UV2600型紫外分光光度计操作指导书.docx
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UV2600型紫外分光光度计操作指导书
UV-2600型紫外分光光度计操作指导书
1概况
1.1仪器概况:
UV-2600型紫外分光光度计是由日本岛津(Shimadzu)生产制造,与功能强大的操作软件UVProbe结合,操作简单方便,且符合SH/T0181方法的测量精度要求。
1.2主要技术参数
波长范围
185nm~900nm
(使用积分球附件ISR-2600Plus时220nm~1400nm)
分辨率
0.1nm
波长准确性
±0.3nm
谱带范围
0.1、0.2、0.5、1、2、5nm
测光方式
双光束方式
杂散光
0.005%以下
检测器
光电倍增管R-928
测光范围
-5~5Abs
比色池
1cm
光源
50W卤素灯、氘灯
单色器
切尼尔-特纳单色器
主电压
AC100V~240V
主频率
50/60Hz
1.3使用条件
操作温度:
15~35℃
操作湿度:
30%~805%
2仪器结构
仪器由UV-2600型紫外分光光度计和计算机组成。
3操作步骤
3.1开机
在使用前先确认仪器和计算机的工作电源,检查仪器样品室应无遮挡光路的物品。
确认后先开启计算机,然后开启仪器电源。
待分光光度计外侧的指示灯显示绿色时,启动电脑桌面上的UVPROBE程序。
首先从下拉式菜单的仪器项上追加需要的仪器,操作完毕如下图①所示,然后点击上图的连接键②,这样仪器与计算机连接(当然,中间的通讯电缆的连接、通讯口的指定等
都是必须的,此处不再赘述)并开始下示的初始化面。
初始化大约需要5分钟左右,进行一系列的检查和初置,如一切顺利通过就可以开始测定。
3.2测定
首先选择测定的方式,在主菜单上能发现右图
所示的各键,自左至右分别为:
①报告生成器:
用于制作各种格式的报告。
②动力学测定方式:
一般测定吸收值随时间的变化,通常用于酶反应随时间的变化。
③光度测定(定量)方式:
可进行多波长、单波长、峰高或峰面积定量。
校准曲线可使用多点、单点、K因子等方法。
由于具有自定义方程的功能,DNA/蛋白质测定等以前需要特殊选购的软件才能进行的工作,使用UVPROBE可自编程序进行测定。
④光谱测定方式:
可进行紫外可见区的光谱测定。
3.3光谱测定方式
3.3.1参数的设定
点击菜单栏上的
键,即可出现如下图所示的选择测定条件的画面:
在此对话框中可选择波长测定的范围、扫描的速度、采样间隔等条件。
点击图中[试样准备]标签,可输入重量、体积、稀释因子、光程长等信息。
点击图中[仪器参数]标签,可选择测定种类(吸收值、透射率、能量、反射率)以及通带(狭逢)等条件。
点击主菜单上的
键,可分别开关图象面板(图中的左键)、数据处理面板(中)以及方法面板(右键)。
3.3.2光谱测定
首先点击上图的
进行基线校正,然后点击③波长设置到500nm,再点击①自动调零。
为何要如此做?
原因非常简单,由于一般的分光光度计的能量在500nm左右最强,在此自动调零可得到最正确的基线。
通常上述操作在开机后进行一次就足够了。
此后,设置样品点击④键即可开始测定。
3.4光度测定方式
3.4.1参数的设定
点击菜单栏中的
键,出现下图:
此处显示的波长类型是“点”表示测定高度,如果选择的是范围,则需输入起始和结束波长,并可选择最大、最小、峰、谷或面积等作为定量的依据。
无论如何选择,波长都是必须的,并要加入以后才有效。
在某单栏上有右列各
键,点击以后分别出现标准表(最左)、样品表(左2)、
工作曲线图(右2)和样品图(最右)。
3.4.2定量测定
首先如前所述,选择了点及波长,然后在方法中选择校准,在此决定用工作曲线法定量,并选择多点、单点或K因子法等。
进行定量测定也需要基线校正和自动调零,方法如前面所述。
此后,样品室内逐个放入标准,点击上图下方的读数键即可。
注意,无论是测定标准或未知样品,必须输入名称才有效。
标准测定完毕,工作曲线自动显示。
接下去就可测定未知样品的浓度了。
有时不测定浓度,只测定某些波长的读数,则在校准方法中选择“原始数据”,在登录时选择若干需要的波长,即可测定各波长的读数。
使用SH/T0181方法标准进行光谱测定时,点击③设置波长到287.5nm,再放入两只均装有光谱纯异辛烷的比色皿,点击①自动调零,最后,将外面一只比色皿中装入需要测定的样品,点击④键读数,即可测得在该波长处的样品的吸光度值。
在工作曲线图象上点击鼠标右键,选择属性,可从该图象上得到许多有用的信息,见下图:
只需在这些显示的项目中做标记,相应的信息即出现在工作曲线图象的左下方。
见下图的划圈部分:
所谓K因子法实际上可称为已知工作曲线法(而且不局限于直线),即工作曲线回归方程的系数和次数已知,故而只要输入这些系数以及工作曲线的次数。
这一方法对工作曲线较为稳定的日常分析非常有效。
设置方法见下图:
3.5动力学分析
在菜单栏中点击方法键
,得到如下图象:
此处的计时方式选择的是“自动”,时间总量中需手动设置测定的时间。
由于是自动计时方式,所以采样步长(图中为时间周期)和读数次数将根据时间总量自动设置。
此外可设置波长以及活度计算的开始和结束时间。
设置大短的活度范围会出现错误信息。
相反,如果计时方式选择的是手动的话,则可输入时间周期和读取次数,而时间总量(测定时间)会根据输入的时间周期和读取次数自动计算得到。
活度范围用于酶反应随时间的变化,如果单纯进行时间扫描的话,则可不考虑活度范围。
测定的波长栏内可选择单波长或双波长(波长l-波长2或波长l/波长2)两种方法。
选择后输入相应的波长。
主菜单中有如右
各键,自主到右分别是时间扫描图象、数据处理面板、测定参数面板和酶活度图象。
点击各键屏幕出现相应的板块。
下图中表示已经测定得到数据的显示情况。
4定期维护检查表
检查维护项目
每天
1年
2年
3年
检查样品室
○
检查外观
○
确认光源点灯时间
○
更换W1(卤素)灯
○
更换D2(氘)灯
○
性能确认
○
○
○
5常见故障及排除
5.1初始化室的异常状况(以下编号见前文初始化窗口中内容)
编号
检查位置
处理措施
9⑧
关闭(OFF)本产品的电源开关后再次打开(ON),进新仪器初始化。
⑨、⑩、⑿
样品室池架上是否有遮挡光线的物品?
暂时关闭(OFF)本产品的电源开关。
取出遮挡光线的物品后再次打开(ON)电源。
观察光源室,W1是否漏光?
如果没有漏光将W1熄灭。
暂时关闭(OFF)本产品的电源开关后再次打开(ON)。
如果光源不亮,请更换W1灯。
光源的使用时间是否超过使用寿命?
在UVProbe软件中单击“仪器”菜单的“配置”,显示“配置”窗口后单击“点灯时间”选项卡。
如果各光源灯的点灯时间超过“灯寿命”,请更换光源。
⑾、⒀
样品室池架上是否有遮挡光线的物品?
暂时关闭(OFF)本产品电源开关。
取出遮挡光线的物品后再次打开(ON)电源,对仪器进行初始化。
样品室盖是否敞开?
暂时关闭(OFF)本产品电源开关。
关闭样品室盖后再次打开(ON)电源开关,对仪器进行初始化。
光源的使用时间是否超过使用寿命?
在UVProbe软件中单击“仪器”菜单的“配置”,显示“配置”窗口后单击“点灯时间”选项卡。
如果各光源灯的点灯时间超过“灯寿命”,请更换光源。
5.2故障症状与处理方法
故障(症状)
主要原因
处理方法
打开电源开关后不通电。
AC电源线插头是否插好?
正确连接AC电源线插头。
AC电源线是否被压,或电源线弯曲?
如果AC电源线损坏,更换相同型号的电源线。
供电电源是否符合仪器的电源规格?
使用与仪器的电源规格相符的电源。
保险丝是否烧断?
需要确认和更好保险丝时请与所在区域的岛津分公司联系。
无法与UVProbe通讯。
是否确保正确连接USB缆线?
请确切链接到PC和仪器上。
是否正确设置PC的COM端口?
在PC显示器右下方确认本产品COM端口号后,电极UVProbe“仪器”菜单的“配置”,设置连接端口。
是否正确安装USB驱动程序?
按照UVProbe软件的安装窗口安装USB驱动程序。
测光值异常。
光源是否熄灭?
在UVProbe软件中单击“仪器”菜单的“配置”,显示“配置”窗口然后单击“维护”选项卡。
“光源状况”的“W1”、“D2”复选框未被激活时,
A处理:
光源熄灯时,激活“W1”、“D2”的复选框。
在UVProbe中单击“断开”,关闭(OFF)与UVProbe的通讯;关闭(OFF)仪器电源。
稍后再打开电源;单击“连接”,进行仪器初始化。
如果光源灯未亮,显示错误时,再进行“B处理”。
光源灯点亮,随后又熄灭时进行“C处理”。
B处理:
光源未亮。
请更换新灯。
C处理:
仪器检出异常时强行将灯熄灭;检测风扇是否停止或基板上的温度感应器是否过热;关闭电源开关后与所在区域内的岛津分公司联系。
波长等测定参数设置是否正确?
请重新检查输入的参数。
测光值异常。
狭缝宽度是否合适?
改变狭缝宽度,重新进行测定。
光源的使用时间收费超过使用寿命?
如果光源的使用时间超过使用寿命,请更换光源。
测定的样品是否正确?
请检查所取样品是否正确。
使用的吸收池是否合适?
请使用符合测定目的的吸收池。
使用玻璃池时无法测定紫外区,请使用石英池。
仪器附近是否使用手机?
手机种类的信号强度可能光度值有影响。
样品室安装的特殊附件和连接器的连接是否正确?
请检查特殊附件是否正确安装到样品室,或连接器是否正确连接?
在仪器前方是否听到发动机的异常声响?
扇形发动机可能运行异常。
请与所在区域的岛津分公司联系。
异常警报发出蜂鸣声,LED显示红色。
排气风扇的排气口是否堵塞?
关闭电源开关。
检查排气风扇出口处10cm以内是否存在阻碍物,如果有请清除。
由于可能出现温度异常,请稍后再重新打开电源开关。
如果仍未解决,请与所在区域的岛津分公司联系。
排气风扇是否停止?
确认空气从左后方的排气口排出。
如果风扇停止运行,关闭电源开关后与所在区域的岛津分公司联系。
光源是否熄灭?
如果光源的使用时间超过使用寿命,请更换光源。
两侧光源都未亮。
排气风扇是否停止?
确认空气从左后方的排气口排出。
如果风扇停止运行,关闭电源开关后与所在区域的岛津分公司联系。
UVProbe启动慢。
仪器记录文件的容量是否增加?
由于加载存储的仪器记录需要时间,软件的启动可能会变慢。
按照以下顺序将仪器记录删除或进行数据库传输。
单击输出窗口的“仪器记录”选项卡;选择仪器记录的所有行;单击右键菜单中的“复制”,将仪器记录复制到剪贴板上;将复制的内容粘贴到文本文件中,保存到PC;再次选择UVProbe仪器记录的所有行;单击右键菜单中“删除”。
6附加说明
6.1本操作指导书参照岛津UV-2600型紫外分光光度计产品使用说明书和UVProbe中文说明书编制而成。
6.2本仪器适用于SH/T0181试验方法。
6.3本操作说明由二站徐樱萍起草。
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- UV2600 紫外 分光 光度计 操作 指导书