运动生理学实验复习.docx
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运动生理学实验复习
实验一ABO血型鉴定
【实验目的】
通过本实验,了解人类血型的遗传特性及其遗传方式;掌握人体血型(ABO型)的检验方法。
同时检测自己的血型。
【实验原理】
血型是指红细胞上特异抗原的类型。
在ABO型系统中,红细胞上有两种凝集原,分别称为A、B凝集原,根据红细胞上的这两种凝集原的不同或有无,可将血液分为四个类型,即A型、B型、O型、AB型。
在同一个体的血浆中,不会含有与他自身红细胞的抗原相对抗的抗体,相对抗的抗原与抗体相遇,会发生红细胞的凝集反应。
因此,可以将A型血清和B型血清作为标准血清,观察在与受测试红细胞混合时是否出现凝集反应来判断受试者的血型。
(如表一)
ABO血型中的抗原和抗体(表一)
血型
红细胞膜上所含的抗原
血清中所含的抗体
O
无A和B
抗A和抗B
A
A
抗B
B
B
抗A
AB
A和B
无抗A和抗B
交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合,观察有无凝集现象(见图1)。
输血时,一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集;其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。
前者叫交叉配血试验的主侧(也叫直接配血),后者叫交叉配血的次侧(也叫间接配血)。
只有主侧和次侧均无凝集,称为“配血相合”,才能进行输血;如果主侧凝集,称为“配血不合”或“配血禁忌”,不能输血;如果主侧不凝集,而次侧凝集,可以认为“基本相合”,但输血要特别谨慎,不宜过快过多,密切注视有无输血反应。
【实验器材】
显微镜、载玻片、刺血针、消毒牙签、抗A和抗B标准血清、生理盐水、酒精棉球。
【方法与步骤】
(一)ABO血型鉴定
1用玻片法鉴定血型
(1)将已知的A型与B型标准血清各滴一滴在双凹玻片的凹内,分别标明A与B。
(2)用75%酒精棉球消毒指端后,采血针刺破皮肤,滴1—2滴血于盛有1毫升生理盐水的小试管内混匀,制成5%红细胞悬液。
(3)用滴管吸取红细胞悬液,分别滴一滴于玻片两端的血清上,再分别用牙签搅匀(注意严防两种血清接触)。
(4)10—15分钟后用肉眼观察有无凝集现象。
如无凝集现象,可再搅匀混合,再静置10—15分钟,根据其有无凝集现象判断血型。
图一
2试管法
(1)取试管2只,分别标明A、B字样,分别加入相应标准血清2滴,各管加入受试者的红细胞悬液1~2滴摇匀。
(2)将上述二试管用1000转/分离心1min。
(3)取出小试管,轻弹底部,如沉淀物呈团块状浮起为凝集,呈散在烟雾状上浮进而恢复原混悬状为无凝集。
(二)交叉配血
(1)先用碘酒,继用75%酒精棉球消毒皮肤后,用消毒干燥注射器抽取受血者及供血者静脉血各2ml,各用一滴制备红细胞悬液,分别标明供血者与受血者。
余下血分别注入干净小试管,也标明供血者与受血者,待其凝固后析出血清备用。
(2)左两凹玻片左侧标上“主”(即主侧);右侧标上“次”(即次侧)。
主侧滴入供血者红细胞悬液一滴和受血者血清一滴;次则滴入受血者红细胞悬液一滴和供血者血清一滴。
分别用竹签混匀。
(3)15~30min后,观察结果。
如两侧均无凝集现象,可多量输血;如主侧无凝集而次侧有凝集只可考虑少量输血;如主侧凝集则不能输血。
父母的血型与子女的血型关系
父母血型
子女可能有的血型
子女不可能有的血型
O+O
O
A、B、AB
A+O
A、O
B、AB
A+A
A、O
B、AB
B+O
B、O
A、AB
B+B
B、O
A、AB
A+B
A、B、AB、O
---
AB+O
A、B
O、AB
AB+B
A、B、AB
O
AB+A
A、B、AB
O
AB+AB
A、B、AB
O
[注意事项]
(1)采血时,要用一定的力度,快速的刺破皮肤。
以免用力小、动作缓慢,而只刺破表皮,无血液流出。
(2)所用双凹玻片的试管实验前必须清洗干净,以免出现假凝集现象
[思考题]
1.用玻片法测定ABO血型,怎样判定其结果?
2.如何区别血液的凝集与凝固,其机理是否一样?
实验二 血红蛋白含量的测定
【实验目的】
掌握比色法测定血红蛋白含量的方法。
【实验原理】
测定血红蛋白含量的方法很多,实验常用沙利氏比色法。
其原理是在一定量的血液中,血红蛋白经少量盐酸的作用,使亚铁血红素变成高铁血红素,呈现较稳定的棕色。
用水稀释后与标准色比较,求出每100ml血液中所含的血红蛋白克数。
正常成年男子每100ml血液平均含14.4g,女子为13.1g。
【实验器材】
血红蛋白计、0.1mol/LHCl、刺血针、滤纸片、酒精棉球、乙醚、95%酒精、蒸馏水。
【实验方法与步骤】
1.血红蛋白计包括①标准比色架,架的两侧镶有两个棕色标准玻璃色柱。
②血红蛋白、稀释管,有方形也有圆形的。
两侧有刻度,一侧以g为计数单位,对侧以百分率计,按我国情况,是以每100ml血液内含血红蛋白14.5g为100%。
③20mm3血红蛋白吸管,还有玻璃棒、滴管。
2.用滴管加0.1mol/LHCl于血红蛋白稀释管内,到刻度10处。
3.用刺血针刺破指尖采血,血滴宜大些。
用血红蛋白吸管的尖端接触血滴,吸血至刻度20mm3处(0.02ml)。
4.用滤纸片或棉球擦净吸管口周围的血液,将吸管插入血红蛋白稀释管的盐酸内,轻轻吹出血液至管底部,反复吸入并吹出稀释管内上层的盐酸,洗涤吸管多次,使吸管内的血液完全洗入稀释管内。
摇匀或用小玻璃棒搅匀后,放置10min,使盐酸与血红蛋白充分作用。
5.把稀释管插入标准比色架两色柱中央的空格中,使无刻度的两侧面位于空格的前后方,便于透光和比色。
6.用滴管向稀释管内逐滴加入蒸馏水(每加一滴要搅拌),边滴边观察颜色,直至颜色与标准玻璃色柱相同为止。
稀释管上液面的刻度读数即为每100ml血液血红蛋白的克数。
7.Hb值通常以每100ml血液中含Hb若干克来表示。
(g/ml)。
我国正常成人,男子约:
12~15g%,女子约:
11~14g%,男运动员不超过:
17g%,女运动员不超过:
16g%。
【注意事项】
1.吹血液入稀释管及洗净吸管时,不宜用力过猛。
2.蒸馏水需逐滴加入,多做几次比色,以免稀释过量。
每次比色时,应将搅拌用的玻璃棒取出,以免影响比色。
3.由于操作过程过长而造成吸管内血液凝固,堵塞管孔时,则要按下列溶液的顺序重复冲洗吸管,即用水→95%酒精→乙醚或丙酮。
【思考题】
1.血液中血红蛋白含量的多少是否能反映机体的健康状况?
为什么?
2.测定血红蛋白的实际意义是什么?
实验三人体在安静及运动后动脉血压的测量
[实验目的]
掌握人体动脉血压间接测量的原理和方法,观察运动对人体血压的影响。
[实验原理]
人体动脉血压测量采用听诊法,测量部位为上臂肱动脉。
用血压计的压脉带充气,通过在动脉外加压,然后根据血管音的变化来测量血压。
通常血液在血管内流动时没有声音,如果血液流经狭窄处形成涡流,则发出声音。
当缠缚于上臂的压脉带内充气后压力超过肱动脉收缩压时,肱动脉内的血流完全被阻断。
用听诊器在其远端听不到声音。
徐徐放气降低压脉带内的压力,当压力低于肱动脉收缩压而高于舒张压时,血液将断续地流过肱动脉而产生声音,在肱动脉远端能听到动脉音。
继续放气,当压脉带内压力等于舒张时,血流由断续流动变成连续流动,使声音突然由强变弱并消失。
故从无声音到刚听见第一个动脉音时的外加压力相当于收缩压,动脉音突然变弱时的外加压力相当于舒张压。
运动主要影响收缩压的变化,收缩压变化大。
[对象]
体育专业学生
[器材]
听诊器、血压计、节拍器
[实验方法与步骤]
l.熟悉血压计的结构
血压计有汞柱式、弹簧式和电子式,一般常用的是汞柱式血压计,它由检压计、压脉带和橡皮充气球3部分组成。
检压计是一标压力刻度的玻璃管,上端通大气,下端和水银槽相通。
压脉带为外包布套的长方形橡皮囊,它借橡皮管分别和检压计的水银槽及充气球相通。
橡皮充气球是一个带有螺丝帽的橡皮囊,供充气,放气用。
2.受试者脱去一衣袖,静坐5min以上。
3.松开血压计橡皮球螺丝,驱出压脉带内残留气体,再旋紧螺丝。
4.令受试者将前臂平放于桌上,与心脏在同一水平位,手掌向上。
将压脉带在该上臂,其下缘至少在肘关节上2cm,松紧适宜。
5.将听诊器耳件塞入外耳道,其弯曲方向与外耳道一致,即略向前弯曲。
6.在肘窝内侧先用手指触及肱动脉脉搏,将听诊器胸件放在其上。
7.测量收缩压:
用橡皮球将空气打入压脉带内,使检压计中水银柱逐步上升到听诊器听不到脉搏音为止。
继续打气使水银再上升2.6~4.0kPa(20~30mmhg)。
随即松开气球螺旋,连续缓慢放气,减低压脉带内压力,在水银柱缓慢下降的同时仔细听诊。
当开始听到“砰、砰”的动脉音时检压计上水银柱的刻度即为收缩压。
一般青壮年收缩压为12-17.3kPa(90-130mmHg).
8.测量舒张压:
继续缓慢放气,动脉音先由低到高,然后由高变低,最后完全消失。
在声音突然变弱的瞬间,检压计上水银柱刻度即代表舒张压。
一般青壮年舒张压力8-10.6kPa(60-80mmHg)。
血压记录常以收缩压/舒张压kPa(或mmHg)表示。
1kPa=7.5mmHg。
反复测血压,如血压值波动<0.5kPa或<4mmHg即为准确。
9.运动后血压的测量:
拉开压脉带与检压计相连的橡皮管接头(不要取下压脉带)。
令受试者以每次2s的速度连续下蹲3min(30次/min)或按节拍器节律下蹲,取坐位测定运动后即刻、2min、4min、6min时的血压和脉率
定量工作(20蹲起)前后脉搏和血压
指标
被试者
安静时
运动后即刻
运动后1分钟
运动后2分钟
运动后3分钟
脉搏
被试1
被试2
血压
被试1
被试2
[注意事项]
1.测量应在安静环境中进行。
2.受试者应脱去衣袖,以免袖口过紧,阻碍血液循环。
3.压脉带的宽度有7、9、12cm3种,应以覆盖受试者上臂的1/2-2/3 。
[运动实践的应用]
1、我国运动员的血压水平一般在健康青年人的血压范围内,当运动员安静时舒张压>
90mmHG,舒张压>130mmHG时应引起注意。
2、晨起血压较稳定,若安静血压比平时上升20%左右持续2天,可视为机能下降或过度疲劳的表现。
运动时收缩压随运动强度的增加而上升。
大强度负荷时,收缩压可达190mmHG或更高,舒张压不变或轻度上升或下降,出现以下情况提示运动员机能不良。
(1)运动时脉压差增加的程度比平时减少;
(2)出现梯形反应;
(3)出现无休止音;
(4)运动时收缩压的上升与运动强度的增加不相平行或突然下降,收缩压突然下降达20mmHG者必须立即停止运动。
实验四剌激条件的改变对骨骼肌收缩的影晌
1实验目的
1.1学习蛙腓肠肌标本的制备方法。
1.2观察刺激强度、刺激频率对骨骼肌收缩的影响。
1.3了解骨骼肌的收缩特性。
2实验原理
蛙的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似,而其离体组织所需的生活条件比较简单,故选用腓肠肌标本来观察骨骼肌的收缩特性。
活的神经肌肉组织能对外界刺激起反应,且不同的刺激强度、作用时间、强度时间变化率及刺激频率作用于肌肉时,其反应性将不一样。
本实验固定作用时间和强度时间变化率来观察刺激强度和频率的变化对肌肉收缩的影响。
3实验标本与仪器
蟾蜍或蛙、蛙类手术器械一套、BL-420生物机能实验系统、张力换能器、滴管、任氏液、铁支架、双凹夹、棉线。
4实验步骤
4.1制备标本
4.1.1破坏脑和脊髓(方法见实验一)。
4.1.2分离腓肠肌:
将蛙俯位放在
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