度为_______mg/ml的溶液,贮存在_______ ℃下备用。
2、分装好的培养基置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌,灭菌条件为温度_______ ,压力_______ 。
3、不同培养基有不同的特点。
MS培养基的特点是_______ ;White培养基特点是_______ ;N6培养基的特点是_______ 。
4、外植体的选择是组织培养培养的关键环节之一,一般选择的原则是优良的种质_______、_______ 。
5、培养基中使用的糖源一般是蔗糖,其浓度为_______ 左右。
叶片组织接种后于_______ 条件下培养,每天光照12~14h,光照度约为_______ 。
二、简述题:
1、外植体灭菌消毒步骤。
2、无菌操作过程。
3、以MS培养基为例,简述配制过程。
一、填空题:
1、固体培养、液体培养
2、先芽后根、先根后芽,根芽同时生长
3、121℃,15——30min
4、调节渗透压、提供碳源、提供能源
5、电融合
6、看护培养
7、细胞培养、组织培养、器官培养
8、潜伏期、指数生长期、平台期、衰退期
9、单核期
10、分离同步化、诱导同步化
二、名词解释:
1、细胞全能性:
生物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组,并具有在一定条件下能够发育成完整个体的潜在能力。
2、原生质体:
指用特殊的方法脱去植物细胞壁的、裸露的、有生活力的原生质团。
3、callus:
即愈伤组织,指脱分化后的细胞,经过细胞分裂形成一团无特定结构和功能的松散的薄壁细胞团。
4、人工种子:
指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。
5、褐变:
指外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活,使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质,这种致死性的褐化物向外扩散使培养基变色,同时抑制其他酶的活性,严重影响外植体的脱分化和器官分化,最后褐变死亡的现象。
三、判断题:
1、对。
2、错前者促进生根,后者促进侧芽生长和保鲜效果。
3、错器官发生。
4、对。
5、错不含主要病毒的苗木称为无毒苗。
6、对
四、简答题:
1、细胞融合过程:
答:
基本过程是:
a、细胞在诱融剂或正弦电场作用下凝集,彼此靠近;b、两个相邻细胞之间的质膜相互融合,随后两个亲本细胞质膜上的受体、糖蛋白、糖脂等质膜成分也在融合后的质膜上重新分布;c、细胞质发生融合;d、细胞核的融合,形成单核融合细胞。
2、无菌操作
a、用水和肥皂洗净双手,穿上灭菌过的专用实验服、帽子鞋子,进入接种室;
b、打开超净工作台和无菌操作室的紫外灯,照射20min;
c、操作前10min使超净工作台处于工作状态,让过滤室空气吹拂工作台面和四周台壁;
d、照射20min后,关闭紫外灯,用70%的酒精擦拭工作台和双手;
e、用蘸有70%酒精的纱布擦拭有培养基的培养器皿,放进工作台;
f、把解剖刀、剪刀、镊子等浸泡在95%酒精中,在火焰上灭菌后,放在器械架上;
g、灭菌材料;,打开培养瓶,火烧瓶口,接种;
h、接种结束后,清理和关闭超净工作台。
3、人工种皮特点:
1、对胚状体或芽无毒害;2、柔软且有一定的机械抗压能力;3、能保持一定水分及营养物质;4、允许种皮内外气体交换通畅,不影响胚萌发突破,播种后易于化解。
意义:
1、人工种子结构完整,体积小,便于贮藏和运输,可直接播种,易于机械化操作;2、不受季节限制,不受环境制约,胚状体数量多、繁殖快、有利于工厂化生产;3、有利于繁殖生育周期长、自交不亲合、珍贵稀有的一些植物,也可以大量繁殖无病毒材料;4、可在人工种子中加入抗生素、菌肥、农药等成分,提高种子活力和品质;5、体细胞胚由无性繁殖体系产生,可以固定杂交优势。
五、单克隆抗体
原理:
正常B淋巴细胞不能在体外培养条件下长期生存,因而不能在体外持续产生抗体,而骨髓瘤细胞可以在体外快速生长,但不能分泌抗体,但是,若把二者在体外结合,获得杂交瘤细胞,使杂交瘤细胞既具有B淋巴细胞分泌抗体的能力,又具有骨髓瘤细胞能够在体外长期快速生长的特性。
步骤要点:
1、致敏B淋巴细胞和骨髓瘤亲本细胞的制备;2、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合(一般5:
1);3、杂交瘤细胞的筛选;4、可分泌特异性单抗的杂交瘤细胞的筛选;5、杂交瘤细胞的克隆化培养;6、单克隆抗体的生产和纯化。
模拟试卷B卷(实验操作部分)
一、填空题
1、0.1—1.0,2~4℃
2、121℃,1.1kg/cm2
3、无机盐浓度高,无机盐浓度低,KNO3和(NH4)SO4含量高,不含钼
4、健壮的植株、最适时期,最佳大小
5、3%,25~28℃,1500~2000lx
二、简述题
1、外植题灭菌消毒步骤:
先用流水冲洗10—20min或更长时间,然后在70%酒精中浸泡30s,再立刻放入0.1%—0.2%氯化汞液中浸泡10min左右或在10%的次氯酸钠、饱和飘白粉浸泡30min左右,然后再用蒸馏水冲洗4—5次,即可。
2、无菌操作过程:
(1)实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射40min灭菌,用70%酒精擦拭无菌操作台面,并开启无菌操作台风机运转10min后,才可开始实验操作。
实验结束后,将实验物品带出工作台。
如需要继续进行下一个实验,则用70%酒精擦拭无菌操作台面,再让无菌操作台风机运转10min后,才可进行下一个实验操作。
(2)无菌操作工作区域应保持清洁与宽敞,必要物品如试管架、移液器或吸管头等可以暂时放置,其它实验用品用完后应及时移出,以利气体流通。
实验用品要用70%酒精擦拭后才能带入无菌操作台内。
实验操作应在操作台中央无菌区域内进行,勿在边缘非无菌区域操作。
(3)小心取出无菌实验用品,避免造成污染。
切勿碰触吸管与吸头头部或容器瓶口,不要在打开的容器正上方操作实验。
容器打开后,用手夹住瓶盖并握住瓶身倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放在台面上。
(4)工作人员应注意自身的安全,必须穿戴实验衣与手套后才进行实验。
操作过程中,应避免引起气溶胶的产生,小心有毒性试剂,并避免尖锐物品伤人等。
(5)定期检查下列项目:
无菌操作台内气流压力是否正常,定期更换紫外灯管及HEPA过滤器滤膜,预滤网。
3、培养基配制过程:
a、取规定数量的糖源和凝固剂置于烧杯或搪瓷锅内,加蒸馏水或去离子水至培养基最终体积的3/4,在恒温水浴中加热使之溶解,并不断搅拌,防止琼脂凝块儿。
配制液体培养基时因不含凝固剂,无须高温加热。
b、根据计算所需量依次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物、生长调节物质母液及其他特殊的附加物,搅拌均匀。
吸取各种母液的移液器应专用,以免产生交叉感染。
对高温高压条件下不稳定或容易分解的植物生长调节物质必须在培养基进行高温高压灭菌后,用过滤的方法加入。
c、加水定容至规定体积,搅拌均匀。
在标准温度下将培养基定容后进行称量,并以此质量为标准进行较高温度的培养基的定容。
d、调整培养基的pH值。
一般采用1mol/LNaOH与1mol/LHCl来调整其pH值。
e、分装。
已经配制好的培养基应尽快的分装,以防止含琼脂的培养基在较低温度下凝固。
分装时应注意到培养基占该容器的1/3—1/4为宜。
f、封口。
培养基分装后,应立刻用封口膜将容器口部封严。
封口膜应具有透光、透气性,但不通透尘埃、微生物等杂质。
植物组织培养复习材料
一、名词解释。
1、植物组织培养:
植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养,
并在人工控制的环境条件下,使其发育成完整植株的科学技术。
简称组培。
2、脱分化:
指失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂,形成无分化的细胞即
愈伤组织的现象。
3、单倍体植株:
只含有配子体染色体组数的植株。
5、胚状体:
体细胞在一定条件下所诱导形成的胚称为体细胞胚,即胚状体。
二、不定项选择(每题2分,共10分)
1、下列不属于生长素类的植物激素是__AD_______。
AKt;BIAA;CNAA;DZT
2、影响培养基凝固程度因素有_ABCD_____。
A琼脂的质量好坏;B高压灭菌的时间;C高压灭菌的温度;D培养基的PH
3、第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是__B_______:
AMorel;BHaberland;C Schleiden;DWhite
4、下列不属于大量元素的盐是____C_____。
ANHNO;BKNO;CZnSO.7HO;DMgSO.7HO
43 3 4 2 4 2
5、下列实验中可能获得单倍体植株的是__BCD______。
A小麦的茎尖培养;B番茄花药培养;C玉米胚乳培养;D玉米花粉培养
三、填空题(每空1分,共20分)
1、植物组织培养按培养对象分为植株培养、_器官培养_、组织或愈伤组织培养、细胞
培养_等几种类型。
2、1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物细胞全能性_的理论概念;1943
年White提出植物细胞“_全能性_”学说,并出版了《植物组织培养手册》,从而使植
物组织培养成为一门新兴的学科。
3、细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的全部遗传信息_和发育成完整植株
的潜在的能力。
4、6-BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值低时促进___根_____的生长,这
时__脱分化_____占主导地位;比值高促进___芽_____的生长,这时___分化_____占主
导地位。
5、在组织培养中,不耐热的物质用__过滤灭菌___法灭菌,而培养基常用_湿热灭菌_
法灭菌。
6、组织培养中有三大不易解决的问题,它们分别是__污染_____、__褐化______、_玻
璃化__。
7、花药培养是_器官__培养,花粉培养属于__细胞___培养,但二者的培养目的一样,
都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞,最后发育成_单倍体植株_。
四、判断题(对的画“√”;错题画“×”。
每题1分,共5分)
1、2,4—D可用0.1mol/L的HCl助溶,再加蒸馏水定容。
(×)
2、幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易。
(√)
3、在MS的培养基成分中,MgSO4·7HO属于微量元素。
(×)
4、一般来说,光照强度较强,幼苗容易徒长,而光照强度较弱幼苗生长的粗壮。
(×)
5、由性细胞发育而成的胚叫做胚状体,而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。
(×)
五、简答题(每题5分,共15分)
1、培养基一般包括哪些基本成分?
答:
培养基的成份有:
(1)无机营养:
包括:
氧(O)、碳(C)、氢(H)、氮(N)、钾(K)、磷(P)、镁(Mg)、硫(S)和钙(Ca)等大量元素;铁(Fe)、铜(Cu)、锌(Zn)、锰(Mn)、钼(Mo)、硼(B)、碘(I)、钴(Co)、氯(Cl)、钠(Na)等微量元素
(2)有机营养:
氨基酸、天然提取物、维生素、糖类
(3)植物生长调节物质:
主要包括生长素类和细胞分裂素类。
(4)其他:
包括水、活性炭、琼脂等。
3、培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌?
答:
培养基一般采用湿热灭菌,如果培养基中的有些成分高温易分解,则可采用过滤灭菌.培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌。
植物材料一般采用药剂浸泡灭菌,具体操作如下:
(1)外植体的预处理,对植物组织进行修整,去掉不需要的部分,并将外植体用流水冲洗干净。
(2)用70%的酒精浸润材料30s左右。
(3)用灭菌剂浸泡灭菌,灭菌时不时搅动,使植物材料与灭菌剂有良好的接触,若灭菌
过程中加入数滴吐温,则灭菌效果更好。
(4)植物材料用无菌水冲洗3--5次,以除去灭菌剂。
一、名词解释(每题4分,共20分)
1、细胞全能性:
指植物体的每个具有完整细胞核的生活的细胞,都具有该植株的全部遗
传信息和发育成完整植株的潜在能力。
2、再分化:
在人工培养的特定条件下,细胞经过脱分化的过程而形成的无结构的分生组
织(愈伤组织)再次分化,进行器官形成,产丛生芽或胚状体,形成完整植株的过程。
3、愈伤组织培养:
指将母体植物上各个部分切下、形成外植体、接种到无菌培养基上、
进行愈伤组织诱导、生长和发育的一门技术。
一般情况下,植物组织均能诱发形成愈伤
组织,由外植体形成愈伤组织,标志着植物组织培养的开始。
二、不定项选择(每题2分,共10分)
1、活性炭在组织培养中的作用有__ABC____。
A吸附有毒物质; B减少褐变,防止玻璃化; C创造黑暗环境,增加培养基的通透性,利于根的生长;D增加培养基中的养分
2、下列具有细胞全能性的细胞是:
_ABCD___。
A成熟的老细胞;B幼嫩的组织细胞;C愈伤组织细胞D番茄的受精合子
3、下列培养基中____C____无机盐的浓度最低。
AMS培养基;BB培养基;CWhite培养基;N培养基
5 6
4、从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织,大致经历_ACD_____三个时期。
A诱导期;B潜伏期;C分化期;D分裂期
5、植物组织培养的特点是_ABCD__:
A培养条件可人为控制;B生长周期短,繁殖率高;C管理方便;D取材少
三、填空题(每空1分,共20分)
1、在无毒苗的组织培养中,外植体的大小与其成活率成__正比______,而与脱毒效果成__反比______。
2、一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象称为"___脱分化____"。
3、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为_普通茎尖__培养和_茎尖分生组织_培养两种类型。
4、愈伤组织的形态发生有_器官形态建成_和_胚形态建成__两种情况。
6、在组织培养中,IAA和GA必须用___过滤_____法灭菌,而接种室空间采用_70%酒精
或2%新洁尔灭喷雾_或_甲酫熏蒸__法灭菌。
7、植物的胚胎培养,包括___胚_______培养、___胚乳_____培养、__胚珠______培养、
___子房___培养。
8、幼胚培养时,其发育过程有_胚性发育_、_早熟萌发_、_产生愈伤组织三种方式。
四、判断题(对的画“√”;错题画“×”。
每题1分,共5分)
1、一个已分化的细胞若要表现其全能性,首先要经历脱分化过程。
(√)
2、一般来说,光照强度较强,幼苗容易徒长,而光照强度较弱幼苗生长的粗壮。
(×)
3、经过花药培养所获得的植株都是单倍体。
(×)
4、由性细胞发育而成的胚叫做胚状体,而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。
(×)
5、用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大,消毒效果越好越好。
(×)
五、简答题(每题5分,共15分)
2、在植物组织培养中细胞分裂素和生长素各有什么作用?
答:
生长素能促进细胞的纵向伸长,它的作用具有两重性:
既促进生长,又能抑制生长、甚至杀死植物;既促进发芽,又会抑制发芽;既能防止落花落果,又可疏花疏果。
这取决于浓度、细胞的年龄和器官的种类。
一般低浓度促进生长,中浓度抑制生长,高浓度则杀死植物。
细胞分裂素能促进细胞分裂和扩大、延迟衰老和保鲜、诱导芽的分化、促进侧芽发育,防止果树生理落果、打破种子的休眠,促使其发芽等作用。
二、不定项选择(每题2分,共10分)
1、高温易被破坏分解的植物激素是___ABD___。
AIAA;BGA;CNAA;DZt
2、同一植株下列__BD_____部位病毒的含量最低。
A叶片细胞;B茎尖生长点细胞;C茎节细胞;D根尖生长点细胞
3、在原生质体的培养中,渗透稳定剂的作用是A:
A稳定原生质体的形态而不使其被破坏B支持作用
C提供营养 D调节PH值
4、下列实验中不可能获得单倍体植株的是__AC_____。
A水稻茎尖培养;B草莓花药培养;C玉米叶片培养;D棉花胚乳培养
5、适合花粉培养的最适时期是B:
A单核早期B单核靠边期C二核期D三核期
三、填空题(每空1分,共20分)
1、一个已停止分裂的成熟细胞转变为__分生状态__状态,并形成_无分化的愈伤组织__的现象称为"脱分化"。
2、原生质体的分离有_机械法___和___酶解法___两种方法。
3、White培养基__无机盐_____浓度低,适合生根培养。
4、在无毒苗的组织培养中,外植体的大小与其成活率成__正比________,而与脱毒效果成__反比_______。
5、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为__普通茎尖___培养和___茎尖分生组织__培养两种类型。
6、由胚乳培养可以获得__单____倍体植株,经秋水仙素处理可以获得___二__倍体植株。
7、使单倍体植株染色体加倍的途径主要有自然加倍、人工加倍和通过愈伤组、织再生加倍
8、细胞悬浮培养有成批掊养 和连续培养 两种类型。
9、通过植物组织培养获得无病毒苗的方法主要有茎尖分生组织培养、愈伤组织培养、珠心胚培养及花药培养脱毒。
四、判断题(对的画“√”;错题画“×”。
每题1分,共5分)
1、经过花药培养所获得的植株都是单倍体。
(×)
2、幼嫩的组织比成熟的老组织脱分化难。
(×)
3、通过子房的培养,即可能等到单倍体植株,也有可能得到二倍体植株。
(√)
4、兰花可以通过芽丛分离的组培途径快繁,非洲菊通过原球茎增殖的途径快繁。
(×)
5、单细胞培养可以采用发酵罐进行培养。
(×)
五、简答题(每题5分,共15分)
3、什么是看护培养?
其具体的方法是什么?
答:
看护培养指用一块生长活跃的愈伤组织来看护单个细胞或其他培养物,使其生长和增殖的方法。
具体方法:
1、将生长活跃的愈伤组织放入灭过菌的固体培养基上,并在愈伤组织上放一片无菌滤纸片。
2、将该愈伤培养过夜。
3、将单细胞或其他培养物放于滤纸片上面,移入培养室培养。
一、名词解释(每题4分,共20分)
1、细胞培养:
指从植物体中分离了单细胞,无人工条件下进行培养,使其生长增殖,甚至发育成完整植株的技术。
4、无病毒苗:
指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
二、不定项选择(每题2分,共10分)
1、IAA需要用___C_____法灭菌。
A灼烧灭菌;B干热灭菌;C过滤灭菌D高压湿热灭菌
2、能打破种子休眠,促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是AB:
AGA;BIAA;CNAA;DZT
3、同一植株下列__BD_____部位病毒的含量最低。
A叶片细胞;B茎尖生长点细胞;C茎节细胞;D根尖生长点细胞
4、从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织,大致经历__ACD____三个时期。
A诱导期;B潜伏期;C分化期;D分裂期
5、下列属于微量元素的盐是_BCD___。
ANH4NO3 ;BKI;CZnSO4.7HO2;DCuSO4.5HO2
三、填空题(每空1分,共20分)
1、去除植物病毒的主要方法是_组培法___和_理化法___两种方法,当把二者结合起来脱毒
效果最好。
2、原生质体的融合可实现__体细胞___的杂交,其融合的方式分为_自然融合__和_人工诱
导融合_两类。
3、在组织培养中,非洲菊是靠__丛生芽____的方式进行繁殖的,而蝴蝶兰是以_原球茎增
殖__的方式进行快繁的。
4、单细胞培养的方法主要有看护培养、微室培养及平板培养。
5、在通过微茎尖培养脱毒时,外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定,一般以_0.3--05___mm、带_1-2___个叶原基为好。
6、植物组织培养按培养过程中是否需要光,可分为__光_____培养和__暗___培养。
7、细胞的再分化有器官发生和体胚发生两种形式。
8、连续培养有浊度恒定法和化学恒定法两种方法。
9、通过茎尖培养脱毒苗的过程中,切取茎尖的大小与其成活率成__正比__,而与脱毒效果成_反比__。
四、判断题(对的画“√”;错题画“×”。
每题1分,共5分)
1、一个已分化的细胞若要表现其全能性,首先要经历脱分化过程。
(√)
2、环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发,一般要求80%-90%的相对湿度。
(√)
3、通过花药培养,即可能等到单倍体植株,也有可能得到二倍体、三倍体甚至更多倍体植
株。
(√)
4、在MS的培养基成分中,M
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- 组织培养 试题